Contudo, a revisão da literatura demonstra até o momento apenas um artigo sobre o possível papel de mutações de GLI1 em CBC, não tendo sido encontrada nenhuma mutação nos casos estudados.60 Os mesmo autores encontraram somente 10% de mutações no gene SMO.
Em outros oncogenes, como BRAF,61 N-RAS, KRAS e c-MYC,42 nenhuma ou poucas mutações foram encontradas em CBCs, sugerindo que esses genes podem não estar envolvidos no desenvolvimento dessa neoplasia.
Enquanto 10% do genoma humano é representado por genes, 90% corresponde a seqüências de DNA com diferentes níveis de repetição. Dependendo de sua localização no genoma, as seqüências repetitivas têm influência na organização da cromatina e na regulação da expressão gênica. Além disso, têm papel fundamental nos rearranjos entre seqüências que levam ao desenvolvimento de inúmeras doenças e na evolução dos genomas e espécies. Alterações nessas seqüências levam à instabilidade genômica observada particularmente em diferentes tipos de câncer. Dentre as seqüências repetitivas de importância no estudo dos cânceres de pele destacam-se os microssatélites, 62 que são curtas seqüências repetitivas de um a seis nucleotídeos, localizadas em sítios bem definidos ao longo do genoma dos organismos eucariotos incluindo o ser humano. Muitos microssatélites localizam-se próximo a importantes oncogenes e genes supressores, o que tem levado ao grande interesse dessas regiões como marcadores genéticos.63,64
O DNA de células tumorais geralmente apresenta alterações no número de unidades repetidas em um ou mais microssatélites quando comparados aos mesmos microssatélites existentes em amostras de DNA de um tecido normal do mesmo indivíduo.65 Essas células tumorais também podem apresentar "impressões digitais" defeituosas em seu DNA quando comparadas aos outros tecidos normais do organismo. 66 Essas "impressões" são referentes a seqüências situadas entre repetições distribuídas ao longo de todo o genoma, detectadas pela técnica RAPD (random amplification of polymorphic DNA) e caracterizam a instabilidade genética. As alterações que culminam com o aumento ou diminuição do número de repetições são denominadas instabilidade de microssatélites (MSI, microsatellite instability) (Figura 3), enquanto a perda completa de um microssatélite é conhecida como perda de heterozigosidade (LOH, loss of heterozygosity). O fato de ocorrer MSI nos alelos tumorais é um indicador direto de que falhas ocorrem durante a replicação celular e estas não foram devidamente corrigidas, evidenciando portando alteração no número de repetições nestes alelos.
Alterações em 12 de 18 microssatélites foram encontradas em CBC, sendo que duas se localizavam próximo aos genes supressores MSH2 e TP53.67 Altas freqüências de alterações também são vistas em microssatélites próximos ao gene Patched.68 Recentemente foram demonstradas 60% de alterações no microssatélite D6S251, na região 6q14, em CBCs herdados e esporádicos.69 Um estudo mais detalhado usando o D6S251 indicou que 23% dos CBCs esporádicos exibiram LOH e MSI. Todos os CBCs com alguma instabilidade eram de alto risco histológico (46%). Entretanto, não foram encontradas alterações no microssatélite D6S252, localizado em 6q1670 (dados não publicados).
