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	제목: 신한은행, 부서장 배우자·직원 가족 3000명 초청 '별밤 콘서트' 지난 28일 신한은행은 경희대학교에서 직원 가족 3000여명을 초청해 '신한가족 별이 빛나는 밤에 콘서트'를 개최했다고 30일 밝히며 일류은행으로 도약하게 된 원동력인 직원과 가족 구성원 모두에게 감동과 행복을 드릴 수 있도록 최선을 다하겠다고 말했다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 신한은행은 지난 28일 서울시 동대문구 회기동 경희대학교에서 부서장 배우자와 직원 가족 3000여명을 초청해 '신한가족 별이 빛나는 밤에 콘서트'를 개최했다고 30일 밝혔다. 이번 직원 가족 초청행사는 신한은행이 일류은행으로 도약하게 된 가장 큰 원동력인 직원들과 헌신과 사랑으로 응원해준 가족들에게 감사의 마음을 전하기 위해 마련됐다. 진옥동 신한은행장은 직원 가족들을 위해 직접 작성한 엽서에서 '저게 저절로 붉어질 리는없다. 저 안에 태풍 몇 개, 저 안에 천둥 몇 개, 저 안에 벼락 몇 개'라는 장석주의 '대추 한 알' 시를 인용하면서 "신한은행은 모든 직원들과 언제나 함께 해주신 가족 여러분의 노력이 고스란히 담긴 결실"이라며 환영사를 대신했다. 특히 이번 '신한가족 별이 빛나는 밤에 콘서트'는 신한은행 가족만을 위해 이문세 단독 콘서트 형식으로 기획됐으며, 별밤지기 출신이자 이문세와도 인연이 깊은 방송인 박경림이 진행을 맡았다. 신한은행 관계자는 "매년 부서장 배우자들을 초청해 다양한 프로그램으로 행사를 진행하고 있으며, 특히 이번 행사에는 감사의 마음을 전하기 위해 직원 가족들까지 초청했다"며 "앞으로도 직원과 가족 구성원 모두에게 감동과 행복을 드릴 수 있도록 최선을 다하겠다"고 밝혔다.
	오이 꼭지에서 나오는 쓴 맛은 코우르비타신 때문입니다. 오이 꼭지에서 나오는 쓴 맛은 코우르비타신이라는 성분 때문입니다. 이 성분은 항암 효과가 있는 반면 일부의 사람들에게는 설사를 유발할 수 있는 작용을 합니다. 따라서 물을 충분히 주어 섭취하면 독성도 줄일 수 있어요.	오이 꼭지에서 쓴 맛이 나는 이유는 무엇인가요? 오이 꼭지를 썰다보면 쓴 맛이 나는데, 이 쓴 맛이 나는 이유가 궁금합니다. 물을 잘 안 주면 어떤 성분이 오이 전체에 퍼져나가서 쓴 맛이 나는 건가요? 코우르비타신과 관계가 있는 건가요?
	'오늘 하루 대청소의 날' 등을 정기적으로 열며 생활 폐기물 억제 노력을 기울인 해운대구가 환경부 주체로 열린 '2019년 생활 쓰레기 줄이기 평가'에서 전국 227개 기초 지자체 중 전국 2위의 성적으로 우수기관으로 뽑혔다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 전국 2위 … 환경부 장관 표창받아 해운대구(구청장 홍순헌)는 환경부가 주관한 '2019년 생활 쓰레기 줄이기 평가'에서 전국 2위에 선정돼 우수상인 환경부 장관 표창을 받았다. 시상식은 6일 인천 송도 컨벤시아에서 열린 '제11회 자원순환의 날' 행사 때 열렸다. ？ 이번 평가는 생활ㆍ음식물류 폐기물 관리 우수사례를 발굴, 전파하고 분리배출을 활성화하기 위해 전국 227개 기초 지자체를 대상으로 실시됐다. 환경부는 "해운대구는 청결한 해수욕장 관리를 통해 쾌적한 피서환경을 조성하고, 정기적으로 '오늘 하루 대청소의 날'을 운영하는 등 생활 폐기물 발생 억제를 위해 노력한 점이 돋보여 우수 기관에 선정했다"고 밝혔다. 생활 쓰레기 수거차량 운행기록계(DTG) 장착, 재활용 자원 수거체계 다각화, 일회용품 감량 등도 좋은 평가를 받았다. 세대별 종량제(RFID) 참여 공동주택을 대상으로 '감량 경진대회' 개최, 발생원별 음식물쓰레기 감량 교육, 환경 시민체험교실 등 구민 의식 개선한 시책을 추진해 연간 음식물류 폐기물을 8.4% 감량(환경부 권고 지침 연간 0.5%)한 것도 탁월하다는 평이다. 홍순헌 해운대구청장은 "우리 구민의 성숙한 시민의식이 있었기에 우수상을 받을 수 있었다"며 "앞으로도 폐기물 발생 억제와 생활 속 자원순환을 위한 다양한 시책을 추진하겠다"고 밝혔다. 정순형 선임기자 [email protected] - 지역의 빛으로 독자의 희망으로 - - Copyrights ⓒ 부산일보사. 무단 전재 및 재배포 금지 -
	제목: 美서 존재감 사라지는 소니...상반기 TV 판매 50% 급감 글로벌 프리미엄TV시장 격전지인 미국에서 소니는 1년새 판매량이 50%급감하며 존재감이 사라지고 있으며 일본을 대표하는 파나소닉 역시 북미에서 올상반기 천대도 못팔면서 사실상 퇴출을 앞두고 있다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 글로벌 프리미엄 TV시장 격전지인 미국에서 소니의 존재감이 점차 사라지고 있다. 삼성전자와 LG전자에 밀린 소니는 1년 새 판매량이 50% 급감하며 '전자왕국' 부활의 꿈은 물 건너간 분위기다. 소니와 함께 일본을 대표하는 TV 브랜드 파나소닉 역시 북미에서 올 상반기 1000대도 못 팔면서 사실상 퇴출을 앞두고 있다. 22일 시장조사업체 IHS마킷에 따르면, 대당 2500달러 이상 북미 프리미엄 TV시장에서 소니의 상반기(1~6월) 판매 규모는 5만4000대에 그친 것으로 집계됐다. 이는 지난해 같은 기간(10만3000대)과 비교해 절반 수준이다. 반면 삼성전자와 LG전자는 올 상반기 각각 19만1000대와 12만2000대를 팔아치웠다. 삼성전자는 전년 동기 대비 2000대(101%), LG전자의 경우 2만4000대(124%)나 더 팔았다. 소니는 2000년대 전사 사업 전반이 주춤했지만 LG전자에 이어 OLED(유기발광다이오드) TV를 재빠르게 내놓은 덕분에 TV 브랜드 이미지 회복에 성공했다는 평가를 받았다. 실제 소니는 지난해 4분기(9만8000대)까지만 해도 2500달러 이상 프리미엄 TV 미국 판매 실적이 LG전자(9만1000대)를 앞서기도 했다. 최근에는 LG전자보다 먼저 8K TV를 출시하며 공격적인 행보를 보였다. 하지만 삼성전자 'QLED'와 '8K QLED', LG전자 '올레드'의 공세 속에 현지 마케팅과 유통전략이 삐걱되면서 완패했다. 소니 입장에서는 하반기 성수기(블랙 프라이데이 등)도 반등을 기대하기 힘들다. 수익이 높은 75형 이상 초대형 시장에서 삼성전자 점유율이 50%를 돌파할 것으로 예상되는 가운데 LG전자 '8K 올레드'도 출격을 앞두고 있다. 당장 그럴 가능성은 희박하지만 일본 경제보복 여파로 LG디스플레이가 소니에 OLED 패널 공급을 줄일 경우 중국 업체에 발목을 잡히는 것은 시간문제로 보는 시각이 적지 않다. 소니가 지난달 LG디스플레이에 '이미 계약한 OLED 패널 물량 공급에 문제는 없는가'라고 거듭 확인한 것도 이 같은 우려에서 비롯된 것으로 업계는 보고 있다. 일본 가전 양대산맥인 파나소닉은 올 상반기 북미에서 수백 대 판매(2500달러 이상)에 그친 것으로 파악됐다. 파나소닉은 일본 내수 시장에 집중하는 전략임을 감안해도 1000대도 못 판 것은 처참한 성적이라는 게 업계의 평가다. 한 업계 관계자는 "소니는 프리미엄 라인업은 한국에 밀리고 55형 이하 중저가 모델은 TCL과 하이센스, 스카이워스 등 중국 제조사에 치였다"며 "상반기 성적표만 놓고 보면 암울한 수준"이라고 말했다.
	동란에는 학습지도요령의 총칙 및 도덕의 목표나 내용, 행동 기록의 평가 항목 및 그 취지를 참고로 하여, 설치자가 항목을 적절히 설정하고, 각 학교가 스스로의 교육 목표에 따라서 항목을 추가할 수 있게 되어있어 각 항목의 취지에 비추어 충분히 만족할 수 있는 상황에 있다고 판단되는 경우에, ○표를 기입하다는 것으로 되어 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 현재 참고 양식의「지도에 관한 기록」에는 도덕 시간의 기록란이 제시되어 있지 않다. 한편, 각 교과, 도덕, 외국어 활동(초등학교), 종합적인 학습의 시간, 특별활동과 기타 학교 활 전체에 걸쳐 인정되는 학생의 행동에 대해서는「행동 기록」란이 마련되어 있다.
	현재 우리 군이 강도 높은 국방개혁을 추진하면서 새로운 ‘싸우는 방식’ 에 기초를 두고 신작전개념과 군구조, 운영구조를 혁신적으로 변화시키기 위해 노력하고 있는 만큼, 4차 산업혁명의 변화 방향과 특성을 중･장기적으로 반영하려는 혁신방식의 변화가 절실하게 요구된다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 지금까지 살펴보았듯이 4차 산업혁명의 요체는 인간과 인간 간, 인간과 사물 간, 그리고 사물과 사물간 연결성이 증대되고 지능화되면서 협업을 통해 사회･경제 체제가 변화되어 나가는 것이다. 군사적 측면으로 보면 전투원과 전투원 간, 전투원과 유･무인 무기체계 간, 유･무인 무기체계 간 협업적 의사결정, 작전지원, 지능화, 합동 및 자율작전을 통해 전력을 획기적으로 향상시켜 나갈 수 있는 계기가 되는 것이다. 이제 우리 군도 이러한 기술적 특성과 변화의 방향에 적합한 혁신 방식을 고민해야 하는 시점이다. 앞으로는 군 고유의 단일기술이 군사혁신의 성공을 결정하는 기술결정론 기반의 하향식 혁신 모델만으로는 융･복합적인 형태로 접목되어 성과가 나타나는 4차 산업혁명 시대에 대응하기 어렵다. 과거 대규모 플랫폼 위주의 기술과 달리 4차 산업혁명의 주도기술은 재래식 또는 첨단 전력에 요소기술로 융･복합됨으로써 그 혁신성이 발휘되기 때문이다. 기존 무기체계에 빅데이터 분석 기술과 인공지능 기술이 융합되는 형태이며, 개발된 무기체계가 전투원에게 단순히 전달되는 일방향적 전력화가 아니라 전투원에 의해서 평가되고 환류되는 지속적인 상호과정을 거칠때 전력의 혁신이 이루어질 수 있다.
	제목: 명품조합 만들기 ‘동분서주’ 권영건 옥천군 산림조합장은 지난 3월 13일 전국동시조합장 선거에서 당선된 이후 전국에서 제일가는 명품 조합을 만들기 위해 산림조합을 홍보하는데 시간을 보내고 상조회를 비롯 수목장, 상호금융사업 등을 알리는데 오늘도 열심히 동분서주 혼신을 다하고 있다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 권영건 옥천군산림조합장 공약 실천위해 밤낮없이 뛰어 예수금·조합원 눈에띄는 증가 대전·청주에 지점 신설도 검토 ▲ 권영건 옥천군산림조합장. 취임 100일을 넘긴 권영건 옥천군산림조합장이 전국에서 제일가는 명품조합을 만들기 위해 동분서주하고 있다. 조합원과 예수금이 눈에 띄게 증가하는가 하면 취임 100일 안내장을 산주와 조합원들에게 발송하는 등 초심을 잃지 않기 위한 소통에 최선을 다하고 있다. 그는 오전 8시 30분 옥천읍 가풍리 사무실로 출근하면서 하루 일과는 시작된다. 간부회의를 마치면 약속한 지인들을 만나 산림조합을 홍보하는데 시간을 보내고 상조회를 비롯해 수목장, 상호금융사업 등을 알리는데 혼신을 다하고 있다. 지난 3월 13일 전국동시조합장 선거에서 당선된 이후 제대로 발 뻗고 잠을 잔적이 없다. 물론 오랫동안 조합 대의원과 이사를 하면서 어느정도 조합을 안다고 생각한 그는 막상 조합장이 되고 보니 무거운 책임감 때문에 잠 못 이루는 날이 많아진 것이다. 취임 이후 직원들의 의식변화서부터 조합원과 약속한 공약을 실천하기 위해 밤낮이 따로 없다. 조합사무실을 나설 때는 산림과 관련된 초록색 모자를 쓰고 옷 색깔까지 초록색으로 맞춰 입고 대외 활동하는 모습은 그에게는 이제 자연스런 트레이드마크다. 이렇게 정신없이 3개월 뛴 결과 옥천군민 전용 금융상품인 옥천사랑 정기예금은 지역주민들에게 선풍적인 호응을 받고 있다. 제2금융권 평균 금리보다 3%대 높은 옥천사랑 정기예금은 출시 두 달도 안 돼 140억 원을 돌파하면서 덩달아 조합 자산규모도 올해 초 900억 원 대에서 1100억 원 대로 훌쩍 넘겼다. 특히 그는 전국 산림조합 중 최초로 인근 도시인 대전과 청주에 지점을 내는 계획을 검토하고 있다. 여기에 2300여명의 조합원 수도 400여명이나 늘어 2700여명이 됐다. 최근에는 산주와 조합원들에게 취임 100일 안내장을 발송했다. 신뢰와 사랑받는 산림조합이 되겠다는 각오인 것이다. 소통을 강조해 온 그는 유관기관, 조합원들과 시간을 갖으며 조합의 개선사항에 귀 기울이고 투명경영과 신규 사업 발굴에 전 직원들이 나서고 있다. 권 조합장은 "조합원들과 약속한 발로 뛰며 찾아가는 조합장이 되겠다는 마음은 잠시도 잊은 적이 없으며 소통을 통해 조합원들이 권리를 몸소 체감할 수 있도록 해 전국 최고의 조합이 되도록 노력하겠다"며 "이렇게 되기 위해서는 산주와 조합원들의 보다 적극적인 관심과 협조를 당부드린다"고 말했다.
	또한 랩에서 수행한 기업 프로젝트를 통해 산학협력적인 인턴십을 경험하게 되는 것도, 랩에서의 경험이 성숙하면서 외부로 자신이 갖는 지식의 영향력을 파급하게 되는 것으로 실행공동체적인 학습이 성숙하였을 때 일어나는 현상이다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 미국 이공계 대학원 교육이 실용주의적 철학에 입각한 교육이라고 할 수 있는 것은 랩을 기반으로 하는 교육의 전반이 경험중심적인 기조에서 이루어지기 때문이다. 랩에 이루어지는 대학원 교육의 가장 긍정적인 요소는, 연구자로써 실제로 갖추어야 하는 역량들과 세부적이고 구체적인 연구 방법들, 작업 절차들, 그리고 자신만의 실험 경험들을 습득할 수 있다는 것이다. 또한, 실험실에서의 연구를 통해서 자신이 실험을 통해 얻은 결과를 바탕으로 여러 가지 가설과 이론을 세우고 그것을 다시 실험을 통해 증명하는 과정을 반복하면서, 학위 취득 후에도 독립적인 연구를 수행할 수 있는 능력을 키울 수 있게 된다. 따라서 박사과정을 처음 시작하면서 연구주제를 탐색하며 전공분야의 주변부에 있던 학생들이, 교수 및 상급박사과정생들과 함께 작업하면서 연차를 더할수록 경험의 폭과 깊이가 생기는 것은, 랩에서의 교육을 통해 실행공동체 학습이 이루어진다는 것을 의미한다(Driscoll, 2004).
	제목: 경쟁학원 앙심 품고 폭력배 사주해 업무방해한 학원장 실형 선고 17일 대구지법 포항지원은 경쟁 학원으로 원생이 많이 옮겨간 것에 불만을 품고 어린 학생들을 상대로 폭력배를 사주한 학원장에게 죄질이 불량하다며 경쟁 학원의 업무방해를 교사한 혐의로 징역 6월을 선고했다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 폭력배 10여명도 실형 또는 벌금, 집행유예 선고받아폭력배 10여명도 실형 또는 벌금, 집행유예 선고받아 [배형욱 기자 [email protected]] 경쟁 학원으로 원생이 많이 옮겨간 것에 앙심을 품고 폭력배를 사주해 위력을 행사한 학원장과 폭력배(매일신문 2018년 11월 20일 자 8면)가 실형을 선고받았다. 대구지법 포항지원 형사1단독(판사 김경훈)은 17일 폭력배에게 경쟁 학원의 업무방해를 교사한 혐의로 기소된 포항 한 학원 A(38) 원장에 대해 징역 6월을 선고했다고 밝혔다. 또 A원장의 사주로 폭력배들을 동원해 학원 업무를 방해한 혐의로 기소된 B(28) 씨에게 징역 8월, B씨의 요청으로 후배들을 동원한 C( 20) 씨에게 징역 6월을 선고했다. B씨의 지시를 받아 A원장의 경쟁 학원 안팎에서 혐오스러운 행동을 하며 위협하고 기물을 파손한 혐의 등으로 기소된 폭력배 9명에게는 벌금 100만원~300만원 또는 집행유예가 선고됐다. 법원은 판결문을 통해 "경쟁 학원의 운영을 해칠 목적으로 나이 어린 학생 등을 상대로 위압적인 행태를 취하며 영업을 방해한 죄질이 매우 불량하다. 또 10~20세의 어린 공범들을 범행에 이용한 점도 불량하다"고 양형 이유를 설명했다. 이들은 지난해 8월부터 한 달여 간 A원장의 경쟁 영어학원 안팎에서 학생들에게 문신을 보여주거나 침을 뱉는 등 공포감을 조성하고, 학원 기물 등을 파손한 혐의로 기소됐다. 당시 A원장은 자신의 학원에서 근무하던 강사가 100m 거리에 다른 학원을 차리자 원생들이 많이 옮겨간 것에 앙심을 품고 이런 짓을 저지른 것으로 드러났다.
	이에 따라 미국을 제외한 세계 경제상황이 매우 안 좋은 현 시점에서 미국의 기준금리 인상이 보다 점진적으로 이루어져야 한다는 국제적 정서가 트럼프 정부 하에서는, 제대로 반영되지 않을 것이란 우려가 높아 금융시장 불안도 증폭되고 있으며 안전자산인 달러화에 대한 수요를 더욱 증가시키며 달러화 강세에 보다 큰 힘을 실어주고 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 여기에 11월 8일에 있었던 미국 대선에서 당선이 유력한 것으로 예상되었던 클린턴(Hillary Clinton) 후보 대신에 트럼프(Donald Trump) 후보가 당선된 것이 달러화 강세를 더욱 가속화시킨 것으로 보인다. 이는 클린턴 후보가 기존의 세계 경제와의 조화를 강조하는 경제정책을 지지하는 것과는 달리, 트럼프 후보는 미국만을 위한 경제정책을 지향해왔기 때문에 금융시장에서는 트럼프의 당선을 일종의 충격으로 받아들이고 있기 때문일 것이다.
	해군 진해기지사령부는 헌혈로 국민의 생명을 보호하는 보람찬 일에 동참하고자 이틀간 부대 곳곳에 버스를 배치해 헌혈을 희망하는 진기사 장병 및 군무원의 자발적인 참여 하에 사랑의 헌혈 운동을 실시할 예정이다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 해군 진해기지사령부(이하 진기사)는 31일부터 2월 1일까지 이틀간 부대 내에서 ‘사랑의 헌혈 운동’을 실시한다. 민족 고유의 명절인 설을 앞두고 진행된 이번 헌혈 운동은 혈액 수급이 불안정한 추운 겨울철을 맞아 헌혈을 통해 혈액난 해소에 도움을 주고 헌혈로 국민의 생명을 지키는 보람찬 일에 동참하고자 마련됐다. 진기사는 이번 헌혈 운동을 위해 대한적십자사 경남혈액원과 협조해 헌혈 이동 버스 4대를 지원 받았다. 부대 곳곳에 버스를 배치해 헌혈을 희망하는 진기사 장병 및 군무원의 자발적인 참여 아래 헌혈 운동을 진행할 방침이다. 경남혈액원 백일열 씨는 “추운 날씨로 헌혈량이 급격히 감소하는 시기인 이때 해군 장병들의 헌혈은 그 어느 때보다 소중한 힘이 된다”며 “헌혈에 동참해준 진해기지사령부 장병들의 작은 실천이 혈액이 필요한 분들에게 큰 기쁨과 희망이 될 것이다.”라고 말했다. 헌혈에 참가한 진기사 근무지원대대 김범수 상병은 “헌혈은 잠깐의 시간을 투자해 누군가의 생명을 살릴 수 있는 뜻깊은 일”이라며 “앞으로도 꾸준한 헌혈을 통해 국민의 생명을 지키는 일에 앞장서는 해군이 되겠다”고 다짐했다. 한편 진기사는 매년 반기별로 사랑의 헌혈 운동을 실시하고 있으며 장병 및 군무원의 적극적인 참여로 소중한 생명 살리기에 앞장서고 있다. 31일 해군 진해기지사령부 장병들이 부대내 마련된 헌혈버스에서 명절을 앞두고 사랑의 헌혈을 하며 손가락으로 하트를 만들어 보이고 있다. 진해기지사령부 제공 이종호 기자 [email protected] .
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	이 외에도 피코시아닌(phycocyanin)이라는 표준물질로 남조류의 발생 빈도나 강도를 예측하고 있지만, 피코시아닌도 전량 수입에 의존하고 있을 뿐만 아니라, 그 가격이 1g 당 약 5.5백만원으로 막대한 외화가 낭비되고 있는 상황이다.따라서 조류 발생으로 인한 빈도의 예측이나, 독성물질의 함유여부를 정확하게 확인하고, 안전한 수돗물을 공급하기 위해서는 상기와 같은 표준물질들이 저렴하면서도 안정되게 공급이 이루어져야 한다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 최근 기후변화로 인하여 조류가 수시로 발생하고 있어 이로 인한 냄새와 독성물질은 큰 사회적 이슈로 부각되고 있다. 특히 수온이 높은 여름철에는 남조류(blue green algae)의 발생빈도가 증가하고 있는 상황이며, 이러한 남조류는 독성을 가지고 있기 때문에 상수원이나 정수장 등 먹는 물과 관련된 기관에서는 이들 남조류로 인한 독성물질이 함유되었는지 확인하기 위하여 표준물질을 사용하여 주기적 또는 비주기적으로 빈번하게 확인하고 있다. 따라서 이와 같이 독소물질을 측정하기 위한 표준물질의 수요가 급증하고 있으며, 이들 독소표준물질은 전량 수입에 의존하고 있는 상황이다. 그러나 그 독성으로 인하여 최근 자국 외 수출을 제한하고 있어 독소표준물질의 수입이 용이하지 않고, 이는 결과적으로 국내에서 자체적으로 생산을 하거나 또는 분석횟수를 줄일 수 밖에 없는 상황에 직면하게 된다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	경제위기와 가족의 관계를 담론으로 분석하고자 하는 본 연구의 문제의식은 한국사회의 신자유주에 관한 문화체계로서의 관심(하비, 2005; 강내희, 2000; 강수돌, 1998; 서동진, 2010)의 일환이기도 하다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 본 연구는 지금의 한국 여성의 상황은 과거 성 평등을 위한 담론이 활발하던 시기의 담론 정치를 성찰해야 하는 시점이라는 관점에서 출발하였다. 특히 가족 문제는 성별 분업과 젠더 이분법의 문제를 들여다볼 수 있는 중요한 착목점이기에 이러한 성찰에서 중요한 의미를 갖는다. 이에 서구사회에서 친가족 정책과 문화를 불러일으켰던 신자유주의 질서가 한국 사회에서 강화된 1997년 경제위기를 전후한 시기의 신문 기사 담론의 변화를 특히 가족에 관한 내용에 초점을 맞추어 분석하였다. 최근 지구화 또는 신자유주의 등 사회변화의 맥락에서 가족 변화는 가족 해체론이나 가족 위기설 등에서 보듯이 주로 형태 변화에 치중하여 논의되는 경향이 있다(벡, 2006; Smith, Wallerstein and Evers, 1984). 하지만 가족 변화는 형태만이 아니라 가족 가치관 등 질적 측면을 포함하여야 한다. 담론연구는 가족 변화의 질적 측면을 보여주는 하나의 방법이다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	특히 부모는 독서를 위한 분위기와 물리적 환경을 제공하고 독서의 경험을 공유할 수 있는 중요한 존재로서, 부모가 제공하는 독서환경은 독서에 긍정적인 틀을 갖게 하고 어려서부터 독서하는 습관을 갖도록 영향을 미치게 된다(송현서, 2008, 재인용).	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 현대인의 가치관의 혼란과 정서함양을 위해서는 여러 가지 방법이 있을 수 있겠지만 독서가 그 방법 가운데 하나가 될 수 있다. 독서교육사전(2006)의 정의에 따르면 독서의 사전적 의미는 ‘책을 읽음’이지만 글을 읽는 행위와 더불어 인격의 수양과 견문 확장, 정서 함양 등을 강조하는 것이다. 따라서 책을 읽는 것만으로 올바른 독서라 할 수 없다. 문화체육관광부의 최근 국민독서실태 조사(2011년)에 의하면 학생 53.9%가본인의 독서량이 부족하다고 느끼고 있으며, 학교 급이 올라갈수록 본인의 독서량이 부족하다고 인식하고 있었다. 성인과 학생 모두 시간적 제약과 독서습관의 부족으로 평소 독서의 생활화가 힘들다고 판단하고 있다. 그리고 독서가 삶에 미치는 영향에 대한 조사에서 성인과 학생의 과반 수 이상이 독서가 삶에 도움이 된다고 생각하지만 시간적 제약과 부족한 독서습관에 의해 독서의 생활화는 미흡한 실정이다. 일찍부터 책들이 가득한 가정환경 속에서 독서 습관을 익힌 아이들은 자극을 풍부하게 받고, 아이가 스스로 깨우친 경우가 많다는 것이 여러 연구를 통해 입증되었다(오태순 이미숙, 2009; 오용분, 2004). 어린 시절의 독서방법과 습관이 일생동안 책을 싫어하고 멀리하는 사람으로 만들 수도 있고, 평생 동안 책을 사랑하고 많이 읽는 독서 애호가로 성장시켜 줄 수 있다는 사실과 무관하지 않다. 다시 말해 올바른 독서 습관의 자연스러운 형성을 위해 독서환경을 조성해주는 일이 필요하다고 하겠다.
	대우 씨에로는 르망의 파생형 승용차로, 세단 타입은 씨에로, 해치백 타입은 넥시아라는 차명으로 판매되었습니다. 씨에로는 '하늘'이라는 뜻의 스페인어 단어에서 유래되었으며, 넥시아는 'Next Generation Idea'에서 따온 것으로 성능과 안전을 강조하는 차량입니다. 그러나 르망보다 큰 인기는 없었고, 씨에로는 많이 팔리지 않았으며 노후화로 인해 현재는 찾기 어렵습니다. 1994년에 씨에로가 출시되었고, 1995년에는 해치백 모델인 넥시아가 출시되었습니다. 이 차량은 르망과 에스페로 사이에 위치하며, 1996년에는 라노스라는 차종이 출시되어 씨에로와 넥시아는 단종되었습니다. 현재는 우즈베키스탄에서 생산되고 있습니다.	대우 씨에로와 넥시아는 어떤 차량이 판매되었나요?
	본 발명은 제1 중합체 조성물을 포함하는 제1 부품 및 제2 중합체 조성물을 포함하는 제2 부품을 포함하는 부품의 조립물에 관한 것으로, 조성물 둘 다 반결정 중합체 및 임의적으로 하나 이상의 다른 성분을 포함하고 제1 부품 및 제2 부품이 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이의 경계면을 통해 서로에게 고정되어 있고, 여기서 경계면은 기계적 맞물림 부재를 포함하지 않고, 여기서 제2 중합체 조성물의 열 전도성(TC2)이 제1 중합체 조성물의 열 전도성(TC1)보다 1.5 이상의 TC2/TC1 비로 더 높다. 또한 본 발명은 그러한 조립물의 제조 방법 및 상기 조립물의 다양한 용도에 관한 것이다.	주어진 문장을 읽고 간략하게 요약해주세요. 문장: [ 발명의 명칭 ] 중합체 부품의 조립물ASSEMBLY OF POLYMERIC PARTS [ 기술분야 ] 본 발명은 제1 중합체 조성물을 포함하는 제1 부품 및 제2 중합체 조성물을 포함하는 제2 부품을 포함하는 부품의 조립물에 관한 것이고, 중합체 조성물 둘 다 반결정(semi-crystalline) 중합체를 포함하고 제1 부품 및 제2 부품은 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이의 경계면(interface)을 통해 서로에게 고정되어 있다. 본 발명은 또한 그러한 조립물 및 상기 조립물을 포함하는 다양한 제품을 제조하는 방법에 관한 것이다. [ 배경기술 ] 경계면을 통해 서로에게 고정되어 있는, 제1 중합체 조성물을 포함하는 제1 부품 및 제2 중합체 조성물을 포함하는 제2 부품을 포함하는 중합체 부품의 조립물은 다양한 방법에 의해, 예를 들어 2개의 개별 부품의 별개의 제조 및 후에 2개의 부품의 공조립(co-assembly)에 의해, 예를 들어 2개의 부품의 기계적 고정 또는 접착; 평행한 2개의 사출 단위체를 갖는 성형 기계를 사용하여 용융물로부터 2가지 물질의 공사출성형(co-injection moulding), 그렇게 함으로써 물질의 용융물의 융합에 의한 연결 부위 형성(이러한 방법은 전형적으로 샌드위치 성형에서 사용된다); 또는 직렬인 2개의 사출 단위체를 갖는 성형 기계를 사용하여 투샷(two-shot) 사출 성형 방법을 사용하여 2가지 물질의 사출 성형에 의해 제조될 수 있고, 여기서 물질 둘 다는 하나의 주형 공동부 배치에서 또다른 공동부 배치로 변경하는 능력을 갖는 주형에서 사출되고, 그로 인해 제1 부품이 제1 주형 공동부 배치에서 제1 물질로부터 제조되고 제1 부품이 제2 주형 공동부 배치에서 위치가 바뀌고 제2 부품이 제2 주형 공동부 배치에서 제1 부품의 오버몰딩(overmoulding)에 의해 제조된다. 그러한 후자의 방법에서 일반적으로 부품 사이에 충분히 강한 결합을 생성하기 위해 특별한 조치가 취해진다, 예를 들어 제1 부품 및 제2 부품 사이에 기계적 맞물림(interlock)을 생성하기 위해 제1 부분에 돌출 부재를 제공하고/거나 제1 부품을 미리 가열하고/거나 제2 물질의 용융물을 광범위하게 가열하여 제2 물질의 사출 시에 제1 부품의 용융을 유도하여 2가지 물질 사이의 용융물 융합 결합을 유도한다. 반결정 중합체를 포함하는 중합체 조성물 둘 다를 사용한 그러한 융합 결합의 달성은 매우 중요하고 보다 극심한 가공 조건을 필요로 하는 한편, 기계적 맞물림의 생성은 주형 구축 및 부품의 이형(demoulding)에서 중요한 문제이다. 그러한 조립물은 예를 들어 미국특허 제5,114,791호에 공지되어 있고, 여기서 2 성분 사출 성형된 물품이 개시되고 상기 물품은 그 사이의 경계면에서 연결된 2개의 중합체 성분을 포함한다. 물품은 헤드램프용 반사 장치에서 사용되고 기술적 장비의 물품용 하우징으로서 사용되었다. 미국특허 제5,114,791호에서 제조된 물품은 하나 이상의 부품이 폴리아릴렌 설파이드를 포함하는 코어-외피 구조이다. 미국특허 제5,114,791호에 따르면 물품은 성분 사이가 파괴되는 경향을 거의 나타내지 않고 실질적으로 빠르게 온도를 변화시키는 것에 의해 영향받지 않고 박리(delamination)의 신호도 나타내지 않는다. 그러나 본 발명자들은 공지된 조립물에서 중합체 부품 사이의 경계면이 종종 불충분한 강도, 특히 부품 둘 다에서 중합체 조성물이 반결정 중합체를 포함할 때 상기 부품은 쉽게 서로 분리되어 두 부품 사이에 접착 실패가 일어남을 관찰하였다. 또한 높은 박리력에 직면하는 적용에 있어 심지어 부품이 쉽게 분리되지 않는 조립물에서 그의 경계면 또는 접착 에너지(adhesive energy)가 여전히 개선될 수 있음을 관찰하였다. 이 문제는 또한 미국특허 제2001/022303호에 언급되어 있고 상기 특허 출원은 병을 위한 다중층 적층된 속이 빈 모양의 퍼폼(perform)을 기재한다. 이들 퍼폼은 특히 반결정 폴리에스테르 또는 반결정 폴리아미드로부터 제조된다 그러한 다중층 적층된 퍼폼의 경우에서 문제는 벽 층의 분리, 즉 박리와 관련된다. 그러한 문제에 대해 미국특허 제2001/002230호에 의해 제공되는 해답은 먼저 내부 및/또는 외부 표면인 표면에 하나 이상의 돌출 영역을 갖고; 돌출을 용융 또는 가소화시키기 위해 블랭크의 상기 표면을 가열하고; 플라스틱의 가소화된 또는 액체 층을 블랭크의 표면에 적용하고 적어도 돌출과 층의 인접한 표면 사이에 점(spot) 또는 띠(zone) 모양의 용접 위치를 형성하여 퍼폼을 제조하고; 퍼폼을 냉각시켜 용접 위치를 고체화한 단일층 블랭크, 전형적으로 속이 빈 모양의 몸체를 제공하는 것이다. 특히 바람직한 구현예에서 돌출은 비늘 구조(scaled structure)를 갖는다. 돌출의 효과는 상이한 층을 기계적으로 맞물리게 하는 것이다. 제조된 제2 부품을 기계적으로 맞물리게 하기 위해 제2 물질을 사용하여 오버몰딩된 부품의 표면으로부터 돌출된 돌출을 기계적으로 맞물리게 하는 부품은 복잡한 주형 디자인 및 부품 표면에 대해 정상적이지 않은 방향에서 상이한 슬라이드 움직임을 갖는 주형을 필요로 한다. 내부 및/또는 외부 표면에 하나 이상의 돌출 영역을 갖는 속이 빈 모양의 몸체를 제조하기 위해 매우 복잡한 주형 및 복잡한 이형 과정을 필요로 한다. 그 외에 중간 가열 단계를 필요로 하는 미국특허 제2001/022303호의 방법은 복잡하다. 미국특허 제2001/022303호에 따르면 블랭크는 제1 주형에서 제조되고 플라스틱의 가소화된 또는 액체 층을 블랭크의 표면에 적용하는 것이 제2 주형에서 이루어진다. 블랭크의 표면 사이에서 예를 들어 가스 화염, 마이크로파, 고주파수 또는 적외선 조사에 의해 또는 블랭크에 삽입된 유도 코일에 의해 가열될 수 있다. 그러한 방법은 산업 규모의 제조에 매우 적합하지 않다. [ 발명의 개요 ] 그러므로 본 발명의 목적은 서로에게 고정되어 있는 중합체 부품의 조립물을 제공하는 것일 수 있고, 여기서 경계면은 일체 성형된 기계적 맞물림 부재를 포함하지 않고 중합체 부품 사이의 접착은 적어도 공지된 물품과 동일하다. 본 발명의 또다른 목적은 또한 서로에게 고정되어 있는 중합체 물품의 조립물을 제공하는 것일 수 있고, 여기서 중합체 부품 사이의 접착은 상응하는 공지된 물품에 비해 개선된다. 본 발명은 "제1 중합체"로 지칭되는 반결정 중합체를 포함하는 제1 중합체 조성물 및 임의적으로 하나 이상의 다른 성분을 포함하는 제1 부품, 및 "제2 중합체"로 지칭되는 반결정 중합체를 포함하는 제2 중합체 조성물 및 임의적으로 하나 이상의 다른 성분을 포함하는 제2 부품을 포함하는 부품의 조립물을 제공하고, 제1 부품 및 제2 부품은 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이의 경계면을 통해 서로에게 고정되어 있고, 여기서 경계면은 일체 성형된 기계적 맞물림 부재를 포함하지 않고, 여기서 제1 중합체 조성물은 TC1로 지칭되는 열 전도성을 갖고 제2 중합체 조성물은 TC2로 지칭되는 열 전도성을 갖고, 여기서 TC2는 TC1보다 1.5 이상의 TC2/TC1 비로 더 높다. [ 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 ] 본원에서 "중합체 조성물"은 중합체 및 하나 이상의 추가적인 성분, 예를 들어 보조 첨가제, 강화 섬유 및/또는 충전재를 포함하는 조성물로 이해된다. 본원에서 "일체 성형된 기계적 맞물림 부재"는 부품과 함께 일체 성형되었을 때 공동부를 형성하는 2개의 주형 절반을 갖는 주형에서 성형될 수 없고 부품 또는 기계적 맞물림 부재의 파괴 없이 절반 중 하나의 제거에 의해 2개의 주형 절반을 간단히 열어 이형될 수 없는 모양을 갖는 성형된 부품 상의 돌출, 언더컷(undercut), 구멍(bore) 및 임의의 다른 부재로 이해되지만, 공동부는 다중 주형 부재에 의해 형성되고 이형은 여러 주형 부재의 떨어짐을 필요로 하는 주형이 요구된다. 본 발명에 따른 방법에 의해 제조된 본 발명의 조립물(여기서 제2 중합체 조성물은 제1 부품 위에 사출 성형되어 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이의 경계면을 생성하고 중합체 조성물 둘 다는 반결정 중합체를 포함하고 제2 중합체 조성물은 1.5 이상의 TC2/TC1 비로 더 높은 열 전도성을 가짐)에서 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이의 경계면의 강도는 열 전도성 조성물을 포함하지 않거나 비슷하게 낮은 열 전도성의 조성물만을 포함하는 상응하는 공지된 물품의 경계면 접착 강도와 적어도 동일함이 관찰되었다. 본 발명에 따르면 부품의 조립물에서 제1 부품 및 제2 부품은 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이의 경계면을 통해 서로에게 고정되어 있다. 본원에서 "고정되어 있는"은 상기 경계면이 추가적인 고정 수단, 예를 들어 접착제, 볼트, 리벳(rivet), 인몰딩된(inmoulded) 기계적 맞물림 부재 등이 필요 없이 부품을 제자리에 고정시키는 충분한 경계면 접착 에너지를 갖는 것으로 이해된다. 특히 본 발명의 부품의 조립물을 형성하는 부품의 경계면 접착 에너지가 높은 박리력 하에서조차 부품의 이형을 방지할 정도로 충분히 높음이 관찰되었다. 보다 구체적으로, 대부분의 경우에 경계면 접착 강도가 너무 높아서 경계면 접착 에너지는 측정될 수 없었는데 이는 박리 시험에서 경계면에서의 부품의 분리보다 부품 중 하나의 내부에서 실패가 일어났기 때문이다. 즉, 경계면에서의 접착 실패에 의해서라기 보다 부품 중 하나의 응집 실패에 의해 조립물이 실패하였고 이는 중합체 조성물 중 하나 또는 심지어 이들 둘 다의 응집 에너지(cohesive energy)보다 경계면 접착 에너지가 더 높음을 나타낸다. 그러므로 본 발명에 따른 조립물의 특정 구현예에서 제1 부품 및 제2 부품은 제1 중합체 조성물의 응집 에너지 또는 제2 중합체 조성물의 응집 에너지 또는 이들 둘 다보다 더 큰 경계면 접착 에너지를 갖는 경계면을 통해 서로에게 고정되어 있다. 경계면 접착 에너지는 또는 응집 에너지는 본원의 아래에 추가로 기재된 바와 같이 소위 이중 캔틸레버 빔(Double Cantilever Beam, DCB) 시험에 의해 측정된다. 