b'\n_START_ARTICLE_\n454 Life Sciences\n_START_SECTION_\nSecuenciaci\xc3\xb3n\n_START_PARAGRAPH_\nLas perlas que contienen genotecas de ADN molde monocatenario se a\xc3\xb1aden a la DNA Bead Incubation Mix (que contiene ADN polimerasa) y son cubiertas por Enzyme Beads (sulfurilasa y luciferasa) en un dispositivo PicoTiterPlate. El dispositivo se centrifuga para depositar las perlas en el interior de los pocillos. La cubierta de Enzyme Beads asegura que las perlas de ADN permanecen posicionados en los pocillos durante la reacci\xc3\xb3n de secuenciaci\xc3\xb3n. El proceso de deposici\xc3\xb3n de las perlas est\xc3\xa1 dise\xc3\xb1ado para maximizar el n\xc3\xbamero de pocillos que contienen perlas con una \xc3\xbanica genoteca amplificada._NEWLINE_El dispositivo PicoTiterPlate cargado se coloca en el Genome Sequencer FLX Instrument. El subsistema flu\xc3\xaddico libera los reactivos de secuenciaci\xc3\xb3n (contiene tampones y nucle\xc3\xb3tidos) a trav\xc3\xa9s de los pocillos de la placa. Los cuatro nucle\xc3\xb3tidos de ADN se a\xc3\xb1aden secuencialmente en un orden fijo a trav\xc3\xa9s del dispositivo PicoTiterPlate durante un paso de secuenciaci\xc3\xb3n. Durante el flujo de nucle\xc3\xb3tidos, millones de copias de ADN unidas a cada una de las perlas se secuencian en paralelo. Cuando se a\xc3\xb1ade un nucle\xc3\xb3tido complementario a la cadena molde en un pocillo, la polimerasa extiende la cadena de ADN existente mediante la adici\xc3\xb3n de nucle\xc3\xb3tido(s). La adici\xc3\xb3n de uno (o m\xc3\xa1s) nucle\xc3\xb3tido(s) genera una se\xc3\xb1al luminiscente que es registrada por la c\xc3\xa1mara CCD en el instrumento. Esta t\xc3\xa9cnica se basa en la secuenciaci\xc3\xb3n por s\xc3\xadntesis y se llama pirosecuenciaci\xc3\xb3n. La intensidad de la se\xc3\xb1al es proporcional al n\xc3\xbamero de nucle\xc3\xb3tidos; por ejemplo, tramos homopolim\xc3\xa9ricos donde se incorporan en un solo flujo de nucle\xc3\xb3tidos generan una mayor se\xc3\xb1al que los nucle\xc3\xb3tidos individuales. Sin embargo, la intensidad de la se\xc3\xb1al para los tramos de homopol\xc3\xadmeros solo es lineal hasta ocho nucle\xc3\xb3tidos consecutivos, despu\xc3\xa9s de lo cual la se\xc3\xb1al cae r\xc3\xa1pidamente. Los datos se almacenan en archivos de formato est\xc3\xa1ndar flowgram (SFF) para su an\xc3\xa1lisis downstream (aguasabajo).'