b'\n_START_ARTICLE_\nEnsayo de quimiotaxis\n_START_PARAGRAPH_\nLos ensayos de quimiotaxis son instrumentos experimentales conocidas para la evaluaci\xc3\xb3n de la habilidad quimiot\xc3\xa1ctica de las c\xc3\xa9lulas procariotas o eucariotas y se aplican una amplia variedad de t\xc3\xa9cnicas para este objetivo._NEWLINE_Algunas de ellas son cualitativas y el investigador puede determinar cual de las c\xc3\xa9lulas prefiere o no evaluar qu\xc3\xadmicamente. Otras son cuantitativas y podemos obtener informaci\xc3\xb3n sobre la intensidad de las respuestas en una forma detallada.\n_START_SECTION_\nT\xc3\xa9cnicas en placa-agar\n_START_PARAGRAPH_\nEste tipo de evaluaci\xc3\xb3n se trata de cultivos semi s\xc3\xb3lidos que contienen agar-agar o gelatina lo cual es primordial para el experimento. Peque\xc3\xb1as cantidades son cortadas en capas y llenadas con las c\xc3\xa9lulas y la sustancia de prueba. Las c\xc3\xa9lulas pueden migrar hacia el gradiente qu\xc3\xadmico en la capa semi s\xc3\xb3lida e incluso por debajo de esta tambi\xc3\xa9n. Algunas variaciones de la t\xc3\xa9cnica tratan tambi\xc3\xa9n con pozos y canales paralelos conectados entre ellos antes del inicio del experimento (t\xc3\xa9cnica PP)._NEWLINE_Una forma radial (circular) de la t\xc3\xa9cnica PP (3 o m\xc3\xa1s canales) nos da la posibilidad de comparar la actividad quimiot\xc3\xa1ctica entre las diferentes poblaciones celulares o del estudio preferencial entre ligandos.\xe2\x80\x8b\n_START_SECTION_\nConteo de c\xc3\xa9lulas\n_START_PARAGRAPH_\nLas c\xc3\xa9lulas blanco que responden en forma positiva,  podr\xc3\xadan ser contadas desde el frente despu\xc3\xa9s de la migraci\xc3\xb3n de las c\xc3\xa9lulas, despu\xc3\xa9s de la tinci\xc3\xb3n, o en condiciones normales en el microscopio \xc3\xb3ptico.\n_START_SECTION_\nT\xc3\xa9cnica de dos c\xc3\xa1maras (two-chamber technique)\n_START_PARAGRAPH_\nLas c\xc3\xa1maras  aisladas por filtros son herramientas adecuadas para determinar con exactitud el comportamiento de quimiotaxis. El pionero de este tipo de c\xc3\xa1maras fue construido por Boyden.\xe2\x80\x8b_NEWLINE_Las c\xc3\xa9lulas m\xc3\xb3viles se colocan en la c\xc3\xa1mara superior, mientras que con la sustancia de ensayo disuelta se llena la primera c\xc3\xa1mara inferior . El tama\xc3\xb1o de las c\xc3\xa9lulas m\xc3\xb3viles que  son investigadas determinan el tama\xc3\xb1o del poro del filtro, y esto es esencial para elegir un di\xc3\xa1metro que permite una transmigraci\xc3\xb3n activa. Para la elaboraci\xc3\xb3n de modelos en condici\xc3\xb3n in vivo varios protocolos prefieren una cobertura de filtro con mol\xc3\xa9culas de la matriz extracelular (ejemplo: col\xc3\xa1geno, elastina, etc). La eficiencia de las mediciones se increment\xc3\xb3 por el desarrollo de los multipozos  \xe2\x80\x9cmultiwell\xe2\x80\x9d (ejemplo, NeuroProbe), en donde 24, 96 y hasta 384 muestras se eval\xc3\xbaan en forma paralela. La ventaja de esta variante es que varios ensayos paralelos son realizables en id\xc3\xa9nticas condiciones. _NEWLINE_En otro tipo de c\xc3\xa1maras, las mismas est\xc3\xa1n conectadas horizontalmente una al lado de la otra (ejemplo, c\xc3\xa1mara Zigmond)\xe2\x80\x8b o como anillos conc\xc3\xa9ntricos en una diapositiva (ejemplo, c\xc3\xa1mara Dunn).