부품 사이의 접착 실패보다 부품 중 하나의 내부에서 응집 실패가 일어나는 경우에 엄밀한 의미의 경계면 접착은 측정되지 않지만 응집 실패를 나타내는 중합체 조성물의 응집 에너지보다 더 높은 것으로 암시적으로 간주되고 이는 접착 에너지가 또한 다른 중합체 조성물의 응집 에너지보다 더 높을 수 있다는 가능성을 열어둔다. 본 발명은 또한 "제1 중합체"로 지칭되는 반결정 중합체를 포함하는 제1 중합체 조성물 및 임의적으로 하나 이상의 다른 성분을 포함하는 제1 부품, 및 "제2 중합체"로 지칭되는 반결정 중합체를 포함하는 제2 중합체 조성물 및 임의적으로 하나 이상의 다른 성분을 포함하는 제2 부품을 포함하는 부품의 조립물을 제조하는 방법에 관한 것이고, 제1 및 제2 부품은 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이의 경계면을 통해 서로에게 고정되어 있다. 방법은 다성분 사출 성형, 바람직하게는 2성분 사출 성형에 의해 수행되고, 여기서 제1 중합체 조성물을 포함하는 부품이 첫번째로 사출 성형되고 제2 중합체 조성물을 포함하는 부품이 제1 부품 위에 두번째로 사출 성형되어 제1 중합체 조성물과 제2 중합체 조성물 사이에 경계면을 생성하고 제2 중합체 조성물의 열 전도성(TC2)은 제1 중합체 조성물의 열 전도성(TC1)보다 1.5 이상의 TC2/TC1 비로 더 높다. 본 발명의 방법에 의해 수득될 수 있는 부품의 조립물에서 경계면 접착 에너지가 반결정 중합체를 포함하나 열 전도성 중합체를 포함하지 않거나 비슷하고/거나 낮은 열 전도성의 조성물만을 포함하는 중합체 조성물에 기초하여 상응하는 공지된 물품에서 통상적으로 접하는 경계면 접착 에너지보다 더 높은 것이 관찰되었다. 2성분 사출 성형 장치 및 이를 사용하는 방법은 당 분야에 공지되어 있다. 예는 미국특허 제7,618,577호; 국제특허출원공개 제WO02057064호; 제WO07113305호; 제WO08043540호; 제WO08092635호 및 제W01998038021호에서 발견될 수 있고 이들 문헌은 전체가 참조로 본원에 포함된다. 본 발명에 따른 조립물 및 방법에서 사용되는 중합체 조성물은 둘 다 (반)결정 중합체를 포함한다. 그러한 (반)결정 중합체는 전형적으로 용융 온도, 결정화 온도 및 유리 전이 온도로 지칭되는 물리적 특성을 갖는다. 본원에 언급된 바와 같은 유리 전이 온도(glass transition temperature, Tg), 용융 온도(melting temperature, Tm) 및 결정화 온도(crystallization temperature, Tcr)의 물리적 특성은 제1 가열 주기, 냉각 주기 및 제2 가열 주기를 적용하는 DSC에 의해 측정되고, 여기서 Tg는 제1 가열 주기 동안 측정되고 Tcr은 냉각 주기 동안 측정되고 Tm은 제2 가열 주기 동안 측정된다. 가열 주기는 240℃ 미만의 용융 온도를 갖는 중합체에는 0℃ 내지 280℃, 240℃ 내지 310℃의 용융 온도를 갖는 중합체에는 0℃ 내지 340℃, 310℃ 이상의 용융 온도를 갖는 중합체에는 0℃ 내지 380℃였다. 본원에서 용어 "유리 전이 온도(Tg)"는 10℃/분의 가열 속도로 DSC에 의해 ASTM E 1356-91에 따라 측정되고 모(parent) 열 곡선의 변곡점에 상응하는 제1 가열 주기의 모 열 곡선의 (시간에 대한) 1차 도함수의 정점에서의 온도로서 측정되는 온도로 이해된다. 본원에서 용어 "결정화 온도(Tcr)"는 10℃/분의 냉각 속도로 DSC에 의해 ASTM D3418-97에 따라 측정되고 용융 범위 내에 있고 가장 높은 결정화 흡열을 나타내는 온도로 이해된다. 본원에서 용어 "용융 온도(Tm)"는 10℃/분의 가열 속도로 제2 가열 동안 DSC에 의해 ASTM D3418-97에 따라 측정되고 용융 범위에 있고 가장 높은 용융 속도를 나타내는 온도로 이해된다. 본 발명의 방법에서 사출 성형 단계에 사용되는 온도는 바람직하게는 상기 (반)결정 중합체의 용융 온도(Tm) 초과에서 수행된다. 중합체 조성물의 사출 온도는 바람직하게는 Tm 내지 Tm + 70℃이고, 여기서 Tm은 각각의 중합체 조성물에 의해 포함되는 중합체의 용융 온도이고 보다 바람직하게는 상기 사출 온도가 Tm + 10℃ 내지 Tm + 50℃, 즉 Tm 초과 10 내지 50℃, 가장 바람직하게는 Tm + 20℃ 내지 Tm + 40℃, 즉 Tm 초과 20 내지 40℃이다. 본 발명의 방법의 구현예에서 상기 방법은 다음 단계를 포함한다: (i) 제1 중합체의 용융 온도(Tm1) 초과의 사출 온도에서 제1 중합체 조성물, 즉 더 낮은 TC를 갖는 중합체 조성물을 사출 성형하여 제1 중합체 조성물을 포함하는 제1 부품을 형성하는 단계; (ii) 제1 중합체 조성물이 제1 중합체의 결정화 온도(Tcr1) 미만의 표면 온도(Ts1)에 도달하도록 제1 부품을 냉각시키는 단계; 및 (iii) 후속으로 제2 중합체의 용융 온도(Tm2) 초과의 온도에서 제2 중합체 조성물, 즉 더 높은 열 전도성(TC2)을 갖는 중합체 조성물을 제1 부품 위에 사출 성형하여 제2 부품을 형성하고 동시에 제2 중합체 조성물과 제1 중합체 조성물 사이에 경계면을 형성하는 단계. 더 높은 경계면 접착 에너지가 본 구현예의 방법에 의해 수득된 본 발명의 물품에 대해 달성되었음이 관찰되었다. 바람직하게는 제1 중합체 조성물이 실질적으로 제1 중합체 조성물의 결정화 온도 Tcr1 미만의 표면 온도(Ts1)에 도달하도록 제1 부품은 상기된 방법의 단계 (ii)에서 냉각된다. 제1 부품이 Tcr1 - 60℃ 내지 Tcr1 - 200℃, 즉 Tcr1 미만 60 내지 200℃, 보다 바람직하게는 Tcr1 - 100℃ 내지 Tcr1 - 180℃, 즉 Tcr1 미만 100 내지 180℃의 온도 Ts1에서 냉각되었을 때 경계면 접착 에너지 면에서 우수한 결과가 수득되었다. 그러한 표면 온도는 Ts1에 맞춰진 주형 온도를 갖는 주형에서 수득되고 중합체 조성물은 예를 들어 15초 이상의 짧은 시간 동안 또는 30초 이상의 짧은 시간 동안 훨씬 더 잘 주형에 남아있는다. 제2 중합체가 제1 중합체의 용융 온도(Tm1)보다 더 높은 용융 온도(Tm2)를 가지고 있을 때 경계면 접착 에너지 면에서 더 우수한 결과가 달성된다. 바람직하게는 제2 중합체는 Tm1 + 20℃, 보다 바람직하게는 Tm1 + 40℃, 훨씬 더 바람직하게는 Tm1 + 60℃의 용융 온도(Tm2)를 갖는다. 상기된 방법의 단계 (iii)에서 제1 중합체 조성물에 대해 제2 중합체 조성물의 사출 성형 동안 수학식 1에 따른 하기 조건이 충족되었을 때 및 적어도 제1 중합체, 보다 바람직하게는 제1 및 제2 중합체 둘 다 (반)결정 중합체일 때 경계면 접착 에너지의 면에서 최고의 결과가 수득되었다: 상기 식에서, A=(TC2/TC1)0.5; 즉 A는 비 TC1/TC2의 제곱근과 같은 수이고; TC1 및 TC2는 각각 제1 및 제2 중합체 조성물의 열 전도성이고; Ts1은 제2 중합체 조성물의 사출 성형 순간에 제1 중합체 조성물의 온도이고; Tim2는 제2 중합체 조성물의 사출 성형 온도이고; Tm1은 제1 중합체 조성물의 용융 온도이다. 추가적인 구현예에서 본 발명은 본 발명의 방법에 의해 수득될 수 있는 부품의 조립물에 관한 것이고 부품의 조립물은 제1 중합체 조성물을 포함하는 제1 부품 및 제2 중합체 조성물을 포함하는 제2 부품을 포함하고 제1 부품과 제2 부품은 제2 중합체 조성물과 제1 중합체 조성물 사이의 경계면을 통해 서로에게 고정되어 있고, 여기서 제2 중합체 조성물의 열 전도성(TC2)은 제1 중합체 조성물의 열 전도성(TC1)보다 1.5 이상의 TC2/TC1 비로 더 높다. 특히 본 구현예에 따른 부품의 조립물이 지금까지 달성되지 않은 경계면 접착 에너지를 가질 수 있음이 발견되었다. 본 발명에 따르면 TC2는 TC1보다, 바람직하게는 TC2/TC1 비 2 이상, 보다 바람직하게는 3 이상, 더 우수하게는 4 이상, 가장 바람직하게는 6 이상으로 더 높다. 바람직하게는 TC1은 3W/m.K 이하, 보다 바람직하게는 2W/m.K 이하, 보다 더 우수하게는 1.25W/m.K, 훨씬 더 우수하게는 1W/m.K 이하, 가장 바람직하게는 0.5W/m.K 이하이다. 적합하게는 TC1은 0.1W/m.K 이상, 보다 바람직하게는 0.2W/m.K 이상, 가장 바람직하게는 0.3W/m.K 이상이다. 가장 바람직하게는 TC1은 0.3 내지 1.25W/m.K이다. 바람직하게는 TC2는 3W/m.K 이상, 보다 바람직하게는 5W/m.K 이상, 훨씬 더 우수하게는 10W/m.K 이상, 가장 바람직하게는 20W/m.K 이상이다. TC2는 40W/m.K 만큼 높거나 훨씬 더 높을 수 있지만 매우 우수한 결과는 이미 10 내지 30W/m.K 범위의 TC2로 수득된다. 본원에서 용어 "중합체 조성물의 열 전도성(TC)"은 평면 전도성이 최대인 방향에서 평면 내(in-plane) 열 전도성으로 이해된다. 그러한 전도성은 또한 평행 또는 종축 열 전도성으로 공지되어 있다. 중합체 조성물의 TC는 중합체 조성물의 시료에서 측정될 수 있고, 시료는 80 x 80 x 2mm의 치수를 갖고, 적합한 치수를 갖는 사각형 주형 및 사각형의 한 면에 위치한 높이 1mm, 폭 80mm의 필름 게이트를 구비한 사출 성형 기계를 사용하여 사출 성형에 의해 제조된다. 2mm 두께의 사출 성형된 시료 중 주형 충전 시 중합체 흐름 방향에 대한 평면 내 및 평행 방향(D//)의 열 확산성(thermal diffusivity), 밀도(ρ) 및 열 용량(Cp)을 측정하였다. 주형 충전 시 중합체 흐름 방향에 대한 평면 내 및 평행 방향(D//)의 열 확산성을 네츠슈(Netzsch) LFA 447 레이저플래쉬 장비를 사용하여 ASTM 방법 E1461-01에 따라 측정하였다. D//를 사출 성형된 시료로부터 먼저 약 1mm의 동일한 폭을 갖는 작은 띠 또는 막대를 잘라 측정하였다. 막대의 길이는 주형 충전 시 중합체 흐름 방향이었다. 이들 막대 중 몇몇을 잘린 표면이 밖으로 향하도록 쌓고 함께 매우 단단히 물렸다. 열 확산성은 잘린 표면의 배열에 의해 형성된 더미의 한 면으로부터 잘린 표면을 갖는 더미의 다른 면으로 더미를 통해 측정하였다. 시료의 열 용량(Cp)을 동일한 네츠슈 LFA 447 레이저플래쉬 장비 및 문헌[W. Nunes dos Santos, P. Mummery and A. Wallwork, Polymer Testing 14 (2005), 628-634]에 기재된 방법을 사용하여 공지된 열 용량을 갖는 참고 시료(피로세람(Pyroceram) 9606)와 비교하여 결정하였다. D//로부터 밀도(ρ) 및 열 용량(Cp), 성형된 플라크의 열 전도성을 하기 수학식 2에 따라 결정하였다: 본원에 언급된 임의의 TC의 모든 값은 20℃에서 측정되고 W/m.K로 표시된다. 열 정도성의 단위(W/m.K)의 표기에 대한 대안은 Wm-1K-1이다. 바람직하게는 본 발명의 조립물은 경계면 접착 에너지, 즉 제2 중합체 조성물과 제1 중합체 조성물 사이의 경계면 접착 에너지 100J/m2 이상, 보다 바람직하게는 200J/m2 이상, 가장 바람직하게는 300J/m2 이상을 갖는다. 경계면 접착 에너지는 이하에 상세히 기재된 바와 같이 적합한 가공 조건을 선택함으로써 또는 경계면 면적을 증가시킴으로써 증가될 수 있고 본원에서 제2 중합체 조성물과 제1 중합체 조성물 사이가 경계면 면적으로 지칭된다. 경계면 접착 에너지 또는 응집 에너지는 본원의 아래에 추가로 기재된 바와 같이 소위 이중 캔틸레버 빔 시험에 의해 측정된다. 부품 중 하나의 내부에서 응집 실패가 일어나는 경우에 엄밀한 의미의 경계면 접착은 측정되지 않지만 응집 실패의 결과로서 측정된 응집 에너지보다 더 높은 것으로 암시적으로 간주된다. 바람직하게는 경계면 면적은 10mm2 이상, 보다 바람직하게는 100mm2 이상, 가장 바람직하게는 1000mm2 이상이다. 경계면 면적은 제2 중합체 조성물과의 경계면에서 제1 중합체 조성물의 표면 영역에서 돌출 패턴의 기하학적 유형 또는 다른 유형을 생성함으로써 증가될 수 있다. 당업자는 중합체 조성물 사이의 열 전도성의 정해진 차이에 도달하기 위해 중합체 조성물의 조합을 선택하는 방법을 안다. 본 발명에 적합하게 사용되는 제1 및 제2 중합체의 예는 열가소성 반결정 중합체를 포함하고 이는 하나 이상의 추가적인 성분, 예를 들어 보조 첨가제, 강화 섬유 및/또는 충전재와 조합될 수 있되 제1 및 제2 중합체와 조합하는 그러한 추가적인 성분이 열 전도성 필요조건을 충족시키기 위해 선택된다. 제1 및/또는 제2 중합체에 사용될 수 있는 열가소성 반결정 중합체는 반결정이고 용융 가공가능한 한 다음을 포함한다: 폴리에스테르, 코폴리에테르에스테르 엘라스토머, 코폴리에스테르에스테르 엘라스토머, 폴리아미드, 코폴리에테르아미드 엘라스토머, 폴리페닐렌 설파이드, 폴리페닐렌 옥사이드, 폴리설폰, 폴리아릴레이트, 폴리이미드, 폴리에테르에테르케톤 및 폴리에테르이미드, 및 이들의 혼합물 및 공중합체. 본 발명의 바람직한 구현예에서 제1 및/또는 제2 중합체는 반결정 폴리아미드이다. 적합한 폴리아미드는 모두 당업자에게 공지된 폴리아미드이고 용융 가공가능한 반결정 폴리아미드를 포함한다. 본 발명에 따른 적합한 폴리아미드의 예는 지방족 폴리아미드, 예를 들어 PA-6, PA-11, PA-12, PA-4,6, PA-4,8, PA-4,10, PA-4,12, PA-6,6, PA-6,9, PA-6,10, PA-6,12, PA-10,10, PA-12,12, PA-6/6,6-코폴리아미드, PA-6/12-코폴리아미드, PA-6/11-코폴리아미드, PA-6,6/11-코폴리아미드, PA-6,6/12-코폴리아미드, PA-6/6,10-코폴리아미드, PA-6,6/6,10-코폴리아미드, PA-4,6/6-코폴리아미드, PA-6/6,6/6,10-터폴리아미드, 및 1,4-시클로헥산디카르복실산 및 2,2,4- 및 2,4,4-트리메틸헥사메틸렌디아민으로부터 수득된 코폴리아미드, 방향족 폴리아미드, 예를 들어 PA-6,I, PA-6,I/6,6-코폴리아미드, PA-6,T, PA-6,T/6-코폴리아미드, PA-6,T/6,6-코폴리아미드, PA-6,I/6,T-코폴리아미드, PA-6,6/6,T/6,I-코폴리아미드, PA-6,T/2-MPMDT-코폴리아미드(2-MPMDT = 2-메틸펜타메틸렌 디아민), PA-9,T, 테레프탈산, 2,2,4- 및 2,4,4-트리메틸헥사메틸렌디아민으로부터 수득된 코폴리아미드, 이소프탈산, 라우린락탐 및 3,5-디메틸-4,4-디아미노-디시클로헥실메탄으로부터 수득된 코폴리아미드, 이소프탈산, 아젤라산 및/또는 세박산 및 4,4-디아미노디시클로헥실메탄으로부터 수득된 코폴리아미드, 카프롤락탐, 이소프탈산 및/또는 테레프탈산 및 4,4-디아미노디시클로헥실메탄으로부터 수득된 코폴리아미드, 카프롤락탐, 이소프탈산 및/또는 테레프탈산 및 이소포론디아민으로부터 수득된 코폴리아미드, 이소프탈산 및/또는 테레프탈산 및/또는 다른 방향족 또는 지방족 디카르복실산으로부터 수득된 코폴리아미드, 임의적으로 알킬 치환된 헥사메틸렌디아민 및 알킬 치환된 4,4-디아미노디시클로헥실아민, 및 또한 상기 폴리아미드의 코폴리아미드 및 혼합물이다. 보다 바람직하게는 제1 중합체 및 제2 중합체 둘 다 반결정 폴리아미드이다. 보다 더 바람직하게는 제1 중합체는 200℃ 이상, 보다 바람직하게는 220℃ 이상의 용융 온도를 갖는 반결정 폴리아미드이다. 바람직하게는 제2 중합체는 240℃ 이상 또는 260℃ 이상, 가장 바람직하게는 280℃ 이상의 용융 온도를 갖는 반결정 폴리아미드이다. 바람직하게는 반결정 폴리아미드는 PA-6, PA-6,6, PA-6,10, PA-4,6, PA-11, PA-12, PA-12,12, PA-6,I, PA-6,T, PA-6,T/6,6-코폴리아미드, PA-6,T/6-코폴리아미드, PA-6/6,6-코폴리아미드, PA-6,6/6,T/6,I-코폴리아미드, PA-6,T/2-MPMDT-코폴리아미드, PA-9,T, PA-4,6/6-코폴리아미드, 및 상기 폴리아미드의 혼합물 및 코폴리아미드를 포함하는 군으로부터 선택된다. 보다 바람직하게는 PA-6,I, PA-6,T, PA-6,6, PA-6,6/6T, PA-6,6/6,T/6,I-코폴리아미드, PA-6,T/2-MPMDT-코폴리아미드, PA-9,T 또는 PA-4,6, 또는 이들의 혼합물 또는 코폴리아미드가 폴리아미드로서 선택된다. 보다 더 바람직하게는 반결정 폴리아미드는 PA-4,6을 포함한다. 본 발명에서 적합하게 사용되는 제1 중합체의 특히 바람직한 예는 PA6, PA66, PA46 및 PA46/4T, 및 이들의 혼합물 및 공중합체를 포함한다. 보다 바람직하게는 제1 중합체는 PA6, PA66 및 PA46, 및 이들의 혼합물 및 공중합체; 훨씬 우수하게는 PA6 및 PA66, 및 이들의 혼합물 및 공중합체로 이루어진 군으로부터 선택된다. 그러한 제1 중합체가 본 발명에 따라 사용될 때 부품의 조립물이 향상된 접착 특성을 가짐을 관찰하였다. 본 발명에서 적합하게 사용되는 제2 중합체의 특히 바람직한 예는 PA6, PA66, PA46, PA-6,6/6,T, PA-9,T, PA46/4T, 또는 이들의 혼합물 또는 공중합체를 포함한다. 바람직하게는 제2 중합체는 PA6, PA66, PA46 및 PA46/4T, 및 이들의 혼합물 및 공중합체로 이루어진 군으로부터 선택된다. 보다 바람직하게는 제2 중합체는 PA6, PA46 및 PA46/4T, 및 이들의 혼합물 및 공중합체로 이루어진 군으로부터 선택된다. 그러한 제2 중합체가 본 발명에 따라 사용되었을 때 부품의 조립물이 향상된 접착 특성을 가짐을 관찰하였다. 상기된 바와 같이 제2 조성물로서 사용되는 열 전도성 중합체 조성물은 바람직하게는 3W/m.K 이상, 보다 바람직하게는 5W/m.K 이상, 보다 더 바람직하게는 10W/m.K 이상의 TC2를 갖는다. 그러한 중합체 조성물은 상기 조성물을 형성하는 중합체에 열 전도성 충전재를 분산시킴으로써 용이하게 수득될 수 있고, 상기 충전재는 열 전도성, 즉 열을 전도하는 특성을 갖는 상기 중합체 조성물을 제공할 정도로 충분히 높은 농도이다. 적합하게는 열 전도성 충전재는 충전재가 분산된 중합체의 고유 열 전도성보다 25배 이상, 보다 바람직하게는 100배 이상, 가장 바람직하게는 300배 이상의 고유 열 전도성을 갖는다. 많은 열가소성 중합체는 약 0.3W/m.K 또는 훨씬 더 낮은 고유 열 전도성을 갖는다. 열 전도성 중합체 조성물에 포함되는 열 전도성 충전재는 중합체에 분산될 수 있고 중합체의 열 전도성을 향상시키는 임의의 물질일 수 있다. 열 전도성 충전재는 바람직하게는 알루미늄, 알루미나, 구리, 마그네슘, 동(brass), 탄소, 질화 규소, 질화 알루미늄, 질화 붕소, 흑연, 세라믹 섬유 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 열 전도성 충전재는 과립 분말, 미립자, 휘스커, 단섬유 또는 임의의 다른 적합한 형태일 수 있다. 미립자는 다양한 구조일 수 있다. 예를 들어 미립자는 박편(flake), 판, 쌀알, 가닥, 6각형 또는 구와 같은 모양을 가질 수 있다. 본원에서 "충전재"는 바람직하게는 10:1 미만의 종횡비를 갖는 미립자로 이루어진 물질로 이해된다. 적합하게는 충전재는 약 5:1 이하의 종횡비 l/d를 갖는다. 예를 들어 약 4:1의 종횡비를 갖는 질화 붕소 과립 미립자가 사용될 수 있다. 미립자는 또한 섬유 또는 작은 판(platelet)일 수 있고, 본원에서 "섬유"는 10:1 이상의 종횡비 l/d를 갖는 미립자로 이루어진 물질로 이해된다. 보다 바람직하게는 열 전도성 충전재는 15:1 이상, 보다 바람직하게는 25:1 이상의 종횡비를 갖는 섬유로 이루어져 있다. 본원에서 "작은 판"은 10:1 이상의 종횡비 d/t를 갖는 미립자로 이루어진 물질로 이해된다. 보다 바람직하게는 d/t는 25:1 이상이다. 종횡비 l/d에서 l은 길이, 즉 미립자의 가장 긴 치수이고 한편 d는 미립자의 직경이다. 유사하게 종횡비 d/t에서 t는 두께, 즉 미립자의 가장 작은 치수이고 한편 d는 미립자의 가장 긴 직경이다. 바람직한 구현예에서 열 전도성 중합체 조성물에 포함된 열 전도성 충전재는 열 전도성 섬유의 형태이다. 바람직하게는 열 전도성 섬유는 금속 섬유 및/또는 탄소 섬유를 포함한다. 적합한 탄소 섬유(또한 흑연 섬유로 공지됨)는 피치(PITCH)계 탄소 섬유이다. 예를 들어 약 50:1의 종횡비를 갖는 피치계 탄소 섬유가 사용될 수 있다. 피치계 탄소 섬유는 열 전도성에 상당히 기여한다. 또다른 바람직한 구현예에서 열 전도성 중합체 조성물에 포함된 열 전도성 충전재는 미립자와 섬유의 조합이다. 그러한 충전재의 예는 맥쿨러프(McCullough) 미국 특허 제6,251,978호 및 제6,048,919호에 기재되어 있고 상기 기재는 본원에 참조로 혼입된다. 본 발명의 또다른 바람직한 구현예에서 열 전도성 충전재는 질화 붕소를 포함한다. 중합체 조성물에서 열 전도성 중합체로서 질화 붕소의 잇점은 질화 붕소가 높은 열 전도성을 부여하면서 우수한 전기 절연 특성을 지닌다는 것이다. 본 발명의 또다른 바람직한 구현예에서 열 전도성 충전재는 흑연, 보다 구체적으로 팽창된 흑연을 포함한다. 중합체 조성물에서 열 전도성 충전재로서 흑연의 잇점은 흑연이 매우 낮은 중량%에서 이미 높은 열 전도성을 부여한다는 것이다. 열 전도성 중합체 조성물에서 열 전도성 충전재의 바람직한 농도는 중합체 조성물의 총 중량의 5중량%(wt%) 이상, 보다 바람직하게는 10중량% 이상, 가장 바람직하게는 15중량% 이상이다. 또한 우수한 기계적 특성을 갖는 열 전도성 중합체 조성물을 수득하기 위해 중합체 조성물 내의 충전재의 농도는 바람직하게는 75중량% 이하, 보다 바람직하게는 60중량% 이하, 가장 바람직하게는 45중량% 이하이다. 바람직한 구현예에서 질화 붕소는 15 내지 60중량% 범위, 보다 바람직하게는 20 내지 45중량% 범위의 양으로 열 전도성 충전재로서 사용된다. 또다른 바람직한 구현예에서 탄소 피치 섬유는 15 내지 60중량%, 보다 바람직하게는 25 내지 60중량%의 범위의 양으로 열 전도성 충전재로서 사용된다. 또다른 바람직한 구현예에서 팽창된 흑연이 10 내지 45중량%, 보다 바람직하게는 15 내지 30중량% 범위의 양으로 열 전도성 충전재로서 사용된다. 본원에서 언급된 중량%는 모두 중합체 조성물의 총 중량에 대한 것이다. 가장 바람직한 구현예에서 제2 중합체 조성물은 질화 붕소 및 흑연, 보다 구체적으로 팽창된 흑연의 조합을 포함한다. 바람직하게는 질화 붕소 및 흑연은 10 내지 60중량%의 조합된 양으로 존재하고 각각 5 내지 30중량% 범위의 양으로 존재한다. 본 발명의 바람직한 구현예에서 제2 부품에 사용되는 열 전도성 중합체 조성물은 다음으로 이루어진다: (a) 30 내지 90중량%의 열가소성 반결정 중합체, (b) 10 내지 70중량%의 열 전도성 물질, (c) 0 내지 60중량%의 다른 첨가제, 여기서, (a), (b) 및 (c)의 중량%는 중합체 조성물의 총 중량에 대한 것이고 (a), (b) 및 (c)의 합계는 100중량%이다. 본 발명의 보다 바람직한 구현예에서 열 전도성 중합체 조성물은 다음으로 이루어진다: (a) 30 내지 90중량%의 열가소성 반결정 중합체, (b) 10 내지 70중량%의 열 전도성 물질(열 전도성 물질의 50중량% 이상은 질화 붕소 또는 흑연, 또는 이들의 조합으로 이루어진다), (c) (i) 0 내지 40중량%의 강화 섬유 및 성분 (b) 이외의 충전재, 및 (ii) 0 내지 20중량%의 다른 첨가제, 여기서, (a), (b), (c)(i) 및 (c)(ii)의 중량%는 중합체 조성물의 총량에 대한 것이고 (a), (b), (c)(i) 및 (c)(ii)의 합계는 100중량%이다. 본 발명의 훨씬 더 바람직한 구현예에서 열 전도성 중합체 조성물은 다음으로 이루어진다: (a) 30 내지 90중량%의 200℃ 이상의 용융 온도를 갖는 반결정 폴리아미드, (b) 10 내지 70중량%의 열 전도성 물질(열 전도성 물질의 50중량% 이상은 질화 붕소 또는 흑연 또는 이들의 조합으로 이루어진다), (c) (i) 0 내지 40중량%의 강화 섬유 및 성분 (b) 이외의 충전재, 및 (ii) 0 내지 20중량%의 다른 첨가제, 여기서, (a), (b), (c)(i) 및 (c)(ii)의 중량%는 중합체 조성물의 총량에 대한 것이고 (a), (b), (c)(i) 및 (c)(ii)의 합계는 100중량%이다. 이들 바람직한 구현예에서 열 전도성 물질의 최소량은 본원에서 사용되는 중합체 조성물의 필요 최소 열 전도성 및 열 전도성 물질의 유형 또는 이들의 조합에 의해 지배됨을 유의한다. 본 발명의 조립물은 다양한 제품, 예를 들어 기어, 램프 하우징, 전동 공구, 수동 공구, 자동차 부품 등에 사용될 수 있다. 본 발명은 추가로 본 발명의 조립물을 포함하는 램프 구성요소 및 보다 특히 램프 소켓 또는 램프 하우징에 관한 것이다. 바람직하게는 본 발명의 램프 구성요소에 포함된 제1 중합체 조성물은 반결정 폴리아미드로 이루어진 군으로부터 선택된다. 앞서 상세히 기재된 바와 같이 바람직하게는 본 발명의 램프 구성요소에 포함된 제2 중합체 조성물은 열 전도성 중합체 조성물이다. 보다 바람직하게는 열 전도성 중합체 조성물은 폴리아미드로 이루어진 군으로부터 선택된 중합체 및 흑연 및/또는 세라믹 충전재, 예를 들어 질화 붕소로 이루어진 군으로부터 선택된 열 전도성 충전재를 포함한다. 가장 바람직하게는 램프 구성요소는 본 발명의 방법에 따라 제조된다. 본 발명은 하기 실시예 및 비교 실험의 도움으로 예시될 것이나 이들로 한정되지 않는다. 방법 경계면 접착 에너지 아래 추가적으로 기재된 바와 같이 2개의 중합체 부품 사이의 경계면 접착 에너지를 시험 시료에 대해 이중 캔틸레버 빔 셋업을 사용하여 측정하였다. 경계면 접착 에너지 측정값에 대한 시험을 2kN 적재 셀(load-cell), 10kN 매뉴얼 그립 고정물 및 제어와 분석을 위한 즈윅(Zwick) 소프트웨어 테스트엑스퍼트(TesTxpert) II를 구비한 즈윅 1455 기계에서 수행하였다. 시험을 23℃ 및 50% 상대습도에서 100mm/분의 시험 속도로 벤치 변위로 수행하였다. 2개의 동일한 적재 금속 탭을 캔틸레버 빔의 한쪽 끝에서 시료의 상부 및 하부 표면이 완전히 겹친 위치에서 서로에 대해 정확히 반대쪽에 올렸다. 탭을 상업적인 에폭시 접착제로 시료에 붙였다. 중합체 부품 사이의 경계면에서 잘라 탭의 표면과 같은 표면에 대해 2개의 중합체 부품의 고정을 풀어 빔의 갈라진 끝을 생성하였고 분리된 영역은 탭 아래 있었다. 반대쪽 방향에서 탭을 당겨 탭을 통해 시료에 적재를 적용하였다. 빔의 끝에서 당김으로써 2개의 중합체 부품이 박리하기 시작하였다. 시험 동안 적용된 힘을 빔 끝의 변위와 함께 측정하였다. 시험을 각각의 물질 조합에 대해 3회 수행하였다. 박리 에너지에 대해 측정된 값을 평균하였다. 박리가 경계면 접착 실패로 인한 것인지 부품 중 하나의 내부의 응집 실패로 인한 것인지는 별개로 하였다. 시험 시료의 제조 조사된 시료는 120252mm의 길이(L) x 폭(W) x 두께(T)의 동일한 치수를 갖는 2개의 중합체 부품으로 이루어진, 공지된 이중 캔틸레버 빔의 모양을 갖는 2-K 성형된 부품이었고, 부품은 부품의 폭 치수에 걸쳐 그리고 부품의 길이 치수를 따라 서로에게 고정되었다. 그러한 시료는 상부 표면과 하부 표면 사이의 거리가 그 사이의 경계면에 수직이고 중합체 부품의 두께의 2배와 동일한 상부 표면 및 하부 표면에 의해 특징지어진다. 먼저 제1 물질을 사출 성형하여 제1 부품을 형성하는 단계 및 이어서 제2 부품을 구성하는 제2 물질로 제1 부품을 오버몰딩하는 단계를 포함하는 표준 성형 조건을 사용하여 2성분 사출 성형에 의해 시료를 제조하였다. 제1 물질의 사출 성형 온도(Tim1) 및 제2 물질의 사출 성형 온도(Tim2) 뿐만 아니라 제2 물질의 사출 성형 순간에 제1 물질의 표면 온도(Ts1)를 나타내는 주형 온도, 제1 및 제2 물질의 열 전도성 및 그 사이의 비 및 접착 에너지 면에서의 결과를 표 1에 제시하였다. 실시예 및 비교 실험 실시예 및 비교 실험을 위해 아래 열거된 물질로부터 선택된 물질의 상이한 조합을 사용하였다. 물질 C-1 강화되지 않은 PA46 등급, TC = 0.3 W/m.K C-2 유리 섬유 강화 등급, PA46을 기초로 함, 흑연 충전됨, TC = 15 W/m.K C-3 충전되지 않은 PA6 등급, TC = 0.3 W/m.K C-4 강화되지 않은 PA6 등급, 흑연 충전됨, TC = 15W/m.K C-5 강화되지 않은 난연 등급, PA46을 기초로 함, 질화 붕소 충전됨, TC = 1 W/m.K C-6 강화되지 않은 PA46 등급, 흑연 충전됨, TC = 15 W/m.K C-7 강화되지 않은 등급, PA46/PA6 블렌드를 기초로 함, TC=0.3 W/mK. 상이한 물질의 조합, 물질의 열 전도성, 성형 온도 및 생성된 접착 에너지를 포함하는 사출 성형 시험을 나타내는 실시예 및 비교 실험의 개요 실험 제1 중합체 조성물 제2 중합체 조성물 TC1, TC2 비TC2/TC1 가공 온도Tim1, Ts1, Tim2 접착 에너지b)(J/m2) 실시예 I C1 C2 0.3;15;50 315;125;315 180 실시예 II C3 C4 0.3;15;50 260;125;290 340 실시예 III C5 C2 1;15;15 310;125;310 287 실시예 IV C5 C4 1;15;15 315;135;290 304 실시예 V C1 C6 0.3;15;50 315;125;315 170 비교 실험 A C1 C1 0.3;0.3;1 315;135;315 ~0a) 비교 실험 B C1 C1 0.3;0.3;1 315;240;315 ~0a) 비교 실험 C C2 C1 15;0.3;0.02 315;125;315 ~0a) 비교 실험 D C2 C5 15;1;0.07 315;125;315 8 비교 실험 E C1 C7 0.3;0.3;1 315;125;315 ~0a) a) 너무 낮아서 정확히 측정되지 않음b) 응집 실패의 경우에 보고된 숫자가 경계면 접착 에너지보다는 응집 에너지를 나타내는 것으로 간주되고, 경계면 접착 에너지는 측정된 값보다 더 높은 것으로 암시적으로 간주됨. 본 발명에 따른 실시예는 부품 중 하나 이내에서 모두 응집 실패를 나타내어 경계면 접착 에너지가 부품 중 하나 이상의 응집 에너지보다 더 높다는 것을 입증한다. 비교 실험은 2개의 부품 사이의 접착 실패, 매우 낮은 분리 또는 박리 에너지를 나타내어 경계면 접착 에너지가 각각의 부품의 응집 에너지보다 더 낮음을 입증하였다.
	제목: [사설] 유류세의 전반적인 손질이 필요하다 정부가 10년 만에 유류세를 인하하겠다 하였으나 2008년 당시 유류세 인하 때 휘발유 가격이 올라 실효성에 대한 걱정이 나오기 때문에 이때 당시 처럼 조금만 인하하는 것이 아니라 크게 인하하는 것이 바람직하다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 정부가 10 년 만에 유류세 인하 카드를 다시 꺼내들었다. 이르면 모레쯤 구체적인 인하 폭과 시행 시기를 발표할 것이라 한다. 국제유가 상승의 영향으로 휘발유 가격이 오르면서 물가를 압박해 서민 가계를 위협하고 소비와 투자를 위축시키는 등 경기에도 악영향을 미치고 있다는 판단에서다. 줄어드는 기름값 부담을 내수 진작으로 유인해 경기를 부양하려는 조치다. 하지만 미리부터 실효성을 걱정하는 소리가 없지 않다. 2008 년 유류세 인하 때 휘발유 가격이 내리기는커녕 오히려 올랐던 선례가 있기 때문이다. 정부는 당시 유류세를 10% 인하했지만 휘발유 소매가격은 되레 3%가 올랐던 기억들을 잊지 않고 있다. 결과적으로 서민 가계나 경기 활력에는 도움을 주지 못한 채 1 조 6000 억원 규모의 세수만 낭비한 꼴이 되고 말았다. 휘발유 유통 과정의 거품을 걷어내지 못한 데 이유가 있었다는 사실을 감안할 필요가 있다. 유류세 인하가 정유사와 주유소의 배만 불렸다는 비판이 나오는 이유다. 물론 유류세 인하 조치 이후에도 국제유가가 계속 오름으로써 유류세 인하의 효과를 상쇄했던 측면도 무시할 수는 없다. 그럼에도 불구하고 휘발유 가격이 최소 1.8%는 떨어져야 했다는 게 전문가들의 분석이다. 과거의 비슷한 잘못을 되풀이해선 안 된다. 더욱이 국제유가는 당분간 상승세를 유지할 것이라고 한다. 수요자들이 기름값 하락을 체감하고 경기 활성화에도 실질 도움이 되도록 하려면 과거처럼 찔끔 인하가 아니라 대폭 인하하는 게 바람직하다. 마침 지난 8 월까지 국세수입도 지난해보다 23 조 7000 억원 더 걷혔다. 10% 인하시 세수 감소가 2 조 6000 억원으로, 탄력세율 최고치인 30%까지 내려도 여력이 있다. 세금인하가 실제 유가하락으로 이어지도록 유통과정의 거품도 빼야 한다. 이번 기회에 시혜 베풀듯이 한시 인하할 것이 아니라 에너지 복지와 경기진작 차원에서 유류세 전반을 손볼 필요가 있다. 휘발유 소비자가격에서 세금이 54.6%를 차지하는 등 배보다 배꼽이 더 큰 기형적 구조를 언제까지 방치할 수는 없는 노릇이다. 자동차가 사치품으로 간주되던 시절에 만들어진 유류세제를 이제 고칠 때가 됐다.
	감의 떫은 맛을 없애기 위해서는 추출 과정을 통해 탄닌을 제거해야 합니다. 감에는 탄닌이 많이 함유되어 있는데, 탄닌은 물에 녹지 않고 산성 또는 염기성 용액에 녹아 특유의 흑갈색을 띄는 물질입니다. 따라서 감을 소금물에 담그면, 물 속에서 탄닌이 불용성이 되어 수분을 뺏어 단 맛을 유지시키는 역할을 합니다. 이 과정은 물이 아닌 알코올로 추출할 때도 잘 작동합니다. 추출 시각과 추출 온도가 적절하면 탄닌을 완전히 제거할 수 있습니다. 추출 시간이 너무 길면 탄닌뿐 아니라 다른 성분도 함께 추출될 수 있으므로 주의해야 합니다. 추출이 완료된 감은 깨끗한 물에 헹궈 사용하면 됩니다.	덜 익은 감의 떫은 맛을 없애기 위해 감을 소금물에 담그는 원리는 무엇인가요?
	이 헌법의 가장 큰 변화는 최고사법관회의를 행정권의 보호 아래 두었다는 점이다. 당시에는 헌법적 틀 안에서 사법권 독립의 토대를 마련하는 것이 아니라 공화국의 연속성을 회복하는 것이 중요하고, 사법부의 구성원을 행정부에서 철수시키고 독립적인 기관에 위임하면 국가가 약화될 수밖에 없으며, 무엇보다 당 체제와 국가정신을 망치는 분열을 종식시킬 필요성이 있다고 보았다. 따라서 그 구성에 있어서 여전히 대통령을 위원장, 법무부장관을 부위원장으로 하고, 나머지 구성원들을 12명에서 9명으로 줄이면서 모두 대통령에 의해 임명되게 하였다. 즉 대통령이 대법원 사무국에 의해 3배수 이상으로 작성된 명단에서 대법원 소속 사법관 3명(1명은 검사), 항소법원 또는 지방법원 판사 3명을 지명하고, 행정최고재판소 전체회의에서 작성된 3명의 명단 중에서 행정최고 재판소 최고위원 1명을 지명하였으며, 그 권한에 의해 자격이 있는 2명도 대통령이 직접 지명하였다. 권한에 있어서도 판사의 임명과 징계권한을 그대로 갖되, 판사 임명에 있어서 제청 권한이 축소되어 대법원 판사와 항소법원장 임명만을 제청할 수 있었고, 그 외의 판사들에 관해서는 법무부장관의 임명안에 대해 구속력이 없는 단순한 의견만을 제시할 수 있었다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 프랑스 사법관의 인사시스템과 그 시사점(1) : 최고사법관회의(Conseil supérieur de la magistrature)를 중심으로 요약문: 이 헌법의 중요한 점은 행정권의 보호 아래에 최고사법관회의를 둔 것이다. 이에 위원장에 대통령을 부위원장에 법무부 장관을 두고 나머지 9명은 대통령이 임명하게 하였다. 판사 역시 임명과 징계 권한은 가지나 이러한 판사 임명에 대한 제청 권한은 줄어들었다.
