b'\n_START_ARTICLE_\nApt\xc3\xa1mero\n_START_PARAGRAPH_\nLos apt\xc3\xa1meros son \xc3\xa1cidos nucleicos de cadena sencilla (ssDNA y RNA), aislados de genotecas de oligonucle\xc3\xb3tidos por selecci\xc3\xb3n in vitro, mediante enriquecimiento exponencial en presencia del ligando (m\xc3\xa9todo SELEX), denominados anticuerpos qu\xc3\xadmicos (del ingl\xc3\xa9s chemical antibodies).\n_START_SECTION_\nDefinici\xc3\xb3n y modo de funcionamiento\n_START_PARAGRAPH_\nLos apt\xc3\xa1meros son oligonucle\xc3\xb3tidos de cadena sencilla con tama\xc3\xb1os entre 70 y 100 nucle\xc3\xb3tidos capaces de reconocer de forma espec\xc3\xadfica y con alta afinidad a varios tipos de mol\xc3\xa9culas diana mediante un plegamiento tridimensional de su cadena. Generalmente son obtenidos mediante su selecci\xc3\xb3n desde genotecas de oligonucle\xc3\xb3tidos combinatoriales, mediante el m\xc3\xa9todo SELEX (de sus siglas en ingl\xc3\xa9s: Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment), que permitir\xc3\xa1 seleccionar aquel oligonucle\xc3\xb3tido de la genoteca utilizada que se une con m\xc3\xa1s afinidad a la mol\xc3\xa9cula diana._NEWLINE_Estos oligonucleotidos tienen una regi\xc3\xb3n central de tama\xc3\xb1o variable y con una secuencia aleatoria, y dos regiones flanqueantes de secuencia conocida. La longitud total del apt\xc3\xa1mero suele variar entre los 70 y los 100 nucle\xc3\xb3tidos, incluyendo una secuencia fija o primer en cada extremo del apt\xc3\xa1mero, para su amplificaci\xc3\xb3n por PCR (es una de las fases del m\xc3\xa9todo de selecci\xc3\xb3n). La longitud de la regi\xc3\xb3n central con secuencia al azar suele estar comprendida entre los 30 y 60 nucle\xc3\xb3tidos._NEWLINE_Estas mol\xc3\xa9culas son capaces de adoptar estructuras globulares lo que les permite exhibir unas complejas y sofisticadas propiedades de reconocimiento molecular siendo capaces de unirse de una manera estable y muy espec\xc3\xadfica a sus dianas. Dichas dianas moleculares pueden ser peque\xc3\xb1as mol\xc3\xa9culas como ATP, prote\xc3\xadnas, \xc3\xa1cidos nucleicos y complejas estructuras multim\xc3\xa9ricas._NEWLINE_Existe tambi\xc3\xa9n un tipo de apt\xc3\xa1meros basado en cadenas pept\xc3\xaddicas, dise\xc3\xb1ados para interaccionar con otras prote\xc3\xadnas dentro de las c\xc3\xa9lulas. Consisten en un bucle pept\xc3\xaddico variable adjunto a los extremos de una prote\xc3\xadna soporte. Esta estructura incrementa la afinidad del apt\xc3\xa1mero pept\xc3\xaddico a niveles comparables a los anticuerpos (rango nanomolar).\n_START_SECTION_\nEnriquecimiento Exponencial en Presencia del Ligando\n_START_PARAGRAPH_\nEl m\xc3\xa9todo SELEX de sus siglas en ingl\xc3\xa9s \xe2\x80\x9cSystematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment\xe2\x80\x9d, tambi\xc3\xa9n conocido como selecci\xc3\xb3n in vitro o evoluci\xc3\xb3n in vitro es la t\xc3\xa9cnica utilizada para la selecci\xc3\xb3n y aislamiento de apt\xc3\xa1meros. Esta es una t\xc3\xa9cnica de qu\xc3\xadmica combinatoria aplicada en biolog\xc3\xada molecular._NEWLINE_El proceso comienza con la s\xc3\xadntesis de una gran genoteca de oligonucle\xc3\xb3tidos, que consiste en secuencias de DNA o RNA generadas al azar y con un n\xc3\xbamero de nucle\xc3\xb3tidos constante, como se ha mencionado anteriormente, en los que todas las secuencias tienen extremos constantes. Para una regi\xc3\xb3n aleatorizada de n nucle\xc3\xb3tidos, el n\xc3\xbamero de posibles secuencias es 4\xe2\x81\xbf._NEWLINE_Las secuencias de la genoteca, se ponen en presencia del ligando diana. Entonces mediante plegamientos tridimensionales los diferentes oligonucleotidos podr\xc3\xa1n unirse a la diana o no. Las secuencias no enlazadas son eliminadas._NEWLINE_Las secuencias enlazadas son eluidas y amplificadas por PCR (mediante los primers de los extremos) para la preparaci\xc3\xb3n de subsecuentes rondas de selecci\xc3\xb3n en las que se aumentar\xc3\xa1 el rigor de las condiciones para identificar las secuencias que poseen la mejor propiedad qu\xc3\xadmica buscada (afinidad, inactivaci\xc3\xb3n de la prote\xc3\xadna, modificaciones en la conformaci\xc3\xb3n para la determinaci\xc3\xb3n, etc).