\xe2\x80\x8b Se desarrolla un gradiente de concentraci\xc3\xb3n  en un estrecho puente de conexi\xc3\xb3n entre las c\xc3\xa1maras   y el n\xc3\xbamero de las c\xc3\xa9lulas que emigran tambi\xc3\xa9n se cuenta en el microscopio \xc3\xb3ptico. En algunos casos, el puente entre las dos c\xc3\xa1maras se llena de agar y las c\xc3\xa9lulas tienen que mantenerse en esta capa semis\xc3\xb3lida._NEWLINE_Algunas t\xc3\xa9cnicas capilares proporcionan tambi\xc3\xa9n una c\xc3\xa1mara como arreglo, sin embargo, ahora hay un filtro entre las c\xc3\xa9lulas y la sustancia de prueba.\xe2\x80\x8b Se obtienen resultados cuantitativos con esta t\xc3\xa9cnica multipozos \xe2\x80\x9cmultiwell\xe2\x80\x9d. Este tipo de pruebas usa  pipetas multicanal de 4-8 y 12 puntas. La precisi\xc3\xb3n de la pipeta y el aumento del n\xc3\xbamero de muestras paralelas es la gran ventaja de esta prueba.\xe2\x80\x8b _NEWLINE_Conteo de c\xc3\xa9lulas: las respuestas positivas de las c\xc3\xa9lulas se cuentan en de la c\xc3\xa1mara inferior ( despu\xc3\xa9s de un largo tiempo de incubaci\xc3\xb3n) o desde el filtro (corto tiempo de incubaci\xc3\xb3n). Para la detecci\xc3\xb3n de c\xc3\xa9lulas se usan t\xc3\xa9cnicas de tinci\xc3\xb3n (ejemplo, azul de tripano) o sondas especiales (p.ej., mt-deshidrogenasa detecci\xc3\xb3n de ensayo con MTT). Las c\xc3\xa9lulas marcadas (p.ej., fluorocromos) son tambi\xc3\xa9n usadas, en algunos ensayos las c\xc3\xa9lulas marcadas se obtienen a trav\xc3\xa9s de la transmigraci\xc3\xb3n por el filtro.\n_START_SECTION_\nOtras t\xc3\xa9cnicas\n_START_PARAGRAPH_\nAdem\xc3\xa1s de los dos mencionados , de las familias de t\xc3\xa9cnicas de uso com\xc3\xban existe una amplia gama de protocolos que fueron desarrollados para medir la actividad de quimiotaxis. Algunas de ellas son s\xc3\xb3lo cualitativas, como los tests de agregaci\xc3\xb3n, cuando los peque\xc3\xb1os trozos de filtros o agar se colocan sobre un portaobjetos y se mide la acumulaci\xc3\xb3n de c\xc3\xa9lulas a su alrededor._NEWLINE_En otra t\xc3\xa9cnica semicuantitativa,  las c\xc3\xa9lulas son sobrepuestas en la sustancia de ensayo y los cambios en la opalescencia del compartimiento originalmente libre de c\xc3\xa9lulas se registran durante el tiempo de incubaci\xc3\xb3n.\xe2\x80\x8b_NEWLINE_La tercera  muy frecuentementemente utilizada, sin embargo, es la t\xc3\xa9cnica cualitativa laberinto en  T o T-maze y sus adaptaciones de las microplacas. En la versi\xc3\xb3n original el contenedor es perforado, se llena de c\xc3\xa9lulas. Entonces, la ficha se retuerce y las c\xc3\xa9lulas logran contactarse con otros dos contenedores llenos de diferentes sustancias. La incubaci\xc3\xb3n es para poder emparejar y contar el n\xc3\xbamero de c\xc3\xa9lulas a partir de los contenedores.\xe2\x80\x8b'