	교육개발협력 연구･사업의 협업은 기존의 협업망 내에서 정보 공유를 확대하고 참여기관 간의 소통과 교류협력을 강화하는 방향으로 추진해야 한다. 이를 위해서는 기관간의 효과적인 의사소통 채널을 구축하는 것이 중요하다. 그동안 교육개발협력 정책연구를 수행하는데 있어서 교육관련 기관들과 국제개발협력 관련 기관간의 연결이 미약했을 뿐만 아니라, 교육관련 기관들조차 약한 연결망을 구축하고 있었다. 그리고 정책연구기관과 사업 수행기관 간의 소통이 부족했기 때문에, 생산된 정책지식이 현장으로 확산되는데도 한계가 있었다. 또한 교육개발협력 분야에 신규 참여하는 기관들의 경우에는 어느 기관과 어떠한 방식의 협업이 가능한지조차 알기 어렵다. 이러한 한계를 극복하기 위해서는 교육 개발협력의 연결망이 실질적으로 작동할 수 있도록 각 기관이 생산한 지식을 공유하고 확산할 수 있는 방안을 적극적으로 모색해야 한다. 그리고 이와 함께 교육개발협력의 연결 망 속에서 관련 정보･경험･지식의 수집과 확산 기능을 담당할 수 있는 중심기관에 관한 논의도 심도있게 검토할 필요가 있다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 글로벌교육협력 연구·사업의 추진 전략과 과제: 교육개발협력 연구·사업의 협업 방안을 중심으로 요약문: 교육개발협력 연구사업의 협업은 참여하는 각 기관들의 의사소통 채널을 구축하고, 관련정보 경험 지식의 수집과 확산을 담당하는 중심기관 설치도 검토할 필요가 있다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	활터에서 기본적으로 민속문화가 갖는 총체성을 확인할 수 있으며, 정치·경제적 조건과 가치, 관념체계의 관계를 살펴 볼 수 있다(국립민속박물관, 2007).	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 전통무예에 대한 관심은 전통과 무예, 문화에 대한 이해 부족으로 인하여 흔히 두 가지 형태로 표현된다. 하나는 전통문화의 수집, 보전, 전승의 노력 등으로 나타나고, 다른 하나는 전통문화를 복원, 재해석 하고 그 위에 재편성 내지 재창조하려는 노력으로 나타난다(나영일, 1994). 소위 전자를 문화적 보수주의, 후자를 창조적 문화주의라고 한다. 또한 전통문화를 연구함에 있어서도 문헌을 기반으로 연구하는 것과 문화를 기반으로 연구하는 것 즉, 문헌연구냐 필드연구냐에 따라 문헌민속학(literary folklore)적 연구와 인류학적 민속학(anthropological folklore) 연구로 구분된다(이찬우, 2008). 한국의 민속학은 1930년대에 시작되어 주로 구비전승이나 무속에 많은 관심을 쏟아왔으며, 이분야에 대한 정리는 이제 상당한 수준에 이른 것으로 보이나, 그 외의 세시풍속이나 통과의례, 놀이 예술, 물질문화 등에서는 여전히 많은 민속학적 연구를 필요로 한다. 활쏘기는 전통놀이 이면서도 무예로서 의미를 갖고 있고, 활과 활터에 대한 연구는 민속학적으로도 큰 의미가 있다. 활터는 활과 화살이라는 도구를 매개로 공간과 인간이 엮이는 곳이다. 즉 활터라는 곳을 통해 우리 사회의 공간이나 도구, 기술에 대한 가치부여방식과 사람들의 사회적 관계망을 파악할 수 있다.
	이렇듯 우리 삶의 중요한 영향요인으로 자리 잡고 있는 자산을 Sherraden(1991)은 복지효과의 측면에서 살펴보았고, 이를 이론화 하였다. 한편, Ando와 Modigliani(1963)는 개인의 부나 저축이 은퇴 이전까지는 증가하다가 은퇴 이후 조금씩 감소하는 현상에 주목하여 생애주기가설(the life-cycle hypothesis)을 주장하였다. 이러한 이론과 가설은 특히 소득활동의 기회가 줄어드는 노년층에게 있어 자산이 매우 중요함을 일깨워준다. 자산은 누구에게나 중요하지만 은퇴 등의 이유로 소득이 줄어들거나 거의 없는 노년층에게는 그들의 남은 삶을 결정하는 핵심 요인이 될 수 있다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 노인의 자산수준이 삶의 만족도에 미치는 영향 : 사회활동참여의 다중매개효과를 중심으로 요약문: Sherraden과 Ando와 Modigliani의 이론과 가설은 노년층에게 자산의 중요함을 일깨워준다. 자산은 소득이 준 노년층에게는 남은 삶을 결정하는 핵심요인이기때문이다.
	단위 정육면체의 모서리 사이의 거리는 1, $\sqrt{2}$, $\sqrt{3}$입니다. 가장 짧은 두 변이 1과 1이면 세 번째 변은 $\sqrt{2}$이어야 합니다. 두 최단변이 1과 $\sqrt{2}$이면, 세 번째 변은 $\sqrt{3}$이어야 합니다. 두 최단변이 $\sqrt{2}$ 와 $\sqrt{2}$ 인 경우, 세 번째 변도 $\sqrt{2}$ 여야 합니다. 최단변이 $\sqrt{3}$인 경우는 없습니다. 이렇게 하면 3$ 개의 비접하는 삼각형이 나옵니다.	단위 정육면체의 모서리에 꼭짓점이 위치하도록 합동이 아닌 삼각형을 몇 개 그릴 수 있습니까?
	문화산업 근로자의 고용에 대한 연구에 따르면 월평균임금과 주당근로시간과 같은 근로조건에서는 제조업 근로자에 비해 불리하지 않지만 짧은 근속 및 경력기간, 소규모 기업 취업, 비정규직 고용형태로 인해 고용의 질적 측면은 취약했다(허식, 2009). 또한 고숙련 프리랜서의 노동이 자율성·창의성·전문성의 특징을 가지는 반면 저숙련 프리랜서의 노동은 고용 불안정성이 커서 양 극단 사이의 차이가 두드러졌다(황준욱 외, 2009). 이와 같은 점을 볼 때 문화산업의 고용이 증가하더라도 불안정한 일자리가 양산될 가능성이 크며 이에 대한 정책적 배려가 필요함을 알 수 있다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 2011 한국의 사회동향 요약문: 문화산업 근로자 중 제조업 근로자는 고용의 질적 측면이 취약했다. 또한 고숙련 프리랜서와 저숙련 프리랜서의 차이가 두드러졌다. 문화산업 근로에서 정책적 배려가 필요하다.
	최근 우리사회에서 보편적인 가족정책의선언과 다문화가족정책의 급속한 전개과정 역시 바로 이러한 가족주의 열망과 무관하지 않다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 그러나 다문화가족정책의 방점은 무엇보다 이들의 가족형성 및 유지 지원에 초점을 맞추고 있다는 점에서 다분히 가족주의의 변형적 특성이 내포되어 있다고 볼 수 있다. 오늘의 가족현실은 과거의 가족이념과는 상당히 다른 방향으로 움직이고 있다. 무엇보다 불안정한 시장상황이 가족의 경제적 기반을 약화시키면서 가족간 계층격차를 초래함에 따라 그동안 가족이 수행해온 보호와 돌봄의 기능을 급격하게 위축시키는가 하면, 요동치는 노동시장에서 가족생활보다는 일과 자신의 직업경력을 우선시하는 사회로 이동하는 것이다. 그럼에도 불구하고 여전히 우리사회에서 가족은 개인 삶의 질을 결정하는 중요한 요인으로 지목되어 왔으며, 특히 가족관계 중에서도 자녀는 가족전체의 삶의 질에 가장 중요한 요소로 인식되고 있다. 그 결과 신자유주의 시장질서가 팽배해지면서 가족의미의 퇴색과 극도의 저출산 현상이 지속되는 다른 한편에서는 여전히 경쟁에서 비교우위를 차지하기 위한 최적의 단위로서 핵가족 이데올로기가 강화, 재생산 되는 이중구조가 나타나고 있다(김혜영, 2013).
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	이 때문에 후처리 공정에서 기판상의 퓨즈 엘리먼트를 캡형상 덮개체로 덮어서 피복할 때, 퓨즈 소자의 변형이 현저한 경우에는, 캡형상 덮개체를 절연 기판에 수평으로 부착할 수가 없거나, 소정의 부착 위치로부터 어긋나거나 하여 덮개체의 재치 작업이 방해되어 조립 불량의 원인이 되는 등 바람직하지 않는다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 근래, 모바일 기기 등 소형 전자기기의 급속한 보급에 수반하여, 탑재하는 전원의 보호 회로에 실장되는 보호 소자도 소형 박형의 것이 사용되고 있다. 예를 들면, 2차 전지 팩의 보호 회로에는, 표면 실장 부품(SMD)의 칩 보호 소자가 알맞게 이용된다. 이들 칩 보호 소자에는, 피보호 기기의 과전류에 의해 생기는 과대 발열을 검지하고, 또는 주위 온도의 이상 과열에 감응하여, 소정 조건으로 퓨즈를 작동시켜 전기회로를 차단하는 비복귀형 보호 소자가 있다. 그 보호 소자는, 기기의 안전을 도모하기 위해, 보호 회로가 기기에 생기는 이상을 검지하면 신호 전류에 의해 저항 소자를 발열시키고, 그 발열로 가융성(可融性)의 합금재로 이루어지는 퓨즈 소자를 용단시켜서 회로를 차단하든지, 또는 과전류에 의해 퓨즈 소자를 용단시켜서 회로를 차단할 수 있다. 예를 들면, 일본 특개2008-112735호 공보(특허 문헌 1) 및 일본 특개2011-034755호 공보(특허 문헌 2)에는, 이상시에 발열하는 저항 소자를 세라믹스 기판 등의 절연 기판상에 마련한 보호 소자와, 이 보호 소자를 이용하여 Li 이온 2차 전지의 과충전 모드로 전극 표면에 생성한 덴드라이트에 의한 성능 열화 등에 기인하는 발화 사고를 방지하는 보호 장치가 개시되어 있다.종래, 상술한 칩 보호 소자의 퓨즈 소자를 구성하는 가융성 합금재는, 세라믹스 기판 등 절연 기판의 위에 형성한 패턴 전극에 레이저 용접 등의 접합 수단에 의해 부착되어 있다. 레이저 용접은, 개편(個片)의 퓨즈 소자를 패턴 전극에 확실하게 접합하기 위해 적합한 공법이지만, 고가의 레이저 용접기를 필요로 하고, 개개의 접합 부분에 레이저를 국부 조사하면서 작업하기 때문에, 복수의 퓨즈 소자를 일괄 접합할 수가 없고, 작업시간을 필요로 하여 반드시 생산 효율이 높은 방법은 아니었다. 또한, 특히 평판형상의 퓨즈 소자를 절연 기판의 패턴 전극과 접합하는 경우에는, 레이저 조사열에 의해 퓨즈 소자 전체가 용융하여 버리지 않도록 퓨즈 소자의 주연부에 레이저를 포인트 조사할 필요가 있고, 퓨즈 소자판의 중앙 부분은 패턴 전극이 있더라도 이것을 접합에 이용하기가 어렵다. 이 때문에 퓨즈 소자와 패턴 전극과의 접촉면 전면(全面)을 접합면으로 할 수가 없고, 전기 저항이나 접속 강도의 관점에서 최적이라고는 말할 수가 없다.또한, 보호 소자의 퓨즈 소자나 기판 전극을 포함하는 기판 등의 접합부품의 소형화·박형화의 진전에 수반하여, 보다 박판의 퓨즈 소자를 이용한 경우에는, 레이저 열에 의해 용접 후의 퓨즈 소자가 과열 변형하거나, 레이저 조사 부위가 과도하게 부풀어 올라 국부적으로 두꺼워지거나 하여 엘리먼트 부착의 만듦새가 나빠지는 결점이 있다.
	우2는 아일랜드 출신의 록 밴드로, 보노, 디 에지, 애덤 클레이튼, 래리 멀린 주니어로 구성되어 있습니다. 초기에는 포스트 펑크 장르를 주로 했지만, 시간이 지나면서 다양한 대중음악 장르를 융합시켰습니다. 밴드의 음악은 정치적, 이념적, 종교적 내용을 담고 있으며, 1976년 마운트 탬플릿 중학교에서 결성되었습니다. 첫 앨범 'Boy'를 발매한 후, 1980년대 중반부터 세계적인 인기를 누리게 됩니다. 1987년에 발매된 'The Joshua Tree'는 몇 차례 라이브 공연에서 큰 성공을 거두었습니다. 1991년에 발매된 'Achtung Baby'와 함께 밴드의 음악적 재창조가 이루어집니다. 이후 몇 년 동안 다양한 음악 스타일을 실험하며 계속해서 새로운 것을 시도하게 됩니다. 2000년에는 'All That You Can't Leave Behind'을 발표하여 2000년대에도 명성을 떨치게 됩니다. 현재까지 총 12장의 정규 앨범을 발표하였으며, 전 세계적으로 2억 1천만장의 음반을 판매하였습니다. 그들은 그래미 상을 22회 수상하였으며, 2005년에는 로큰롤 명예의 전당에 입성하였습니다.	우2는 어떤 음악 장르를 주로 한 밴드인가요?
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	이럴 경우 비자발적 강제입원은 입원이 환자의 이익에 명백하게 도움이 된다는 의학적 판단에 따른 온정적 간섭주의(medical paternalism)에 의해 정당화되고, 사회는 이를 관례적으로 인정해오고 있다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 모든 국민은 신체의 자유에 대한 기본권을 가지며, 이 기본권을 제한하기 위해서는 법률과 적법한 절차에 따라야 하고, 이를 제한하는 경우에도 자유와 권리의 본질적인 내용을 침해할 수는 없다. 이는 정신질환자에게도 동일하게 적용되어야 한다. 이를 위해 정신보건법에서는 모든 정신질환자는 정신질환이 있다는 이유로 부당한 차별대우를 받아서는 안된다고 규정하고 있다. 그럼에도 불구하고 정신질환자는 경우에 따라서 자신의 의지에 반하는 비자발적 강제입원(involuntary and compulsory admission)을 당할 수 있다. 원론적 측면에서 비자발적 강제입원은 법적으로 신체의 자유에 대한 기본권 침해에 해당하고, 윤리적 관점에서는 환자의 자율적 선택을 무시하는 행위이다. 의사가 치료 과정에서 환자의 동의를 구하는 것은 환자의 자율적 선택을 보장하는 중요한 과정으로서, 이는 곧 환자의 존엄성과 권리를 존중한다는 의미다. 그러나 현실적으로 정신질환자의 치료 과정에서 환자가 동의하지 않는 비자발적 강제입원이 불가피한 경우가 있을 수 있다. 일부 정신질환자에서는 치료가 필요함에도 불구하고 현실판단력이 떨어지거나 병식이 결여되어 치료가 자신의 이익에 부합된다는 사실을 인정하지 않아 치료 자체를 거부할 수 있기 때문이다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 제공하세요.	이송되는	이 문제에서는 주어진 텍스트 내의 <MASK>로 표시된 부분에 들어갈 적절한 단어를 예측해야 합니다. <MASK>가 위치한 문장의 전체 문맥을 분석하여, 문장의 나머지 내용과 일관되게 <MASK>에 들어갈 가장 적합한 단어를 답하세요. #텍스트: 디지털 날염기는 컴퓨터에 저장된 데이터에따라 잉크를 분사하여 표현된 원단디자인을 고열로 승화시키는 고열히터를 구비한다. 이러한 디지털 날염기는 기능성 섬유의 손상을 최소화 시킴으로써 온도와 장력을 조정하여 섬유에 색을 승화하므로 섬세한 문양을 빠르게 발색 할 수 있어 스카프나 넥타이 등의 문양 염색시 많이 사용된다.이러한 디지털 날염기에는 원단을 이송하는 다수의 롤러가 마련되며 이들 롤러에 감겨져 <MASK> 원단의 주름이나 구김을 방지할 수 있는 수단이 필요하다.즉, 원단의 두께, 원단의 이송 속도, 원단의 신축성 정도, 원단이 <MASK> 위치 등 디지털 날염기의 각종 운전 조건에 따라 원단이 구김이나 주름 없이 이송될 수 있도록 하고, 이송시 원단의 구겨짐, 늘어남등에 의한 인쇄 품질 저하가 발생하지 않도록 할 필요성이 있다.
	특히, 2020년 사우디가 의장국으로서 G20 논의를 시작하였는 바, 의장국의 제안 주제(안)을 적극 검토 및 협조하여 정책적 관심사항을 미리 고민하여 투영할 필요가 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 우선, G20 내에서의 연계전략이다. 국가들의 관심 정책이슈 및 디지털경제 현황에 대한 파악 후, G20 내에서의 이슈별 강조점을 관련국가와 연계하는 전략이 필요하다. 쟁점 대립과 관련, 국가들의 동향과 의도 파악이 가능하므로 예를들어 5G 전략을 강하게 추진하는 국가, AI전략을 국제협력 차원에서 진행하려는 국가, 우리측 관련 법제방향과 상반되지 않는 국가들과 상호 협조 구도를 사전에 꾸려가는 것이 필요하다.
	IRB 심의의 경우 재심의 판정이 나는 것을 대비하여 의무기록 조사를 실시하기 최소한 2달 전부터 이를 준비하는 것이 필요할 것이다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 둘째, 의무기록 조사 사전 준비 단계이다. 여기서는 병원 선정 및 섭외, 검토자 섭외 및 교육, IRB 심의 준비를 수행한다. 대규모 연구에서는 병원의 임의 선정보다는 병원을 규모나 그 특성에 맞게 층화하여 무작위 추출하는 과정이 필요하겠다. 이렇게 추출한 후 병원에 연구를 설명하고, 연구 참여를 설득하는 과정이 필요한데, 이를 만약 병원의 연구 참여를 어느 정도 강제하지 못 한다면 무작위 병원 선정 과정이 무의미할 수 있다. 위해 사건 현황 및 환자 안전 현황 파악을 유도하기 위한 제도 마련이 시급하겠다. 또 이 단계에서는 검토자의 섭외 및 교육도 중요하다. 검토자의 경우 임상 경력이 1차 검토자의 경우 최소 5년, 2차 검토자의 경우 최소 10년 이상인 사람을 선정하는 것이 검토의 질을 위하여 필요할 것이다. 검토자 교육도 최소 2일 이상, 위해 사건의 사례를 가지고 다함께 토의 하는 장을 마련하는 것이 중요하다. 또 실제 의무기록을 가지고 검토를 실습해보고, 그 결과를 검토자들마다 피드백해주는 것도 필수적이다.
	제목: 자동차 보험정비 거래 관행 ‘확’ 바뀐다...‘先손해사정제’ 도입 중소벤처기업부는 17일 국내 4대 손해보험사와 자동차 정비업계 등과 함께 '자동차 보험정비 분야의 건전한 발전과 소비자 권익 증진을 위한 상생협약'을 맺고 '선(先) 손해배상제도'를 시범도입 하기로 합의해 앞으로는 소비자들이 자동차 보험정비 및 정비요금과 자기부담금, 보험료 할증 등을 미리 알 수 있는 길이 열린다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 앞으로 자동차 보험정비 및 수리 때 발생하는 정비요금과 자기부담금, 보험료 할증 등을 사전에 알 수 있는 길이 열린다. 국내 4대 손해보험사와 자동차 정비업계, 정부가 사상 처음으로 '선(先) 손해배상제도'를 시범 도입키로 했다. 중소벤처기업부는 17일 국토교통부, 서울특별시, 더불어민주당, 국내 4대 손해보험사, 전국 시·도자동차검사정비사업조합, 소비자연대 등과 함께 '자동차 보험정비 분야의 건전한 발전과 소비자 권익 증진을 위한 상생협약'을 체결했다. 그동안 자동차 보험정비는 정비업체가 정비를 한 후 손해보험사의 손해사정이 진행됨에 따라 소비자와 정비업체, 손해보험사 간 정비요금 감액, 미지급, 지연지급 등을 이유로 분쟁이 자주 생겼다. 또 손해사정 내역이 자동차 소유자에게 정확하게 제공되지 않아 어떤 것을 정비했고, 정비요금은 얼마인지, 자기부담금 및 보험료 할증은 어떻게 진행했는지 등을 정확히 파악할 수 없었다. 중기부는 이 같은 자동차 보험정비 거래관행 개선을 위해 서울시와 합동으로 실태조사를 통해 선손해사정제도의 시범 도입과 상생협의회 구성 등을 제시했다. 이에 따라 손해보험사가 정비업체에 손해사정서에 있는 정비내역을 먼저 제공한 후, 정비를 진행하는 '선손해사정제도'가 처음으로 도입된다. 이 제도는 서울지역에서 1년 동안 시범 운영된다. 전국 확대 시기와 방법 등은 상생협의회에서 시범 운영 성과를 토대로 추후 논의할 예정이다. 이와 함께 손해보험사는 자동차 소유자에게 손해사정한 내용 등을 신속히 설명하고, 분쟁이 있는 정비요금에 대해선 주기적으로 검토해 합리적인 지급사유가 있는 경우 신속히 지급하기로 했다. 이해찬 더불어민주당 대표는 "사상 처음으로 선손해사정제도를 시범 도입함으로써 소비자의 알권리를 보다 강화할 수 있게 됐다"고 말했다. 박영선 중기부 장관은 "1년 간의 시범 운영을 통해 미흡한 점을 보완해 전국으로 확산되면 손해보험사, 정비업계, 소비자 모두에게 이익이 되는 상생과 공존의 기업 생태계가 만들어 질 것"이라고 기대를 표시했다. 한편, 중기부는 다른 분야와 업종에서 이런 상생협력 사례가 나올 수 있도록 지원할 계획이다.
	제목: 한국지역언론인클럽, 포항 지진특별법 통과 촉구 지난 30일부터 31일까지 개최된 '2019 한국지역언론인클럽 연찬회'에서 한국지역언론인클럽은 지열발전소로 인한 촉발지진에 대한 포항시민의 피해를 해소할 포항지진 특별법이 통과되어야 한다고 요구했다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 30일부터 이틀간 포항서 연찬회 열고 지역현안 공동 대처 한국지역언론인클럽(KLJC·회장 김진호)은 "여야의 정치적 이해관계 때문에 포항지진 특별법이 통과되지 못하고 있어 안타깝다"며 여야 정치권이 초당적 대처로 정기국회 내에 포항지진 특별법이 통과시켜야 한다고 촉구했다. KLJC는 지난 30일부터 31일까지 경북 포항에서 열린 '2019 한국지역언론인클럽 연찬회'에서 이 같은 내용을 담은 결의문을 채택했다. KLJC는 "포항지진이 지열발전소로 인한 촉발지진으로 밝혀진 지 6개월이 넘어갔으나 관련 상임위인 산자위에서는 아무런 논의조차 이뤄지지 못하고 있다"며 "국회가 포항지진 특별법 제정에 지지부진한 모습을 보임으로 인해 피해를 입은 포항시민들의 고통을 외면하고 있다"고 안타까워했다. 그러면서 "피해 주민들의 아픔을 생각해서라도 각 당은 한 발 씩 양보해 하루빨리 우선법안으로 상정해 9월 정기국회 내에 제정될 수 있도록 최선을 다해야 한다"고 강조했다. KLJC는 이날 채택한 결의서를 문희상 국회의장 및 여야 3당 대표에게 전달할 계획이다. 현재 포항지진 특별법은 발의됐으나 국회에 계류중이다. 더불어민주당의 '지열발전사업으로 촉발된 포항지진의 진상조사 및 피해구제 등을 위한 특별법안', 자유한국당의 '포항지진 피해구제 및 지원 등을 위한 특별법'과 '포항지진 진상조사 및 안전사회 건설 등을 위한 특별법', 바른미래당의 '2017년11월15일 포항지진 및 여진의 피해구제 등을 위한 특별법'등이다. 포항시청 대회의실에서 진행된 연찬회에서 김진호 회장은 "KLJC는 지난 2012년 창립 이래로 지방자치와 지방분권 등 지역발전과 국가발전에 선도적인 역할을 다해왔다"며 "앞으로도 국민의 알 권리 충족과 주민들의 삶의 질 향상, 도정 및 시?군정에 대한 날카롭고 올곧은 비판과 대안제시 등을 통해 국민들에게 많은 사랑을 받을 수 있도록 하겠다"고 밝혔다. 이철우 경북도지사는 축사를 통해 "현재 대한민국은 양극화와 지역·계층·세대·성별간의 갈등으로 많은 어려움에 처해있다. 소멸을 걱정하는 지역도 한두 곳이 아니다"면서 "한국지역언론인클럽이 중심에 서서 국민의 관심과 참여, 그리고 사회 각 부문의 적극적인 성원을 모아주길 당부한다"고 말했다. 이강덕 포항시장은 "포항이 시로 승격한지 70년이 되는 2019년에 한국지역언론인클럽의 연찬회를 포항에서 개최하게 된 것을 매우 뜻깊게 생각한다"며 "지역의 균형발전과 지역민들의 역량결집을 위해 앞으로도 많은 역할 해달라"고 요청했다. 한편 KLJC는 청와대와 국회를 출입하는 전국 주요 지역일간지 중견기자들이 중심이 돼 지난 2012년 8월 창립했으며, 40여개 지역신문·방송사 200여명의 회원이 활동하고 있다.
	제목: 문 대통령 "헝가리 정부와 긴밀 협력" 문재인 대통령은 3일 청와대에서 수석보과관회의를 열고 헝가리 정부와 협력하여 대응하고 있으며 모든 외교 채널과 물적 인적 자원을 총동원해 최선을 노력을 다할 것이라고 말하며, 각 부처에서도 긴밀히 협력하여 사고 수습에 나설 것을 강조했다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: "사고 수습에 최선 다할 것" [서울=충청일보 이득수기자] 문재인 대통령은 3일 "모든 외교 채널과 가능한 물적 인적 자원을 총동원해 마지막까지 최선의 노력을 다할 것"이라고 말했다. 문 대통령은 이날 청와대에서 수석보과관회의를 주재하고 "헝가리 정부와 협력해 최선을 다해 안타까운 상황에 임하고 있다"며 이같이 밝혔다. 문 대통령은 이어 "헝가리 정부와 협력해 사고원인 규명에도 빈틈이 없도록 하겠다"며 "각 부처는 사고 수습이 마무리될 때까지 긴밀히 협력하며 할 수 있는 노력을 다해주기 바란다"고 당부했다. 또 문 대통령은 "모든 가족들에게 최대한 신속하게 정보를 제공하고, 언론에게는 확인되는 상황을 실시간으로 알려서 부정확한 보도로 혼란을 주는 일이 없도록 노력해 주기 바란다"고 언급하고 "특히 현지에 있는 가족들의 경우 시일이 많이 걸릴 수도 있는 만큼 지내기에 불편함이 없도록 각별하게 마음을 써 주기 바란다"고 밝혔다. 사망자 시신의 국내 운구와 장례 지원, 또 생존자와 피해 가족들에 대한 심리적 안정 지원, 의료 지원과 법률 지원 등 필요한 조치들도 성의를 다해 줄 것도 당부했다. 이어 문 대통령은 "해외여행 3000만명 시대를 맞이해 사후 조력뿐 만이 아니라 사전에 안전관리를 강화하는 것이 중요하다"고 지적하고 "실효성 있는 개선방안을 마련해주기 바란다"고 지시했다.
	제목: “좀비 분장하고 상주의 호러나이트 즐겨요” 상주시는 전통이 깃든 왕산역사공원을 시작으로 상주향청 등 상주 시내에서 귀신 분장을 하고 공포 분위기를 자아내는 의상을 착용하고 진행하는 야간 관광 상품 '백귀야행'을 지난 11일 시작으로 올 5월부터 연말까지 진행한다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 이재수 야간관광상품 ‘백귀야행’ 첫 선 한국형 좀비 콘셉트 퍼포먼스 왕산역사공원 등 지역명소서 귀신 분장하고 특별미션 수행 이색 체험행사 참가자들 ‘호평’ 상주시는 지난 11일 야간 관광 상품 ‘백귀야행’첫 행사를 가졌다. 상주시는 올 5월부터 연말까지 야간 관광 상품 ‘백귀야행(百鬼夜行)’을 운영키로 하고 11일 첫 행사를 가졌다. 야간 관광상품은 다음달 8일, 7월 13일에도 선을 보이는 등 연말까지 이어진다. 백귀야행은 상주시의 전통이 깃든 왕산역사공원을 시작으로 상주향청, 중앙시장, 왕산장터, 카페, 음식점 등 상주 시내에서 실시하는 미션게임, 퍼포먼스 등으로 주·야간에 걸쳐 실시하는 관광 상품이다. 상주시는 신규 관광 상품을 통해 상주시만의 특별한 경험과 추억을 이용객들에게 제공할 계획이다. 백귀야행은 일반 관광지 투어 형식의 관광 상품과는 달리, 한국형 좀비를 의미하는 야귀(夜鬼) 개념을 이용해 귀신 분장을 하고 공포 분위기를 자아내는 의상을 착용하는 등 독특한 콘셉트의 상품이다. 1단계(베이스캠프 집결 후, 분장과 의상으로 야귀 변신), 2단계(곳곳에 숨어있는 저승사자를 찾아 미션 수행하기), 3단계(지정 장소 찾아 인증샷 전송하기, 특별미션 수행하기), 4단계(미션수행 실적에 따른 상품 수령하기, 해피호러나이트와 포토타임) 순으로 진행된다. 지난 11일 백귀야행 첫 행사를 시행한 결과, 다양한 즐길 거리, 볼거리, 먹거리가 함께해 참가자들에게 호평을 받았으며, 색다른 광경에 시민과 상인들 또한 큰 관심을 보였다. 상주=이재수기자
	2016-17년 A리그는 오스트레일리아의 최상위 리그로, 12번째 시즌이며 40번째 시즌이다. 시즌은 2015년 10월 7일에 시작되었고, 시드니 FC가 정규리그 우승과 함께 A리그 그랜드 파이널에서 멜버른 빅토리를 꺾고 우승했다. 시드니 FC와 멜버른 빅토리가 AFC 챔피언스리그 2018 출전권을 획득했고, 브리즈번 로어는 2017년 AFC 챔피언스리그 2차 예선부터 참가할 수 있었다. 그러나 시드니 FC와 멜버른 빅토리가 2017년 5월 7일에 열린 A리그 그랜드 파이널에서 무승부로 끝난 결승전에서 시드니 FC가 우승했다. 각 클럽의 위치와 홈구장 수용 인원은 다음과 같다: 뉴캐슬 제츠(뉴캐슬 헌터 스타디움), 멜버른 빅토리(멜버른 이티하드 경기장), 멜버른 시티(멜버른 AAMI 파크), 브리즈번 로어(브리즈번 선콥 스타디움), 센트럴코스트 매리너스(센트럴코스트 매리너스 고스퍼드 블루텅 스타디움), 시드니 FC(시드니 시드니 풋볼 스타디움), 애들레이드 유나이티드(애들레이드 하인드마시 스타디움), 웨스턴 시드니 원더러스(웨스턴 시드니 원더러스 애들레이드 패러매타 스타디움), 웰링턴 피닉스(웰링턴 웨스트팩 스타디움), 퍼스 글로리(퍼스 NIB 스타디움). 각 클럽의 감독과 주장은 다음과 같다: 뉴캐슬 제츠(마크 존스), 멜버른 빅토리(케빈 머스캣), 멜버른 시티(마이클 벌캐니스), 브리즈번 로어(존 알로이시), 센트럴코스트 매리너스(폴 오콘), 시드니 FC(그레이엄 아놀드), 애들레이드 유나이티드(기예르모 아모르), 웨스턴 시드니 원더러스(토니 포포비치), 웰링턴 피닉스(디마스 델가도), 퍼스 글로리(케니 로우 로스틴).	A리그 2016-17 시즌에서 시드니 FC가 우승했나요?
	1. The Parting of the Ways 2. 2005년 3. 10대 닥터 4. The Parting of the Ways 5. 크리스토퍼 에클스턴 6. 10대 7. 2005년 8. 2부 9. 데이비드 테넌트	주어진 정보를 기반으로 질문에 답하세요. 답을 모른다면 답을 지어내지 말고 그냥 모른다고 말하세요. "The Parting of the Ways" (KBS 방영 제목: 〈이별〉)은 영국의 공상과학 텔레비전 드라마 《닥터 후》 시즌 1의 열세 번째 에피소드이자 마지막 에피소드이다. 2005년 6월 18일 영국에서 방영되었고 한국에서는 2005년 7월 17일에 방영되었다. 총 2부로 나뉘어진 줄거리의 두번째 파트로, 크리스토퍼 에클스턴가 9대 닥터로 마지막으로 출연하는 동시에 데이비드 테넌트가 10대 닥터로 처음 출연하는 에피소드이다. 또 잭 하크니스가 닥터의 정기 동행자로 활약하는 마지막 에피소드로, 나중에 시리즈 3 마지막화인 "Utopia" / "The Sound of Drums" / "Last of the Time Lords"과 시리즈 4 마지막화인 "The Stolen Earth" / "Journey's End"에서 다시 출연한다. 질문: 1. 닥터후 시즌1의 마지막 에피소드 제목은 무엇인가? 2. 닥터후의 시즌1 마지막 에피소드는 영국에서 몇년도에 방영 되었는가? 3. The Parting of the Ways에 처음 출연하는 닥터는 몇대 닥터인가? 4. 영국 드라마 닥터 후 시즌 1의 마지막 에피소드는? 5. The Parting of the Ways 에서 9대 닥터로 마지막으로 출연하는 배우는? 6. 데이비드 테넌트는 닥터 후의 몇대 닥터인가? 7. The parting of the ways가 영국에서 방영된 년도는 언제인가요? 8. the parting of the ways은 총 몇부로 나누어지나요? 9. the parting of the ways 에서 10대 닥터로 처음 출연하는 배우의 이름은 무엇인가요?
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	이에 발맞추어 대학에서는 교수자 중심의 전통적인 교수방법의 수업을 벗어나 학습자 중심의 수업모델 중 하나로 캡스톤 디자인을 제시하였다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 최근 미래사회에 대비하기 위하여 교육 분야에서의 융복합적인 접근이 확대되고 창의 융합형 인재양성이 강조되면서 대학에서도 이에 상응하는 대응안의 모색이 요구되었다. 이에 대학교육에서 주목받고 있는 것이 캡스톤 디자인(Capstone Design)이다(강경희, 2019). 캡스톤 디자인의 사전적 의미를 살펴보면 캡스톤은 돌기둥이나 담 위 등 건축물의 정점에 놓인 장식으로 최고의 업적이나 성취를 뜻하며, 캡스톤 디자인은 공학계열 학생들이 전공 분야 지식과 그 외 분야 지식을 종합하여 산업현장에서 부딪칠 수 있는 문제들을 해결할 수 있는 능력을 기르기 위해 프로젝트를 기획, 설계, 제작하는 전 과정을 경험하게 하는 교육 과정을 뜻한다(한경경제사전, 2020). 캡스톤 디자인은 현장의 수요에 적합한 인재 양성을 위한 프로그램으로 교육과정에서 배운 지식을 종합하여 실무에 바로 적응할 수 있도록 하는 교육 훈련 과정이라고 할 수 있다(이태식, 전영준, 이동욱, 장병철, 2009). 실무형, 현장 중심형 인력 양성을 위한 캡스톤 디자인은 2012년 교육과학기술부의 LINK 사업의 일환으로 진행되었다. 이에 대학에서도 현장에 적합한 인재 양성을 위한 교육과정을 운영하여 성과를 평가함과 동시에 환류체계를 거쳐 보다 유능하고 실용적인 인재양성을 추구하고 있다(이하원, 신원애, 2018).
	현 초·중·고교 재학생 중 정규 공교육이 아닌 대안학교를 다니고 싶어하는 학생들이 학교밖에서 공부할 수 있도록 하는 프로그램이 서울교육청과 구로구청의 협력을 통해 제공되는데, 개인의 소질과 인성을 고려한 대안교육을 제공하기 위함이다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 현 초·중·고교 재학생 중 대안교육을 원하는 학생들이 학교밖에서 공부할 수 있는 위탁교육기관 운영에 자치구가 힘을 보탠다. 서울교육청은 19일 오후 4시 시립구로총소년센터에서 구로구청과 전국 최초로 '마을형 대안교육 위탁교육기관' 지원을 위한 업무협약을 체결한다. 마을형 대안교육 위탁교육기관은 전국 최초로 교육청과 자치구가 협력해 공교육 내 대안교육 기회 확대를 도모하는 새로운 형태의 위탁교육기관 모델이다. 자치구는 시설과 인건비를 부담하고, 교육청은 학력인정과 프로그램 운영비, 탄력적인 대안교육과정, 학생상담을 지원한다. 이번 협약을 통해 교육청과 구로구는 시립구로청소년센터에서 운영하는 마을형 대안교육 위탁교육기관(기관명 '다다름학교')을 공동 지원하며 학교 부적응 학생들의 학업중단예방을 위해 상호 협력할 계획이다. '다다름학교'는 중학교 과정 2학급으로 운영된다. 1년 위탁과정 1학급과 4주 위탁과정 1학급으로 이루어진다. 특히 4주 위탁과정은 상담·치유 프로그램과 체험 중심의 대안교육에 집중해 위기 청소년의 치유에 도움이 될 것으로 전망하고 있다. 시교육청은 매년 대안교육 위탁교육기관을 지정해 관내 초·중·고등학교 재학생 중 대안교육과정을 희망하는 학생들에게 개인의 소질과 적성에 맞는 대안교육을 제공하고 있다. 2019학년도에는 39개 기관(공립 2기관, 민간 34기관, 타시도 3기관)을 지정·운영하고 있다. 총 1530명 정원의 학생들이 진로·직업교육, 인성교육, 공동체학습, 자격증 취득, 예술교육 등을 받고있다.
	커스틴 멀도나도(Kirstin Maldonado, 1992년 5월 16일 ~)는 미국의 가수로, 아카펠라 그룹 펜타토닉스의 유일한 여성 멤버입니다. 그녀는 1992년 5월 16일 미국 텍사스주 포트워스에서 태어났습니다. 그녀의 어머니는 스페인, 이탈리아계이며 아버지는 멕시코인입니다. 또한 오클라호마 대학교에서 뮤지컬을 공부했지만 졸업하지 못했습니다. 그녀는 마틴 고등학교에서 미치 그래시와 스콧 호잉과 함께 음악 활동을 했습니다. 2011년, 그녀와 두 명의 다른 멤버인 아비 카플랜과 케빈 올루졸라는 함께 '펜타토닉스'를 결성하였고, 싱오프 시즌 3에 참가하여 우승했습니다. 2016년 5월 29일, 가수 제레미 루이스와 약혼했습니다.	커스틴 멀도나도는 어떤 가수인가?
	해쉬스완(Hash Swan, 1995년 3월 12일 ~ )은 대한민국의 래퍼로, 일리네어 레코즈 산하의 앰비션 뮤직에 소속되어 있습니다. 고등학교 1학년 때부터 힙합 음악을 시작했고, 고등학교 2학년 때 바스코로부터 레슨을 받았습니다. 2016년 'Show Me The Money 5'에 참여하여 1대1 배틀에서 주노플로를 이겼지만, 팀 선택에서 탈락하였습니다. 그러나 2016년 10월에 앰비션 뮤직에 합류하였고, 2017년 'Show Me The Money 6'에 참여하였습니다. 해쉬스완은 음원 미션 곡인 '요즘것들'에서 활약했으며, 킬라그램과의 마이크 선택에서 탈락하였습니다. 그 결과, 미공개 곡은 올 하반기 해쉬스완의 앨범에 수록될 예정입니다. 그의 앨범으로는 'Hash X Kash'(2016년), 'Shangri-La'(2017년), 'Alexandrite'(2018년), 'Peridot'(2019년), 'Ay'(2016년), 'MA$HIMARO'(2017년), 'No Switchin` Sides'(2017년), 'What Time Is It Now?(2018년), '손바닥 위'(2018년), '스도쿠'(2019년) 등이 있습니다.	해쉬스완은 무슨 분야에서 활동하고 있나요?
	만네르헤임가는 스웨덴계 핀란드 귀족 가문으로, 독일에서 유래했습니다. 이 가문은 두 개의 파벌로 나누어져 있습니다 - 만네르헤임 남작가와 만네르헤임 백작가입니다. 만네르헤임 남작가의 당주는 핀란드 기사원 18번 의석을 소유하고 있으며, 독일인 제분업자 하인리히 마르하인을 조상으로 합니다. 마르하인과 그의 후손들은 스웨덴으로 이주하여 스웨덴 귀족으로 서임되었고, 아우구스틴 마르하인은 핀란드 기사원에 등원하면서 성을 만네르헤임으로 바꾸었습니다. 만네르헤임 백작가는 만네르헤임 남작가의 분가이며, 그 당주는 핀란드 기사원 8번 의석을 보유하고 있습니다. 만네르헤임 남작가는 18세기 중반에 핀란드로 이주하여 정착했고, 만네르헤임 백작가는 만네르헤임 남작가의 분가입니다. 만네르헤임 백작가의 당주는 백작 작위를 소유하며, 장남 이외의 아들들은 남작 작위를 계승받습니다.	만네르헤임가는 어떤 귀족 가문인가요?
