O kit DetectX® Serum Estradiol ELISA foi projetado para medir quantitativamente 17β-estradiol livre presente em amostras de soro e plasma. Um padrão de estradiol é fornecido para gerar uma curva padrão para o ensaio e todas as amostras devem ser lidas na curva padrão. Padrões ou amostras diluídas são pipetadas para uma placa de microtitulação transparente revestida com um anticorpo de captura. Um conjugado estradiol-peroxidase é adicionado aos poços. A reação de ligação para o EIA / ELISA é iniciada pela adição de um anticorpo de ovino ao estradiol em cada poço. Após a incubação, a placa é lavada e o substrato é adicionado. O substrato reage com o conjugado estradiol-peroxidase ligado. Após uma curta incubação, a reação é interrompida e a intensidade da cor gerada pelo EIA / ELISA é detectada em um leitor de placas de microtitulação capaz de medir o comprimento de onda de 450 nm.
O 17β-estradiol (E2) é um regulador chave do crescimento, diferenciação e função em uma ampla variedade de tecidos, incluindo os sistemas reprodutivo masculino e feminino, glândula mamária, cérebro, sistemas cardiovasculares e esqulético. Os efeitos biológicos predominantes de E2 são mediados através de dois receptores intracelulares distintos, ERa e ERß, cada um codificado por genes únicos que possuem as características do domínio funcional da superfamília dos receptores nucleares. ERa é a forma predominante expressa na mama, útero, colo do útero e vagina. O ERß exibe um padrão mais limitada e é expresso principalmente no ovário, próstata, testículo, baço, pulmão, hipotálamo e timo. O estradiol também influencia o crescimento ósseo, o desenvolvimento e maturação do cérebro e a ingestão de alimentos, além de ser fundamental para manter as funções orgânicas durante traumas graves. No plasma, o estradiol está ligado às proteínas séricas, como albumina e globulina de ligação aos hormônios sexuais. Pouco mais de 2% do E2 é livre e biologicamente ativo, a porcentagem permanece constante ao longo do ciclo menstrual. O estradiol é conjugado no fígado a derivados de sulfato e glucuronideo e excretado. A desativação inclui a conversão em estrógenos menos ativos, como estrona e estriol. Estriol é o principal metabólito urinário.