Auxílio à pesquisa 05/05204-7 - Neurologia, Miopatias mitocondriais - BV FAPESP
Estudo do DNA mitocondrial (mtDNA) em culturas de mioblastos provenientes de pacie...
Estudo das mitocôndrias morfologicamente anormais em biopsias musculares de pacien...
Estudo das mitocôndrias morfologicamente anormais em biópsias musculares de pacien...
Complementação genética entre DNAs mitocondriais contendo deleções não superpostas...
Processo: 05/05204-7
Pesquisador responsável: Cláudia Ferreira da Rosa Sobreira
Beneficiário: Cláudia Ferreira da Rosa Sobreira
Bolsa(s) vinculada(s): 08/11039-7 - Estudo do DNA mitocondrial (mtDNA) em culturas de mioblastos provenientes de pacientes com deleções múltiplas do mtDNA, BP.TT
08/11038-0 - Caracterização molecular dos pacientes com miopatia mitocondrial e deleções múltiplas do DNA mitocondrial, BP.TT
Assunto(s): Neurologia Miopatias mitocondriais DNA mitocondrial Timidina fosforilase Deleção de genes Mioblastos
Propomos o estudo das doenças mitocondriais que surgem pelo desenvolvimento de deleções múltiplas no DNA mitocondrial (mtDNA) através da avaliação de suas causas e conseqüências no âmbito morfológico, bioquímico e molecular, em biópsias musculares e em mioblastos em cultura, visando melhor conhecimento da fisiologia mitocondrial e da fisiopatologia dessas doenças, e o delineamento de propostas terapêuticas eficazes. Inicialmente analisaremos o quadro clínico-laboratorial dos pacientes com deleções múltiplas do mtDNA seguidos no HC-FMRP-USP e classificaremos os pacientes de acordo com o fenótipo apresentado. A seguir, estudaremos as causas através do avaliação da atividade da enzima timidina fosforilase e do estudo molecular dos genes POLG1, ANT1, Twinkle e da timidina fosforilase, situados no DNA nuclear, determinando os fenótipos associados a cada tipo de mutação. As consequências morfológicas serão analisadas através de estudos histoenzimológicos e morfométrico, determinando o padrão de atrofia dos vários tipos de fibras musculares, comparando o padrão observado nesses pacientes com o de pacientes que apresentam outras formas de miopatia mitocondrial; estudando a relação dos achados morfométricos com o fenótipo e o grau de incapacidade física dos pacientes; comparando a ocorrência e magnitude da mialgia em relação a pacientes que apresentam exclusivamente atrofia das fibras do tipo 1 (miopatia com desproporção dos tipos de fibra). As conseqüências bioquímicas serão avaliadas através do estudo da atividade das enzimas da cadeia respiratória, determinando a relação entre as alterações e as características clínicas. Avaliaremos, a seguir, as deleções múltiplas do mtDNA nas biópsias musculares e em clones isolados de mioblastos, para determinar se o padrão das deleções varia em diferentes células e qual a interferência de fatores ambientais no aparecimento das mesmas. Por fim, analisaremos a influência da coenzima Q10 e da vitamina C, ambos antioxidantes potentes, no comportamento dessas deleções em culturas celulares. (AU)