	이와 같이 임신ㆍ출산ㆍ돌봄에 대한 직접적인 정책 개입은 단기간에 출산율을 높이려는 의도를 드러내고 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 사회문제로서 저출산 현상을 해결하기 위한 정책적 개입의 단기목표는 가능한 빠른 시간 안에 출산의도를 이끌어 내어 출산율 자체를 끌어올리는 것이다. 임신ㆍ출산ㆍ돌봄을 직접적으로 지원하는 정책이 추구하는 목표가 대체로 단기적 성격을 갖는다. 임신을 원하지만 심리적ㆍ의료적ㆍ사회적 요인으로 가능하지 않는 경우가 있다. 임신ㆍ출산ㆍ돌봄 관련 비용 부담이 원인일 수 있다. 사회적 돌봄시설이 부족하거나 질적 수준이 낮아서 그리고 직장 일 때문에 일ㆍ가정 양립이 가능하지 않을 것이라는 불안감도 있다. 난임처럼 의학적 원인으로 인하여 원하는 임신ㆍ출산을 할 수 없는 경우도 있다. 아이가 태어나는 과정과 현상 그 자체에 대한 개입을 통해 출산을 가능케 하는 정책적 개입이 있는 것이다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	다시 말하면 교회가 세상을 향해 문을 열고 사회에 대한 적극적 개방, 사회정의에 대한 관심과 예언자적 역할 등에 관한 관심이 점차적으로 높아지던 시기였다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 한국사회의 60년대는 정부 주도의 산업화가 전격적으로 이루어지는 시기이다. 61년 군사쿠데타 이후 박정희 정권의 국가주의와 반공주의 이데올로기를 통한 지배, 그리고 경제 성장주의의 이면에는 노동자에 대한 직접적인 노동 통제가 이루어졌다. 노동자의 대표조직인 한국노총 역시 군사정권에 의해 재편된 어용화된 조직에 불과하였으며 60년대는 강력한 국가와 부재한 시민사회라는 불균형 사회로 노동자의 계급적 정체성은 아직 형성되지 못하였다. 강화지역의 경우 도시보다 상대적으로 더 강력한 농촌사회의 유교적 특성과 보수성에 기반을 둔 한 사회로 직물 노동자의 계급 형성은 아직 맹아적 수준에 머물러 있었다. 특히 강화지역은 북한과 접경지역으로 반공의식이 높고 분단 이후 ‘강화 양민학살 사건’ 등 이데올로기 갈등과 피해의식이 타 지역보다 훨씬 높은 지역으로 이는 노동계급 형성에 있어 가장 큰 걸림돌이었다. 한편 1960년대의 한국의 가톨릭 교회는 로마 가톨릭 교회 이래 가장 생산적인 공의회로 평가받는 제2차 바티칸 공의회(1962-65)의 영향이 점차적으로 지역교회로 그 정신이 전파되어지는 과정에 있었다.
	아시야가와역은 일본 효고현 아시야시에 위치한 한큐 전철 고베 본선의 역으로, 역 번호는 HK-10입니다. 1920년 7월 16일에 개업했으며, 1957년에 새로 개축되었습니다. 그러나 1995년 한신·아와지 대지진으로 인해 재해가 발생하여 영업이 중단되었습니다. 그 후 4월 7일부터 슈쿠가와~오카모토 구간이 복구되어 정기 왕복 운행이 개시되었고, 6월 1일부터 오카모토~미카게 구간까지 복구되어 고베 선 전 노선이 개통되었습니다. 2013년 12월 21일에 역 번호가 도입되었습니다. 아시야가와역은 상대식 승강장 2면 2선의 지상역으로, 승강장은 동쪽에서 아시야 강을 넘고 있습니다. 역사는 아시야 강 서안에 위치하며, 개찰구는 역사 1층에 1개소만 있습니다. 분기기와 절대 신호가 없어 정류장으로 분류됩니다. 남쪽 고베 본선(하행) 고베(산노미야)·신카이치·산요 전철선 방향과 북쪽 고베 본선(상행) 오사카(우메다)·니시노미야키타구치·교토·다카라즈카 방향 부근은 주택지로 이용되고 있습니다. 역 주변에는 상업 시설이 부족합니다. 또한, 개찰구 앞의 남북으로 이어진 도로변에는 한큐 버스의 한큐 아시야 가와 정류소가 설치되어 있습니다. 아시야 강 한큐 택시 승강장, 빠세오 아시야 로손 아시야가와 역점, 아시야니시야마 우체국, 데키스이 미술관, 다와라 미술관 옛 야마무라가 주택(요도코 영빈관), 롯코 산 등산로 입구 등이 있습니다.	아시야가와역은 어디에 위치한 역인가요?
	아동권리협약 제12조에서는 아동이 본인과 관련된 문제에 있어서 자신의 의사를 자유롭게 표현, 아동의 연령과 성숙도에 따라 정당한 비중이 부여되어야하는 것(자기결정·자립 의사표현권 협약12조), 13조(표현·정보의 자유), 14조(사상·양심·종교의 자유), 15조(결사·집회의 자유)에서는 아동이 한 시민으로서 사회에 발언하고, 참여하는 것을 추구하고 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 한국사회 내 아동은 보호의 대상, 부모의 소유물, 훈계의 대상으로 인식되어 왔다. 하지만 아동권리협약에서 아동관은 아동을 권리의 주체, 권리행사의 주체(아동권리협약 제5조)로 하고 있다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	이에 따라, 근래에는 이동하는 복수의 항체 사이의 정확한 상대 위치를 도출하기 위한 다양한 연구가 지속적으로 이루어지고 있는 추세이다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 항체(Vehicle) 간 충돌은 재산 손실뿐만 아니라 인명에 치명적인 영향을 미침으로써, 항체 간의 충돌을 감지 및 방지는 안전을 중시하는 미래 교통 분야의 핵심 기술이다. 이에 따라, 차량의 V2V(Vehicle to Vehicle), 선박의 AIS(Automatic Identification System), 항공기의 ADS-B(Automatic Dependent Surveillance - Broadcast) 등과 같은 미래 육/해/공 각 교통 분야에서 충돌 방지에 활용되는 측위 기술들이 제시된다. 이러한 충돌방지에 활용되는 측위 기술들은 일반적으로 위성항법 시스템(GNSS, Global Navigation Satellite System)으로부터 각기 취득한 PVT(Position, Navigation, Time) 정보를 인근 항체에 제공하고, 수신한 인근 항체 위치와의 차분을 통해 상대 위치를 획득한다. 여기서, 일반적인 위성항법의 정확도를 향상시키기 위해 사용되는 DGNSS(Differential GNSS), RTK(Real Time Kinematics) 등의 위성항법 보정시스템은 사전에 정확한 위치를 구한 정지 기준국의 위치를 기준으로 사용자의 상대 위치를 도출한다. 최근에는 이동하는 두 항체 간의 상대 위치를 결정하기 위해, 두 항체 중 1기를 정지된 기준국이 아닌 이동하는 기준국으로 설정하고 다른 1기의 항체에 이동기준국의 위치를 실시간으로 적용하여 상대 위치를 구하는 이동 기준국 방식의 알고리즘이 제시되고 있다. 그런데, 이러한 방식의 경우 이동 기준국의 위치를 실시간 고속으로 전송해야 하므로 이동 기준국의 빠른 이동 속도, 비선형 고기동, 낮은 출력 등의 이유로 인해, 이동 기준국과 사용자 사이의 위치 결정 정확도가 저하된다.
	자유우파 파워 유튜버가 오는 27일 서울 마포구 상암동 제일라 아트홀에 모여 ‘文정권 3년차, 국가 대위기 진단과 대안’이라는 제하의 ‘12시간 생중계 자유유튜버 릴레이 토크 페스티벌’을 진행해 ‘표현의 자유’를 보장받고 품격을 지키는 건전한 미래 지향적 유트브 방송문화 정착을 기대한다고 밝혔다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 윤정 ‘위기의 文정권 3년차’ 주제 9개 대담·명사 50여명 참가 ABC 주최·한국당 등 후원 자유우파 파워 유튜버가 오는 27일 대거 한곳에 모여 ‘文정권 3년차, 국가 대위기 진단과 대안’이라는 제하의 ‘12시간 생중계 자유유튜버 릴레이 토크 페스티벌’을 진행한다. 서울 마포구 상암동 제일라 아트홀에서 열리는 이 행사는 50여 명의 유튜버와 명사 그리고 12시간 동안 릴레이 토크쇼라는 점에서 최초·최대·최장시간이라는 기록을 남기게 된다. 자유유튜버로 국내 최고의 구독자수를 가진 ‘신의 한 수’(74만명)의 신혜식 대표를 비롯해 유튜버 채널을 운영하는 이언주·김문수·황태순·안형환·청아대 등이 참여한다. 이 행사는 초당적 보수자정운동을 벌이는 ‘보수의 새길 ABC(Able·Brave·Clean)’가 주최하고 자유유튜버 채널 및 자유유튜버네트워크포럼·행동하는 자유시민·한국유튜버협회·플랫폼 자유와 공화 등이 공동주관을 하며 자유한국당 정책위원회가 후원을 한다. 행사 슬로건으로 ‘자유유튜버가 대한민국을 지킨다’, ‘자유전심, 천만대군으로 가자’로 정하고 최초·최대·최장시간 자유유튜버가 벌이는 토크 페스티벌을 기념해 이날을 자유유튜버의 날로 정하기로 했다. 또한 ‘진실을 말하고 품격을 지킨다’는 취지의 자유유튜버 결의문을 채택할 예정이다. 이 행사는 오전 10시부터 특별대담·명사대담·사법대담·청년대담 등 9개 대담코너와 1인방송, 유튜버 강연 등으로 오후 10시까지 12시간 동안 계속 진행되며 ‘신의 한 수’ 등의 유튜버 방송을 통해 생중계된다. ‘보수의 새길 ABC’ 이주영 상임공동대표(국회 부의장)는 “좌파 편향적인 언론환경 속에서도 자유유튜버가 용기있는 행동으로 진실을 알리는데 많은 노력을 하고 있어 다행”이라며 “자유대한민국을 지키는 유튜버의 역할이 커지고 이러한 자유민심이 일파만파로 널리 퍼져 나아가길 기대한다”고 말했다. 자유유튜버네트워크포럼 강요식 사무총장(한국당 구로을당협위원장)은 “기울어진 공중파 방송의 대안으로 유튜브 방송이 진실성과 중립성을 표방하는 중요한 매체로 자리매김을 하고 있다”고 강조했다. 그러면서 “자유유튜버가 어떤 탄압에서도 ‘표현의 자유’를 보장받고 진실을 말하고 품격을 지키는 건전한 미래 지향적 유트브 방송문화 정착을 위해 이번 행사를 마련했다”고 밝혔다. 윤정기자 [email protected]
	제목: 전남도립대, 국제 이·미용 기능대회서 대상 ‘싹쓸이’ 전남도립대는 뷰티아트과 학생 20명이 최근 광주 김대중컨벤션센터에서 열린 제 5회 BIS컵 국제 이·미용기능경기대회에서 각 분야별 종목에 참가해 대상을 수상하는 등 참가자 전원이 수상을 하는 결과를 얻었다고 11일 밝혔다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 김우관 기자 전남도립대, 국제 이·미용 기능대회서 대상 ‘싹쓸이’ 뷰티아트과 학생 20명 참가 …전원 입상 쾌거 전남도립대 학생 20명이 참가한 국제 이. 미용기능경기대회에서 대상 등을 휩쓸었다. 전남도립대학교(총장 김대중)는 최근 광주 김대중컨벤션센터에서 열린 제5회 BIS컵 국제이·미용기능경기대회에서 헤어, 피부, 네일 등 각 분야별 종목 부문에 뷰티아트과 20명이 참가해 대상 수상 등 전원이 입상하는 쾌거를 이뤘다고 11일 밝혔다. 이번 기능경기대회에서 도립대 뷰티아트과 정유나(1년), 정유빈(1년) 학생이 헤어커트 부문 대상을, 퍼머넌트웨이브 부문에서 김동희(1년) 학생이 대상을 수상했다. 또한 피부미용 안면관리 부문에서 김수정(2년) 학생이 대상, 김민경(2년) 학생 외 4명이 금상, 오유라(1년) 학생 등 4명이 은상, 이희경(1년) 학생 등 5명이 동상을 수상하는 등 각 분야에서 재학생 참가 선수 전원이 입상했다. 서명희 도립대 뷰티아트과 학과장은 “이번 국제 이·미용기능경기대회를 위해 4월부터 각 분야별로 담당 교수를 배정하고 학생별 밀착 지도를 진행했다”며 “미용의 기초 분야를 산업현장에서 적용하도록 맞춤별 학습을 실시했다”고 말했다. 김대중 총장은 “뷰티 관련 산업 성장성이 두드러지는 만큼 실무 인재 양성에 최선을 다하고, 일자리 창출에도 주력하겠다”고 말했다. /김우관 기자 [email protected] 김우관 기자 [email protected]
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	양영애 등은 노인들에게 있어서 휴대전화란 단지 전화통화 기능뿐 아니라 위급한 상황에서의 안전 수단, 외로움 감소 등 다른 사람과의 관계 유지나 사회적 상호작용으로의 역할이 중요하다고 보고 작업 치료적 관점에서 노인을 대상으로 한 휴대전화 사용 속도에 미치는 요인들을 분석하였다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 2010년 국내 이동 통신 가입자 수는 5000만 명을 돌파했으며 이는 우리나라 인구 대비 100%를 초과한 수치이다. 즉 국민 1인당 휴대폰을 하나 이상 가지고 있다는 것이며 일상생활에 있어서 휴대폰은 가장 중요한 대표적 IT 제품으로 자리 잡았다. 이처럼 휴대폰이 널리 보급됨에 따라 최근 들어 휴대폰을 보다 쉽게 사용하도록 하기 위해 사용자 인간요소 설계, 제품의 사용자 인터페이스 설계에 관한 연구가 활발하게 이루어지고 있다. 김정룡 등은 휴대전화의 주요 사용자 군으로 부상한 중년층을 포함한 고령자들의 제품 만족도를 높이기 위해서는 연령별 심리적, 기능적 특징을 이해하는 것이 중요하다고 보고 사용 연령층을 나이별로 분류하고 이에 대한 연령대별 휴대전화의 사용 특성을 조사 연구하였다.
	1. 1997년 11월 26일 2. 814억원 3. 조중훈 명예 회장 4. '아일랜드 더블린' 5. 아일랜드 더블린 6. 814억원	주어진 정보를 기반으로 질문에 답하세요. 답을 모른다면 답을 지어내지 말고 그냥 모른다고 말하세요. 1991년 부터 1998년까지 외국 기업 두 곳의 항공기를 구매할때 특정 회사의 엔진을 장착하는 조건으로 리베이트를 받았다. 이 중 일부인 1천685억원을 국내로 들여와 조중훈 명예 회장과 조양호 회장 등이 개인적으로 사용했다. 지난 1997년 11월 26일 600만달러의 리베이트를 국내로 반입하고 1998년 7월 29일에 이 중 18만달러 (2억 5천만원)를 개인 목적으로 사용하기 위해 3개를 당좌수표로 분산하여 현금화한것으로 밝혀졌다. 또, 조중훈 일가는 이때 받은 리베이트를 조세 회피 지역인 '아일랜드 더블린' 지역에 100만달러를 출자해 설립한 현지 법인 KA사에 이전하여 1억 8천 400만 달러가 해외로 유출됐고, 이로 인해 814억원을 탈세한 혐의가 밝혀졌다. 질문: 1. 조양호 회장이 600만달러의 리베이트를 국내로 반입한 것은 언제인가? 2. 조중훈 일가가 해외로 탈세한 금액은? 3. 조양호 회장과 더불어 불법 리베이트를 받은 인물은 ? 4. 조중훈 일가가 받은 리베이트를 회피한 지역은? 5. 조중훈 일가가 100만 달러를 출자해 설립한 KA사가 있는 조세 회피 지역은? 6. 조중훈 일가가 아일랜드 더블린 현지 법인KA사를 통해 탈세한 금액은?
	항종양 효과와 안전성면이 우수한 항종양약으로서, 다음 식으로 나타내는 항종양성 화합물과 항체를, 다음 식 ： -L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 로 나타내는 구조의 링커를 개재하여 결합시킨 것을 특징으로 하는 항체-약물 콘주게이트 (항체는 L1 의 말단에 있어서 결합하고, 항종양성 화합물은 1 위치의 아미노기의 질소 원자를 결합 부위로서, Lc 의 말단에 있어서 결합한다) 를 제공한다.	주어진 문장을 읽고 간략하게 요약해주세요. 문장: [ 발명의 명칭 ] 항체-약물 콘주게이트ANTIBODY-DRUG CONJUGATE [ 기술분야 ] 본 발명은, 종양 세포를 표적으로 할 수 있는 항체와 항종양성 약물을 링커 구조 부분을 개재하여 결합시킨, 항종양약으로서 유용한 항체-약물 콘주게이트에 관한 것이다. [ 배경기술 ] 암 세포 표면에 발현하고, 또한 세포에 내재화할 수 있는 항원에 결합하는 항체에, 세포 독성이 있는 약물을 결합시킨 항체-약물 콘주게이트 (Antibody-Drug Conjugate ； ADC) 는, 암 세포에 선택적으로 약물을 송달할 수 있는 것에 의해, 암 세포 내에 약물을 축적시켜, 암 세포를 사멸시키는 것을 기대할 수 있다 (비특허문헌 1 ∼ 3 참조). ADC 로서 예를 들어, 항 CD33 항체에 칼리치아마이신을 결합시킨 Mylotarg (겜투주마브오조가마이신) 는 급성 골수성 백혈병의 치료약으로서 인가되어 있다. 또, 항 CD30 항체에 오리스타틴 E 를 결합시킨 Adcetris (브렌툭시마브베도틴) 는 호지킨 림프종과 미분화 대세포 림프종의 치료약으로서 최근 인가되었다 (비특허문헌 4 참조). 지금까지 인가된 ADC 에 함유되는 약물은 DNA, 또는 튜불린을 표적으로 하고 있다.항종양성의 저분자 화합물로서 토포이소머라아제 I 을 저해하여 항종양 작용을 발현하는 화합물인 캄프토테신 유도체가 알려져 있다. 그 중에서 하기 식[화학식 1]으로 나타내는 항종양성 화합물 (엑사테칸, 화학명 ： (1S,9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-2,3-디하이드로-9-하이드록시-4-메틸-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4' : 6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(9H,15H)-디온) 은 수용성의 캄프토테신 유도체이다 (특허문헌 1, 2). 현재 임상에서 사용되고 있는 이리노테칸과는 상이하고, 효소에 의한 활성화가 불필요하다. 또, 이리노테칸의 약효 본체인 SN-38 이나, 동 임상에서 사용되고 있는 토포테칸보다 토포이소머라아제 I 저해 활성이 강하고, in vitro 에서 여러 가지의 암 세포에 대해, 보다 강한 살세포 활성을 가지고 있다. 특히 P-glycoprotein 의 발현에 의해 SN-38 등에 내성을 나타내는 암 세포에 대해서도 효과를 나타냈다. 또, 마우스의 인간 종양 피하 이식 모델에서도 강한 항종양 효과를 나타내어, 임상 시험이 실시되었지만 출시에는 이르지 않았다 (비특허문헌 5 ∼ 10 참조). 엑사테칸이 ADC 로서 유효하게 작용하는지에 대해서는 분명하지 않았다.DE-310 은 생분해성의 카르복시메틸덱스트란폴리알코올폴리머에 엑사테칸을 GGFG 펩티드 스페이서를 개재하여 결합시킨 복합체이다 (특허문헌 3). 엑사테칸을 고분자 프로드러그화함으로써, 높은 혈중 체류성을 유지시키고, 또한 종양 신생 혈관의 투과성의 항진과 종양 조직 체류성을 이용하여, 수동적으로 종양 부위에 대한 지향성을 높인 것이다. DE-310 은, 효소에 의한 펩티드 스페이서의 절단에 의해, 활성 본체인 엑사테칸, 및 글리신이 아미노기에 결합하고 있는 엑사테칸이 지속적으로 유리된다. 그 결과, 약물 동태가 개선되어, 비임상 시험에 있어서의 여러 가지의 종양의 평가 모델에 있어서, DE-310 은 엑사테칸의 투여량이 엑사테칸 단제의 투여 시보다 감소하고 있는데도 불구하고, 엑사테칸 단제의 투여 시보다 더 높은 유효성을 나타냈다. DE-310 에 관해서는 임상 시험이 실시되어, 인간에게 있어서 유효예가 확인되고, 활성 본체가 정상 조직보다 종양에 집적하는 것이 확인되었다는 보고가 있는 한편, 인간에게 있어서의 종양에의 DE-310 및 활성 본체의 집적은 정상 조직에의 집적과 큰 차이 없고, 인간에서는 수동적인 타게팅은 보이지 않았다는 보고도 있다 (비특허문헌 11 ∼ 14 참조). 결과적으로 DE-310 도 출시에는 이르지 않고, 엑사테칸이 이와 같은 타게팅을 지향한 약물로서 유효하게 기능하는지에 대해서는 분명하지 않았다.DE-310 의 관련 화합물로서, -NH(CH2)4C(=O)- 로 나타내는 구조 부분을 -GGFG- 스페이서와 엑사테칸의 사이에 삽입하고, -GGFG-NH(CH2)4C(=O)- 를 스페이서 구조로 하는 복합체도 알려져 있지만 (특허문헌 4), 동 복합체의 항종양 효과에 대해서는 전혀 알려지지 않았다. [ 선행기술문헌 ] [ 특허문헌 ] 일본 공개특허공보 평5-59061호 일본 공개특허공보 평8-337584호 국제 공개 WO1997/46260 팜플렛 국제 공개 WO2000/25825 팜플렛 [ 비특허문헌 ] Ducry, L., et al. Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5-13. ; Antibody-Drug Conjugates : Linking cytotoxic payloads to monoclonal antibodies. Alley, S. C., et al. Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529-537. ; Antibody-drug conjugates : targeted drug delivery for cancer. Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445-1452. ; Tumour-targeted chemotherapy with immunoconjugates of calicheamicin. Senter P. D., et al. Nature Biotechnology (2012) 30, 631-637. ; The discovery and development of brentuximab vedotin for use in relapsed Hodgkin lymphoma and systemic anaplastic large cell lymphoma. Kumazawa, E., Tohgo, A., Exp. Opin. Invest. Drugs (1998) 7,625-632. ; Antitumour activity of DX-8951f : a new camptothecin derivative. Mitsui, I., Kumazawa, E., Hirota, Y., et al. Jpn J. Cancer Res. (1995) 86, 776-782. ; A new water-soluble camptothecin derivative, DX-8951f, exhibits potent antitumor activity against human tumors in vitro and in vivo. Takiguchi, S., Tohgo, A., et al. Jpn J. Cancer Res. (1997) 88, 760-769. ; Antitumor effect of DX-8951, a novel camptothecin analog, on human pancreatic tumor cells and their CPT-11-resistant variants cultured in vitro and xenografted into nude mice. Joto, N. et al. Int J Cancer (1997) 72, 680-686. ; DX-8951f, a water-soluble camptothecin analog, exhibits potent antitumor activity against a human lung cancer cell line and its SN-38-resistant variant. Kumazawa, E. et al. Cancer Chemother. Pharmacol. (1998) 42, 210-220. ; Potent and broad antitumor effects of DX-8951f, a water-soluble camptothecin derivative, against various human tumors xenografted in nude mice. De Jager, R.,et al. Ann N Y Acad Sci (2000) 922, 260-273. ; DX-8951f : summary of phase I clinical trials. Inoue, K. et al. Polymer Drugs in the Clinical Stage, Edited by Maeda et al. (2003), 145-153. ; CM-dextran-polyalcohol-camptothecin conjugate, DE-310 with a novel carrier system and its preclinical data. Kumazawa, E. et al. Cancer Sci (2004) 95, 168-175. ; DE-310, a novel macro㏖ecular carrier system for the camptothecin analog DX-8951f : Potent antitumor activities in various murine tumor models. Soepenberg, O. et al. Clinical Cancer Research, (2005) 11, 703-711. ; Phase I and pharmacokinetic study of DE-310 in Patients with Advanced Solid Tumors. Wente M. N. et al. Investigational New Drugs (2005) 23, 339-347. ; DE-310, a macro㏖ecular prodrug of the topoisomerase-I-inhibitor exatecan (DX-8951), in patients with operable solid tumors. [ 발명의 개요 ] [ 해결하려는 과제 ] 항체에 의한 종양의 치료에 있어서는, 항체가 항원을 인식하여 종양 세포에 결합해도 항종양 효과가 충분하지 않은 경우가 관찰되는 경우도 있어, 보다 효과가 높은 항종양 항체가 필요하게 되는 경우가 있다. 또, 항종양성의 저분자 화합물에 있어서는, 항종양 효과가 우수해도 부작용이나 독성면 등, 안전성 상의 문제를 갖는 것이 많아, 저분자 항종양 화합물에 대해서는, 안전성을 보다 높여 보다 우수한 치료 효과를 획득하는 것도 과제이다. 즉, 본 발명은 항종양 효과와 안전성면이 우수하고, 우수한 치료 효과를 갖는 항종양약을 획득하여 제공하는 것이 과제이다. [ 과제의 해결 수단 ] 본 발명자들은 항종양성 화합물인 엑사테칸을, 링커 구조 부분을 개재하여, 종양 세포를 표적으로 할 수 있는 항체, 즉, 종양 세포를 인식할 수 있는 특성, 종양 세포에 결합할 수 있는 특성, 종양 세포에 내재화할 수 있는 특성, 혹은 종양 세포에 세포 장해성을 갖는 특성 중 어느 하나 또는 그 이상의 특성을 구비한 항체에 결합시킨 화합물인 항체-약물 콘주게이트로 변환함으로써, 종양 세포에 세포 장해성을 갖는 항체이면 그 세포 장해성의 증강을 달성할 수 있는 것, 또한 항종양성 화합물을 종양 세포에 의해 확실하게 이동시켜 당해 화합물의 항종양 효과를 종양 세포에서 특이적으로 발휘시킬 수 있는 것, 따라서 항종양 효과의 확실한 발휘와 함께 항종양성 화합물의 투여량을 당해 화합물의 단체 투여 시보다 감소시킬 수 있으므로 보다 높은 안전성을 달성할 수 있는 것이 가능하다고 생각했다.이 때문에 본 발명자들은 특정 구조의 링커를 창출하고, 이 링커를 개재하여 항체와 엑사테칸을 결합시킨 항체-약물 콘주게이트를 획득하는 것에 성공하고, 그리고 이 화합물이 우수한 항종양 효과를 발휘하는 것을 알아내어 본 발명을 완성시킨 것이다.즉 본원 발명은,[1] 다음 식[화학식 2]으로 나타내는 항종양성 화합물과 항체를 다음 식 ： -L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-로 나타내는 구조의 링커를 개재하여 결합시킨 것을 특징으로 하는 항체-약물 콘주게이트에 관한 것이다.여기서, 항체는 L1 의 말단에 있어서 결합하고, 항종양성 화합물은 1 위치의 아미노기의 질소 원자를 결합 부위로서, Lc 의 말단에 있어서 결합하고, 식 중,n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내고,L1 은 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)-, -CH2-C(=O)-NH-(CH2)n3-C(=O)-, -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)-, 또는 -C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 를 나타내고, 여기서, n2 는 2 내지 8 의 정수를 나타내고, n3 은 1 내지 8 의 정수를 나타내고, n4 는 1 내지 8 의 정수를 나타내고, L2 는 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)-, -S-(CH2)n6-C(=O)-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n5 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, n6 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, LP 는 2 내지 7 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기를 나타내고,La 는 -C(=O)-NH-, -NR1-(CH2)n7-, -O-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n7 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, R1 은 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)n8-COOH, 또는 -(CH2)n9-OH 를 나타내지만, n8 은 정수의 1 내지 4 를 나타내고, n9 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, Lb 는 -CR2(-R3)-, -O-, -NR4-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, R2 및 R3 은, 각각 독립적으로, 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)na-NH2, -(CH2)nb-COOH, 또는 -(CH2)nc-OH 를 나타내고, R4 는 수소 원자 또는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기를 나타내고, na 는 0 내지 6 의 정수를 나타내고, nb 는 정수의 1 내지 4 를 나타내고, nc 는 정수의 1 내지 4 를 나타내지만, na 가 0 일 때는, R2 및 R3 은 동일하게는 되지 않고, Lc 는 -CH2- 또는 -C(=O)- 를 나타내고,-(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 3]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,-(N-ly-3-diminiccuS)- 는 다음 식 ： [화학식 4]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 L2 와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이 구조를 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고, cyc.Hex(1,4) 는 1,4-시클로헥실렌기를 나타내고,L2 가 -S-(CH2)n6-C(=O)- 일 때, L1 은 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 가 된다.또한 본원 발명은 이하의 각각에 관한 것이기도 하다.[2] Lc 가 -C(=O)- 인 [1] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[3] 항체와 L1 의 결합이항체의 힌지부에 존재하는 디술파이드 결합 부분에 있어서 형성시킨 티오에테르 결합, 항체의 힌지부에 존재하는 디술파이드 결합 부분에 있어서 형성시킨 디술파이드 결합, 또는 항체를 구성하는 아미노산의 측사슬 상에 존재하는 아미노기 또는 말단의 아미노기에 있어서 형성시킨 아미드 결합 인 [1] 또는 [2] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[4] LP 의 펩티드 잔기가 페닐알라닌, 글리신, 발린, 리신, 시트룰린, 세린, 글루탐산, 아스파르트산에서 선택되는 아미노산으로 이루어지는 아미노산 잔기인 [1] 내지 [3] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[5] LP 가 4 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기인 [1] 내지 [3] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[6] LP 가 -GGFG- 인 [1] 내지 [3] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[7] 다음 식[화학식 5]으로 나타내는 항종양성 화합물과 항체를 다음 식 ： -L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-으로 나타내는 구조의 링커를 개재하여 결합시킨 것을 특징으로 하는 항체-약물 콘주게이트.여기서, 항체는 L1 의 말단에 있어서 결합하고, 항종양성 화합물은 1 위치의 아미노기의 질소 원자를 결합 부위로서, Lc 의 말단에 있어서 결합하고, 식 중,n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내고,L1 은 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)-, -CH2-C(=O)-NH-(CH2)n3-C(=O)-, -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)-, 또는 -C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 를 나타내고, 여기서, n2 는 2 내지 8 의 정수를 나타내고, n3 은 1 내지 8 의 정수를 나타내고, n4 는 1 내지 8 의 정수를 나타내고, L2 는 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)-, -S-(CH2)n6-C(=O)-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n5 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, n6 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, LP 는 GGFG 의 테트라펩티드 잔기를 나타내고,La 는 -O- 또는 단결합을 나타내고,Lb 는 -CR2(-R3)- 또는 단결합을 나타내고, 여기서, R2 및 R3 은 수소 원자를 나타내고,Lc 는 -C(=O)- 를 나타내고,-(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 6]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,-(N-ly-3-diminiccuS)- 는 다음 식 ： [화학식 7]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 L2 와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이 구조를 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고, cyc.Hex(1,4) 는 1,4-시클로헥실렌기를 나타내고,L2 가 -S-(CH2)n6-C(=O)- 일 때, L1 은 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 가 된다.[8] L1 이 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)- 또는 -CH2-C(=O)-NH-(CH2)n3-C(=O)- 인 [1] 내지 [7] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[9] L1 이 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)- 인 [1] 내지 [7] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[10] L1 이 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 또는 -C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 인 [1] 내지 [7] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[11] n2 가 2 내지 5 의 정수로서, L2 가 단결합인 [1] 내지 [9] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[12] n2 가 2 내지 5 의 정수로서, L2 가 -NH-(CH2CH2O)n5-CH2-CH2-C(=O)- 이며, n5 가 2 또는 4 인 [1] 내지 [9] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[13] -NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 가 4 내지 7 원자의 사슬 길이를 갖는 부분 구조인 [1] 내지 [12] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[14] -NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 가 5 또는 6 원자의 사슬 길이를 갖는 부분 구조인 [1] 내지 [12] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[15] -NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-가-NH-(CH2)3-C(=O)-,-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-, 또는-NH-(CH2)2-O-CH2-C(=O)-인 [1] 내지 [14] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[16] 약물-링커 구조 부분이 다음의 약물-링커 구조의 군에서 선택되는 1 종의 약물-링커 구조인 [1] 내지 [15] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트 ： 여기서, -(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 8]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,-(N-ly-3-diminiccuS)- 는 다음 식 ： [화학식 9]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 L2 와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이 구조를 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고, cyc.Hex(1,4) 는 1,4-시클로헥실렌기를 나타내고,-(NH-DX) 는 다음 식 ： [화학식 10]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타내고, -GGFG- 는 -Gly-Gly-Phe-Gly- 의 펩티드 잔기를 나타낸다.[17] -L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 에 약물을 결합시킨 약물-링커 구조 부분이 다음의 군에서 선택되는 1 종의 약물-링커 구조인 [1] 내지 [9] 및 [11] 내지 [14] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트 ： 여기서, -(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 11]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,-(NH-DX) 는 다음 식 ： [화학식 12]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다.[18] 다음 식[화학식 13]으로 나타내는 항종양성 화합물과 항체를 다음 식 ： -L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-으로 나타내는 구조의 링커를 개재하여 결합시킨 것을 특징으로 하는 항체-약물 콘주게이트.여기서, 항체는 L1 의 말단에 있어서 결합하고, 항종양성 화합물은 Lc 의 말단에 있어서 결합하고, 식 중,n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내고,L1 은 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)- 를 나타내고, 항체의 힌지부에 존재하는 디술파이드 결합 부분에 있어서 형성시킨 티오에테르 결합을 개재하여 항체에 결합하지만, 여기서, n2 는 2 내지 8 의 정수를 나타내고,L2 는 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)- 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n5 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고,LP 는 GGFG 의 테트라펩티드 잔기를 나타내고,La 는 -O- 또는 단결합을 나타내고,Lb 는 -CR2(-R3)- 또는 단결합을 나타내고, 여기서, R2 및 R3 은 수소 원자를 나타내고,Lc 는 -C(=O)- 를 나타내고,-(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 14]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합한다.[19] n2 가 2 이며, L2 가 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)- 로서, n5 가 2 이며, n1 이 3 이며, La 및 Lb 가 모두 단결합이거나, n2 가 5 이며, L2 가 단결합이며, n1 이 1 이며, La 가 -O- 이고, Lb 가 -CR2(-R3)- 이거나, 또는 n2 가 5 이며, L2 가 단결합이며, n1 이 2 이며, La 가 -O- 이며, Lb 가 -CR2(-R3)- 인 [18] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[20] n2 가 2 내지 5 의 정수로서, L2 가 단결합인 [18] 또는 [19] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[21] n2 가 2 내지 5 의 정수로서, L2 가 -NH-(CH2CH2O)n5-CH2-CH2-C(=O)- 이며, n5 가 2 또는 4 인 [18] 또는 [19] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[22] -NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 가-NH-(CH2)3-C(=O)-,-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-, 또는-NH-(CH2)2-O-CH2-C(=O)-인 [18] 내지 [21] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[23] 약물-링커 구조 부분이 다음의 약물-링커 구조의 군에서 선택되는 1 종의 약물-링커 구조인 [18] 내지 [22] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트 ： 여기서, -(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 15]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,-(NH-DX) 는 다음 식 ： [화학식 16]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다.[24] -L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 에 약물을 결합시킨 약물-링커 구조 부분이 다음의 군에서 선택되는 1 종의 약물-링커 구조인 [23] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트 ： 여기서, -(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 17]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,-(NH-DX) 는 다음 식 ： [화학식 18]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기를 나타낸다.[25] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 1 내지 10 개의 범위인 [1] 내지 [24] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[26] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 2 내지 8 개의 범위인 [1] 내지 [24] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[27] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 3 내지 8 개의 범위인 [1] 내지 [24] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[28] 항체가 표적 세포를 인식할 수 있는 특성, 표적 세포에 결합할 수 있는 특성, 표적 세포에 내재화할 수 있는 특성, 표적 세포를 상해하는 특성 중 1 또는 그 이상의 특성을 구비한 항체인 [1] 내지 [27] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[29] 항체-약물 콘주게이트가 표적으로 하는 세포가 종양 세포인 [1] 내지 [27] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[30] 항체가 항 A33 항체, 항 B7-H3 항체, 항 CanAg 항체, 항 CD20 항체, 항 CD22 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 항 CD56 항체, 항 CD70 항체, 항 CEA 항체, 항 Cripto 항체, 항 EphA2 항체, 항 G250 항체, 항 MUC1 항체, 항 GPNMB 항체, 항 Integrin 항체, 항체 PSMA 항체, 항 Tenascin-C 항체, 항 SLC44A4 항체, 또는 항 Mesothelin 항체인 [1] 내지 [27] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[31] 항체가 항 B7-H3 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 또는 항 CD70 항체인 [1] 내지 [27] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[32] 항체가 항 B7-H3 항체인 [1] 내지 [27] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[33] [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 함유하는 의약.[34] [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 함유하는 항종양약 및/또는 항암약.