Análises do cariótipo de tumores demonstram grandes alterações, seja no número de cromossomos (ganho ou perda), seja nos rearranjos entre os cromossomos. A análise de determinados microssatélites também tem valor nesse tipo de informação, tendo sido usada para mapear regiões cromossômicas contendo genes envolvidos no desenvolvimento de CBC, em que são particularmente altas as perdas de regiões próximas ao gene PTCH.42
Apesar de o UVA ser o mais abundante (90%), o UVB é cerca de mil vezes mais eficiente em causar queimaduras na pele. A exposição da pele ao UV afeta a sobrevivência e proliferação de células epidérmicas e dérmicas e altera várias funções cutâneas.71 Os efeitos agudos da exposição ao UV são os mais adversos e incluem lesão no DNA, apoptose, eritema, imunossupressão, envelhecimento e câncer.72
Um dos principais efeitos do UV no desenvolvimento do câncer está no dano direto ao DNA. A absorção do UVB pelo DNA pode causar dois tipos de lesões, os fotoprodutos 6-4 e os dímeros de pirimidinas ou ciclobutanos. Os danos são causados por ligação errônea de duas pirimidinas na mesma fita de DNA. Em vez de ocorrer o pareamento clássico AT ou GC, as bases podem ligar-se por meio de CC, TT ou CT. Dímeros de pirimidina são considerados mais carcinogênicos do que fotoprodutos 6-4, formando-se cerca de três vezes mais e sendo menos eficientemente reparados.73 Ambos os tipos de lesão podem levar a mutações genéticas, tais como transições C ®T e CC ®TT. UVB pode causar também transversões de C ®A e G ®T, além de quebras no DNA, em fita simples e dupla.74
Outros tipos de lesão que podem acometer o DNA são aqueles ocasionados por espécies reativas de oxigênio (ROS, reactive oxygen species) as quais são geradas por excessiva exposição ao UV,75 caracterizando assim um efeito indireto da radiação. Essas moléculas podem levar à formação de adutos nas bases que compõem a molécula de DNA causando pareamentos errôneos e dessa maneira podem levar a mutações e rearranjos cromossômicos que podem levar ao câncer.
O desenvolvimento de cânceres cutâneos tem sido freqüentemente observado em pacientes portadores de XP. Tal doença é caracterizada por mutações deletérias nos genes envolvidos no sistema de reparo a danos no DNA, com marcada redução na capacidade de suas células em reparar mutações potencialmente carcinogênicas, sobretudo as causadas por UV, tornando assim seus portadores altamente fotossensíveis e predispostos ao câncer de pele. Poderiam polimorfismos, ou seja, variações genéticas nesses genes na população, contribuir para maior susceptibilidade a essas neoplasias?
Baseando-se nessa questão muitos pesquisadores têm desenvolvido estudos de caráter epidemiológico buscando avaliar a maior ocorrência de certos polimorfismos em casos de câncer em comparação a controles.76 Diferentemente de mutações que são raras e demonstram alta penetrância e pouca influência de fatores ambientais, os polimorfismos são mais freqüentes na população. Além disso, funcionam como fatores de baixa penetrância e podem apresentar susceptibilidade variável a fatores ambientais de risco, como, por exemplo, exposição ao UV.77
Estudos demonstraram que, enquanto pacientes de origem escandinava com determinado genótipo quanto ao gene de reparo XPD (no caso homozigotos "dominantes" e heterozigotos)78 possuíam maior risco de desenvolverem CBCs, numa população americana indivíduos com o genótipo homozigoto "recessivo" demonstravam maior susceptibilidade a esse tipo de neoplasia cutânea.79 Essa diferença demonstra que fatores ambientais e genéticos de certa população influenciam na contribuição de um determinado polimorfismo no desenvolvimento de tumores.
Quebras na estrutura da molécula de DNA também são decorrentes da ação UV, sendo que tais fenômenos são responsáveis por aberrações cromossômicas características em tumores cutâneos como, por exemplo, o CBC. O reparo dessas lesões fica a cargo de outra via de reparo, também formada por diversos genes, os quais também apresentam polimorfismos já descritos. Recentemente foi demonstrado que a combinação de certos polimorfismos aumenta o risco de desenvolvimento de CECs (p<0,05) e principalmente de CBCs (p< 0,0001).80 Reforçando essa hipótese, um estudo in vitro mostrou significante número de quebras de cromossomos em linfócitos de pacientes diagnosticados com CECs e CBCs quando expostos ao UV.81
Ao contrário de outros tipos de neoplasia, em que polimorfismos em genes de reparo têm demonstrado forte risco relativo associado, nos CCNMs esses estudos são escassos. Diante da variedade de polimorfismos existentes, estudos epidemiológicos do tipo caso-controle bem conduzidos, em que se avaliassem tanto os fatores ambientais envolvidos, como padrão de exposição solar e demais fatores de risco, quanto as variantes polimórficas de genes de reparo, poderiam ser de grande utilidade no sentido de se identificarem possíveis grupos de risco para o desenvolvimento dessas neoplasias.