\n_START_SECTION_\nAplicaciones\n_START_PARAGRAPH_\nEstas mol\xc3\xa9culas se presentan como una alternativa real a los anticuerpos monoclonales en la investigaci\xc3\xb3n biom\xc3\xa9dica, tanto en el \xc3\xa1mbito del diagn\xc3\xb3stico, debido a su aplicaci\xc3\xb3n como sensores moleculares , como en el terap\xc3\xa9utico, ya que son capaces de interferir en las funciones biol\xc3\xb3gicas de las mol\xc3\xa9culas diana. En las propiedades qu\xc3\xadmicas y biol\xc3\xb3gicas se presentan diversas ventajas en su utilizaci\xc3\xb3n frente a los anticuerpos monoclonales, como pueden ser, su potencial obtenci\xc3\xb3n frente a prote\xc3\xadnas no inmunog\xc3\xa9nicas, su capacidad de regeneraci\xc3\xb3n, su estabilidad a temperatura ambiente, las posibilidades de modificaci\xc3\xb3n de su estructura (pegilaci\xc3\xb3n, etc.), el abaratamiento de sus costes de producci\xc3\xb3n debido a que se pueden obtener mediante s\xc3\xadntesis qu\xc3\xadmica, evitando el uso de animales o c\xc3\xa9lulas, su alta reproducibilidad y su capacidad para ser marcados. Tambi\xc3\xa9n se han detectado aplicaciones como herramientas de separaci\xc3\xb3n anal\xc3\xadtica._NEWLINE_Los pioneros en Espa\xc3\xb1a en la selecci\xc3\xb3n de apt\xc3\xa1meros mediante enriquecimiento exponencial en presencia del ligando son el grupo de investigaci\xc3\xb3n liderado por el doctor V\xc3\xadctor M. Gonz\xc3\xa1lez en el Irycis (Instituto Ram\xc3\xb3n y Cajal de Investigaci\xc3\xb3n Sanitaria), que han desarrollado apt\xc3\xa1meros frente a prote\xc3\xadnas como la KMP-11 y las histonas H2A y H3 de leishmania infantum. Su know-how ha desembocado en un convenio con la compa\xc3\xb1\xc3\xada APTUS Biotech, para el desarrollo de un servicio a la carta de selecci\xc3\xb3n y producci\xc3\xb3n de apt\xc3\xa1meros._NEWLINE_Las investigaciones llevadas a cabo desde el descubrimiento de los apt\xc3\xa1meros han dado lugar a la aprobaci\xc3\xb3n por parte de la FDA del primer f\xc3\xa1rmaco basado en un apt\xc3\xa1mero para el tratamiento de la degeneraci\xc3\xb3n macular neovascular asociada a la edad. Este es conocido como Macugen (Pegaptanib), comercializado en Espa\xc3\xb1a por Pfizer. La mol\xc3\xa9cula es un oligonucle\xc3\xb3tido pegilado que liga con una alta especificidad y afinidad al Factor de Crecimiento del Endotelio Vascular (VEGF165) extracelular, inhibiendo su actividad. Por otro lado, la compa\xc3\xb1\xc3\xada americana con base en Cambridge, MA, Archemix ha basado toda su I+D y pipeline en el desarrollo de apt\xc3\xa1meros como una nueva clase de terapia directa para la prevenci\xc3\xb3n y el tratamiento de enfermedades cr\xc3\xb3nicas y agudas. Su mol\xc3\xa9cula estrella, ARC1779 es un antagonista del Factor von Willebrand y est\xc3\xa1 siendo evaluada en estudios de fase 2 en pacientes en los que se ha diagnosticado S\xc3\xadndrome Coronario Agudo que han sido sometidos a una angioplastia coronaria._NEWLINE_Debido a las expectativas creadas por la investigaci\xc3\xb3n en estas mol\xc3\xa9culas, el laboratorio Ellington, ha desarrollado una base de datos para ensayos de selecci\xc3\xb3n in vitro y SELEX, llamada The Aptamer Database, que cataloga todos los experimentos publicados._NEWLINE_Los apt\xc3\xa1meros tienen una serie de caracter\xc3\xadsticas particulares, como que la vida media en sangre de estas mol\xc3\xa9culas sin modificar es muy corta, debido a su r\xc3\xa1pida degradaci\xc3\xb3n por parte de las nucleasas muy abundantes en este medio. Adem\xc3\xa1s, como consecuencia de su bajo peso molecular, son f\xc3\xa1cilmente eliminados del organismo por los ri\xc3\xb1ones, lo que hace que su toxicidad sea baja. Aunque tambi\xc3\xa9n debido a esto, las aplicaciones actuales de estos apt\xc3\xa1meros no modificados se focalizan en el tratamiento de estados transitorios, como la coagulaci\xc3\xb3n sangu\xc3\xadnea, o el tratamiento localizado de \xc3\xb3rganos, como los ojos, donde su delivery es posible. Un ejemplo de esto es un apt\xc3\xa1mero cuya diana es la tenascina, desarrollado por Schering AG y NeXstar Pharmaceuticals como marcador tumoral por imagen para el c\xc3\xa1ncer._NEWLINE_En los \xc3\xbaltimos a\xc3\xb1os se ha mejorado considerablemente su aplicaci\xc3\xb3n intracelular (intr\xc3\xa1meros), as\xc3\xad como su resistencia a las nucleasas, mediante modificaciones tales como en posici\xc3\xb3n 2\xc2\xb4del az\xc3\xbacar._NEWLINE_Otros ejemplos de apt\xc3\xa1meros seleccionados frente a dianas prote\xc3\xadcas identificados en la bibliograf\xc3\xada son apt\xc3\xa1mero frente a la transcriptasa reversa del HIV-1, apt\xc3\xa1mero frente a la RNA polimerasa RNA-dependiente del virus de la Hepatitis C, frente a la prote\xc3\xadna gp 120 del HIV-1, apt\xc3\xa1mero frente a prote\xc3\xadna NS3 del virus de la hepatitis.'