[35] 폐암, 신암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 다형 신경 교아종, 난소암, 췌암, 유방암, 멜라노마, 간암, 방광암, 위암, 또는 식도암에 적용하기 위한 [34] 에 기재된 항종양약 및/또는 항암약.[36] [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 활성 성분으로 하고, 약학적으로 허용되는 제제 성분을 함유하는 의약 조성물.[37] 폐암, 신암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 다형 신경 교아종, 난소암, 췌암, 유방암, 멜라노마, 간암, 방광암, 위암, 또는 식도암에 적용하기 위한 [36] 에 기재된 의약 조성물.[38] [1] 내지 [32] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트, 그 염, 또는 그들의 수화물을 투여하는 것을 특징으로 하는 종양 및/또는 암의 치료 방법.[39] 다음 식으로 나타내는 약물-링커 중간체 화합물 ： Q-(CH2)nQ-C(=O)-L2a-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-(NH-DX)식 중, Q 는 (maleimid-N-yl)-, HS-, X-CH2-C(=O)-NH-, 또는 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)- 를 나타내고, X 는 브롬 원자 또는 요오드 원자를 나타내고, nQ 는 정수의 2 내지 8 을 나타내고, L2a 는 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n5 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고,LP 는 페닐알라닌, 글리신, 발린, 리신, 시트룰린, 세린, 글루탐산, 아스파르트산에서 선택되는 2 내지 7 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기를 나타내고, n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내고,La 는 -C(=O)-NH-, -NR1-(CH2)n7-, -O-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n7 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, R1 은 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)n8-COOH, 또는 -(CH2)n9-OH 를 나타내지만, n8 은 정수의 1 내지 4 를 나타내고, n9 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, Lb 는 -CR2(-R3)-, -O-, -NR4-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, R2 및 R3 은, 각각 독립적으로, 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)na-NH2, -(CH2)nb-COOH, 또는 -(CH2)nc-OH 를 나타내고, R4 는 수소 원자 또는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기를 나타내고, na 는 0 내지 6 의 정수를 나타내고, nb 는 정수의 1 내지 4 를 나타내고, nc 는 정수의 1 내지 4 를 나타내지만, na 가 0 일 때는, R2 및 R3 은 동일하게는 되지 않고, Lc 는 -CH2- 또는 -C(=O)- 를 나타내고, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 19]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며, (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl) 은 다음 식[화학식 20]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,-(NH-DX) 는 다음 식[화학식 21]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[40] Lc 가 -C(=O)-인 [39] 에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[41] LP 가 4 개의 아미노산으로 구성된 펩티드 잔기인 [39] 또는 [40] 에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[42] LP 가 -GGFG- 인 [39] 내지 [41] 중 어느 한 항에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[43] -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가-NH-CH2CH2-,-NH-CH2CH2CH2-,-NH-CH2CH2CH2CH2-,-NH-CH2CH2CH2CH2CH2-,-NH-CH2-O-CH2-, 또는-NH-CH2CH2-O-CH2- 인 [39] 내지 [42] 중 어느 한 항에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[44] -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가-NH-CH2CH2CH2-,-NH-CH2-O-CH2-, 또는-NH-(CH2)2-O-CH2- 인 [39] 내지 [42] 중 어느 한 항에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[45] nQ 가 정수의 2 내지 6 인 [39] 내지 [44] 중 어느 한 항에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[46] Q 가 (maleimid-N-yl)- 이며, nQ 가 정수의 2 내지 5 이며, L2a 가 단결합인 [43] 에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[47] Q 가 (maleimid-N-yl)- 이며, nQ 가 정수의 2 내지 5 이며, L2a 가 단결합인 [44] 에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[48] Q 가 (maleimid-N-yl)- 이며, nQ 가 정수의 2 내지 5 이며, L2a 가 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)- 이며, n5 가 정수의 2 내지 4 이며,-NH-(CH2)n1-La-Lb- 가-NH-CH2CH2-,-NH-CH2CH2CH2-,-NH-CH2CH2CH2CH2-,-NH-CH2CH2CH2CH2CH2-,-NH-CH2-O-CH2-, 또는-NH-CH2CH2-O-CH2- 인 [39] 내지 [42] 중 어느 한 항에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[49] n5 가 정수의 2 또는 4 이며,-NH-(CH2)n1-La-Lb- 가-NH-CH2CH2CH2-,-NH-CH2-O-CH2-, 또는-NH-CH2CH2-O-CH2- 인 [48] 에 기재된 약물-링커 중간체 화합물.[50] 다음의 화합물 ： 여기서, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 22]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며, X 는 할로겐 원자를 나타내고,(Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 23]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,-(NH-DX) 는 다음 식[화학식 24]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[51] 다음의 화합물 ： 여기서, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 25]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,-(NH-DX) 는 다음 식[화학식 26]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[52] 다음의 화합물 ： (maleimid-N-yl)-CH2CH2-C(=O)-NH-CH2CH2O-CH2CH2O-CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2CH2CH2-C(=O)-(NH-DX), (maleimid-N-yl)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX) 또는(maleimid-N-yl)-CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX).여기서, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 27]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,-(NH-DX) 는 다음 식[화학식 28]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[53] 다음의 군에서 선택되는 화합물 ： NH2-CH2CH2-C(=O)-(NH-DX), NH2-CH2CH2CH2-C(=O)-(NH-DX), NH2-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX), NH2-CHCH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX), 및HO-CH2-C(=O)-(NH-DX)식 중, -(NH-DX) 는 다음 식[화학식 29]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[54] 다음 식[화학식 30]으로 나타내는 화합물.[55] 다음 식 ： [화학식 31]으로 나타내는 화합물.[56] 다음 식[화학식 32]으로 나타내는 화합물.[57] 다음 식으로 나타내는 화합물 ： Q-(CH2)nQ-C(=O)-L2a-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-(NH-DX)를 항체 또는 그 반응성 유도체와 반응시키고, 항체의 힌지부에 존재하는 디술파이드 결합 부분에 있어서 티오에테르 결합을 형성시키는 방법, 또는 항체를 구성하는 아미노산의 측사슬 상에 존재하는 아미노기 또는 말단의 아미노기에 있어서 아미드 결합을 형성시키는 방법 에 의해 약물-링커 부분을 항체에 결합시키는 것을 특징으로 하는 항체-약물 콘주게이트의 제조 방법.식 중, Q 는 (maleimid-N-yl)-, HS-, X-CH2-C(=O)-NH-, 또는 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)- 를 나타내고, X 는 브롬 원자 또는 요오드 원자를 나타내고, nQ 는 정수의 2 내지 8 을 나타내고, L2a 는 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n5 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, LP 는 페닐알라닌, 글리신, 발린, 리신, 시트룰린, 세린, 글루탐산, 아스파르트산에서 선택되는 2 내지 7 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기를 나타내고, n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내고,La 는 -C(=O)-NH-, -NR1-(CH2)n7-, -O-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n7 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, R1 은 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)n8-COOH, 또는 -(CH2)n9-OH 를 나타내지만, n8 은 정수의 1 내지 4 를 나타내고, n9 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, Lb 는 -CR2(-R3)-, -O-, -NR4-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, R2 및 R3 은, 각각 독립적으로, 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)na-NH2, -(CH2)nb-COOH, 또는 -(CH2)nc-OH 를 나타내고, R4 는 수소 원자 또는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기를 나타내고, na 는 0 내지 6 의 정수를 나타내고, nb 는 정수의 1 내지 4 를 나타내고, nc 는 정수의 1 내지 4 를 나타내지만, na 가 0 일 때는, R2 및 R3 은 동일하게는 되지 않고, Lc 는 -CH2- 또는 -C(=O)- 를 나타내고, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 33]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며, (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl) 은 다음 식[화학식 34]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,-(NH-DX) 는 다음 식[화학식 35]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[58] 약물-링커 부분을 항체에 결합시키는 방법이,항체를 환원 처리한 후에, Q 가 말레이미딜기 또는 X-CH2-C(=O)-NH- 인 화합물을 반응시켜 티오에테르 결합을 형성시키는 방법, 항체에, Q 가 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)- 인 화합물을 반응시켜 아미드 결합을 형성시키는 방법, 또는 항체에 식 Q1-L1a-Q2[식 중, Q1 은 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)-, (3-Sulfo-pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)-, RQ-O-C(=N)-, 또는 O=C=N- 을 나타내고, L1a- 는 -cyc.Hex(1,4)-CH2-, 탄소수 1 내지 10 의 알킬렌기, 페닐렌기, -(CH2)n4-C(=O)-, -(CH2)n4a-NH-C(=O)-(CH2)n4b-, 또는 -(CH2)n4a-NH-C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2- 를 나타내고, Q2 는 (maleimid-N-yl), 할로겐 원자, 또는 -S-S-(2-Pyridyl) 을 나타내고,RQ 는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, n4 는 1 내지 8 의 정수를 나타내고,n4a 는 0 내지 6 의 정수, n4b 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, (3-Sulfo-pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)- 은 다음 식[화학식 36]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며, 이 술폰산은 리튬염, 나트륨염, 칼륨염을 형성할 수 있고, cyc.Hex(1,4) 는 1,4-시클로헥실렌기를 나타내고, (2-Pyridyl) 은 2-피리딜기를 나타낸다.]으로 나타내는 화합물을 반응시킨 후에, Q 가 SH 인 화합물을 반응시켜 아미드 결합에 의해 약물-링커 구조를 형성시키는 방법 중 어느 것인 [57] 에 기재된 제조 방법.[59] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 1 내지 10 개의 범위인 [57] 또는 [58] 에 기재된 제조 방법.[60] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 2 내지 8 개의 범위인 [57] 또는 [58] 에 기재된 제조 방법.[61] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 3 내지 8 개의 범위인 [57] 또는 [58] 에 기재된 제조 방법.[62] 항체-약물 콘주게이트가 표적으로 하는 세포가 종양 세포인 [57] 내지 [61] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.[63] 항체가 항 A33 항체, 항 B7-H3 항체, 항 CanAg 항체, 항 CD20 항체, 항 CD22 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 항 CD56 항체, 항 CD70 항체, 항 CEA 항체, 항 Cripto 항체, 항 EphA2 항체, 항 G250 항체, 항 MUC1 항체, 항 GPNMB 항체, 항 Integrin 항체, 항체 PSMA 항체, 항 Tenascin-C 항체, 항 SLC44A4 항체, 또는 항 Mesothelin 항체인 [57] 내지 [61] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.[64] 항체가 항 B7-H3 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 또는 항 CD70 항체인 [57] 내지 [61] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.[65] 항체가 항 B7-H3 항체인 [57] 내지 [61] 중 어느 한 항에 기재된 제조 방법.[66] [57] 내지 [65] 중 어느 것의 제조 방법에 의해 얻어지는 항체-약물 콘주게이트.[67] 항체를 환원 조건에서 처리한 후에 이하의 화합물군에서 선택되는 화합물을 반응시키는 것을 특징으로 하는, 항체의 힌지부의 술파이드 결합 부분에 있어서 티오에테르 결합을 형성시켜 얻어지는 항체-약물 콘주게이트 ： 여기서, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 37]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,-(NH-DX) 는 다음 식[화학식 38]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[68] 항체를 환원 조건에서 처리한 후에 이하의 화합물군에서 선택되는 화합물을 반응시키는 것을 특징으로 하는, 항체의 힌지부의 술파이드 결합 부분에 있어서 티오에테르 결합을 형성시켜 얻어지는 항체-약물 콘주게이트 ： (maleimid-N-yl)-CH2CH2-C(=O)-NH-CH2CH2O-CH2CH2O-CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2CH2CH2-C(=O)-(NH-DX), (maleimid-N-yl)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX), 또는 (maleimid-N-yl)-CH2CH2CH2CH2CH2-C(=O)-GGFG-NH-CH2CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX).여기서, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식 [화학식 39]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,-(NH-DX) 는 다음 식[화학식 40]으로 나타내는, 1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위로 되어 있는 기이다.[69] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 1 내지 10 개의 범위인 [67] 또는 [68] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[70] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 2 내지 8 개의 범위인 [67] 또는 [68] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[71] 선택된 1 종의 약물-링커 구조의 1 항체당 평균 결합수가 3 내지 8 개의 범위인 [67] 또는 [68] 에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[72] 항체-약물 콘주게이트가 표적으로 하는 세포가 종양 세포인 [67] 내지 [71] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[73] 항체가 항 A33 항체, 항 B7-H3 항체, 항 CanAg 항체, 항 CD20 항체, 항 CD22 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 항 CD56 항체, 항 CD70 항체, 항 CEA 항체, 항 Cripto 항체, 항 EphA2 항체, 항 G250 항체, 항 MUC1 항체, 항 GPNMB 항체, 항 Integrin 항체, 항체 PSMA 항체, 항 Tenascin-C 항체, 항 SLC44A4 항체, 또는 항 Mesothelin 항체인 [67] 내지 [71] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[74] 항체가 항 B7-H3 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 또는 항 CD70 항체인 [67] 내지 [71] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[75] 항체가 항 B7-H3 항체인 [67] 내지 [71] 중 어느 한 항에 기재된 항체-약물 콘주게이트.[76] 링커를 개재하여 약물과 항체가 결합된 항체-약물 콘주게이트를 얻기 위한 다음 식으로 나타내는 링커.-L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-여기서, L1 은 항체에 대한 결합 부위이며, Lc 는 항종양성 화합물에 대한 결합 부위이며, 식 중,n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내고,L1 은 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)-, -CH2-C(=O)-NH-(CH2)n3-C(=O)-, -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)-, 또는 -C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 를 나타내고, 여기서, n2 는 2 내지 8 의 정수를 나타내고, n3 은 1 내지 8 의 정수를 나타내고, n4 는 1 내지 8 의 정수를 나타내고, L2 는 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)-, -S-(CH2)n6-C(=O)-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n5 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, n6 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, LP 는 2 내지 7 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기를 나타내고, La 는 -C(=O)-NH-, -NR1-(CH2)n7-, -O-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n7 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, R1 은 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)n8-COOH, 또는 -(CH2)n9-OH 를 나타내지만, n8 은 정수의 1 내지 4 를 나타내고, n9 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, Lb 는 -CR2(-R3)-, -O-, -NR4-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, R2 및 R3 은, 각각 독립적으로, 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)na-NH2, -(CH2)nb-COOH, 또는 -(CH2)nc-OH 를 나타내고, R4 는 수소 원자 또는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기를 나타내고, na 는 0 내지 6 의 정수를 나타내고, nb 는 정수의 1 내지 4 를 나타내고, nc 는 정수의 1 내지 4 를 나타내지만, na 가 0 일 때는, R2 및 R3 은 동일하게는 되지 않고, Lc 는 -CH2- 또는 -C(=O)- 를 나타내고,-(Succinimid-3-yl-N)- 은 다음 식 ： [화학식 41]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 항체와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이것을 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고,-(N-ly-3-diminiccuS)- 는 다음 식 ： [화학식 42]으로 나타내는 구조이며, 이것의 3 위치에서 L2 와 결합하고, 1 위치의 질소 원자 상에서 이 구조를 포함하는 링커 구조 내의 메틸렌기와 결합하고, cyc.Hex(1,4) 는 1,4-시클로헥실렌기를 나타내고, L2 가 -S-(CH2)n6-C(=O)- 일 때, L1 은 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 가 된다.[77] 다음의 군에서 선택되는 [76] 에 기재된 링커, 단 좌단이 항체와의 결합 부위이며, 우단이 항종양성 화합물과의 결합 부위이다.[78] 다음의 군에서 선택되는 [76] 에 기재된 링커, 단 좌단이 항체와의 결합 부위이며, 우단이 항종양성 화합물과의 결합 부위이다.[79] 다음의 군에서 선택되는 [76] 에 기재된 링커, 단 좌단이 항체와의 결합 부위이며, 우단이 항종양성 화합물과의 결합 부위이다.[80] 다음의 군에서 선택되는 [76] 에 기재된 링커 링커, 단 좌단이 항체와의 결합 부위이며, 우단이 항종양성 화합물과의 결합 부위이다. [ 발명의 효과 ] 특정 구조의 링커를 개재하여 항종양성 화합물 엑사테칸을 결합시킨 항체-약물 콘주게이트에 의해 우수한 항종양 효과 및 안전성을 달성할 수 있다. [ 도면의 간단한 설명 ] 도 1 은 B7-H3 베어리언트 1 의 아미노산 배열 (배열 번호 1) 을 나타낸다.도 2 는 B7-H3 베어리언트 2 의 아미노산 배열 (배열 번호 2) 을 나타낸다.도 3 은 M30-H1 타입 중사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 9) 을 나타낸다.도 4 는 M30-H2 타입 중사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 10) 을 나타낸다.도 5 는 M30-H3 타입 중사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 11) 을 나타낸다.도 6 은 M30-H4 타입 중사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 12) 을 나타낸다.도 7 은 M30-L1 타입 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 13) 을 나타낸다.도 8 은 M30-L2 타입 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 14) 을 나타낸다.도 9 는 M30-L3 타입 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 15) 을 나타낸다.도 10 은 M30-L4 타입 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 16) 을 나타낸다.도 11 은 M30-L5 타입 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 17) 을 나타낸다.도 12 는 M30-L6 타입 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 18) 을 나타낸다.도 13 은 M30-L7 타입 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 19) 을 나타낸다.도 14 는 M30 항체 중사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 20) 을 나타낸다.도 15 는 M30 항체 경사슬의 아미노산 배열 (배열 번호 21) 을 나타낸다.도 16 은 B7-H3 베어리언트 1 의 뉴클레오티드 배열 (배열 번호 26) 을 나타낸다.도 17 은 피하 이식한 인간 멜라노마주 A375 세포에 대한 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 효과를 나타낸다. 도면 중의 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 삼각선은 M30-H1-L4P 항체, 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 효과를 나타낸다.도 18 은 피하 이식한 인간 멜라노마주 A375 세포에 대한 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 효과를 나타낸다. 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흑색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (2) 0.1 mg/kg 투여 시, 선 -X- 는 0.3 mg/kg 투여 시, 흑색 삼각선은 1 mg/kg 투여 시, 흰색 둥근선은 3 mg/kg 투여 시의 효과를 나타낸다.도 19 는 피하 이식한 인간 비소세포 폐암주 Calu-6 세포에 대한 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 효과를 나타낸다. 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 삼각선은 M30-H1-L4P 항체, 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 효과를 나타낸다.도 20 은 피하 이식한 인간 멜라노마주 A375 세포에 대한 항체-약물 콘주게이트 (1), (13), (41), (55) 의 효과를 나타낸다. 도면 중의 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (1), 흰색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (13), 선 -X- 는 항체-약물 콘주게이트 (41), 흰색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (55) 의 효과를 나타낸다.도 21 은 피하 이식한 인간 비소세포 폐암주 Calu-6 세포에 대한 항체-약물 콘주게이트 (13), (41), (55) 의 효과를 나타낸다. 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 둥근선은 DE-310, 흰색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (13), 선 -X- 는 항체-약물 콘주게이트 (41), 흰색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (55) 의 효과를 나타낸다.도 22 는 피하 이식한 인간 멜라노마주 A375 세포에 대한 항체-약물 콘주게이트 (17), (18), (19), (59), (60), (61) 의 효과를 나타낸다. 도면 흑색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흑색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (17), 흰색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (18), 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (19), 흑색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (59), 흰색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (60), 선 -X- 는 항체-약물 콘주게이트 (61) 의 효과를 나타낸다. [ 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 ] 본 발명의 항체-약물 콘주게이트는, 항종양성 항체에, 링커 구조 부분을 개재하여 항종양성 화합물을 결합시킨 항종양성 약물이며, 이하에 상세하게 설명한다.[항체]본 발명의 항체-약물 콘주게이트에 사용되는 항체는 면역 글로불린을 의미하고, 항원과 면역 특이적으로 결합하는 항원 결합 부위를 함유하는 분자이다. 본 발명의 항체로서 IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY 중 어느 클래스여도 되지만, IgG 가 바람직하다. 또, 서브 클래스로서 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2 중 어느 것이어도 되지만 IgG1 및 IgG2 가 바람직하다. 항체는 어느 종에서 유래해도 되지만, 바람직하게는, 인간, 래트, 마우스 및 토끼를 예시할 수 있다. 인간 이외의 종에서 유래하는 경우에는, 주지의 기술을 이용하여, 키메라화 또는 인간화하는 것이 바람직하다. 본 발명의 항체는 폴리클로날 항체이거나, 모노클로날 항체여도 되지만, 모노클로날 항체가 바람직하다.본 발명의 항체는 종양 세포를 표적으로 할 수 있는 항체이면 된다. 즉 항종양 활성을 갖는 약물을 링커를 개재하여 결합시키는 점에서, 항체로서는, 종양 세포를 인식할 수 있는 특성, 종양 세포에 결합할 수 있는 특성, 종양 세포 내에 수용되어 내재화하는 특성, 나아가서는 종양 세포를 장해하는 특성 중 1 또는 그 이상의 특성을 구비하고 있는 것이 바람직하다.항체의 종양 세포에 대한 결합성은 플로사이트메트리를 사용하여 확인할 수 있다. 종양 세포 내에 대한 항체의 수용은, (1) 치료 항체에 결합하는 2 차 항체 (형광 표식) 를 사용하여 세포 내에 받아들여진 항체를 형광 현미경으로 가시화하는 어세이 (Cell Death and Differentiation (2008) 15, 751-761), (2) 치료 항체에 결합하는 2 차 항체 (형광 표식) 를 사용하여 세포 내에 받아들여진 형광량을 측정하는 어세이 (㏖ecular Biology of the Cell Vol. 15, 5268-5282, December 2004) 또는 (3) 치료 항체에 결합하는 이뮤노톡신을 사용하여, 세포 내에 받아들여지면 독소가 방출되어 세포 증식이 억제된다는 Mab-ZAP 어세이 (BioTechniques 28 : 162-165, January 2000) 를 사용하여 확인할 수 있다.항체의 항종양 활성은 종양 세포에 대한 세포 장해 활성, 살세포 효과를 말하지만, in vitro 에서는, 세포의 증식의 억제 활성으로 측정함으로써 확인할 수 있다. 예를 들어, 항체의 표적 단백질을 과잉 발현하고 있는 암 세포주를 배양하고, 배양계에 여러 가지의 농도로 항체를 첨가하여, 포커스 형성, 콜로니 형성 및 스페로이드 증식에 대한 억제 활성을 측정할 수 있다. In vivo 에서는, 예를 들어, 표적 단백질을 고발현하고 있는 종양 세포주를 이식한 누드 마우스에 항체를 투여하고, 암 세포의 변화를 측정함으로써, 항종양 활성을 확인할 수 있다. 또한, 항체-약물 콘주게이트는 항종양 효과를 발휘하는 약물을 결합시키고 있으므로, 항체 자체에 항종양 효과가 있는 것은 필수는 아니지만 항종양 효과를 갖는 것이 보다 바람직하다. 항종양 효과의 발휘의 점에서는 항체가 내재화되어 종양 세포 내로 이행하는 성질이 있는 것이 약물에 의해 종양 세포를 특이적·선택적으로 장해를 주는 점에서 중요하고, 바람직하다.이와 같은 항체로서 항 A33 항체, 항 B7-H3 항체, 항 CanAg 항체, 항 CD20 항체, 항 CD22 항체, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 항 CD56 항체, 항 CD70 항체, 항 CEA 항체, 항 Cripto 항체, 항 EphA2 항체, 항 G250 항체, 항 MUC1 항체, 항 GPNMB 항체, 항 Integrin 항체, 항체 PSMA 항체, 항 Tenascin-C 항체, 항 SLC44A4 항체, 항 Mesothelin 항체를 예시할 수 있지만 이것에 한정되지 않는다.본 발명의 항체로서 바람직하게는, 항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 항 CD70 항체 및 항 B7-H3 항체이며, 더욱 바람직하게는 항 B7-H3 항체이다.본 발명의 항체는, 이 분야에서 통상적으로 실시되는 방법을 이용하여, 항원이 되는 폴리펩티드를 동물에 면역하고, 생체 내에 산생되는 항체를 채취, 정제함으로써 얻을 수 있다. 항원의 유래는 인간으로 한정되지 않고, 마우스, 래트 등의 인간 이외의 동물에서 유래하는 항원을 동물에게 면역할 수도 있다. 이 경우에는, 취득된 이종 항원에 결합하는 항체와 인간 항원의 교차성을 시험함으로써, 인간의 질환에 적용 가능한 항체를 선별할 수 있다.또, 공지된 방법 (예를 들어, Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p. 495-497, Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p.365-367, Plenum Press, N. Y. (1980)) 에 따라, 항원에 대한 항체를 산생하는 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 융합시킴으로써 하이브리도마를 수립하여, 모노클로날 항체를 얻을 수도 있다.또한, 항원은 항원 단백질을 코드하는 유전자를 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 산생시킴으로써 얻을 수 있다. 구체적으로는, 항원 유전자를 발현 가능한 벡터를 제작하고, 이것을 숙주 세포에 도입하여 그 유전자를 발현시키고, 발현한 항원을 정제하면 된다.항 CD30 항체, 항 CD33 항체, 항 CD70 항체는, 각각, WO2002/043661, 미국 특허 제5,773,001호, WO2006/113909 에 기초하여, 공지된 수단에 의해 취득할 수 있다.본 발명에 있어서 사용되는 B7-H3 항체로서는, 이하의 특성을 갖는 항체가 바람직하다.(1) 이하의 특성을 갖는 것을 특징으로 하는 항체 ； (a) B7-H3 에 특이적으로 결합한다(b) 항체 의존성 세포 매개식 작용 (ADCP) 활성을 갖는다(c) in vivo 에서 항종양 활성을 갖는다(2) B7-H3 이 배열 번호 1 또는 2 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 분자인 상기 (1) 에 기재된 항체 또는 당해 항체.(3) 중사슬에 있어서의 상보성 결정 영역으로서 배열 번호 3 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 CDRH1, 배열 번호 4 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 CDRH2 및 배열 번호 5 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 CDRH3, 그리고 경사슬에 있어서의 상보성 결정 영역으로서 배열 번호 6 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 CDRL1, 배열 번호 7 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 CDRL2 및 배열 번호 8 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 CDRL3 을 갖는 상기 (1) 또는 (2) 에 기재된 항체.(4) 정상 영역이 인간 유래 정상 영역인 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 기재된 항체.(5) 인간화되어 있는 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 한 항에 기재된 항체.(6) (a) 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열, (b) 배열 번호 10 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열, (c) 배열 번호 11 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열, (d) 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열, (e) (a) 내지 (d) 의 배열에 대해 적어도 95 ％ 이상의 상동성을 갖는 아미노산 배열, 및 (f) (a) 내지 (d) 의 배열에 있어서 1 또는 수 개의 아미노산이 결실, 치환 또는 부가된 아미노산 배열로 이루어지는 군에서 선택된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역, 그리고 (g) 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열, (h) 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열, (i) 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열, (j) 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열, (k) 배열 번호 17 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열, (l) 배열 번호 18 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열, (m) 배열 번호 19 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열, (n) (g) 내지 (m) 의 배열에 대해 적어도 95 ％ 이상의 상동성을 갖는 아미노산 배열, 및 (o) (g) 내지 (m) 의 배열에 있어서 1 또는 수 개의 아미노산이 결실, 치환 또는 부가된 아미노산 배열로 이루어지는 군에서 선택된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역을 갖는 상기 (5) 에 기재된 항체.(7) 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 17 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 18 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 19 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역, 그리고 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬의 가변 영역 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬의 가변 영역으로 이루어지는 군 에서 선택되는 중사슬의 가변 영역 및 경사슬의 가변 영역을 갖는 상기 (6) 에 기재된 항체.(8) 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 17 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 18 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 19 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 그리고 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 군에서 선택되는 중사슬 및 경사슬로 이루어지는 상기 (6) 또는 (7) 에 기재된 항체.(9) 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 17 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 18 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 19 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬, 그리고 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 군에서 선택되는 중사슬 및 경사슬로 이루어지는 상기 (6) 내지 (8) 중 어느 한 항에 기재된 항체.(10) 중사슬이 배열 번호 9 또는 12 에 기재된 아미노산 배열에 있어서 카르복실 말단의 아미노산이 결실되어 있는 중사슬인 상기 (8) 또는 (9) 에 기재된 항체.(11) 상기 (1) 내지 (10) 중 어느 한 항에 기재된 항체를 코드하는 폴리뉴클레오티드를 함유하는 발현 벡터에 의해 형질 전환된 숙주 세포를 배양하는 공정 및 당해 공정에서 얻어진 배양물로부터 목적으로 하는 항체를 채취하는 공정을 포함하는 당해 항체의 제조 방법에 의해 얻어지는 항체.(12) 항체 의존성 세포 상해 활성을 증강시키기 위해서 당사슬 수식이 조절되어 있는 상기 (1) 내지 (11) 중 어느 한 항에 기재된 항체.이하에, 본 발명에 있어서 사용되는 B7-H3 항체에 대해 설명한다.본 명세서 중에 있어서, 「암」 과 「종양」 은 동일한 의미로 사용하고 있다.본 명세서 중에 있어서, 「유전자」 라는 말에는, DNA 뿐만 아니라 그 mRNA, cDNA 및 그 cRNA 도 포함된다.본 명세서 중에 있어서, 「폴리뉴클레오티드」 라는 말은 핵산과 동일한 의미로 사용하고 있고, DNA, RNA, 프로브, 올리고뉴클레오티드, 및 프라이머도 포함된다.본 명세서 중에 있어서는, 「폴리펩티드」 와 「단백질」 은 구별하지 않고 사용하고 있다.