A ação do vírus HPV, assim como as mutações, anulam a função da proteína p53 nos cânceres cutâneos humanos, fato esse recentemente revisado de modo extensivo.82 De mais de 100 subtipos identificados de HPV, apenas um pequeno subgrupo, denominado HPV mucotrópico de alto risco (HPV tipos 16, 18, 31, 33,35 e 58), tem sido responsabilizado pelo desenvolvimento do câncer cervical. O gene E6 desses HPVs de alto risco pode induzir rápida degradação proteossomal da p53, abolindo a parada do ciclo celular ou a apoptose. Assim como em carcinomas cervicais, DNA de HPV é freqüentemente detectado em carcinomas cutâneos, sendo que mais de 40 subtipos foram identificados,83 mas não são de alto risco.84 Tem sido sugerido que mecanismos diferentes dos que ocorrem no câncer genital possam estar envolvidos na transformação neoplásica maligna cutânea.85
Recentemente foi detectado HPV-38 em 50% de carcinomas cutâneos e 10% de peles sãs, podendo ser responsável pela longevidade/imortalização de queratinócitos humanos em cultura.86 Outro estudo demonstrou que o DNA do HPV-38 estava presente em 43% de QAs, bem como em 13% e 16% de CECs e CBCs, respectivamente.87 Além disso, acredita-se que vários tipos de HPV estejam envolvidos na epidermodisplasia verruciforme.88
Pela análise citogenética e hibridização genômica comparativa que permitem avaliar um painel amplo de ganhos e perdas,89 os CECs mostraram grande heterogeneidade citogenética, com perfil de aberrações mais complexo do que o das QAs e queratoacantomas. 47,51,90,91 Muitas aberrações estruturais afetando regiões centroméricas, em especial nos cromossomos 3, 5, 8 e 9 foram encontradas nos CECs.47 Foram também observados clones celulares geneticamente não relacionados dentro de um mesmo tumor, o que sugere desenvolvimento multifocal em cânceres cutâneos. A detecção de LOH em marcadores localizados em 9p é freqüente, enquanto em 9q ocorre em apenas 12% dos CECs.52 LOH pode ocorrer também em outras regiões do genoma, como 3p, 13p, 17p e 17q.45
Apesar da ampliação do conhecimento atual sobre a genética molecular dos dois principais tipos de CCNM, ainda se sabe pouco sobre o papel dos inúmeros oncogenes, genes supressores e vias de transdução de sinal na gênese e no desenvolvimento dessas neoplasias.
Os CCNMs apresentam muitas alterações, nos níveis gênico e cromossômico. A principal causa de desenvolvimento do CBC foi associada à via patched/ sonic-hedgehog. A utilização de drogas que revertam os efeitos das mutações oncogênicas do SMO e PTCH, como a substância ciclopamina, poderá num futuro próximo auxiliar no tratamento dos diversos fenótipos de CBC.
A compreensão dos mecanismos que promovem instabilidade genômica, como ganhos ou perdas de seqüências e translocações cromossômicas, pode, num futuro próximo, não só auxiliar no estadiamento tumoral como também no estabelecimento de novas terapias que irão beneficiar milhões de doentes diagnosticados anualmente em todo o mundo.
1. Brasil. Ministério de Saúde. Incidência de Câncer no Brasil-Estimativa 2006 [homepage]. Rio de Janeiro: Instituto Nacional do Câncer; 2005 [acesso 16 Jul 2006]. Disponível em: http://www.inca.gov.br/ estimativa/2006. [ Links ]
66. Pinho M. Câncer colo-retal com instabilidade de microssatélites: uma doença diferente. Rev Bras Coloproctol. 2002;22:139-44. [ Links ]
70. Martinez MAR. Estudo das alterações dos microssatélites D6S251 e D6S252 no carcinoma basocelular esporádico [dissertação]. São Paulo: Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo; 2006. 78p. [ Links ]
* Trabalho realizado pelo Grupo de Estudos de Câncer Cutâneo do Departamento de Dermatologia da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (USP) e Laboratório de Genética do Instituto Butantã - São Paulo (SP), Brasil.
Baseando-se nos conhecimentos dos efeitos mutagênicos da radiação ultravioleta (UV), qual seqüência teria maior probabilidade de vir a apresentar lesões do tipo dímeros de pirimidina?
5. Um paciente jovem chega ao consultório apresentando diversos tumores cutâneos, entre eles CBCs, CECs e melanoma. Tal indivíduo é diagnosticado como portador de xeroderma pigmentoso. Sabendo que essa é uma doença genética recessiva, que genes deverão estar mutados?