b'\n_START_ARTICLE_\nElectroforesis bidimensional\n_START_SECTION_\nBase de la separaci\xc3\xb3n\n_START_PARAGRAPH_\nEl proceso comienza con electroforesis en una dimensi\xc3\xb3n, pero a continuaci\xc3\xb3n, separa las mol\xc3\xa9culas en una direcci\xc3\xb3n de 90 grados de la primera. En la electroforesis "1D", las prote\xc3\xadnas se separan en una dimensi\xc3\xb3n, de manera que todas las mol\xc3\xa9culas se encuentren a lo largo de un carril. Debido a que es poco probable que dos mol\xc3\xa9culas sean similares en dos propiedades distintas, \xc3\xa9stas se separan m\xc3\xa1s eficazmente con electroforesis en 2-D que en la electroforesis en 1-D._NEWLINE_Las dos dimensiones en que las prote\xc3\xadnas se obtienen por esta t\xc3\xa9cnica, aprovechan propiedades como son el punto isoel\xc3\xa9ctrico, la masa de  las prote\xc3\xadnas complejas y el estado de la prote\xc3\xadna._NEWLINE_El proceso para separar las prote\xc3\xadnas por punto isoel\xc3\xa9ctrico se llama isoelectroenfoque (IEF). En esta t\xc3\xa9cnica, un gradiente de pH se aplica a un gel y un potencial el\xc3\xa9ctrico se adiciona a trav\xc3\xa9s de \xc3\xa9ste, haciendo que un extremo sea m\xc3\xa1s positivo que el otro.  Si estos extremos tienen carga positiva, se acoplar\xc3\xa1n hacia el extremo m\xc3\xa1s negativo del gel y si se encuentran cargados negativamente se ubicar\xc3\xa1n en el extremo m\xc3\xa1s positivo. Las prote\xc3\xadnas aplicadas en la primera dimensi\xc3\xb3n se mover\xc3\xa1n a lo largo del gel y se acumular\xc3\xa1n en su punto isoel\xc3\xa9ctrico; es decir, el punto en el que la carga global en la prote\xc3\xadna es cero._NEWLINE_Para el an\xc3\xa1lisis del funcionamiento de las prote\xc3\xadnas en una c\xc3\xa9lula, el conocimiento de su cooperaci\xc3\xb3n es esencial. Muy a menudo las prote\xc3\xadnas act\xc3\xbaan juntas en complejos para ser completamente funcionales. El an\xc3\xa1lisis de esta sub organizaci\xc3\xb3n de la c\xc3\xa9lula requiere de t\xc3\xa9cnicas de conservaci\xc3\xb3n del estado natural del complejo de prote\xc3\xadna. _NEWLINE_En la electroforesis en gel de poliacrilamida, las prote\xc3\xadnas permanecen en su estado nativo y se separan en el campo el\xc3\xa9ctrico en funci\xc3\xb3n de su masa y la masa de sus complejos, respectivamente. _NEWLINE_Para obtener una separaci\xc3\xb3n por tama\xc3\xb1o y no por la carga neta, como en el IEF, una carga adicional se transfiere a las prote\xc3\xadnas mediante el uso de Azul Brillante de Coomassie o dodecil sulfato de litio. Despu\xc3\xa9s de la terminaci\xc3\xb3n de la primera dimensi\xc3\xb3n, los complejos son destruidos por la aplicaci\xc3\xb3n del  desnaturalizante en la segunda dimensi\xc3\xb3n, donde las prote\xc3\xadnas de los complejos se separan por su masa._NEWLINE_Previo a esto, se les trata con dodecil sulfato de sodio (DSS), junto con otros reactivos. Esto desnaturaliza las prote\xc3\xadnas, es decir, se despliegan en mol\xc3\xa9culas largas y rectas y se unen a un n\xc3\xbamero de mol\xc3\xa9culas de DSS m\xc3\xa1s o menos proporcional a la longitud de la prote\xc3\xadna. _NEWLINE_Dado que las mol\xc3\xa9culas de SDS est\xc3\xa1n cargadas negativamente, el resultado de esto es que todas las prote\xc3\xadnas tendr\xc3\xa1n aproximadamente la misma proporci\xc3\xb3n de masa-carga entre s\xc3\xad. Adem\xc3\xa1s, \xc3\xa9stas no migrar\xc3\xa1n cuando no tienen carga (resultado de la etapa de enfoque isoel\xc3\xa9ctrico), por tanto, el recubrimiento de la prote\xc3\xadna en DSS (cargado negativamente) permite la migraci\xc3\xb3n de las prote\xc3\xadnas en la segunda dimensi\xc3\xb3n._NEWLINE_En la segunda dimensi\xc3\xb3n, un potencial el\xc3\xa9ctrico se aplica nuevamente, pero en un \xc3\xa1ngulo de 90 grados desde el primer campo. Las prote\xc3\xadnas se sentir\xc3\xa1n atra\xc3\xaddas por el lado m\xc3\xa1s positivo del gel DSSS, porque est\xc3\xa1 cargado negativamente en proporci\xc3\xb3n a su relaci\xc3\xb3n masa-carga. Como se explic\xc3\xb3 anteriormente, esta relaci\xc3\xb3n ser\xc3\xa1 casi la misma para todas las prote\xc3\xadnas. _NEWLINE_La migraci\xc3\xb3n de las prote\xc3\xadnas en el mismo gel ser\xc3\xa1 restringido por las fuerzas de fricci\xc3\xb3n. Por tanto, el gel  act\xc3\xbaa como un tamiz molecular cuando se aplica la corriente, estimando la separaci\xc3\xb3n de las prote\xc3\xadnas sobre la base de su masa molecular. De esa manera, las prote\xc3\xadnas m\xc3\xa1s grandes se mantienen m\xc3\xa1s altas en el gel y las prote\xc3\xadnas m\xc3\xa1s peque\xc3\xb1as son capaces de pasar a trav\xc3\xa9s del tamiz y llegar a las regiones inferiores del gel.\n_START_SECTION_\nProte\xc3\xadnas de detecci\xc3\xb3n\n_START_PARAGRAPH_\nEl resultado de esto es un gel con las prote\xc3\xadnas separadas hacia fuera sobre su superficie. Estas prote\xc3\xadnas pueden entonces ser detectadas por una variedad de medios, si bien el reactivo indicador que generalmente se utiliza es el de plata y Azul brillante de Coomassie. _NEWLINE_En el primer caso, un coloide de plata se aplica al gel, el cual se une a grupos de ciste\xc3\xadna en la prote\xc3\xadna, y la plata se oscurece por exposici\xc3\xb3n a la luz ultravioleta. _NEWLINE_Esta medida s\xc3\xb3lo puede dar cantidades aproximadas, pero es adecuada para la mayor\xc3\xada de los prop\xc3\xb3sitos. La tinci\xc3\xb3n con plata es 100 veces m\xc3\xa1s sensible que la que se realiza con Azul Brillante de Coomassie con un rango 40 veces mayor en linealidad.\xe2\x80\x8b_NEWLINE_Otras mol\xc3\xa9culas distintas de las prote\xc3\xadnas se pueden separar por electroforesis en bidimensional:en determinados ensayos, el ADN en espiral se separa en la primera dimensi\xc3\xb3n y es desnaturalizado por un intercalador de ADN, tal como bromuro de etidio o la cloroquina  que es menos cancer\xc3\xadgena.'