본 명세서 중에 있어서, 「세포」 에는, 동물 개체 내의 세포, 배양 세포도 포함하고 있다.본 명세서 중에 있어서, 「B7-H3」 은 B7-H3 단백질과 동일한 의미로 사용하고 있고, 또, B7-H3 베어리언트 1 및/또는 B7-H3 베어리언트 2 를 의미한다.본 명세서에 있어서의 「CDR」 이란, 상보성 결정 영역 (CDR ： Complemetarity deterring region) 을 의미한다. 항체 분자의 중사슬 및 경사슬에는 각각 3 지점의 CDR 이 있는 것이 알려져 있다. CDR 은 초가변 영역 (hypervariable domain) 이라고도 불리고, 항체의 중사슬 및 경사슬의 가변 영역 내에 있고, 1 차 구조의 변이성이 특히 높은 부위이며, 중사슬 및 경사슬의 폴리펩티드 사슬의 1 차 구조 상에 있어서, 각각 3 지점으로 분리되어 있다. 본 명세서 중에 있어서는, 항체의 CDR 에 대해, 중사슬의 CDR 을 중사슬 아미노산 배열의 아미노 말단측으로부터 CDRH1, CDRH2, CDRH3 으로 표기하고, 경사슬의 CDR 을 경사슬 아미노산 배열의 아미노 말단측으로부터 CDRL1, CDRL2, CDRL3 으로 표기한다. 이들의 부위는 입체 구조 상에서 서로 근접하여, 결합하는 항원에 대한 특이성을 결정하고 있다.본 발명에 있어서, 「스트린젠트한 조건하에서 하이브리다이즈한다」 란, 시판되는 하이브리다이제이션 용액 ExpressHyb Hybridization Solution (클론텍크사 제조) 중, 68 ℃ 에서 하이브리다이즈하는 것, 또는, DNA 를 고정한 필터를 사용하여 0.7-1.0 M 의 NaCl 존재하 68 ℃ 에서 하이브리다이제이션을 실시한 후, 0.1-2 배 농도의 SSC 용액 (1 배 농도 SSC 란 150 mM NaCl, 15 mM 시트르산나트륨으로 이루어진다) 을 사용하고, 68 ℃ 에서 세정함으로써 동정할 수 있는 조건 또는 그것과 동등한 조건으로 하이브리다이즈하는 것을 말한다.1. B7-H3B7-H3 은 항원 제시 세포에 보조 자극 분자로서 발현하는 B7 패밀리의 하나이며, T 세포 상의 리셉터에 작용하여 면역 작용을 촉진 또는 억제한다고 생각되고 있다.B7-H3 은 1 회 막 관통 구조를 갖는 단백질이지만, B7-H3 의 N 말단측의 세포 외 영역에는 2 개의 베어리언트가 존재한다. B7-H3 베어리언트 1 (4Ig-B7-H3) 에는 각 2 지점의 V 또는 C 형 Ig 도메인이 존재하고, B7-H3 베어리언트 2 (2Ig-B7-H3) 에는 각 1 지점의 V 또는 C 형 Ig 도메인이 존재한다.본 발명에서 사용하는 B7-H3 은 인간, 비인간 포유 동물 (래트, 마우스 등) 의 B7-H3 발현 세포로부터 직접 정제하여 사용하거나, 혹은 당해 세포의 세포막 획분을 조제하여 사용할 수 있고, 또, B7-H3 을 in vitro 에서 합성하거나, 혹은 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 산생시킴으로써 얻을 수 있다. 유전자 조작에서는, 구체적으로는, B7-H3 cDNA 를 발현 가능한 벡터에 삽입한 후, 전사와 번역에 필요한 효소, 기질 및 에너지 물질을 포함하는 용액 중에서 합성하거나, 혹은 다른 원핵 생물, 또는 진핵 생물의 숙주 세포를 형질 전환시킴으로써 B7-H3 을 발현시키는 것에 의해, 그 단백질을 얻을 수 있다.인간 B7-H3 베어리언트 1 유전자의 오픈 리딩 프레임 (ORF) 의 아미노산 배열은 배열표의 배열 번호 1 에 기재되어 있다. 또, 배열 번호 1 의 배열은 도 1 에 기재되어 있다.인간 B7-H3 베어리언트 2 유전자의 ORF 의 아미노산 배열은 배열표의 배열 번호 2 에 기재되어 있다. 또, 배열 번호 2 의 배열은 도 2 에 기재되어 있다.또, 상기 각 B7-H3 의 아미노산 배열에 있어서, 1 또는 수 개의 아미노산이 치환, 결실 및/또는 부가된 아미노산 배열로 이루어지고, 당해 단백질과 동등한 생물 활성을 갖는 단백질도 B7-H3 에 포함된다.시그널 배열이 제거된 성숙 인간 B7-H3 베어리언트 1 은 배열 번호 1 에 나타내는 아미노산 배열의 27 번째 내지 534 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열에 상당한다. 또, 시그널 배열이 제거된 성숙 인간 B7-H3 베어리언트 2 는 배열 번호 2 에 나타내는 아미노산 배열의 27 번째 내지 316 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열에 상당한다.2. 항 B7-H3 항체의 제조본 발명의 B7-H3 에 대한 항체는, 통상적인 방법을 이용하여, B7-H3 또는 B7-H3 의 아미노산 배열에서 선택되는 임의의 폴리펩티드를 동물에 면역하고, 생체 내에 산생되는 항체를 채취, 정제함으로써 얻을 수 있다. 항원이 되는 B7-H3 의 생물종은 인간으로 한정되지 않고, 마우스, 래트 등의 인간 이외의 동물에서 유래하는 B7-H3 을 동물에게 면역할 수도 있다. 이 경우에는, 취득된 이종 B7-H3 에 결합하는 항체와 인간 B7-H3 의 교차성을 시험함으로써, 인간의 질환에 적용 가능한 항체를 선별할 수 있다.또, 공지된 방법 (예를 들어, Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p. 495-497, Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p. 365-367, Plenum Press, N. Y. (1980)) 에 따라, B7-H3 에 대한 항체를 산생하는 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 융합시킴으로써 하이브리도마를 수립하여, 모노클로날 항체를 얻을 수도 있다.또한, 항원이 되는 B7-H3 은 B7-H3 유전자를 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 발현시킴으로써 얻을 수 있다.구체적으로는, B7-H3 유전자를 발현 가능한 벡터를 제작하고, 이것을 숙주 세포에 도입하여 그 유전자를 발현시키고, 발현한 B7-H3 을 정제하면 된다. 이하, 구체적으로 B7-H3 에 대한 항체의 취득 방법을 설명한다.(1) 항원의 조제항 B7-H3 항체를 제작하기 위한 항원으로서는, B7-H3 또는 그 적어도 6 개가 연속된 부분 아미노산 배열로 이루어지는 폴리펩티드, 혹은 이들에 임의의 아미노산 배열이나 담체가 부가된 유도체를 들 수 있다.B7-H3 은 인간의 종양 조직 혹은 종양 세포로부터 직접 정제하여 사용할 수 있고, 또, B7-H3 을 in vitro 에서 합성하거나, 혹은 유전자 조작에 의해 숙주 세포에 산생시킴으로써 얻을 수 있다.유전자 조작에서는, 구체적으로는, B7-H3 의 cDNA 를 발현 가능한 벡터에 삽입한 후, 전사와 번역에 필요한 효소, 기질 및 에너지 물질을 포함하는 용액 중에서 합성하거나, 혹은 다른 원핵 생물, 또는 진핵 생물의 숙주 세포를 형질 전환시킴으로써 B7-H3 을 발현시키는 것에 의해, 항원을 얻을 수 있다.또, 막 단백질인 B7-H3 의 세포 외 영역과 항체의 정상 영역을 연결한 융합 단백질을 적절한 숙주·벡터계에 있어서 발현시킴으로써, 분비 단백질로서 항원을 얻는 것도 가능하다.B7-H3 의 cDNA 는, 예를 들어, B7-H3 의 cDNA 를 발현하고 있는 cDNA 라이브러리를 주형으로 하여, B7-H3 cDNA 를 특이적으로 증폭하는 프라이머를 사용하여 폴리머라아제 연쇄 반응 (이하 「PCR」 이라고 한다) (Saiki, R. K., et al. Science (1988) 239, p. 487-489 참조) 을 실시하는, 이른바 PCR 법에 의해 취득할 수 있다.폴리펩티드의 인·비트로 (in vitro) 합성으로서는, 예를 들어 로슈·다이아그노스틱스사 제조의 래피드 트랜스레이션 시스템 (RTS) 을 들 수 있지만, 이것으로 한정되지 않는다.원핵 세포의 숙주로서는, 예를 들어, 대장균 (Escherichia coli) 이나 고초균 (Bacillus subtilis) 등을 들 수 있다. 목적으로 하는 유전자를 이들의 숙주 세포 내에서 형질 전환시키려면, 숙주와 적합할 수 있는 종 유래의 레프리콘 즉 복제 기점과, 조절 배열을 포함하고 있는 플라스미드 벡터로 숙주 세포를 형질 전환시킨다. 또, 벡터로서는, 형질 전환 세포에 표현 형질 (표현형) 의 선택성을 부여할 수 있는 배열을 갖는 것이 바람직하다.진핵 세포의 숙주 세포에는, 척추 동물, 곤충, 효모 등의 세포가 포함되고, 척추 동물 세포로서는, 예를 들어, 원숭이의 세포인 COS 세포 (Gluzman, Y. Cell (1981) 23, p. 175-182, ATCC CRL-1650), 마우스 선유아 세포 NIH3T3 (ATCC No. CRL-1658) 이나 차이니즈·햄스터 난소 세포 (CHO 세포, ATCC CCL-61) 의 디하이드로 엽산 환원 효소 결손주 (Urlaub, G. and Chasin, L. A. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1980) 77, p. 4126-4220) 등이 흔히 사용되고 있지만, 이들로 한정되지 않는다.상기와 같이 하여 얻어지는 형질 전환체는 통상적인 방법에 따라 배양할 수 있고, 그 배양에 의해 세포 내, 또는 세포 외에 목적으로 하는 폴리펩티드가 산생 된다.그 배양에 사용되는 배지로서는, 채용한 숙주 세포에 따라 관용되는 각종의 것을 적절히 선택할 수 있고, 대장균이면, 예를 들어, LB 배지에 필요에 따라, 암피실린 등의 항생 물질이나 IPMG 를 첨가하여 사용할 수 있다.상기 배양에 의해, 형질 전환체의 세포 내 또는 세포 외에 산생되는 재조합 단백질은 그 단백질의 물리적 성질이나 화학적 성질 등을 이용한 각종 공지된 분리 조작법에 의해 분리·정제할 수 있다.그 방법으로서는, 구체적으로는 예를 들어, 통상적인 단백질 침전제에 의한 처리, 한외 여과, 분자체 크로마토그래피 (겔 여과), 흡착 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 어피니티 크로마토그래피 등의 각종 액체 크로마토그래피, 투석법, 이들의 조합 등을 예시할 수 있다.또, 발현시키는 재조합 단백질에 6 잔기로 이루어지는 히스티딘 태그를 연결함으로써, 니켈 어피니티 칼럼으로 효율적으로 정제할 수 있다. 혹은, 발현시키는 재조합 단백질에 IgG 의 Fc 영역을 연결함으로써, 프로테인 A 칼럼으로 효율적으로 정제할 수 있다.상기 방법을 조합함으로써 용이하게 고수율, 고순도로 목적으로 하는 폴리펩티드를 대량으로 제조할 수 있다.(2) 항 B7-H3 모노클로날 항체의 제조B7-H3 과 특이적으로 결합하는 항체의 예로서, B7-H3 과 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체를 들 수 있지만, 그 취득 방법은 이하에 기재하는 바와 같다.모노클로날 항체의 제조에 있어서는, 일반적으로 하기와 같은 작업 공정이 필요하다.즉,(a) 항원으로서 사용하는 생체 고분자의 정제,(b) 항원을 동물에 주사함으로써 면역한 후, 혈액을 채취하여 그 항체가를 검정하여 비장 적출의 시기를 결정하고 나서, 항체 산생 세포를 조제하는 공정,(c) 골수종 세포 (이하 「미엘로마」 라고 한다) 의 조제,(d) 항체 산생 세포와 미엘로마의 세포 융합,(e) 목적으로 하는 항체를 산생하는 하이브리도마군의 선별,(f) 단일 세포 클론으로의 분할 (클로닝),(g) 경우에 따라서는, 모노클로날 항체를 대량으로 제조하기 위한 하이브리도마의 배양, 또는 하이브리도마를 이식한 동물의 사육,(h) 이와 같이 하여 제조된 모노클로날 항체의 생리 활성, 및 그 결합 특이성의 검토, 혹은 표식 시약으로서의 특성의 검정등이다.이하, 모노클로날 항체의 제작법을 상기 공정을 따라 상세히 서술하지만, 그 항체의 제작법은 이것에 제한되지 않고, 예를 들어 비세포 이외의 항체 산생 세포 및 미엘로마를 사용할 수도 있다.(a) 항원의 정제항원으로서는, 상기한 바와 같은 방법으로 조제한 B7-H3 또는 그 일부를 사용할 수 있다.또, B7-H3 발현 재조합 체세포에 의해 조제한 막 획분, 또는 B7-H3 발현 재조합 체세포 자체, 또한, 당업자에게 주지의 방법을 이용하여, 화학 합성한 본 발명의 단백질의 부분 펩티드를 항원으로서 사용할 수도 있다.(b) 항체 산생 세포의 조제공정 (a) 에서 얻어진 항원과, 프로인드의 완전 또는 불완전 애주번트, 또는 칼리명반과 같은 보조제를 혼합하여, 면역원으로서 실험 동물에게 면역한다. 실험 동물은 공지된 하이브리도마 제작법에 사용되는 동물을 지장없이 사용할 수 있다. 구체적으로는, 예를 들어 마우스, 래트, 염소, 양, 소, 말 등을 사용할 수 있다. 단, 적출한 항체 산생 세포와 융합시키는 미엘로마 세포의 입수 용이성 등의 관점에서, 마우스 또는 래트를 피면역 동물로 하는 것이 바람직하다.또, 실제로 사용하는 마우스 및 래트의 계통에는 특별히 제한은 없고, 마우스의 경우에는, 예를 들어 각 계통 A, AKR, BALB/c, BDP, BA, CE, C3H, 57BL, C57BL, C57L, DBA, FL, HTH, HT1, LP, NZB, NZW, RF, R III, SJL, SWR, WB, 129 등이, 또 래트의 경우에는, 예를 들어, Wistar, Low, Lewis, Sprague, Dawley, ACI, BN, Fischer 등을 사용할 수 있다.이들의 마우스 및 래트는 예를 들어 닛폰 쿠레아, 닛폰 찰스 리버, 등 실험 동물 사육 판매업자로부터 입수할 수 있다.이 중, 후술하는 미엘로마 세포와의 융합 적합성을 감안하면, 마우스에서는 BALB/c 계통이, 래트에서는 Wistar 및 Low 계통이 피면역 동물로서 특히 바람직하다.또, 항원의 인간과 마우스에서의 상동성을 고려하여, 자기 항체를 제거하는 생체 기구를 저하시킨 마우스, 즉 자기 면역 질환 마우스를 사용하는 것도 바람직하다.또한, 이들 마우스 또는 래트의 면역 시의 주령은 바람직하게는 5 ∼ 12 주령, 더욱 바람직하게는 6 ∼ 8 주령이다.B7-H3 또는 이 재조합체에 의해 동물을 면역하려면, 예를 들어, Weir, D. M., Handbook of Experimental Immunology Vol. I. II. III., Blackwell Scientific Publications, Oxford (1987), Kabat, E. A. and Mayer, M. M., Experimental Immunochemistry, Charles C Thomas Publisher Springfield, Illinois (1964) 등에 상세하게 기재되어 있는 공지된 방법을 이용할 수 있다.이들의 면역법 중, 본 발명에 있어서 바람직한 방법을 구체적으로 나타내면, 예를 들어 이하와 같다.즉, 먼저, 항원인 막 단백질 획분, 혹은 항원을 발현시킨 세포를 동물의 피내 또는 복강 내에 투여한다.단, 면역 효율을 높이기 위해서는 양자의 병용이 바람직하고, 전반은 피내 투여를 실시하고, 후반 또는 최종회만 복강내 투여를 실시하면, 특히 면역 효율을 높일 수 있다.항원의 투여 스케줄은 피면역 동물의 종류, 개체차 등에 따라 상이하지만, 일반적으로는, 항원 투여 횟수 3 ∼ 6 회, 투여 간격 2 ∼ 6 주간이 바람직하고, 투여 횟수 3 ∼ 4 회, 투여 간격 2 ∼ 4 주간이 더욱 바람직하다.또, 항원의 투여량은 동물의 종류, 개체차 등에 따라 상이하지만, 일반적으로는 0.05 ∼ 5 mg, 바람직하게는 0.1 ∼ 0.5 mg 정도로 한다.추가 면역은 이상과 같은 항원 투여의 1 ∼ 6 주일 후, 바람직하게는 2 ∼ 4 주일 후, 더욱 바람직하게는 2 ∼ 3 주일 후에 실시한다.또한, 추가 면역을 실시할 때의 항원 투여량은 동물의 종류, 크기 등에 따라 상이하지만, 일반적으로, 예를 들어 마우스의 경우에는 0.05 ∼ 5 mg, 바람직하게는 0.1 ∼ 0.5 mg, 더욱 바람직하게는 0.1 ∼ 0.2 mg 정도로 한다.상기 추가 면역으로부터 1 ∼ 10 일 후, 바람직하게는 2 ∼ 5 일 후, 더욱 바람직하게는 2 ∼ 3 일 후에 피면역 동물로부터 항체 산생 세포를 포함하는 비장 세포 또는 림프구를 무균적으로 꺼낸다. 그 때에 항체가를 측정하고, 항체가가 충분히 높아진 동물을 항체 산생 세포의 공급원으로서 사용하면, 이후의 조작의 효율을 높일 수 있다.여기서 사용되는 항체가의 측정법으로서는, 예를 들어, RIA 법 또는 ELISA 법을 들 수 있지만 이들의 방법으로 제한되지 않는다.본 발명에 있어서의 항체가의 측정은, 예를 들어 ELISA 법에 의하면, 이하에 기재하는 바와 같은 순서에 의해 실시할 수 있다.먼저, 정제 또는 부분 정제한 항원을 ELISA 용 96 구멍 플레이트 등의 고상 표면에 흡착시키고, 또한 항원이 흡착되어 있지 않은 고상 표면을 항원과 무관계한 단백질, 예를 들어 소 혈청 알부민 (이하 「BSA」 라고 한다) 에 의해 덮고, 그 표면을 세정 후, 제 1 항체로서 단계 희석한 시료 (예를 들어 마우스 혈청) 에 접촉시켜, 상기 항원에 시료 중의 항체를 결합시킨다.또한 제 2 항체로서 효소 표식된 마우스 항체에 대한 항체를 추가하여 마우스 항체에 결합시키고, 세정 후 그 효소의 기질을 추가하고, 기질 분해에 기초하는 발색에 의한 흡광도의 변화 등을 측정함으로써, 항체가를 산출한다.피면역 동물의 비장 세포 또는 림프구로부터의 항체 산생 세포의 분리는 공지된 방법 (예를 들어, Kohler et al., Nature (1975) 256, p. 495, ； Kohler et al., Eur. J. Immunol. (1977) 6, p. 511, ； Milstein et al., Nature (1977), 266, p. 550, ； Walsh, Nature, (1977) 266, p. 495) 에 따라 실시할 수 있다. 예를 들어, 비장 세포의 경우에는, 비장을 세절하여 세포를 스테인리스 메시로 여과한 후, 이글 최소 필수 배지 (MEM) 에 부유시켜 항체 산생 세포를 분리하는 일반적 방법을 채용할 수 있다.(c) 골수종 세포 (이하, 「미엘로마」 라고 한다) 의 조제세포 융합에 사용하는 미엘로마 세포에는 특별한 제한은 없고, 공지된 세포주로부터 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 단, 융합 세포로부터 하이브리도마를 선택할 때의 편리성을 고려하여, 그 선택 수속이 확립되어 있는 HGPRT (Hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase) 결손주를 사용하는 것이 바람직하다.즉, 마우스 유래의 X63-Ag8 (X63), NS1-ANS/1 (NS1), P3X63-Ag8. U1 (P3U1), X63-Ag8. 653 (X63. 653), SP2/0-Ag14 (SP2/0), MPC11-45. 6TG1. 7 (45. 6 TG), FO, S149/5XXO, BU. 1 등, 래트 유래의 210. RSY3. Ag. 1. 2. 3 (Y3) 등, 인간 유래의 U266AR (SKO-007), GM1500·GTG-A12 (GM1500), UC729-6, LICR-LOW-HMy2 (HMy2), 8226AR/NIP4-1 (NP41) 등이다. 이들의 HGPRT 결손주는 예를 들어, American Type Culture Collection (ATCC) 등으로부터 입수할 수 있다.이들의 세포주는 적당한 배지, 예를 들어 8-아자구아닌 배지 [RPMI-1640 배지에 글루타민, 2-메르캅토에탄올, 겐타마이신, 및 소 태아 혈청 (이하 「FBS」 라고 한다) 을 추가한 배지에 8-아자구아닌을 추가한 배지], 이스코브 개변 덜벡코 배지 (Iscove's Modified Dulbecco's Medium ； 이하 「IMDM」 이라고 한다), 또는 덜벡코 개변 이글 배지 (Dulbecco's Modified Eagle Medium ； 이하 「DMEM」 이라고 한다) 에서 계대 배양하지만, 세포 융합의 3 내지 4 일 전에 정상 배지 [예를 들어, 10 ％ FCS 를 포함하는 ASF104 배지 (아지노모토 (주) 사 제조)] 에서 계대 배양하고, 융합 당일에 2 × 107 이상의 세포수를 확보해 둔다.(d) 세포 융합항체 산생 세포와 미엘로마 세포의 융합은, 공지된 방법 (Weir, D. M., Handbook of Experimental Immunology Vol. I. II. III., Blackwell Scientific Publications, Oxford (1987), Kabat, E. A. and Mayer, M. M., Experimental Immunochemistry, Charles C Thomas Publisher Springfield, Illinois (1964) 등) 에 따라, 세포의 생존률을 극도로 저하시키지 않을 정도의 조건하에서 적절히 실시할 수 있다.그러한 방법은, 예를 들어, 폴리에틸렌글리콜 등의 고농도 폴리머 용액 중에서 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 혼합하는 화학적 방법, 전기적 자극을 이용하는 물리적 방법 등을 이용할 수 있다. 이 중, 상기 화학적 방법의 구체예를 나타내면 이하와 같다.즉, 고농도 폴리머 용액으로서 폴리에틸렌글리콜을 사용하는 경우에는, 분자량 1500 ∼ 6000, 바람직하게는 2000 ∼ 4000 의 폴리에틸렌글리콜 용액 중에서, 30 ∼ 40 ℃, 바람직하게는 35 ∼ 38 ℃ 의 온도에서 항체 산생 세포와 미엘로마 세포를 1 ∼ 10 분간, 바람직하게는 5 ∼ 8 분간 혼합한다.(e) 하이브리도마군의 선택상기 세포 융합에 의해 얻어지는 하이브리도마의 선택 방법은 특별히 제한은 없지만, 통상적으로 HAT (히포크산틴·아미노프테린·티미딘) 선택법 (Kohler et al., Nature (1975) 256, p. 495 ； Milstein et al., Nature (1977) 266, p. 550) 이 사용된다.이 방법은 아미노프테린으로 생존할 수 없는 HGPRT 결손주의 미엘로마 세포를 사용하여 하이브리도마를 얻는 경우에 유효하다.즉, 미융합 세포 및 하이브리도마를 HAT 배지에서 배양함으로써, 아미노프테린에 대한 내성을 가진 하이브리도마만을 선택적으로 잔존시키고, 또한 증식시킬 수 있다.(f) 단일 세포 클론으로의 분할 (클로닝)하이브리도마의 클로닝법으로서는, 예를 들어 메틸셀룰로오스법, 연아가로오스법, 한계 희석법 등의 공지된 방법을 이용할 수 있다 (예를 들어 Barbara, B. M. and Stanley, M. S. ： Selected Methods in Cellular Immunology, W. H. Freeman and Company, San Francisco (1980) 참조). 이들의 방법 중, 특히 메틸셀룰로오스법 등의 삼차원 배양법이 바람직하다. 예를 들어, 세포 융합에 의해 형성된 하이브리도마군을 ClonaCell-HY Selection Medium D (StemCell Technologies 사 제조 ＃03804) 등의 메틸셀룰로오스 배지에 현탁하여 배양하고, 형성된 하이브리도마 콜로니를 회수함으로써 모노 클론 하이브리도마의 취득이 가능하다. 회수된 각 하이브리도마 콜로니를 배양하고, 얻어진 하이브리도마 배양 상청 중에 안정적으로 항체가가 확인된 것을 B7-H3 모노클로날 항체 산생 하이브리도마주로서 선택한다.이와 같이 하여 수립된 하이브리도마주의 예로서는, B7-H3 하이브리도마 M30 을 들 수 있다. 또한, 본 명세서 중에 있어서는, B7-H3 하이브리도마 M30 이 산생하는 항체를 「M30 항체」 또는 간단히 「M30」 으로 기재한다.M30 항체의 중사슬은 배열표의 배열 번호 20 에 나타내는 아미노산 배열을 갖는다. 또, M30 항체의 경사슬은 배열표의 배열 번호 21 에 나타내는 아미노산 배열을 갖는다. 또한, 배열표의 배열 번호 20 에 나타내는 중사슬 아미노산 배열 중에서, 1 내지 19 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 시그널 배열이며, 20 내지 141 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 가변 영역이며, 142 내지 471 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 정상 영역이다. 또, 배열표의 배열 번호 21 에 나타내는 경사슬 아미노산 배열 중에서, 1 내지 22 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 시그널 배열이며, 23 내지 130 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 가변 영역이며, 131 내지 235 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 정상 영역이다.(g) 하이브리도마의 배양에 의한 모노클로날 항체의 조제이와 같이 하여 선택된 하이브리도마는, 이것을 배양함으로써, 모노클로날 항체를 효율적으로 얻을 수 있지만, 배양에 앞서, 목적으로 하는 모노클로날 항체를 산생하는 하이브리도마를 스크리닝하는 것이 바람직하다.이 스크리닝에는 그 자체 이미 알려진 방법을 채용할 수 있다.본 발명에 있어서의 항체가의 측정은 예를 들어 상기 (b) 의 항목에서 설명한 ELISA 법에 의해 실시할 수 있다.이상의 방법에 의해 얻은 하이브리도마는 액체 질소 중 또는 -80 ℃ 이하의 냉동고 중에 동결 상태로 보존할 수 있다.클로닝을 완료한 하이브리도마는 배지를 HT 배지로부터 정상 배지로 변경하여 배양된다.대량 배양은 대형 배양병을 사용한 회전 배양, 혹은 스피너 배양으로 실시된다. 이 대량 배양에 있어서의 상청으로부터, 겔 여과 등, 당업자에게 주지의 방법을 이용하여 정제함으로써, 본 발명의 단백질에 특이적으로 결합하는 모노클로날 항체를 얻을 수 있다.또, 동 계통의 마우스 (예를 들어, 상기의 BALB/c), 혹은 Nu/Nu 마우스의 복강 내에 하이브리도마를 주사하고, 그 하이브리도마를 증식시킴으로써, 본 발명의 모노클로날 항체를 대량으로 포함하는 복수를 얻을 수 있다.복강 내에 투여하는 경우에는, 사전 (3 ∼ 7 일 전) 에 2,6,10,14-테트라메틸펜타데칸 (2,6,10,14-tetramethyl pentadecane) (프리스탄) 등의 광물유를 투여하면, 보다 다량의 복수가 얻어진다.예를 들어, 하이브리도마와 동 계통의 마우스의 복강 내에 미리 면역 억제제를 주사하고, T 세포를 불활성화한 후, 20 일 후에 106 ∼ 107 개의 하이브리도마·클론 세포를, 혈청을 포함하지 않는 배지 중에 부유 (0.5 ㎖) 시켜 복강 내에 투여하고, 통상적으로 복부가 팽만하고, 복수가 고인 시점에서 마우스로부터 복수를 채취한다. 이 방법에 의해, 배양액 중에 비해 약 100 배 이상의 농도의 모노클로날 항체가 얻어진다.상기 방법에 의해 얻은 모노클로날 항체는 예를 들어 Weir, D.M. ： Handbook of Experimental Immunology, Vol. I, II, III, Blackwell Scientific Publications, Oxford (1978) 에 기재되어 있는 방법으로 정제할 수 있다.이렇게 하여 얻어지는 모노클로날 항체는 B7-H3 에 대해 높은 항원 특이성을 갖는다.(h) 모노클로날 항체의 검정이렇게 하여 얻어진 모노클로날 항체의 아이소타입 및 서브 클래스의 결정은 이하와 같이 실시할 수 있다.먼저, 동정법으로서는 오크테르로니 (Ouchterlony) 법, ELISA 법, 또는 RIA 법을 들 수 있다.오크테르로니법은 간편하기는 하지만, 모노클로날 항체의 농도가 낮은 경우에는 농축 조작이 필요하다.한편, ELISA 법 또는 RIA 법을 이용한 경우에는, 배양 상청을 그대로 항원 흡착 고상과 반응시키고, 또한 제 2 차 항체로서 각종 이뮤노글로불린 아이소타입, 서브 클래스에 대응하는 항체를 사용함으로써, 모노클로날 항체의 아이소타입, 서브 클래스를 동정하는 것이 가능하다.또, 더욱 간편한 방법으로서, 시판되는 동정용의 키트 (예를 들어, 마우스 타이퍼키트 ； 바이오래드사 제조) 등을 이용할 수도 있다.또한, 단백질의 정량은 포린로우리법, 및 280 nm 에 있어서의 흡광도 [1.4 (OD280) = 이뮤노글로불린 1 mg/㎖] 로부터 산출하는 방법에 의해 실시할 수 있다.또한, (2) 의 (a) 내지 (h) 의 공정을 재차 실시하여 별도로 독립적으로 모노클로날 항체를 취득한 경우에 있어서도, M30 항체와 동등한 세포 상해 활성을 갖는 항체를 취득하는 것이 가능하다. 이와 같은 항체의 일례로서, M30 항체와 동일한 에피토프에 결합하는 항체를 들 수 있다. M30 은 B7-H3 의 세포 외 영역 중의 도메인인 IgC1 도메인 또는 IgC2 도메인에 있어서의 에피토프를 인식하고, IgC1 도메인 혹은 IgC2 도메인 또는 양자에 결합하므로, 특히 당해 에피토프로서는 B7-H3 의 IgC1 도메인 또는 IgC2 도메인에 존재하는 에피토프를 들 수 있다. 새롭게 제작된 모노클로날 항체가 M30 항체의 결합하는 부분 펩티드 또는 부분 입체 구조에 결합하면, 그 모노클로날 항체가 M30 항체와 동일한 에피토프에 결합한다고 판정할 수 있다. 또, M30 항체의 B7-H3 에 대한 결합에 대해 그 모노클로날 항체가 경합하는 (즉, 그 모노클로날 항체가 M30 항체와 B7-H3 의 결합을 방해한다) 것을 확인함으로써, 구체적인 에피토프의 배열 또는 구조가 결정되어 있지 않아도, 그 모노클로날 항체가 M30 항체와 동일한 에피토프에 결합한다고 판정할 수 있다. 에피토프가 동일한 것이 확인된 경우, 그 모노클로날 항체가 M30 항체와 동등한 세포 상해 활성을 가지고 있는 것이 강하게 기대된다.(3) 그 밖의 항체본 발명의 항체에는, 상기 B7-H3 에 대한 모노클로날 항체에 추가하여, 인간에 대한 이종 항원성을 저하시키는 것 등을 목적으로 하여 인위적으로 개변한 유전자 재조합형 항체, 예를 들어, 키메라 (Chimeric) 항체, 인간화 (Humanized) 항체, 인간 항체 등도 포함된다. 이들의 항체는 이미 알려진 방법을 이용하여 제조할 수 있다.키메라 항체로서는, 항체의 가변 영역과 정상 영역이 서로 이종인 항체, 예를 들어 마우스 또는 래트 유래 항체의 가변 영역을 인간 유래의 정상 영역에 접합한 키메라 항체를 들 수 있다 (Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 81, 6851-6855, (1984) 참조).인간화 항체로서는, 상보성 결정 영역 (CDR ； complementarity determining region) 만을 인간 유래의 항체에 삽입한 항체 (Nature (1986) 321, p. 522-525 참조), CDR 이식법에 의해, CDR 의 배열에 추가하여 일부의 프레임 워크의 아미노산 잔기도 인간 항체에 이식한 항체 (국제 공개 팜플렛 WO90/07861) 를 들 수 있다.단, M30 항체 유래의 인간화 항체로서는, M30 항체의 6 종 모든 CDR 배열을 유지하고, 항종양 활성을 갖는 한, 특정의 인간화 항체로 한정되지 않는다. 또한, M30 항체의 중사슬 가변 영역은 배열표의 배열 번호 3 에 나타내는 아미노산 배열로 이루어지는 CDRH1 (NYVMH), 배열 번호 4 에 나타내는 아미노산 배열로 이루어지는 CDRH2 (YINPYNDDVKYNEKFKG), 및 배열 번호 5 에 나타내는 아미노산 배열로 이루어지는 CDRH3 (WGYYGSPLYYFDY) 을 보유하고 있다. 또, M30 항체의 경사슬 가변 영역은 배열표의 배열 번호 6 에 나타내는 아미노산 배열로 이루어지는 CDRL1 (RASSRLIYMH), 배열 번호 7 에 나타내는 아미노산 배열로 이루어지는 CDRL2 (ATSNLAS), 및 배열 번호 8 에 나타내는 아미노산 배열로 이루어지는 CDRL3 (QQWNSNPPT) 을 보유하고 있다.마우스 항체 M30 의 인간화 항체의 실예로서는, (1) 배열표의 배열 번호 9, 10, 11 또는 12 의 20 내지 141 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열, (2) 상기 (1) 의 아미노산 배열에 대해 적어도 95 ％ 이상의 상동성을 갖는 아미노산 배열, 및 (3) 상기 (1) 의 아미노산 배열에 있어서 1 또는 수 개의 아미노산이 결실, 치환 또는 부가된 아미노산 배열 중 어느 하나로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 포함하는 중사슬, 그리고 (4) 배열 번호 13, 14, 15, 16, 17, 18 또는 19 의 21 내지 128 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열, (5) 상기 (4) 의 아미노산 배열에 대해 적어도 95 ％ 이상의 상동성을 갖는 아미노산 배열, 및 (6) 상기 (4) 의 아미노산 배열에 있어서 1 또는 수 개의 아미노산이 결실, 치환 또는 부가된 아미노산 배열 중 어느 하나로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 포함하는 경사슬의 임의의 조합을 들 수 있다.또한, 본 명세서 중에 있어서의 「수 개」란, 1 내지 10 개, 1 내지 9 개, 1 내지 8 개, 1 내지 7 개, 1 내지 6 개, 1 내지 5 개, 1 내지 4 개, 1 내지 3 개, 또는 1 혹은 2 개를 의미한다.또, 본 명세서 중에 있어서의 아미노산의 치환으로서는 보존적 아미노산 치환이 바람직하다. 보존적 아미노산 치환이란, 아미노산 측사슬에 관련이 있는 아미노산 그룹 내에서 생기는 치환이다. 바람직한 아미노산 그룹은 이하와 같다 ： 산성 그룹 = 아스파긴산, 글루탐산 ； 염기성 그룹 = 리신, 아르기닌, 히스티딘 ； 비극성 그룹 = 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판 ； 및 비대전 극성 패밀리 = 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신. 다른 바람직한 아미노산 그룹은 다음과 같다 ： 지방족 하이드록시 그룹 = 세린 및 트레오닌 ； 아미드 함유 그룹 = 아스파라긴 및 글루타민 ； 지방족 그룹 = 알라닌, 발린, 류신 및 이소류신 ； 그리고 방향족 그룹 = 페닐알라닌, 트립토판 및 티로신. 이러한 아미노산 치환은 원래의 아미노산 배열을 갖는 물질의 특성을 저하시키지 않는 범위에서 실시하는 것이 바람직하다.상기 중사슬 및 경사슬의 바람직한 조합의 항체로서는, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 17 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 18 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 19 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체, 그리고 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 141 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 가변 영역을 갖는 중사슬 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 128 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬 가변 영역을 갖는 경사슬로 이루어지는 항체를 들 수 있다.더욱 바람직한 조합의 항체로서는, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 17 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 18 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 19 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 번째의 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 번째의 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 그리고 배열 번호 12 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체.또, 다른 바람직한 조합으로서는, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 17 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 18 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 9 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 19 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 13 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 14 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 15 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체, 그리고 배열 번호 12 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체를 들 수 있다.상기의 중사슬 아미노산 배열 및 경사슬 아미노산 배열과 높은 상동성을 나타내는 배열을 조합함으로써, 상기의 각 항체와 동등한 세포 상해성 활성을 갖는 항체를 선택하는 것이 가능하다. 이와 같은 상동성은 일반적으로는 80 ％ 이상의 상동성이며, 바람직하게는 90 ％ 이상의 상동성이며, 보다 바람직하게는 95 ％ 이상의 상동성이며, 가장 바람직하게는 99 ％ 이상의 상동성이다. 또, 중사슬 또는 경사슬의 아미노산 배열에 1 내지 수 개의 아미노산 잔기가 치환, 결실 또는 부가된 아미노산 배열을 조합하는 것에 의해서도, 상기의 각 항체와 동등한 세포 상해성 활성을 갖는 항체를 선택하는 것이 가능하다.2 종류의 아미노산 배열간의 상동성은 Blast algorithm version 2.2.2 (Altschul, Stephen F., ThomasL. Madden, Alejandro A. Schaffer, Jinghui Zhang, Zheng Zhang, Webb Miller, and David J. Lipman (1997), 「Gapped BLAST and PSI-BLAST ： a new generation of protein database search programs」, Nucleic Acids Res. 25 ： 3389-3402) 의 디폴트 파라미터를 사용함으로써 결정할 수 있다. Blast algorithm 은 인터넷으로 www.ncbi.nlm.nih.gov/blast 에 액세스하는 것에 의해서도 사용할 수 있다.또한, 배열표의 배열 번호 9, 10, 11 또는 12 에 나타내는 중사슬 아미노산 배열 중에서, 1 내지 19 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 시그널 배열이며, 20 내지 141 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 가변 영역이며, 142 내지 471 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 정상 영역이다. 배열 번호 9 의 배열은 도 3 에, 배열 번호 10 의 배열은 도 4 에, 배열 번호 11 의 배열은 도 5 에, 배열 번호 12 의 배열은 도 6 에 각각 기재되어 있다.또, 배열표의 배열 번호 13, 14, 15, 16, 17, 18 또는 19 에 나타내는 경사슬 아미노산 배열 중에서, 1 내지 20 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 시그널 배열이며, 21 내지 128 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 가변 영역이며, 129 내지 233 번째의 아미노산 잔기로 이루어지는 아미노산 배열은 정상 영역이다. 배열 번호 13 의 배열은 도 7 에, 배열 번호 14 의 배열은 도 8 에, 배열 번호 15 의 배열은 도 9 에, 배열 번호 16 의 배열은 도 10 에, 배열 번호 17 의 배열은 도 11 에, 배열 번호 18 의 배열은 도 12 에, 배열 번호 19 의 배열은 도 13 에 각각 기재되어 있다.본 발명의 항체로서는, 또한, M30 항체와 동일한 에피토프에 결합하는, 인간 항체를 들 수 있다. 항 B7-H3 인간 항체란, 인간 염색체 유래의 항체의 유전자 배열만을 갖는 인간 항체를 의미한다. 항 B7-H3 인간 항체는 인간 항체의 중사슬과 경사슬의 유전자를 포함하는 인간 염색체 단편을 갖는 인간 항체 산생 마우스를 사용한 방법 (Tomizuka, K. et al., Nature Genetics (1997) 16, p. 133-143, ； Kuroiwa, Y. et. al., Nucl. Acids Res. (1998) 26, p. 3447-3448 ； Yoshida, H. et. al., Animal Cell Technology ： Basic and Applied Aspects vol. 10, p. 69-73 (Kitagawa, Y., Matsuda, T. and Iijima, S. eds.), Kluwer Academic Publishers, 1999. ； Tomizuka, K. et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2000) 97, p. 722-727 등을 참조.) 에 의해 취득할 수 있다.이와 같은 인간 항체 산생 마우스는, 구체적으로는, 내재성 면역 글로불린 중사슬 및 경사슬의 유전자 자리가 파괴되고, 대신에 효모 인공 염색체 (Yeast artificial chromosome, YAC) 벡터 등을 개재하여 인간 면역 글로불린 중사슬 및 경사슬의 유전자 자리가 도입된 유전자 재조합 동물을, 녹아웃 동물 및 트랜스제닉 동물의 제작, 및 이들의 동물끼리를 교배시킴으로써 만들어 낼 수 있다.또, 유전자 재조합 기술에 의해, 그러한 인간 항체의 중사슬 및 경사슬의 각각을 코드하는 cDNA, 바람직하게는 그 cDNA 를 포함하는 벡터에 의해 진핵 세포를 형질 전환하고, 유전자 재조합 인간 모노클로날 항체를 산생하는 형질 전환 세포를 배양함으로써, 이 항체를 배양 상청 중에서 얻을 수도 있다.여기서, 숙주로서는 예를 들어 진핵 세포, 바람직하게는 CHO 세포, 림프구나 미엘로마 등의 포유 동물 세포를 사용할 수 있다.또, 인간 항체 라이브러리에서 선별한 파지 디스플레이 유래의 인간 항체를 취득하는 방법 (Wormstone, I. M. et. al, Investigative Ophthal㏖ogy ＆ Visual Science. (2002) 43 (7), p. 2301-2308 ； Carmen, S. et. al., Briefings in Functional Genomics and Proteomics (2002), 1 (2), p. 189-203 ； Siriwardena, D. et. al., Ophthal㏖ogy (2002) 109 (3), p. 427-431 등 참조.) 도 알려져 있다.예를 들어, 인간 항체의 가변 영역을 한 개 사슬 항체 (scFv) 로서 파지 표면에 발현시켜, 항원에 결합하는 파지를 선택하는 파지 디스플레이법 (Nature Biotechnology (2005), 23, (9), p. 1105-1116) 을 이용할 수 있다.항원에 결합함으로써 선택된 파지의 유전자를 해석함으로써, 항원에 결합하는 인간 항체의 가변 영역을 코드하는 DNA 배열을 결정할 수 있다.항원에 결합하는 scFv 의 DNA 배열이 밝혀지면, 당해 배열을 갖는 발현 벡터를 제작하고, 적당한 숙주에 도입하여 발현시킴으로써 인간 항체를 취득할 수 있다 (WO92/01047, WO92/20791, WO93/06213, WO93/11236, WO93/19172, WO95/01438, WO95/15388, Annu. Rev. Immunol (1994) 12, p. 433-455, Nature Biotechnology (2005) 23 (9), p.1105-1116).새롭게 제작된 인간 항체가 M30 항체의 결합하는 부분 펩티드 또는 부분 입체 구조에 결합하면, 그 인간 항체가 M30 항체와 동일한 에피토프에 결합한다고 판정할 수 있다. 또, M30 항체의 B7-H3 에 대한 결합에 대해 그 인간 항체가 경합하는 (즉, 그 인간 항체가 M30 항체와 B7-H3 의 결합을 방해한다) 것을 확인함으로써, 구체적인 에피토프의 배열 또는 구조가 결정되어 있지 않아도, 그 인간 항체가 M30 항체와 동일한 에피토프에 결합한다고 판정할 수 있다. 에피토프가 동일한 것이 확인된 경우, 그 인간 항체가 M30 항체와 동등한 세포 상해 활성을 가지고 있는 것이 강하게 기대된다.이상의 방법에 의해 얻어진 키메라 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체는, 공지된 방법 등에 의해 항원에 대한 결합성을 평가하여, 바람직한 항체를 선발할 수 있다.항체의 성질을 비교할 때의 다른 지표의 일례로서는, 항체의 안정성을 들 수 있다. 시차주사 칼로리메트리 (DSC) 는 단백의 상대적 구조 안정성이 좋은 지표가 되는 열변성 중점 (Tm) 을 재빠르게, 또 정확하게 측정할 수 있는 장치이다. DSC 를 사용하여 Tm 값을 측정하고, 그 값을 비교함으로써, 열안정성의 차이를 비교할 수 있다. 항체의 보존 안정성은 항체의 열안정성과 어느 정도의 상관을 나타내는 것이 알려져 있고 (Lori Burton, et. al., Pharmaceutical Development and Technology (2007) 12, p. 265-273), 열안정성을 지표로, 바람직한 항체를 선발할 수 있다. 항체를 선발하기 위한 다른 지표로서는, 적절한 숙주 세포에 있어서의 수량이 높은 것, 및 수용액 중에서의 응집성이 낮은 것을 들 수 있다. 예를 들어 수량이 가장 높은 항체가 가장 높은 열안정성을 나타낸다고는 할 수 없기 때문에, 이상에 기술한 지표에 기초하여 종합적으로 판단하여, 인간에의 투여에 가장 적합한 항체를 선발할 필요가 있다.본 발명의 항체에는 항체의 수식체도 포함된다. 당해 수식체란, 본 발명의 항체에 화학적 또는 생물학적인 수식이 실시되어 이루어지는 것을 의미한다. 화학적인 수식체에는, 아미노산 골격에의 화학 부분의 결합, N-결합 또는 O-결합 탄수화물 사슬의 화학 수식체 등이 포함된다. 생물학적인 수식체에는, 번역 후 수식 (예를 들어, N-결합 또는 O-결합에의 당사슬 부가, N 말 또는 C 말의 프로세싱, 탈아미드화, 아스파르트산의 이성화, 메티오닌의 산화) 된 것, 원핵 생물 숙주 세포를 사용하여 발현시킴으로써 N 말에 메티오닌 잔기가 부가된 것 등이 포함된다. 또, 본 발명의 항체 또는 항원의 검출 또는 단리를 가능하게 하기 위해서 표식된 것, 예를 들어, 효소 표식체, 형광 표식체, 어피니티 표식체도 이러한 수식물의 의미에 포함된다. 이와 같은 본 발명의 항체의 수식물은 원래의 본 발명의 항체의 안정성 및 혈중 체류성의 개선, 항원성의 저감, 이러한 항체 또는 항원의 검출 또는 단리 등에 유용하다.또, 본 발명의 항체에 결합하고 있는 당사슬 수식을 조절하는 것 (글리코실화, 탈푸코오스화 등) 에 의해, 항체 의존성 세포 상해 활성을 증강하는 것이 가능하다. 항체의 당사슬 수식의 조절 기술로서는, WO99/54342, WO00/61739, WO02/31140 등이 알려져 있지만, 이들로 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 항체에는 당해 당사슬 수식이 조절된 항체도 포함된다.항체 유전자를 일단 단리한 후, 적당한 숙주에 도입하여 항체를 제작하는 경우에는, 적당한 숙주와 발현 벡터의 조합을 사용할 수 있다. 항체 유전자의 구체예로서는, 본 명세서에 기재된 항체의 중사슬 배열을 코드하는 유전자, 및 경사슬 배열을 코드하는 유전자를 조합한 것을 들 수 있다. 숙주 세포를 형질 전환할 때에는, 중사슬 배열 유전자와 경사슬 배열 유전자는, 동일한 발현 벡터에 삽입되어 있는 것이 가능하고, 또 각각의 발현 벡터에 삽입되어 있는 것도 가능하다.진핵 세포를 숙주로서 사용하는 경우, 동물 세포, 식물 세포, 진핵 미생물을 사용할 수 있다. 특히 동물 세포로서는, 포유류 세포, 예를 들어, 원숭이의 세포인 COS 세포 (Gluzman, Y. Cell (1981) 23, p. 175-182, ATCC CRL-1650), 마우스 선유아 세포 NIH3T3 (ATCC No. CRL-1658) 이나 차이니즈·햄스터 난소 세포 (CHO 세포, ATCC CCL-61) 의 디하이드로 엽산 환원 효소 결손주 (Urlaub, G. and Chasin, L. A. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. (1980) 77, p. 4126-4220) 를 들 수 있다.원핵 세포를 사용하는 경우에는, 예를 들어, 대장균, 고초균을 들 수 있다.이들의 세포에 목적으로 하는 항체 유전자를 형질 전환에 의해 도입하고, 형질 전환된 세포를 in vitro 에서 배양함으로써 항체가 얻어진다. 당해 배양에 있어서는 항체의 배열에 의해 수량이 상이한 경우가 있고, 동등한 결합 활성을 가지는 항체 중에서 수량을 지표로 의약으로서의 생산이 용이한 것을 선별하는 것이 가능하다. 따라서, 본 발명의 항체에는, 상기 형질 전환된 숙주 세포를 배양하는 공정, 및 당해 공정에서 얻어진 배양물로부터 목적으로 하는 항체 또는 당해 항체의 기능성 단편을 채취하는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 당해 항체의 제조 방법에 의해 얻어지는 항체도 포함된다.또한, 포유류 배양 세포에서 생산되는 항체의 중사슬의 카르복실 말단의 리신 잔기가 결실되는 것이 알려져 있고 (Journal of Chromatography A, 705 ： 129-134 (1995)), 또, 동 중사슬 카르복실 말단의 글리신, 리신의 2 아미노산 잔기가 결실되고, 새롭게 카르복실 말단에 위치하는 프롤린 잔기가 아미드화되는 것이 알려져 있다 (Analytical Biochemistry, 360 ： 75-83 (2007)). 그러나, 이들의 중사슬 배열의 결실 및 수식은 항체의 항원 결합능 및 이펙터 기능 (보체의 활성화나 항체 의존성 세포 장해 작용 등) 에는 영향을 미치지 않는다. 따라서, 본 발명에는 당해 수식을 받은 항체 및 당해 항체의 기능성 단편도 포함되고, 중사슬 카르복실 말단에 있어서 1 또는 2 개의 아미노산이 결실된 결실체, 및 아미드화된 당해 결실체 (예를 들어, 카르복실 말단 부위의 프롤린 잔기가 아미드화된 중사슬) 등을 들 수 있다. 단, 항원 결합능 및 이펙터 기능이 유지되어 있는 한, 본 발명에 관련된 항체의 중사슬의 카르복실 말단의 결실체는 상기의 종류로 한정되지 않는다. 본 발명에 관련된 항체를 구성하는 2 개의 중사슬은 완전 길이 및 상기의 결실체로 이루어지는 군에서 선택되는 중사슬 중 어느 1 종이어도 되고, 어느 2 종을 조합한 것이어도 된다. 각 결실체의 양비는 본 발명에 관련된 항체를 산생하는 포유류 배양 세포의 종류 및 배양 조건에 영향을 받을 수 있지만, 본 발명에 관련된 항체의 주성분으로서는 2 개의 중사슬의 쌍방에서 카르복실 말단의 하나의 아미노산 잔기가 결실되어 있는 경우를 들 수 있다.본 발명의 항체의 아이소타입으로서는, 예를 들어 IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4) 등을 들 수 있지만, 바람직하게는 IgG1 또는 IgG2 를 들 수 있다.항체의 기능으로서는, 일반적으로는 항원 결합 활성, 항원의 활성을 중화하는 활성, 항원의 활성을 증강하는 활성, 항체 의존성 세포 상해 (ADCC) 활성 및 보체 의존성 세포 상해 (CDC) 활성을 들 수 있지만, 본 발명에 관련된 항체가 갖는 기능은 B7-H3 에 대한 결합 활성이며, 바람직하게는 항체 의존성 세포 매개식 작용 (ADCP) 활성이며, 보다 바람직하게는 종양 세포에 대한 ADCP 활성을 개재한 세포 상해 활성 (항종양 활성) 이다. 또한, 본 발명의 항체는, ADCP 활성에 더하여, ADCC 활성 및/또는 CDC 활성을 겸비하고 있어도 된다.얻어진 항체는 균일하게까지 정제할 수 있다. 항체의 분리, 정제는 통상적인 단백질로 사용되고 있는 분리, 정제 방법을 사용하면 된다. 예를 들어 칼럼 크로마토그래피, 필터 여과, 한외 여과, 염석, 투석, 조제용 폴리아크릴아미드겔 전기 영동, 등전점 전기 영동 등을 적절히 선택, 조합하면, 항체를 분리, 정제할 수 있지만 (Strategies for Protein Purification and Characterization ： A Laboratory Course Manual, Daniel R. Marshak et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1996) ； Antibodies ： A Laboratory Manual. Ed Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory (1988)), 이들로 한정되는 것은 아니다.크로마토그래피로서는, 어피니티 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 소수성 크로마토그래피, 겔 여과 크로마토그래피, 역상 크로마토그래피, 흡착 크로마토그래피 등을 들 수 있다.이들의 크로마토그래피는 HPLC 나 FPLC 등의 액체 크로마토그래피를 사용하여 실시할 수 있다.어피니티 크로마토그래피에 사용하는 칼럼으로서는, 프로테인 A 칼럼, 프로테인 G 칼럼을 들 수 있다. 예를 들어 프로테인 A 칼럼을 사용한 칼럼으로서, Hyper D, POROS, Sepharose F. F. (파르마시아) 등을 들 수 있다.또 항원을 고정화한 담체를 사용하여, 항원에의 결합성을 이용하여 항체를 정제하는 것도 가능하다.[항종양성 화합물]본 발명의 항체-약물 콘주게이트에 결합되는 항종양성 화합물에 대해 기술한다. 항종양성 화합물로서는, 항종양 효과를 갖는 화합물로서, 링커 구조에 결합할 수 있는 치환기, 부분 구조를 갖는 것이면 특별히 제한은 없다. 항종양성 화합물은 링커의 일부 또는 전부가 종양 세포 내에서 절단되어 항종양성 화합물 부분이 유리되어 항종양 효과가 발현된다. 링커가 약물과의 결합 부분에서 절단되면 항종양성 화합물이 본래의 구조에서 유리되고, 그 본래의 항종양 효과가 발휘된다.항종양성 화합물로서는, 예를 들어, 독소르비신, 다우노르비신, 마이토마이신 C, 블레오마이신, 시클로시티딘, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 메토트렉세이트, 백금계 항종양제 (시스플라틴 혹은 그 유도체), 택솔 혹은 그 유도체, 캄프토테신 혹은 그 유도체 (일본 공개특허공보 평6-87746호에 기재된 항종양제) 등을 들 수 있다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트에 있어서는, 캄프토테신 유도체인 엑사테칸 ((1S,9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-2,3-디하이드로-9-하이드록시-4-메틸-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(9H,15H)-디온 ； 다음 식：)[화학식 43]을 바람직하게 사용할 수 있다. 이 엑사테칸은 우수한 항종양 활성을 가지고 있지만, 항종양약으로서 시판되기에는 이르지 않았다. 동 화합물은 공지된 방법으로 용이하게 취득할 수 있고, 1 위치의 아미노기를 링커 구조에의 결합 부위로서 바람직하게 사용할 수 있다. 또, 엑사테칸은 링커의 일부가 결합한 상태로 종양 세포 내에서 유리되는 경우도 있지만, 이와 같은 상태에서도 우수한 항종양 효과가 발휘되는 우수한 화합물이다.항체-약물 콘주게이트에 있어서, 항체 1 분자에 대한 약물의 결합수는 그 유효성, 안전성에 영향을 미치는 중요 인자이다. 항체-약물 콘주게이트의 제조는, 약물의 결합수가 일정한 수가 되도록, 반응시키는 원료·시약의 사용량 등의 반응 조건을 규정하여 실시되지만, 저분자 화합물의 화학 반응과는 상이하고, 상이한 수의 약물이 결합한 혼합물로서 얻어지는 것이 통상적이다. 항체 1 분자에 대한 약물의 결합수는 평균치, 즉, 평균 약물 결합수로서 특정되어 표기된다. 본 발명에서도 원칙으로서 언급이 없는 한, 즉, 상이한 약물 결합수를 가지는 항체-약물 콘주게이트 혼합물에 포함되는 특정의 약물 결합수를 가지는 항체-약물 콘주게이트를 나타내는 경우를 제외하고, 약물의 결합수는 평균치를 의미한다. 항체 분자에 대한 엑사테칸의 결합수는 컨트롤 가능하고, 1 항체당 약물 평균 결합수로서, 1 내지 10 개 정도의 엑사테칸을 결합시킬 수 있지만, 바람직하게는 2 내지 8 개이며, 보다 바람직하게는 3 내지 8 개이다. 또한, 당업자이면 본원의 실시예의 기재로부터 항체에 필요한 수의 약물을 결합시키는 반응을 설계할 수 있고, 엑사테칸의 결합수를 컨트롤한 항체를 취득할 수 있다.엑사테칸은 캄프토테신 구조를 가지므로, 산성 수성 매체 중 (예를 들어 pH 3 정도) 에서는 락톤 고리가 형성된 구조 (폐환체) 에 평형이 치우치고, 한편, 염기성 수성 매체 중 (예를 들어 pH 10 정도) 에서는 락톤 고리가 개환된 구조 (개환체) 에 평형이 치우치는 것이 알려져 있다. 이와 같은 폐환 구조 및 개환 구조에 대응하는 엑사테칸 잔기를 도입한 약물 콘주게이트여도 동등한 항종양 효과가 기대되고, 어느 것이나 본 발명의 범위에 포함되는 것은 말할 필요도 없다.[링커 구조]본 발명의 항체-약물 콘주게이트에 있어서 항종양성 약물을 항체에 결합하는 링커 구조에 대해 기술한다. 당해 링커는 다음 식 ： -L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-의 구조를 가지고 있고, 항체는 L1 의 말단, L2 가 결합하는 것과는 반대측의 말단에서 결합하고, 항종양성 약물은 Lc 의 말단, Lb 가 결합하는 것과는 반대측의 말단에서 결합한다.n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내지만, 바람직하게는 1 내지 5 의 정수이며, 보다 바람직하게는 1 내지 3 이다.1. L1L1 은-(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)-,-CH2-C(=O)-NH-(CH2)n3-C(=O)-,-C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)-, 또는-C(=O)-(CH2)n4-C(=O)-의 각 구조로 나타내는 구조의 링커이다. 여기서, n2 는 2 내지 8 의 정수이며, n3 은 1 내지 8 의 정수이며, n4 는 1 내지 8 의 정수이다.링커 L1 중의 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)- 로 나타내는 구조의 링커에 있어서, 「-(Succinimid-3-yl-N)-」 은 다음 식[화학식 44]으로 나타내는 구조를 갖는다. 이 부분 구조에 있어서의 3 위치가 항체에 대한 결합 부위이다. 또한 이 3 위치에서의 항체와의 결합은 티오에테르를 형성하여 결합하는 것이 특징이다. 한편, 이 구조 부분의 1 위치의 질소 원자는 이 구조가 포함되는 링커 내에 존재하는 메틸렌의 탄소 원자와 결합한다. 즉 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)-L2- 는 다음 식으로 나타내는 구조이다 (여기서, 「항체 -S-」 는 항체 유래이다.).[화학식 45]식 중, n2 는 2 내지 8 의 정수이지만, 바람직하게는 2 내지 5 이다.L1 중의 -CH2-C(=O)-NH-(CH2)n3-C(=O)- 로 나타내는 구조의 링커에 있어서, n3 은 1 내지 8 의 정수이지만, 바람직하게는 2 내지 6 이다. 이 링커는 항체와는 말단의 메틸렌의 탄소 원자 상에서 결합하지만, 이전과 마찬가지로 티오에테르를 형성하여 결합하는 다음의 구조를 갖는다 (여기서, 「항체 -S-」 는 항체 유래이다.) ： 항체 -S-CH2-C(=O)-NH-(CH2)n3-C(=O)-L2-.L1 중의 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 로 나타내는 구조의 링커이지만, 여기서 「-(N-ly-3-diminiccuS)-」 는 다음 식 ： [화학식 46]으로 나타내는 구조를 갖는다. 이 구조 부분에 있어서, 1 위치의 질소 원자는 동 구조를 포함하는 링커 내에 존재하는 메틸렌탄소 원자와 결합한다. 3 위치의 탄소 원자는 링커 L2 중의 -S-(CH2)n6-C(=O)- 와, 그 말단의 황 원자에 있어서 결합한다. 또한, 이 L2 의 링커인 -S-(CH2)n6-C(=O)- 는 L1 링커 중의 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 와만 조합된 링커 구조를 형성한다. 여기서, 링커에 포함되는 「-cyc.Hex(1,4)-」 는 1,4-시클로헥사렌기를 나타낸다. 링커 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 는 항체와는 말단의 카르보닐탄소에서 아미드 결합을 형성하여 결합한다 (다음 식 ； 여기서, 「항체 -NH-」 는 항체 유래이다.).[화학식 47]이 아미드 결합을 형성하는 항체의 아미노기로서는 항체의 리신 잔기의 측사슬의 말단의 아미노기, 혹은 항체 N 말단의 아미노기이면 된다. 또한, 당해 구조의 링커는 아미드 결합 외에, 항체의 아미노산의 수산기와 에스테르 결합을 형성하여 결합할 수도 있다.또, 당해 링커에 포함되는 「-cyc.Hex(1,4)-」 구조 부분이지만, 1,4-시클로헥사렌기 외에, 이것 이외의 2 가의 포화 고리형 알킬렌기인, 시클로부틸렌기, 시클로펜틸렌기, 시클로헵타렌기, 시클로옥타렌기 등의 2 가의 고리형 포화 탄화수소기여도 되고, 페닐렌기, 나프틸렌기 등의, 2 가의 방향족 탄화수소기여도 되고, 또, 5 원자 고리, 6 원자 고리의 포화, 부분 포화, 혹은 방향족인, 1 또는 2 의 복소 원자를 포함하는 2 가의 복소 고리기여도 된다. 나아가서는, 탄소수 1 내지 4 의 2 가의 알킬렌기여도 된다. 또한, 2 가기에 대한 결합은 인접한 위치이거나 떨어진 위치이거나 어느 것이어도 된다.링커 L1 중의 -C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 로 나타내는 구조의 링커에 있어서, n4 는 1 내지 8 의 정수이지만, 바람직하게는 2 내지 6 이다. 이 링커도, 상기의 링커와 마찬가지로, 말단의 카르보닐기에 있어서 항체의 아미노기와 아미드 결합을 형성하여 결합한다 (다음 식 ； 당해 구조에 있어서 「항체 -NH-」 는 항체 유래이다.).항체 -NH-C(=O)-(CH2)n4-C(=O)-L2-.링커 L1 의 구체예로서는,등을 들 수 있다 (Aryl 은 2 가의 방향족 탄화수소기, cyc.Het 는 2 가의 고리형 복소 고리기를 나타낸다.).2. L2링커 L2 는-NH-(CH2CH2O)n5-CH2-CH2-C(=O)-, 또는-S-(CH2)n6-C(=O)-, 로 나타내는 구조의 링커이지만, 링커 L2 는 존재하지 않아도 되고, 이 경우 L2 는 단결합이 된다. 또, n5 는 1 내지 6 의 정수이며, n6 은 1 내지 6 의 정수이다.링커 L2 중의, -NH-(CH2CH2O)n5-CH2-CH2-C(=O)- 로 나타내는 구조의 링커에 있어서, n5 는 1 내지 6 의 정수이지만, 바람직하게는 2 내지 4 이다. 당해 링커는 말단의 아미노기로 링커 L1 에 결합하고, 반대의 말단의 카르보닐기에서 링커 LP 와 결합한다.링커 L2 중의, -S-(CH2)n6-C(=O)- 에 있어서, n6 은 1 내지 6 의 정수이지만, 바람직하게는 2 내지 4 이다.링커 L2 의 구체예로서는,등을 들 수 있다.또한 링커 L2 가 -S-(CH2)n6-C(=O)- 의 경우, 조합되는 링커 L1 은 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 이므로, -L1-L2- 링커의 구체예로서는,등을 들 수 있다.3. LP링커 LP 는 2 내지 7 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기이다. 즉, 2 내지 6 개의 아미노산이 펩티드 결합한 올리고펩티드의 잔기에 의해 구성된다. 링커 LP 는 N 말단에 있어서 링커 L2 에 결합하고, C 말단에 있어서 링커의 -NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 부분의 아미노기에 결합한다. 링커 LP 를 구성하는 아미노산은 특별히 한정되는 경우는 없지만, 예를 들어, L- 또는 D-아미노산이며, 바람직하게는 L-아미노산이다. 또, α-아미노산 외에, β-알라닌, ε-아미노카프로산, γ-아미노부티르산 등의 구조의 아미노산이어도 되고, 나아가서는 예를 들어 N-메틸화된 아미노산 등의 비천연형의 아미노산이어도 된다.링커 LP 의 아미노산 배열은 특별히 한정되지 않지만, 구성하는 아미노산으로서 페닐알라닌 (Phe ； F), 티로신 (Tyr ； Y), 류신 (Leu ； L), 글리신 (Gly ； G), 알라닌 (Ala ； A), 발린 (Val ； V), 리신 (Lys ； K), 시톨린 (Cit), 세린 (Ser ； S), 글루탐산 (Glu ； E), 아스파르트산 (Asp ； D) 등을 들 수 있다. 이들 중에서 바람직하게는, 페닐알라닌, 글리신, 발린, 리신, 시톨린, 세린, 글루탐산, 아스파르트산을 들 수 있다. 아미노산의 종류에 따라, 약물 유리의 패턴을 컨트롤할 수 있다. 아미노산의 수는 2 내지 7 개면 된다.링커 LP 의 구체예로서를 들 수 있다 [상기의 「(D-)D」 는 D-아스파르트산을 의미한다]. 본 발명 항체-약물 콘주게이트의 특히 바람직한 링커 LP 로서 -GGFG- 를 들 수 있다.링커의 -NH-(CH2)n1- 로 나타내는 구조 부분이지만, n1 은 0 내지 6 의 정수이지만, 바람직하게는 1 내지 5 의 정수이며, 보다 바람직하게는 1 내지 3 이다. 이 부분의 아미노기 부분이 링커 LP 의 C 말단에 결합한다.4. La링커의 La 는 -C(=O)-NH-, -NR1-(CH2)n7-, -O- 의 각 구조 중 어느 것이거나, 또는 단결합이지만, n7 은 1 내지 6 의 정수이며, R1 은 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)n8-COOH, 또는 -(CH2)n9-OH 이며, n8 은 정수의 1 내지 4 이며, n9 는 1 내지 6 의 정수이다.링커의 La 중 아미드 구조인 -C(=O)-NH- 는 질소 원자측이 Lb 에 결합한다. 링커의 La 중의 -NR1-(CH2)n7- 인 구조 부분에 있어서, n7 은 1 내지 6 의 정수이며, 바람직하게는 1 내지 3 이다. 당해 부분은 메틸렌측이 Lb 에 결합한다. R1 은 수소 원자 또는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기이지만, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기의 경우에는, 직사슬형이거나 분지 사슬형이어도 된다. 예를 들어, 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기, 이소부틸기, sec-부틸기, tert-부틸기, 펜틸기, 이소펜틸기, 2-메틸부틸기, 네오펜틸기, 1-에틸프로필기, 헥실기, 이소헥실기, 4-메틸펜틸기, 3-메틸펜틸기, 2-메틸펜틸기, 1-메틸펜틸기, 3,3-디메틸부틸기, 2,2-디메틸부틸기, 1,1-디메틸부틸기, 1,2-디메틸부틸기, 1,3-디메틸부틸기, 2,3-디메틸부틸기 및 2-에틸부틸기 등을 들 수 있다. 이들 중에서 바람직하게는, 메틸기 또는 에틸기이다. R1 이 -(CH2)n8-COOH 로 나타내는 구조일 때, n8 은 정수의 1 내지 4 이지만, 바람직하게는 1 또는 2 이다. R1 이 -(CH2)n9-OH 로 나타내는 구조일 때, n9 는 1 내지 6 의 정수이지만, 바람직하게는 1 또는 2 이다. R1 로서는, 수소 원자, 메틸기, 에틸기, -CH2COOH, -CH2CH2-COOH, 또는 -CH2CH2-OH 가 바람직하고, 보다 바람직하게는, 수소 원자, 메틸기, -CH2COOH 이다. 더욱 바람직하게는 수소 원자이다. 또한, 링커의 La 부분은 -O-, 또는 단결합이어도 된다.5. Lb링커의 Lb 는 -CR2(-R3)-, -O-, -NR4- 의 각 구조 중 어느 것이거나, 또는 단결합이며, R2 및 R3 은, 각각 독립적으로, 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)na-NH2, -(CH2)nb-COOH, 또는 -(CH2)nc-OH 이며, R4 는 수소 원자 또는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기이며, na 는 0 내지 6 의 정수이며, nb 는 정수의 1 내지 4 이며, nc 는 정수의 0 내지 4 이지만, na 또는 nc 가 0 일 때는, R2 및 R3 은 동일하게는 되지 않는다.R2 및 R3 이 알킬기일 때, 이 알킬기는 R1 에 있어서의 알킬기와 동일하게 해석되는 알킬기이다. R2 및 R3 이 -(CH2)na-NH2 의 구조일 때, na 는 0 내지 6 의 정수이지만, 바람직하게는 0 이거나, 혹은 3 내지 5 이다. 또한, na 가 0 일 때는 R2 및 R3 은 동일하게는 되지 않는다. R2 및 R3 이 -(CH2)nb-COOH 의 구조일 때, nb 는 정수의 1 내지 4 이지만, 바람직하게는 1 또는 2 이다. R2 및 R3 이 -(CH2)nc-OH 의 구조일 때, nc 는 정수의 0 내지 4 이지만, 바람직하게는 1 또는 2 이다.R2 및 R3 으로서 바람직하게는, 수소 원자, 메틸기, 에틸기, -NH2, -CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2COOH, -CH2CH2-COOH, -CH2OH, 또는 -CH2CH2-OH 가 바람직하고, 보다 바람직하게는, 수소 원자, 메틸기, -NH2, -CH2CH2CH2CH2NH2, -CH2COOH, -CH2CH2-COOH, -CH2OH, 또는 -CH2CH2-OH 이다. 더욱 바람직하게는 수소 원자이다.R4 가 탄소수 1 내지 6 의 알킬기이며, 이 알킬기는 R1 에 있어서의 알킬기와 동일하게 해석되는 알킬기이다. R4 로서는 수소 원자 또는 메틸기가 바람직하고, 보다 바람직하게는 수소 원자이다.링커의 -NH-(CH2)n1-La-Lb- 로 나타내는 구조의 구체예로서,등을 들 수 있다.이들 중 바람직하게는,등을 들 수 있다.보다 바람직하게는,를 들 수 있다.더욱 바람직하게는,이다.6. Lc링커의 Lc 는 -CH2- 또는 -C(=O)- 이다. 당해 링커에 있어서 항종양성 화합물과 결합한다. 링커의 Lc 로서는, -C(=O)- 가 보다 바람직하다.링커의 -NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc 는 사슬 길이로서 4 내지 7 원자의 사슬 길이인 것이 바람직하지만, 더욱 바람직하게는 5 또는 6 원자의 사슬 길이를 갖는 것이다.본 발명의 항체-약물 콘주게이트는 종양 세포 내로 이동한 후에는 링커 부분이 절단되고, NH2-(CH2)n1-La-Lb-Lc-(NH-DX) 로 나타내는 구조의 약물 유도체가 유리되어 항종양 작용을 발현한다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트로부터 유리되어 항종양 효과를 발현하는 항종양성 유도체로서는, 먼저 예시한 링커의 -NH-(CH2)n1-La-Lb- 로 나타내는 구조에 Lc 를 결합시켜, 말단이 아미노기가 된 구조 부분을 갖는 항종양성 유도체를 들 수 있지만, 특히 바람직한 것은 다음의 것이다 ： 또한, NH2-CH2-O-CH2-C(=O)-(NH-DX) 의 경우에는 동 분자 내에 있는 아미날 구조가 불안정하기 때문에, 추가로 자기 분해하여HO-CH2-C(=O)-(NH-DX)가 유리되는 것이 확인되었다. 이들의 화합물은 본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조 중간체로서도 바람직하게 사용할 수 있다.약물을 엑사테칸으로 하는 본 발명의 항체-약물 콘주게이트에 있어서는, 하기의 구조의 약물-링커 구조 부분 [-L1-L2-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-(NH-DX)] 를 항체에 결합시킨 것이 바람직하다. 이들의 약물-링커 구조 부분은, 1 항체당 평균 결합수로서, 1 내지 10 을 결합시키면 되지만, 바람직하게는 2 내지 8 이며, 보다 바람직하게는 3 내지 8 이다.이들 중에서 보다 바람직하게는, 다음의 것이다.더욱 바람직하게는, 다음의 것이다.본원의 항체-약물 콘주게이트에 있어서, 항체와 약물을 결합하는 링커 구조는, 지금까지 기술한 링커 각 부에 있어서 나타낸 바람직한 구조의 것을 결합함으로써 바람직한 링커를 구축할 수 있다. 이와 같은 링커 구조로서 이하의 구조의 것을 바람직하게 사용할 수 있다. 또한 구조의 좌단이 항체와의 결합 부위이며, 우단이 약물과의 결합 부위이다.이들 중에서 보다 바람직하게는, 다음의 것이다.또한, 바람직하게는, 다음의 것을 들 수 있다.[제조 방법]다음으로, 본 발명의 항체-약물 콘주게이트 혹은 그 제조 중간체의 대표적인 제조 방법에 대해 설명한다. 또한, 이하에 있어서, 화합물을 나타내기 위해, 각 반응식 중에 나타내는 화합물의 번호를 사용한다. 즉, 「식 (1) 의 화합물」, 「화합물 (1)」 등으로 칭한다. 또 이것 이외의 번호의 화합물에 대해서도 동일하게 기재한다.1. 제조 방법 1식 (1) 로 나타내는 항체-약물 콘주게이트 중, 티오에테르를 개재하여 항체와 링커 구조가 결합하고 있는 것은 예를 들어 하기 방법에 의해 제조할 수 있다.[화학식 48][식 중, AB 는 술프하이드릴기를 갖는 항체를 나타내고, L1' 는, L1 로 나타내는 링커 구조에 있어서, 링커 말단이 말레이미딜기 (다음 식)[화학식 49]로 된 구조이거나 (여기서, 질소 원자가 결합 부위이다.), 또는 말단이 할로겐이 된 구조의 링커를 나타내지만, L1 중 -(Succinimid-3-yl-N)-(CH2)n2-C(=O)- 에 있어서 -(Succinimid-3-yl-N)- 부분이 말레이미딜기로 된 기, 또는 L1 에 있어서의 -CH2C(=O)NH-(CH2)n3-C(=O)- 의 말단의 메틸렌이 할로겐화되어 할로아세트아미드가 된, Halogen-CH2C(=O)NH-(CH2)n3-C(=O)- 기를 나타낸다. 또, -(NH-DX) 는 다음 식 ： [화학식 50]으로 나타내는 구조이며, 엑사테칸의 1 위치의 아미노기의 수소 원자 1 개가 제거되어 생성되는 기를 나타낸다. 또, 상기의 반응식에 있어서 식 (1) 의 화합물에서는, 약물로부터 링커 말단까지의 구조 부분 1 개가 1 의 항체에 대해 결합한 구조로서 기재되어 있지만, 이것은 설명을 위한 편의적인 기재로서, 실제로는 당해 구조 부분이 항체 분자에 대해 복수개가 결합하고 있는 경우가 많다. 이 상황은 이하의 제조 방법의 설명에 있어서도 동일하다.]즉, 후술하는 방법에 의해 입수할 수 있는 화합물 (2) 와, 술프하이드릴기를 갖는 항체 (3a) 를 반응시킴으로써, 항체-약물 콘주게이트 (1) 을 제조할 수 있다.술프하이드릴기를 갖는 항체 (3a) 는 당업자 주지의 방법으로 얻을 수 있다 (Hermanson, G.T, Bioconjugate Techniques, pp. 56-136, pp. 456-493, Academic Press (1996)). 예를 들어, Traut's 시약을 항체의 아미노기에 작용시킨다 ； N-숙신이미딜S-아세틸티오알카노에이트류를 항체의 아미노기에 작용시킨 후, 하이드록실아민을 작용시킨다 ； N-숙신이미딜3-(피리딜디티오)프로피오네이트를 작용시킨 후, 환원제를 작용시킨다 ； 디티오트레이톨, 2-메르캅토에탄올, 트리스(2-카르복시에틸)포스핀염산염 (TCEP) 등의 환원제를 항체에 작용시켜 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원하여 술프하이드릴기를 생성시킨다 등등의 방법을 들 수 있지만 이들로 한정되는 경우는 없다.구체적으로는, 환원제로서 TCEP 를, 항체 내 힌지부 디술파이드 한 개당에 대해 0.3 내지 3 몰 당량 사용하고, 킬레이트제를 포함하는 완충액 중에서, 항체와 반응시킴으로써, 항체 내 힌지부 디술파이드가 부분적 혹은 완전하게 환원된 항체를 얻을 수 있다. 킬레이트제로서는, 예를 들어 에틸렌디아민 4 아세트산 (EDTA) 이나 디에틸렌트리아민 5 아세트산 (DTPA) 등을 들 수 있다. 이들을 1 mM 내지 20 mM 의 농도로 사용하면 된다. 완충액으로서는, 인산나트륨이나 붕산나트륨, 아세트산나트륨 용액 등을 사용할 수 있다. 구체적인 예에 있어서, 항체는 4 ℃ 내지 37 ℃ 에서 1 내지 4 시간 TCEP 와 반응시킴으로써 부분적 혹은 완전하게 환원된 술프하이드릴기를 갖는 항체 (3a) 를 얻을 수 있다.또한, 여기서 술프하이드릴기를 약물-링커 부분에 부가시키는 반응을 실시시킴으로써 티오에테르 결합에 의해 약물-링커 부분을 결합시킬 수 있다.다음으로, 술프하이드릴기를 갖는 항체 (3a) 한 개당, 2 내지 20 몰 당량의 화합물 (2) 를 사용하여, 항체 1 개당 2 개 내지 8 개의 약물이 결합한 항체-약물 콘주게이트 (1) 을 제조할 수 있다. 구체적으로는, 술프하이드릴기를 갖는 항체 (3a) 를 포함하는 완충액에, 화합물 (2) 를 용해시킨 용액을 첨가하여 반응시키면 된다. 여기서, 완충액으로서는, 아세트산나트륨 용액, 인산나트륨이나 붕산나트륨 등을 이용하면 된다. 반응 시의 pH 는 5 내지 9 이며, 보다 바람직하게는 pH 7 부근에서 반응시키면 된다. 화합물 (2) 를 용해시키는 용매로서는, 디메틸술폭시드 (DMSO), 디메틸―포름아미드 (DMF), 디메틸아세트아미드 (DMA), N-메틸-2-피리돈 (NMP) 등의 유기 용매를 사용할 수 있다. 화합물 (2) 를 용해시킨 유기 용매 용액을, 술프하이드릴기를 갖는 항체 (3a) 를 포함하는 완충액에 1 내지 20 ％ v/v 를 첨가하여 반응시키면 된다. 반응 온도는 0 내지 37 ℃, 보다 바람직하게는 10 내지 25 ℃ 이며, 반응 시간은 0.5 내지 2 시간이다. 반응은 미반응의 화합물 (2) 의 반응성을 티올 함유 시약에 의해 실활시킴으로써 종료할 수 있다. 티올 함유 시약은, 예를 들어, 시스테인 또는 N-아세틸-L-시스테인 (NAC) 이다. 보다 구체적으로는, NAC 를, 사용한 화합물 (2) 에 대해, 1 내지 2 몰 당량 첨가하여, 실온에서 10 내지 30 분 인큐베이트함으로써 반응을 종료할 수 있다.제조한 항체-약물 콘주게이트 (1) 은, 이하의 공통 조작에 의해 농축, 버퍼 교환, 정제, 항체 농도 및 항체 1 분자당 약물 평균 결합수의 측정을 실시하여, 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 동정을 실시할 수 있다.공통 조작 A ： 항체 혹은 항체-약물 콘주게이트 수용액의 농축Amicon Ultra (50,000 MWCO, Millipore Corporation) 의 용기 내에 항체 혹은 항체-약물 콘주게이트 용액을 넣고, 원심기 (Allegra X-15R, Beckman Coulter, Inc.) 를 사용한 원심 조작 (2000G 내지 3800G 에서 5 내지 20 분간 원심) 으로, 항체 혹은 항체-약물 콘주게이트 용액을 농축했다.공통 조작 B ： 항체의 농도 측정 UV 측정기 (Nanodrop 1000, Thermo Fisher Scientific Inc.) 를 사용하여, 메이커 규정의 방법에 따라, 항체 농도의 측정을 실시했다. 그 때에, 항체마다 상이한 280 nm 흡광 계수 (1.3 ㎖mg-1 cm-1 내지 1.8 ㎖mg-1 cm-1) 를 사용했다.공통 조작 C-1 ： 항체의 버퍼 교환 Sephadex G-25 담체를 사용한 NAP-25 칼럼 (Cat. No. 17-0852-02, GE Healthcare Japan Corporation) 을, 메이커 설명서의 방법에 따라, 염화나트륨 (137 mM) 및 에틸렌디아민 4 아세트산 (EDTA, 5 mM) 을 포함하는 인산 완충액 (10 mM, pH 6.0) (본 명세서에서 PBS 6.0/EDTA 라고 칭한다.) 으로 평형화시켰다. 이 NAP-25 칼럼 한 개당, 항체 수용액 2.5 ㎖ 를 얹은 후, PBS 6.0/EDTA 3.5 ㎖ 로 용출시킨 획분 (3.5 ㎖) 을 분취했다. 이 획분을 공통 조작 A 에 의해 농축하고, 공통 조작 B 를 사용하여 항체 농도의 측정을 실시한 후에, PBS 6.0/EDTA 를 사용하여 10 mg/㎖ 로 항체 농도를 조정했다.공통 조작 C-2 ： 항체의 버퍼 교환 Sephadex G-25 담체를 사용한 NAP-25 칼럼 (Cat. No. 17-0852-02, GE Healthcare Japan Corporation) 을, 메이커 규정의 방법에 따라, 염화나트륨 (50 mM) 및 EDTA (2 mM) 를 포함하는 인산 완충액 (50 mM, pH 6.5) (본 명세서에서 PBS 6.5/EDTA 라고 칭한다.) 으로 평형화시켰다. 이 NAP-25 칼럼 한 개당, 항체 수용액 2.5 ㎖ 를 얹은 후, PBS 6.5/EDTA 3.5 ㎖ 로 용출시킨 획분 (3.5 ㎖) 을 분취했다. 이 획분을 공통 조작 A 에 의해 농축하고, 공통 조작 B 를 사용하여 항체 농도의 측정을 실시한 후에, PBS 6.5/EDTA 를 사용하여 20 mg/㎖ 로 항체 농도를 조정했다.공통 조작 D-1 ： 항체-약물 콘주게이트의 정제 시판되는 인산 완충액 (PBS 7.4, Cat. No. 10010-023, Invitrogen), 염화나트륨 (137 mM) 을 포함하는 인산나트륨 완충액 (10 mM, pH 6.0 ； 본 명세서에서 PBS 6.0 으로 칭한다.) 혹은 Sorbitol (5 ％) 을 포함하는 아세트산 완충액 (10 mM, pH 5.5 ； 본 명세서에서 ABS 라고 칭한다.) 중 어느 완충액으로 NAP-25 칼럼을 평형화시켰다. 이 NAP-25 칼럼에, 항체-약물 콘주게이트 반응 수용액 (약 1.5 ㎖) 을 얹고, 메이커 규정의 양의 완충액으로 용출시킴으로써, 항체 획분을 분취했다. 이 분취 획분을 다시 NAP-25 칼럼에 얹고 완충액으로 용출시키는 겔 여과 정제 조작을 합계 2 내지 3 회 반복함으로써, 미결합의 약물 링커나 저분자 화합물 (트리스(2-카르복시에틸)포스핀염산염 (TCEP), N-아세틸-L-시스테인 (NAC), 디메틸술폭시드) 을 제거한 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.공통 조작 E ： 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 농도 및 항체 1 분자당 약물 평균 결합수의 측정 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 결합 약물 농도는, 항체-약물 콘주게이트 수용액의 280 nm 및 370 nm 의 2 파장에 있어서의 UV 흡광도를 측정한 후에 하기의 계산을 실시함으로써, 산출할 수 있다.어느 파장에 있어서의 전체 흡광도는 계 내에 존재하는 모든 흡수 화학종의 흡광도의 합에 동일한 [흡광도의 가성성] 점에서, 항체와 약물의 콘쥬게이션 전후에 있어서, 항체 및 약물의 몰 흡광 계수에 변화가 없다고 가정하면, 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 농도 및 약물 농도는 하기의 관계식으로 나타내진다.여기서, A280 은 280 nm 에 있어서의 항체-약물 콘주게이트 수용액의 흡광도를 나타내고, A370 은 370 nm 에 있어서의 항체-약물 콘주게이트 수용액의 흡광도를 나타내고, AA, 280 은 280 nm 에 있어서의 항체의 흡광도를 나타내고, AA, 370 은 370 nm 에 있어서의 항체의 흡광도를 나타내고, AD, 280 은 280 nm 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 흡광도를 나타내고, AD, 370 은 370 nm 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 흡광도를 나타내고, εA, 280 은 280 nm 에 있어서의 항체의 몰 흡광 계수를 나타내고, εA, 370 은 370 nm 에 있어서의 항체의 몰 흡광 계수를 나타내고, εD, 280 은 280 nm 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 몰 흡광 계수를 나타내고, εD, 370 은 370 nm 에 있어서의 콘주게이트 전구체의 몰 흡광 계수를 나타내고, CA 는 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 항체 농도를 나타내고, CD 는 항체-약물 콘주게이트에 있어서의 약물 농도를 나타낸다.여기서, εA, 280, εA, 370, εD, 280, εD, 370 은 사전에 준비한 값 (계산 추정치 혹은 화합물의 UV 측정에서 얻어진 실측치) 이 사용된다. 예를 들어, εA, 280 은, 항체의 아미노산 배열로부터, 이미 알려진 계산 방법 (Protein Science, 1995, vol. 4, 2411-2423) 에 의해 추정할 수 있다. εA, 370 은, 통상적으로, 제로이다. εD, 280 및 εD, 370 은, 사용하는 콘주게이트 전구체를 어느 몰 농도로 용해시킨 용액의 흡광도를 측정함으로써, 람버트·비어의 법칙 (흡광도 = 몰 농도 × 몰 흡광 계수 × 셀 광로 길이) 에 의해, 얻을 수 있다. 항체-약물 콘주게이트 수용액의 A280 및 A370 을 측정하고, 이들의 값을 식 (1) 및 (2) 에 대입하여 연립 방정식을 풀음으로써, CA 및 CD 를 구할 수 있다. 또한 CD 를 CA 로 나눔으로써 1 항체당 약물 평균 결합수를 구할 수 있다.제조 방법 1 에 있어서의 식 (2) 로 나타내는 화합물이지만, 다음 식 중 어느 것이다.[화학식 51]상기 식 중, n1, n2, n3, L2, LP, La, Lb 및 Lc 는 이미 정의한 바와 같으며, Lc 는 약물과의 결합 부위가 된다.이와 같은 본 발명 화합물의 제조에 유용한 중간체로서 바람직한 것은, n2 로서는, 정수의 2 내지 5 이며, L2 는 -NH-(CH2CH2O)n5-CH2CH2-C(=O)- 이거나 단결합이며, n5 는 2 내지 4 이며, LP 는 GGFG 이며, -NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc- 는 -NH-CH2CH2-C(=O)-, NH-CH2CH2CH2-C(=O)-, -NH-CH2-O-CH2-C(=O)-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2-C(=O)- 의 부분 구조가 바람직하다. 또 Halogen 으로서는 브롬 또는 요오드가 바람직하다. 이들의 화합물에 대해 구체적으로는 이하의 것을 예시할 수 있다 [여기서, (maleimid-N-yl) 은 말레이미딜기 (2,5-dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl 기) 를 의미한다].여기서, 식 중의 X 는 브롬 원자 또는 요오드 원자를 나타낸다. 이들의 브롬 화합물 및 요오드 화합물은 모두 제조 중간체로서 바람직하게 사용할 수 있다.또한, 콘주게이트의 양을 확보하기 위해서, 동일한 조건으로 제작하여 얻어진 평균 약물수가 동일한 정도의 복수의 콘주게이트 (예를 들어 ± 1 정도) 를 혼합하여 새로운 로트로 할 수 있다. 그 경우, 평균 약물수는 혼합 전의 평균 약물수의 사이에 들어간다.2. 제조 방법 2식 (1) 로 나타내는 항체-약물 콘주게이트 중, 항체와의 결합이 아미드기로서, 티오에테르 결합을 링커 내에 갖는 링커인, 구체적으로는 -L1-L2- 가 -C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)-S-(CH2)n6-C(=O)- 의 구조인 것은 하기 방법에 의해서도 제조할 수 있다.[화학식 52][식 중, AB-L1' 는 항체와 링커 L1 이 결합하고, 또한 L1 의 말단이 N-말레이미딜기로 변환된 기를 나타내지만, 구체적으로는 AB-C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-(N-ly-3-diminiccuS)- 에 있어서, -(N-ly-3-diminiccuS)- 가 말레이미딜기로 변환된 구조이다. L2' 는 말단이 메르캅토기가 된 HS-(CH2)n6-C(=O)- 기를 나타내고, AB 는 항체를 나타낸다.]즉, 후술하는 방법에 의해 입수할 수 있는 화합물 (2a) 와, 말레이미딜기를 갖는 링커를 결합시킨 항체 (3b) 를 반응시킴으로써, 항체-약물 콘주게이트 (1) 을 제조할 수 있다.말레이미딜기를 갖는 항체 (3b) 도 당업자 주지의 방법으로 얻을 수 있다 (Hermanson, G. T, Bioconjugate Techniques, pp. 56-136, pp. 456-493, Academic Press (1996)). 예를 들어 아미노기, 하이드록실기와의 결합성을 가지며 말레이미딜기를 갖는 숙신이미딜-4-(N-말레이미드메틸)시클로헥산-1-카르복시레이트 (SMCC) 등의 2 관능성 링커를 리간드의 아미노기에 작용시켜 말레이미딜기를 도입하는 등의 방법을 들 수 있지만, 이들로 한정되지 않는다.예를 들어, 아미노기에 대한 반응성 부분과, 티올기에 대한 반응성 부분을 링커로 결합한 화합물이면 바람직하게 사용할 수 있다. 여기서 아미노기에 대한 반응성 부분은 활성 에스테르, 이미드에스테르 등이면 되고, 또 티올 반응성 부분은 말레이미딜, 할로겐화아세틸, 할로겐화알킬, 나아가서는 디티오피리딜 등이면 된다.항체를 구성하는 아미노산의 아미노기 또는 수산기, 특히 아미노기에 있어서 아미드 결합을 개재하여 링커를 구축시키기 위한 방법으로서, 먼저 항체에 반응시키는 화합물은 다음 식 ： Q1-L1a-Q2[식 중, Q1 은 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)-, (3-Sulfo-pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)-, RQ-O-C(=N)-, 또는 O=C=N- 을 나타내고, L1a- 는 -cyc.Hex(1,4)-CH2-, 탄소수 1 내지 10 의 알킬렌기, 페닐렌기, -(CH2)n4-C(=O)-, -(CH2)n4a-NH-C(=O)-(CH2)n4b-, 또는 -(CH2)n4a-NH-C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2- 를 나타내고, Q2 는 (maleimid-N-yl), 할로겐 원자, 또는 -S-S-(2-Pyridyl) 을 나타내지만, RQ 는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, n4 는 1 내지 8 의 정수를 나타내고, n4a 는 0 내지 6 의 정수, n4b 는 1 내지 6 의 정수를 나타낸다.]으로 나타내는 화합물이면 된다.여기서, RQ 는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기이면 되지만, 보다 바람직하게는 메틸기 또는 에틸기이다.L1a 에 있어서의 알킬렌기로서는, 탄소수 1 내지 10 의 것이면 된다. 페닐렌기로서는, 오르토, 메타, 파라 어느 것이어도 되지만, 파라, 또는 메타의 것이 보다 바람직하다.L1a 로서 바람직한 것은, -cyc.Hex(1,4)-CH2-, -(CH2)5-NH-C(=O)-cyc.Hex(1,4)-CH2-, -(CH2)2-NH-C(=O)-CH2-, -(CH2)5-NH-C(=O)-(CH2)2-, -CH2-, -(CH2)2-, -(CH2)3-, -(CH2)5-, -(CH2)10-, -(para-Ph)-, -(meta-Ph)-, -(para-Ph)-CH(-CH3)-, -(CH2)3-(meta-Ph)-, 또는 -(meta-Ph)-NH-C(=O)-CH2- 를 들 수 있다.Q1 로서 바람직하게는 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)- 이며, Q2 는 (maleimid-N-yl) 이 바람직하지만, 디술파이드 결합을 형성시키고자 할 때에는 -S-S-(2-Pyridyl) 을 사용하면 된다.여기서, (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)- 은 다음 식[화학식 53]으로 나타내는 질소 원자가 결합 부위인 기이며, (3-Sulfo-pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)- 은 다음 식[화학식 54]으로 나타내는 질소 원자가 결합 부위인 기이며, 이 술폰산은 리튬염, 나트륨염, 칼륨염을 형성할 수 있고, 바람직하게는 나트륨염이며, cyc.Hex(1,4) 는 1,4-시클로헥실렌기를 나타내고, (maleimid-N-yl) 은 다음 식[화학식 55]으로 나타내는, 질소 원자가 결합 부위인 기이며,(2-Pyridyl) 은 2-피리딜기를 나타내고, (para-Ph) 는 파라페닐렌기를 나타내고, (meta-Ph) 는 메타페닐렌기를 나타낸다.이와 같은 화합물로서 예를 들어, 술포숙신이미딜-4-(N-말레이미딜메틸)시클로헥산-1-카르복시레이트 (sulfo-SMCC), N-숙신이미딜-4-(N-말레이미딜메틸)-시클로헥산-1-카르복시-(6-아미드카프로에이트) (LC-SMCC), κ-말레이미딜운데칸산N-숙신이미딜에스테르 (KMUA), γ-말레이미딜부티르산N-숙신이미딜에스테르 (GMBS), ε-말레이미딜카프로산N-하이드록시숙신이미드에스테르 (EMCS), m-말레이미딜벤조일- N-하이드록시숙신이미드에스테르 (MBS), N-(α-말레이미딜아세톡시)-숙신이미드에스테르 (AMAS), 숙신이미딜-6-(β-말레이미딜프로피온아미드)헥사노에이트 (SMPH), N-숙신이미딜4-(p-말레이미딜페닐)-부틸레이트 (SMPB), N-(p-말레이미딜페닐)이소시아네이트 (PMPI), N-숙신이미딜-4-(요오드아세틸)-아미노벤조에이트 (SIAB), N-숙신이미딜요오드아세테이트 (SIA), N-숙신이미딜브로모아세테이트 (SBA) N-숙신이미딜3-(브로모아세트아미드)프로피오네이트 (SBAP), N-숙신이미딜-3-(2-피리도디티오)프로피오네이트 (SPDP), 및 숙신이미딜옥시카르보닐-α-메틸-α-(2-피리딜디티오)톨루엔 (SMPT) 등의 화합물이다.구체적으로는, 예를 들어, 항체 (3) 에 대해, 2 내지 6 당량의 SMCC 를, pH 6 내지 7 의 인산 완충액 중에서, 실온 또한 1 내지 6 시간 반응시킴으로써, SMCC 의 활성 에스테르가 항체와 반응하여 말레이미딜기를 갖는 항체 (3b) 를 얻을 수 있다. 얻어진 항체 (3b) 는 하기의 공통 조작 D-2 에 의해 정제하고, 다음의 화합물 (2a) 와의 반응에 사용할 수 있다.공통 조작 D-2 ： 숙신이미딜4-(N-말레이미딜메틸)-시클로헥산-1-카르복시레이트 (SMCC) 유도체화 항체의 정제 PBS 6.5/EDTA 로 NAP-25 칼럼을 평형화시켰다. 이 NAP-25 칼럼에, 숙신이미딜4-(N-말레이미딜메틸)-시클로헥산-1-카르복시레이트 (본 명세서에서 SMCC 라고 칭한다.) 유도체화 항체를 포함하는 반응액 (약 0.5 ㎖) 을 얹고, 메이커 규정의 양의 완충액으로 용출시킴으로써, 항체 획분을 분취하여, 정제를 실시했다.링커와의 결합에 제공되는 항체의 아미노기는 N 말단 아미노기 및/또는 리신 잔기가 갖는 아미노기이면 되지만 이들로 한정되는 경우는 없다. 또한 세린 잔기가 갖는 수산기를 이용하여 에스테르 결합을 형성시켜 링커와 결합시킬 수도 있다.화합물 (2a) 와, 말레이미딜기를 갖는 링커를 결합시킨 항체 (3b) 의 반응은, 제조 방법 1 에서 기술한, 화합물 (2) 와, 술프하이드릴기를 갖는 항체 (3a) 의 반응 방법의 경우와 마찬가지로 하여 실시할 수 있다.제조한 항체-약물 콘주게이트 (1) 에 있어서의, 농축, 버퍼 교환, 정제, 항체 농도 및 항체 1 분자당 약물 평균 결합수의 측정에 의한 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 동정은 제조 방법 1 과 마찬가지로 실시할 수 있다.제조 방법 2 에 있어서 식 (3b) 로 나타내는 화합물은 다음의 구조를 갖는다 (다음 식 ； 당해 구조에 있어서 「항체-NH-」 는 항체 유래이다.).[화학식 56]본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 제조하기 위한 중간체로서 상기의 구조를 갖는 화합물은 다음과 같다 (식 중, n 은 1 내지 10 의 정수이지만, 바람직하게는 2 내지 8 이며, 보다 바람직하게는 3 내지 8 이다.).[화학식 57]또한 말단이 메르캅토기가 된 본 발명의 화합물로서는 이하의 것을 들 수 있다.3. 제조 방법 3식 (1) 로 나타내는 항체-약물 콘주게이트로서, 아미드 결합을 개재하여 약물 링커 부분과 항체가 결합한 것은 이하의 방법으로 제조할 수 있다. 예를 들어 L1 이 -C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 이며, 이것이 활성 에스테르가 된 L1', 예를 들어 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 를 바람직하게 사용할 수 있다. 또한 L2 가 단결합인 경우는 예를 들어 하기의 방법에 의해 제조할 수 있다.[화학식 58]즉, 후술하는 방법에 의해 입수할 수 있는 화합물 (2b) 와, 항체 (3) 을 반응시킴으로써, 항체-약물 콘주게이트 (1) 을 제조할 수 있다.화합물 (2b) 는 항체의 아미노기, 하이드록실기와의 결합성을 갖는다. 항체의 아미노기, 하이드록실기는, 제조 방법 2 에서 기재한 바와 같이, 각각 예를 들어 항체가 갖는 N 말단 아미노기 및/또는 리신 잔기가 갖는 아미노기, 세린 잔기가 갖는 수산기를 나타내지만, 이들로 한정되지 않는다.화합물 (2b) 는 N-하이드록시숙신이미딜에스테르기로 이루어지는 활성 에스테르이지만, 다른 활성 에스테르, 예를 들어 술포숙신이미딜에스테르기, N-하이드록시프탈이미딜에스테르, N-하이드록시술포프탈이미딜에스테르, 오르토-니트로페닐에스테르, 파라-니트로페닐에스테르, 2,4-디니트로페닐에스테르, 3-술포닐-4-니트로페닐에스테르, 3-카르복시-4-니트로페닐에스테르, 펜타플루오로페닐에스테르 등도 사용할 수 있다.화합물 (2b) 와, 항체 (3) 의 반응은, 항체 (3) 한 개당, 2 내지 20 몰 당량의 화합물 (2b) 를 사용하여, 항체 1 개당 1 개 내지 10 개의 약물이 결합한 항체-약물 콘주게이트 (1) 을 제조할 수 있다. 구체적으로는, 항체 (3) 을 포함하는 완충액에, 화합물 (2b) 를 용해시킨 용액을 첨가하여 반응시킴으로써, 항체-약물 콘주게이트 (1) 을 제조할 수 있다. 여기서, 완충액으로서 아세트산나트륨 용액, 인산나트륨이나 붕산나트륨 등을 사용할 수 있다. 반응 시의 pH 는 5 내지 9 이면 되고, 보다 바람직하게는 pH 7 부근에서 반응시키면 된다. 화합물 (2b) 를 용해시키는 용매로서는, 디메틸술폭시드 (DMSO), 디메틸―포름아미드 (DMF), 디메틸아세트아미드 (DMA), N-메틸-2-피리돈 (NMP) 등의 유기 용매를 사용할 수 있다. 화합물 (2b) 를 용해시킨 유기 용매 용액을, 항체 (3) 을 포함하는 완충액에 1 내지 20 ％ v/v 를 첨가하여 반응시키면 된다. 반응 온도는 0 내지 37 ℃, 보다 바람직하게는 10 내지 25 ℃ 이며, 반응 시간은 0.5 내지 20 시간이다.제조한 항체-약물 콘주게이트 (1) 에 있어서의, 농축, 버퍼 교환, 정제, 항체 농도 및 항체 1 분자당 약물 평균 결합수의 측정에 의한 항체-약물 콘주게이트 (1) 의 동정은 제조 방법 1 과 마찬가지로 실시할 수 있다.제조 방법 3 에 있어서 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 는 다음의 구조를 갖는다.[화학식 59]상기의 부분 구조를 갖는 본 발명의 화합물로서는 이하의 것을 들 수 있다.4. 제조 방법 4이전의 제조 방법에서 사용한 중간체인 식 (2) 또는 (2b) 로 나타내는 화합물 및 그들의 약리상 허용되는 염은 예를 들어 하기 방법에 의해 제조할 수 있다.[화학식 60][식 중, Lc 는 -C(=O)- 로서 -(NH-DX) 와의 결합은 아미드 결합을 형성하고, L1' 는 말단 말레이미딜기, 또는 말단 할로아세틸기, 또는 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)-(CH2)n4-C(=O)- 로 변환된 구조의 L1 을 나타내고, P1, P2 및 P3 은 보호기를 나타낸다.]카르복실산 (5) 를 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산할로겐화물 등으로 유도하고, 염기 존재하, NH2-DX [엑사테칸을 나타낸다 ； 화학명 ： (1S,9S)-1-아미노-9-에틸-5-플루오로-2,3-디하이드로-9-하이드록시-4-메틸-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4':6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-10,13(9H,15H)-디온] (4) 또는 그 약리상 허용되는 염과 반응시킴으로써 화합물 (6) 을 제조할 수 있다.이 반응은 펩티드 합성에 통상적으로 사용하는 반응 시약이나 조건을 준용하면 된다. 활성 에스테르에는 각종의 것이 있지만, 예를 들어 p-니트로페놀 등의 페놀류, N-하이드록시벤조트리아졸 혹은 N-하이드록시숙신이미드 등과 카르복실산 (5) 를 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 혹은 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드·염산염 등의 축합제를 사용하여 반응시키면 제조할 수 있다. 또, 활성 에스테르는 카르복실산 (5) 와 펜타플루오로페닐트리플루오로아세테이트 등과의 반응 ； 카르복실산 (5) 와 1-벤조트리아졸릴옥시트리피롤리디노포스포늄헥사플루오로포스파이트와의 반응 ； 카르복실산 (5) 와 시아노포스폰산디에틸과의 반응 (염입법) ； 카르복실산 (5) 와 트리페닐포스핀 및 2,2'-디피리딜디술파이드와의 반응 (향산법) ； 카르복실산 (5) 와 4-(4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-4-메틸모르폴리늄클로라이드 (DMTMM) 와 같은 트리아진 유도체와의 반응 등에 의해서도 제조할 수 있다. 또, 카르복실산 (5) 를 염기 존재하에 염화티오닐, 옥살릴클로라이드 등의 산 할로겐화물로 처리함으로써 제조할 수 있는 산 할라이드법 등에 의해 반응을 실시할 수도 있다. 상기와 같이 얻은 카르복실산 (5) 의 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물을 화합물 (4) 와 적당한 염기 존재하에 불활성인 용매 중에서 -78 ℃ ∼ 150 ℃ 에서 반응시킴으로써 화합물 (6) 을 제조할 수 있다 (또한, 「불활성인 용매」 란 그 용매가 채용된 반응에 있어서 실시되는 반응을 저해하는 일이 없는 용매를 의미한다.).상기의 각 공정에 사용하는 구체적인 염기로서는, 예를 들어, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 나트륨에톡시드, 칼륨부톡시드, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수소화나트륨, 수소화칼륨과 같은, 알칼리 금속 혹은 알칼리 토금속의 탄산염, 알칼리 금속 알콕시드, 알칼리 금속 수산화물 혹은 수소화물, 또는 n-부틸리튬과 같은 알킬리튬, 리튬디이소프로필아미드와 같은 디알킬아미노리튬으로 대표되는 유기 금속염기 ； 리튬비스(트리메틸실릴)아미드와 같은 비스실릴아민의 유기 금속염기 ； 또는 피리딘, 2,6-루티딘, 콜리딘, 4-디메틸아미노피리딘, 트리에틸아민, N-메틸모르폴린, 디이소프로필에틸아민, 디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU) 과 같은 유기 염기 등을 들 수 있다.본 반응에 사용하는 불활성인 용매로서는, 디클로로메탄, 클로로포름, 사염화탄소 등의 할로겐화 탄화수소계 용매 ； 테트라하이드로푸란, 1,2-디메톡시에탄, 디옥산 등의 에테르계 용매 ； 벤젠, 톨루엔 등의 방향족 탄화수소계 용매 ； N,N-디메틸―포름아미드, N,N-디메틸―아세트아미드, N-메틸피롤리딘-2-온 등의 아미드계 용매를 들 수 있고, 이들에 더하여 경우에 따라서는 디메틸술폭시드, 술포란 등의 술폭시드계 용매 ； 아세톤, 메틸에틸케톤 등의 케톤계 용매 등을 사용하는 것도 가능하다.화합물 (6) 의 La 및 Lb 는, 후술하는 바와 같이, 그 수산기, 카르복시기, 아미노기 등이 유기 화합물의 합성에 통상적으로 사용되는 보호기로 보호되어 있어도 된다. 구체적으로는 수산기의 보호기로서는, 메톡시메틸기 등의 알콕시메틸기 ； 벤질기, 4-메톡시벤질기, 트리페닐메틸기 등의 아릴메틸기 ； 아세틸기 등의 알카노일기 ； 벤조일기 등의 아로일기 ； tert-부틸디페닐실릴기 등의 실릴기 등을 들 수 있다. 카르복시기는 메틸기, 에틸기, tert-부틸기 등의 알킬기, 알릴기, 또는 벤질기 등의 아릴메틸기와의 에스테르 등으로서 보호할 수 있다. 아미노기는 tert-부틸옥시카르보닐기, 메톡시카르보닐기, 에톡시카르보닐기 등의 알킬옥시카르보닐기 ； 알릴옥시카르보닐, 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐기, 벤질옥시카르보닐기, 파라메톡시벤질옥시카르보닐기, 파라 (또는 오르토) 니트로벤질옥시카르보닐기 등의 아릴메틸기 외에, 아세틸기 등의 알카노일기 ； 벤질기, 트리페닐메틸기 등의 아릴메틸기 ； 벤조일기 등의 아로일기 ； 또는 2,4-디니트로벤젠술포닐기, 오르토니트로벤젠술포닐기 등의 아릴술포닐기 등, 펩티드 합성에 통상적으로 사용되고 있는 아미노기의 보호기에 의해 보호할 수 있다. 상기의 보호기의 착탈은 통상적으로 실시되는 방법에 따라 실시하면 된다.화합물 (6) 의 말단 아미노기의 보호기 P1 로서는, tert-부틸옥시카르보닐기나 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐기, 벤질옥시카르보닐기 등, 펩티드 합성에 통상적으로 사용되고 있는 아미노기의 보호기를 사용할 수 있다. 다른 아미노기의 보호기로서는, 아세틸기 등의 알카노일기 ； 메톡시카르보닐기, 에톡시카르보닐기 등의 알콕시카르보닐기 ； 파라메톡시벤질옥시카르보닐기, 파라 (또는 오르토) 니트로벤질옥시카르보닐기 등의 아릴메톡시카르보닐기 ； 벤질기, 트리페닐메틸기 등의 아릴메틸기 ； 벤조일기 등의 아로일기 ； 또는 2,4-디니트로벤젠술포닐기, 오르토니트로벤젠술포닐기 등의 아릴술포닐기를 들 수 있다. 보호기 P1 은 아미노기를 보호하는 화합물의 성질 등에 따라 취사 선택하면 된다.얻어진 화합물 (6) 의 말단 아미노기의 보호기 P1 을 탈보호시킴으로써 화합물 (7) 을 제조할 수 있다. 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다.N 말단을 P2 로 보호한 펩티드카르복실산 (8) 을 활성 에스테르, 혼합 산무수물 등으로 유도하고, 얻어진 화합물 (7) 에 반응시킴으로써, 화합물 (9) 를 제조할 수 있다. 펩티드카르복실산 (8) 과 화합물 (7) 의 펩티드 결합을 형성하는 반응 조건이나 시약, 및 염기, 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다. 보호기 P2 는 화합물 (6) 의 보호기에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 되고, 아미노기를 보호하는 화합물의 성질 등에 따라 취사 선택하면 된다. 또, 펩티드 합성에 통상적으로 사용되고 있는 바와 같이, 펩티드카르복실산 (8) 을 구성하는 아미노산 또는 펩티드를 순차 반응과 탈보호를 반복하여, 신장시켜 화합물 (9) 를 제조할 수도 있다.얻어진 화합물 (9) 의 아미노기의 보호기 P2 를 탈보호시킴으로써 화합물 (10) 을 제조할 수 있다. 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다.카르복실산 (11) 및 (11b) 를 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도하여, 얻어진 화합물 (10) 에 반응시킴으로써, 화합물 (2) 또는 (2b) 를 제조할 수 있다. 카르복실산 (11) 또는 (11b) 와 화합물 (10) 의 펩티드 결합을 형성하는 반응 조건이나 시약, 및 염기, 불활성 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.화합물 (9) 는 예를 들어 하기 방법으로도 제조할 수 있다.N 말단을 P2 로 보호한 펩티드카르복실산 (8) 을 활성 에스테르, 혼합 산무수물 등으로 유도하고, 염기 존재하, 카르복시기를 P3 으로 보호한 아민 화합물 (12) 와 반응시킴으로써 화합물 (13) 을 제조할 수 있다. 펩티드카르복실산 (8) 과 화합물 (12) 의 펩티드 결합을 형성하는 반응 조건이나 시약, 및 염기, 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다. 화합물 (13) 의 아미노기의 보호기 P2 는 화합물 (6) 의 보호기에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다. 카르복시기의 보호기 P3 으로서는, 유기 합성 화학, 그 중에서도 펩티드 합성에 있어서 카르복시기의 보호기로서 통상적으로 사용되고 있는 보호기를 사용하면 되고, 구체적으로는 메틸기, 에틸기, tert-부틸 등의 알킬에스테르, 알릴에스테르, 벤질에스테르 등, 화합물 (6) 의 보호기에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다. 이 경우에, 아미노기의 보호기와 카르복시기의 보호기를 상이한 방법 또는 조건으로 제거할 수 있을 필요가 있다. 예를 들어 P2 가 tert-부틸옥시카르보닐기이며, P3 이 벤질기인 조합 등을 대표적인 것으로 들 수 있다. 그들의 보호기는 아미노기와 카르복시기를 보호하는 화합물의 성질 등에 따라 상기 서술한 것에서 취사 선택하면 되고, 그들의 보호기의 절단에 있어서도 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다.얻어진 화합물 (13) 의 카르복시기의 보호기 P3 을 탈보호시킴으로써 화합물 (14) 를 제조할 수 있다. 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다.얻어진 화합물 (14) 를 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도하고, 염기 존재하, 화합물 (4) 와 반응시킴으로써 화합물 (9) 를 제조할 수 있다. 이 반응은 펩티드 합성에 통상적으로 사용하는 반응 시약이나 조건을 준용하면 되고, 반응 조건이나 시약, 및 염기나 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.화합물 (2) 또는 (2b) 는 예를 들어 하기 방법으로도 제조할 수 있다.화합물 (13) 의 아미노기의 보호기 P2 를 탈보호시킴으로써 화합물 (15) 를 제조할 수 있다. 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다.카르복실산 유도체 (11) 또는 (11b) 를 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도하고, 염기 존재하, 얻어진 화합물 (15) 와 반응시킴으로써 화합물 (16) 또는 (16b) 를 제조할 수 있다. 펩티드카르복실산 (11) 또는 (11b) 와 화합물 (15) 의 아미드 결합을 형성하는 반응 조건이나 시약, 및 염기, 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.얻어진 화합물 (16) 또는 (16b) 의 카르복시기의 보호기를 탈보호시킴으로써 화합물 (17) 또는 (17b) 를 제조할 수 있다. 화합물 (14) 의 제조에 있어서의 카르복시기의 탈보호와 마찬가지로 실시할 수 있다.화합물 (17) 또는 (17b) 를 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도하고, 염기 존재하, 화합물 (4) 와 반응시킴으로써 화합물 (2) 또는 (2b) 를 제조할 수 있다. 이 반응은 펩티드 합성에 통상적으로 사용하는 반응 시약이나 조건을 준용하면 되고, 반응 조건이나 시약, 및 염기나 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.5. 제조 방법 5중간체의 식 (2) 로 나타내는 화합물은 하기 방법에 의해서도 제조할 수도 있다.[화학식 61][식 중, L1' 는 말단이 말레이미딜기, 또는 할로아세틸기로 변환된 구조의 L1 이며, P4 는 보호기를 나타낸다.]화합물 (11) 을 활성 에스테르, 혼합 산무수물 등으로 유도하고, 염기 존재하, C 말단을 P4 로 보호한 펩티드카르복실산 (18) 과 반응시킴으로써 화합물 (19) 를 제조할 수 있다. 펩티드카르복실산 (18) 과 화합물 (11) 의 펩티드 결합을 형성하는 반응 조건이나 시약, 및 염기, 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다. 화합물 (18) 의 카르복시기의 보호기 P4 는 화합물 (6) 의 보호기에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.얻어진 화합물 (19) 의 카르복시기의 보호기를 탈보호시킴으로써 화합물 (20) 을 제조할 수 있다. 화합물 (14) 의 제조에 있어서의 카르복시기의 탈보호와 동일하게 실시할 수 있다.얻어진 화합물 (20) 을 활성 에스테르, 또는 혼합 산무수물 등으로 유도하고, 화합물 (7) 에 반응시킴으로써, 화합물 (2) 를 제조할 수 있다. 이 반응은 펩티드 합성에 통상적으로 사용하는 반응 시약이나 조건을 준용하면 되고, 반응 조건이나 시약, 및 염기나 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.6. 제조 방법 6제조 방법 2 에 기재된 제조 중간체 (2a) 로서, L2' 가 말단 메르캅토알카노일기로 변환된 구조의 L2 인 화합물은 하기의 방법에 의해 제조할 수 있다.[화학식 62]말단 메르캅토기를 갖는 카르복실산 (21) 을 활성 에스테르, 또는 혼합 산무수물 등으로 유도하고, 화합물 (10) 에 반응시킴으로써, 화합물 (2a) 를 제조할 수 있다. 이 반응은 펩티드 합성에 통상적으로 사용하는 반응 시약이나 조건을 준용하면 되고, 반응 조건이나 시약, 및 염기나 불활성인 용매는 화합물 (4) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.또, 화합물 (21) 을 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도하고, 화합물 (15) 와 반응시켜, 얻어지는 화합물 (22) 의 카르복시기의 보호기를 탈보호함으로써, 화합물 (23) 을 제조할 수 있다.화합물 (23) 을 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도하고, 염기 존재하, 화합물 (4) 와 반응시킴으로써 화합물 (2a) 를 제조할 수 있다. 이 반응은 펩티드 합성에 통상적으로 사용하는 반응 시약이나 조건을 준용하면 되고, 반응 조건이나 시약, 및 염기나 불활성인 용매는 화합물 (6) 의 합성에서 기술한 것에서 적절히 선택하여 사용하면 된다.7. 제조 방법 7이하에, 제조 방법 4 에 기재된 제조 중간체 (10) 중, n1 = 1, La = O, 및 Lb = CR2(-R3) 의 화합물 (10c) 의 제조 방법에 대해 상세히 기술한다. 식 (10c) 로 나타내는 화합물, 그 염 또는 그들의 용매화물, 예를 들어 하기 방법으로 제조할 수 있다.[화학식 63][식 중, LP, R2, 및 R3 은 상기와 동일한 것을 나타내고, L 은 아세틸기 또는 수소 원자 등을, X 및 Y 는 1 내지 3 개의 아미노산으로 이루어지는 올리고펩티드를, P5 및 P7 은 아미노기의 보호기를, P6 은 카르복시기의 보호기를 나타낸다.]식 (24) 로 나타내는 화합물은, 일본 공개특허공보 2002-60351호에 기재되는 수법이나 문헌 (J. Org. Chem., 51 권, 3196 페이지, 1986 년) 에 기재된 방법, 혹은 그 방법을 응용하여, 필요에 따라 보호기의 제거나 관능기 변환을 실시함으로써, 제조할 수 있다. 또는, 말단 아미노기가 보호된 아미노산 또는 아미노기가 보호된 올리고펩티드의 산아미드를 알데히드 또는 케톤과 처리함으로써 얻을 수 있다.화합물 (24) 를, 불활성인 용매 중, 산 또는 염기 존재하에 냉각하 ∼ 실온하에서 수산기를 갖는 화합물 (25) 와 반응시킴으로써, 화합물 (26) 을 제조할 수 있다. 사용하는 산으로서는 예를 들어, 불화수소산, 염산, 황산, 질산, 인산, 붕산 등의 무기산, 아세트산, 시트르산, 파라톨루엔술폰산, 메탄술폰산 등의 유기산, 테트라플루오로보레이트, 염화아연, 염화주석, 염화알루미늄, 염화철 등의 루이스산 등을 들 수 있다. 특히 파라톨루엔술폰산이 바람직하다. 사용하는 염기로서는, 상기의 염기 중에서 적절히 선택하여 사용하면 되고, 특히 칼륨tert-부톡시드 등의 알칼리 금속 알콕시드, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등의 알칼리 금속 수산화물, 수소화나트륨, 수소화칼륨 등의 알칼리 금속 수소화물, 리튬디이소프로필아미드 등의 디알킬아미노리튬으로 대표되는 유기 금속염기, 리튬비스(트리메틸실릴)아미드 등의 비스실릴아민의 유기 금속염기 등이 바람직하다. 반응에 사용하는 용매로서는, 테트라하이드로푸란, 1,4-디옥산 등의 에테르계 용매 ； 벤젠, 톨루엔 등의 방향족 탄화수소계 용매 등이 사용된다. 상기의 용매는 물과의 혼합물로 해도 된다. 또, P5 로 예시되는 아미노기의 보호기로서는, 통상적으로, 아미노기의 보호에 사용되는 기이면 특별히 제한은 없고, 대표적인 것으로서 제조 방법 4 에서 기재한 아미노기의 보호기를 들 수 있지만, 본 반응 중에 있어서 P5 로 예시되는 아미노기의 보호기가 절단되는 경우가 있다. 그 경우에는, 필요에 따라 적당한 아미노기의 보호 시약과 반응시킬 필요가 있다.화합물 (27) 은 화합물 (26) 의 보호기 P6 을 제거함으로써 제조할 수 있다. 여기서, P6 으로서 예시되는 카르복시기의 보호기로서는, 대표적인 것을 제조 방법 4 에 기재했지만, 이 경우에는 아미노기의 보호기 P5 와 카르복시기의 보호기 P6 이 상이한 방법 또는 조건으로 제거할 수 있는 보호기인 것이 바람직하다. 예를 들어, P5 가 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐기이며, P6 이 벤질기인 조합 등을 대표적인 것으로서 들 수 있다. 그들의 보호기는 아미노기 및 카르복시기를 보호하는 화합물의 성질 등에 따라 취사 선택하면 되고, 그들 보호기의 제거에 있어서도 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다.카르복실산 (27) 을 활성 에스테르, 혼합 산무수물, 또는 산 할로겐화물 등으로 유도하고, 염기 존재하, 화합물 (4) 및 그들의 약리상 허용되는 염과 반응시킴으로써 화합물 (28) 을 제조하고, 얻어진 화합물 (28) 의 보호기 P5 를 제거함으로써 화합물 (29) 를 제조할 수 있다. 화합물 (4) 와 카르복실산 (27) 의 반응 및 보호기 P6 을 제거하는 반응에서는, 제조 방법 4 에서 기술한 시약이나 반응 조건과 동일한 것을 사용하면 된다.화합물 (29) 와 말단 아미노기가 보호된 아미노산 또는 아미노기가 보호된 올리고펩티드 (30) 을 반응시킴으로써 화합물 (9c) 를 제조하고, 얻어진 화합물 (9c) 의 보호기 P7 을 제거함으로써 화합물 (10c) 를 제조할 수 있다. P7 로 예시되는 아미노기의 보호기로서는, 통상적으로, 아미노기의 보호에 사용되는 기이면 특별히 제한은 없고, 대표적인 것으로서 제조 방법 4 에서 기재한 아미노기의 보호기를 들 수 있고, 그 보호기의 제거에 있어서도 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다. 화합물 (29) 와 화합물 (30) 의 반응에서는, 펩티드 합성에 통상적으로 사용되는 반응 시약이나 조건을 준용하면 된다. 상기의 방법으로 제조한 화합물 (10c) 는 상기 서술한 제조 방법에 따라 본 발명 화합물 (1) 로 유도할 수 있다.8. 제조 방법 8이하에, 제조 방법 4 에 기재된 제조 중간체 (2) 중, n1 = 1, La = O, 및 Lb = CR2(-R3) 의 화합물 (2c) 의 제조 방법에 대해 상세히 기술한다. 식 (2c) 로 나타내는 화합물, 그 염 또는 그들의 용매화물은 예를 들어 하기 방법으로 제조할 수 있다.[화학식 64][식 중, L1', L2, LP, R2, 및 R3 은 상기와 동일한 것을 나타내고, Z 는 1 내지 3 개의 아미노산으로 이루어지는 올리고펩티드를, P8 은 아미노기의 보호기를, P9 는 카르복시기의 보호기를 나타낸다.]말단 아미노기 및 카르복시기가 보호된 아미노산 또는 올리고펩티드 (31) 의 보호기 P8 을 제거함으로써 화합물 (32) 를 제조하고, 얻어진 아민체 (32) 와 화합물 (11) 을 반응시킴으로써 화합물 (33) 을 제조할 수 있다. P8 로 예시되는 아미노기의 보호기로서는, 통상적으로, 아미노기의 보호에 사용되는 기이면 특별히 제한은 없고, 대표적인 것으로서 제조 방법 4 에서 기재한 아미노기의 보호기를 들 수 있다. 또, 보호기 P8 의 제거에 있어서도 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다. 화합물 (32) 와 카르복실산 (11) 의 반응에서는, 제조 방법 4 에서 기술한 시약이나 반응 조건과 동일한 것을 사용하면 된다.화합물 (33) 의 보호기 P9 를 제거함으로써 화합물 (34) 를 제조하여, 얻어진 카르복실산 (34) 와 화합물 (29) 를 반응시킴으로써 제조 중간체 (2c) 를 제조했다. P9 로서 예시되는 카르복시기의 보호기로서는, 대표적인 것을 제조 방법 4 에 기재했지만, 그 탈보호 반응에서는 제조 방법 4 에서 기술한 시약이나 반응 조건과 동일한 것을 사용하면 된다. 또, 화합물 (29) 와 카르복실산 (34) 의 반응에서는, 펩티드 합성에 통상적으로 사용되는 반응 시약이나 조건을 준용하면 된다. 상기의 방법으로 제조한 화합물 (2c) 는 상기 서술한 제조 방법에 따라 본 발명 화합물 (1) 로 유도할 수 있다.9. 제조 방법 9이하에, 제조 방법 4 에 기재된 제조 중간체 (17) 중, n1 = 1, La = O, 및 Lb = CR2(-R3) 의 화합물 (17c) 의 제조 방법에 대해 상세히 기술한다. 식 (17c) 로 나타내는 화합물, 그 염 또는 그들의 용매화물은 예를 들어 하기의 방법에 의해서도 제조할 수 있다.[화학식 65][식 중, L1', L2, LP, R2, R3, X, Y, P5, P6, 및 P7 은 상기와 동일한 것을 나타낸다.]말단 아미노기 및 말단 카르복시기가 보호된 화합물 (26) 의 아미노기의 보호기 P5 를 탈보호함으로써 화합물 (35) 를 제조하고, 얻어진 아민체 (35) 와 말단 아미노기 또는 아미노기가 보호된 올리고펩티드 (30) 을 반응시킴으로써 화합물 (36) 을 제조할 수 있다. P5 로 예시되는 아미노기의 보호기로서는, 통상적으로, 아미노기의 보호에 사용되는 기이면 특별히 제한은 없고, 대표적인 것으로서 제조 방법 4 에서 기재한 아미노기의 보호기를 들 수 있다. 또, 보호기 P5 의 제거에 있어서도 그 보호기에 따른 시약이나 조건을 선택하면 된다. 여기서, P6 으로 예시되는 카르복시기의 보호기 및 P7 로 예시되는 아미노기의 보호기로서는, 대표적인 것으로서 제조 방법 4 에서 기재한 카르복시기 및 아미노기의 보호기를 들 수 있지만, 카르복시기의 보호기 P6 과 아미노기의 보호기 P7 을 동일한 방법 또는 조건으로 제거할 수 있는 보호기가 바람직하다. 예를 들어 P6 이 벤질에스테르기이며, P7 이 벤질옥시카르보닐기인 조합 등을 대표적인 것으로서 들 수 있다.화합물 (37) 은 화합물 (36) 의 카르복시기의 보호기 P6 과 아미노기의 보호기 P7 을 제거함으로써 제조할 수 있다. 카르복시기의 보호기 P6 과 아미노기의 보호기 P7 각각을 순차 제거하는 것에 의해서도 화합물 (37) 을 제조할 수 있고, P6 과 P7 이 동일한 방법 또는 조건으로 제거할 수 있는 보호기이면, 양자를 일 공정으로 제거하여 화합물 (37) 을 제조할 수 있다.얻어진 화합물 (37) 과 화합물 (11) 을 반응시킴으로써 화합물 (17c) 를 제조할 수 있다. 화합물 (37) 과 화합물 (11) 의 반응에서는, 제조 방법 4 에서 기술한 시약이나 반응 조건과 동일한 것을 사용하면 된다.본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 있어서 유용한 제조 중간체로서 다음 식 ： [화학식 66]으로 나타내는 화합물을 먼저 설명했지만, 추가로 다음 식 ： Q-(CH2)nQ-C(=O)-L2a-LP-NH-(CH2)n1-La-Lb-Lc-(NH-DX)으로 나타내는 일군의 화합물도 본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 제조에 있어서 유용한 제조 중간체가 되는 화합물이다.즉, 상기 식에 있어서, Q 는 (maleimid-N-yl)-, HS-, X-CH2-C(=O)-NH-, 또는 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)- 이며, X 는 브롬 원자 또는 요오드 원자이며, nQ 는 정수의 2 내지 8 이며, L2a 는 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n5 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고,LP 는 2 내지 7 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기를 나타내고,n1 은 0 내지 6 의 정수를 나타내고,La 는 -C(=O)-NH-, -NR1-(CH2)n7-, -O-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, n7 은 1 내지 6 의 정수를 나타내고, R1 은 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)n8-COOH, 또는 -(CH2)n9-OH 를 나타내지만, n8 은 정수의 1 내지 4 를 나타내고, n9 는 1 내지 6 의 정수를 나타내고, Lb 는 -CR2(-R3)-, -O-, -NR4-, 또는 단결합을 나타내고, 여기서, R2 및 R3 은, 각각 독립적으로, 수소 원자, 탄소수 1 내지 6 의 알킬기, -(CH2)na-NH2, -(CH2)nb-COOH, 또는 -(CH2)nc-OH 를 나타내고, R4 는 수소 원자 또는 탄소수 1 내지 6 의 알킬기를 나타내고, na 는 0 내지 6 의 정수를 나타내고, nb 는 정수의 1 내지 4 를 나타내고, nc 는 정수의 1 내지 4 를 나타내지만, na 가 0 일 때는, R2 및 R3 은 동일하게는 되지 않고, Lc 는 -CH2- 또는 -C(=O)- 를 나타내고, (maleimid-N-yl)- 은 다음 식[화학식 67]으로 나타내는 구조의 기 (질소 원자가 결합 부위) 이며, (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)- 은 다음 식[화학식 68]으로 나타내는 구조의 기 (질소 원자가 결합 부위) 이며, -(NH-DX) 는 다음 식[화학식 69]으로 나타내는 구조의 기 (1 위치의 아미노기의 질소 원자가 결합 부위) 이다.제조 중간체로서는, Lc 가 -C(=O)- 인 화합물이 바람직하다.또, LP 의 펩티드 잔기로서는, 페닐알라닌, 글리신, 발린, 리신, 시트룰린, 세린, 글루탐산, 아스파르트산에서 선택되는 아미노산으로 이루어지는 아미노산 잔기인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다. 이와 같은 펩티드 잔기 중, LP 가 4 개의 아미노산으로 구성되는 펩티드 잔기인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다. 보다 구체적으로는, LP 가 -GGFG- 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다.또한, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 로서는, -NH-CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하고, 보다 바람직하게는, -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-(CH2)2-O-CH2-C(=O)- 인 화합물이다.nQ 로서는, 정수의 2 내지 6 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다.L2a 는 단결합이거나, n5 가 정수의 2 내지 4 의 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다.또, Q 가 (maleimid-N-yl)- 인 경우, nQ 가 정수의 2 내지 5 이며, L2a 가 단결합이며, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다. 보다 바람직하게는, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이다. 또한, nQ 가 정수의 2 또는 5 인 화합물이 바람직하다.또한, Q 가 (maleimid-N-yl)- 인 경우, nQ 가 정수의 2 내지 5 이며, L2a 가 -NH-(CH2-CH2-O)n5-CH2-CH2-C(=O)- 로서, n5 가 정수의 2 내지 4 이며, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다. 보다 바람직하게는, n5 가 정수의 2 또는 4 의 화합물이다. 또한, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이 바람직하다.Q 가 HS- 인 경우, nQ 가 정수의 2 내지 5 이며, L2a 가 단결합이며, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다. 보다 바람직하게는, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이다.Q 가 X-CH2-C(=O)-NH- 인 경우, X 로서는 브롬 원자인 화합물이 제조 중간체로서 바람직한 화합물이다. nQ 는 정수의 2 내지 8 인 화합물이 바람직하고, L2a 가 단결합인 화합물이 바람직하고, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다.Q 가 (Pyrrolidine-2,5-dione-N-yl)-O-C(=O)- 인 경우, nQ 가 정수의 2 내지 5 이며, L2a 가 단결합이며, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2CH2CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이 제조 중간체로서 바람직하다. 보다 바람직하게는, -NH-(CH2)n1-La-Lb- 가 -NH-CH2CH2CH2-, -NH-CH2-O-CH2-, 또는 -NH-CH2CH2-O-CH2- 인 화합물이다.보다 구체적으로는 이하의 것이 제조 중간체로서 바람직한 화합물이다.또한, 본 발명의 항체-약물 콘주게이트는, 대기 중에 방치하거나, 또는 재결정함으로써, 수분을 흡수하여, 흡착수가 생기거나, 수화물이 되는 경우가 있고, 그러한 물을 포함하는 화합물 및 염도 본 발명에 포함된다.또, 본 발명에는, 여러 가지의 방사성 또는 비방사성 동위체로 라벨된 화합물도 포함된다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 구성하는 원자의 1 이상으로, 원자 동위체의 비천연 비율도 함유할 수 있다. 원자 동위체로서는, 예를 들어, 중수소 (2H), 트리튬 (3H), 요오드-125 (125I) 또는 탄소-14 (14C) 등을 들 수 있다. 또, 본 발명 화합물은, 예를 들어, 트리튬 (3H), 요오드-125 (125I) 또는 탄소-14 (14C) 와 같은 방사성 동위체로 방사성 표식될 수 있다. 방사성 표식된 화합물은 치료 또는 예방제, 연구 시약, 예를 들어, 어세이 시약, 및 진단제, 예를 들어, 인비보 화상 진단제로서 유용하다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트의 모든 동위체 변이종은 방사성이고 아니고를 불문하고, 본 발명의 범위에 포함된다.＜의약＞본 발명의 항체-약물 콘주게이트는, 암 세포에 대해 세포 상해 활성을 나타내는 점에서, 의약으로서, 특히 암에 대한 치료제 및/또는 예방제로서 사용할 수 있다.본 발명의 항체-약물 콘주게이트가 적용되는 암의 종류로서는, 폐암, 신암, 요로 상피암, 대장암, 전립선암, 다형 신경교아종, 난소암, 췌암, 유방암, 멜라노마, 간암, 방광암, 위암, 식도암 등을 들 수 있지만, 치료 대상이 되는 암 세포에 있어서 항체-약물 콘주게이트 중의 항체를 인식할 수 있는 단백을 발현하고 있는 암세포이면 이들에는 한정되는 일은 없다.본 발명의 항체-약물 콘주게이트는 포유 동물에 대해 바람직하게 투여할 수 있지만, 보다 바람직하게는 인간이다.본 발명의 항체-약물 콘주게이트가 포함되는 의약 조성물에 있어서 사용되는 물질로서는, 투여량이나 투여 농도에 있어서, 이 분야에 있어서 통상적으로 사용되는 제제 첨가물 그 외에서 적절히 선택하여 적용할 수 있다.본 발명의 항체-약물 콘주게이트는 1 종 이상의 약학적으로 적합성의 성분을 포함하는 약학적 조성물로서 투여될 수 있다. 예를 들어, 상기 약학적 조성물은, 대표적으로는, 1 종 이상의 약학적 캐리어 (예를 들어, 멸균된 액체 (예를 들어, 물 및 기름 (석유, 동물, 식물, 또는 합성 기원의 기름 (예를 들어, 락카세이유, 대두유, 광유, 참기름 등) 을 포함한다)) 를 포함한다. 물은, 상기 약학적 조성물이 정맥 내 투여되는 경우에, 보다 대표적인 캐리어이다. 식염 수용액, 그리고 덱스트로스 수용액 및 글리세롤 수용액도 또한, 액체 캐리어로서, 특히, 주사용 용액을 위해서 사용될 수 있다. 적절한 약학적 부형제는 당해 분야에서 공지이다. 상기 조성물은 또, 원한다면, 미량의 습윤제 혹은 유화제, 또는 pH 완충화제를 함유할 수 있다. 적절한 약학적 캐리어의 예는 E. W. Martin 에 의한 「Remington's Pharmaceutical Sciences」 에 기재된다. 그 처방은 투여의 양태에 대응한다.여러 가지의 송달 시스템이 공지이며, 본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 투여하기 위해서 사용될 수 있다. 도입 방법으로서는, 피내, 근육내, 복강내, 정맥내, 및 피하의 경로를 들 수 있지만, 이들로 한정되지 않는다. 투여는, 예를 들어, 주입 또는 볼러스 주사에 의한 것일 수 있다. 특정의 바람직한 실시형태에 있어서, 상기 리간드 약물 결합체의 투여는, 주입에 의한 것이다. 비경구적 투여는 바람직한 투여 경로이다.대표적 실시형태에 있어서, 상기 약학적 조성물은 인간에 대한 정맥내 투여에 적합한 약학적 조성물로서 상습적 순서에 따라 처방된다. 대표적으로는, 정맥내 투여를 위한 조성물은 멸균의 등장성의 수성 완충액 중의 용액이다. 필요한 경우, 상기 의약은 또, 가용화제 및 주사 부위에서의 동통을 완화시키기 위한 국소 마취제 (예를 들어, 리그노카인) 를 포함할 수 있다. 일반적으로, 상기 성분은, (예를 들어, 활성제의 양을 나타내는 앰플 또는 사셰 등의 밀봉하여 시일된 용기 중의 건조 동결 건조 분말 또는 무수의 농축물로서, 별개로, 또는 단위 제형 중에서 함께 혼합한 것 중 어느 하나로 공급된다. 상기 의약이 주입에 의해 투여될 예정인 경우, 그것은, 예를 들어, 멸균의 제약 그레이드의 물 또는 식염수를 포함하는 주입 보틀로 투약될 수 있다. 상기 의약이 주사에 의해 투여되는 경우, 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰플은, 예를 들어, 상기 성분이 투여 전에 혼합될 수 있도록, 제공될 수 있다.본 발명의 의약 조성물에는 본원의 항체-약물 콘주게이트만을 포함하는 의약 조성물이어도 되고, 항체-약물 콘주게이트 및 적어도 하나의 이것 이외의 암치료제를 포함하는 의약 조성물이어도 된다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트는 다른 암치료제와 함께 투여할 수도 있고, 이로써 항암 효과를 증강시킬 수 있다. 이와 같은 목적으로 사용되는 다른 항암제는 항체-약물 콘주게이트와 동시에, 따로 따로, 혹은 연속해서 개체에 투여되어도 되고, 각각의 투여 간격을 변경하여 투여해도 된다. 이와 같은 암치료제로서 abraxane, carboplatin, cisplatin, gemcitabine, irinotecan (CPT-11), paclitaxel, pemetrexed, sorafenib, vinblastin 또는 국제 공개 제WO2003/038043호 팜플렛에 기재된 약제, 또한 LH-RH 아날로그 (류프로레린, 고세레린 등), 에스트람스틴·포스페이트, 에스트로겐 길항약 (타목시펜, 라록시펜 등), 아로마타제 저해제 (아나스트로졸, 레트로졸, 엑세메스탄 등) 등을 들 수 있지만, 항종양 활성을 갖는 약제이면 한정되는 일은 없다.이와 같은 의약 조성물은, 선택된 조성과 필요한 순도를 가지는 제제로서, 동결 건조 제제 혹은 액상 제제로서 제제화하면 된다. 동결 건조 제제로서 제제화할 때에는, 이 분야에 있어서 사용되는 적당한 제제 첨가물이 포함되는 제제여도 된다. 또 액제에 있어서도 동일하게 하여, 이 분야에 있어서 사용되는 각종 제제 첨가물을 포함하는 액상 제제로서 제제화할 수 있다.의약 조성물의 조성 및 농도는 투여 방법에 의해서도 변화하지만, 본 발명의 의약 조성물에 포함되는 항체-약물 콘주게이트는, 항체-약물 콘주게이트의 항원에 대한 친화성, 즉, 항원에 대한 해리 정수 (Kd 값) 의 점에 있어서, 친화성이 높을수록 (Kd 값이 낮다), 소량의 투여량이어도 약효를 발휘시킬 수 있다. 따라서, 항체-약물 콘주게이트의 투여량의 결정에 있어서는, 항체-약물 콘주게이트와 항원의 친화성의 상황에 기초하여 투여량을 설정할 수도 있다. 본 발명의 항체-약물 콘주게이트를 인간에 대해 투여할 때에는, 예를 들어, 약 0.001 ∼ 100 mg/kg 을 1 회 혹은 1 ∼ 180 일간에 1 회의 간격으로 복수회 투여하면 된다.실시예이하에 나타내는 실시예에 의해 본 발명을 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들로 한정되는 것은 아니다. 또, 이들은 어떠한 의미에 있어서도 한정적으로 해석되는 것은 아니다. 또, 본 명세서에 있어서, 특히 기재가 없는 시약, 용매 및 출발 재료는 시판되는 공급원으로부터 용이하게 입수 가능하다.참고예 1 M30-H1-L4 항체항 B7-H3 항체의 인간화 항체 중, 배열 번호 9 에 있어서 아미노산 번호 20 내지 471 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 중사슬 및 배열 번호 16 에 있어서 아미노산 번호 21 내지 233 에 기재된 아미노산 배열로 이루어지는 경사슬로 이루어지는 항체를 공지된 방법에 의해 제조하고, 얻어진 인간화 항 B7-H3 항체를 M30-H1-L4 항체 (또는 간단히 「M30-H1-L4」 라고 기재) 로 했다.참고예 2 M30-H1-L4P 항체상기에서 얻어진 M30-H1-L4 항체에 결합하고 있는 당사슬 수식을 공지된 방법에 의해 탈푸코오스화하여 조절하고, 얻어진 당사슬 수식이 조절되어 있는 항체를 M30-H1-L4P 항체 (또는 간단히 「M30-H1-L4P」 라고 기재) 로 했다.참고예 3 항 CD30 항체항 CD30 항체는 일본 공표특허공보 2005-506035 를 참조하여 제작했다. 그 배열을 배열 번호 27, 28 에 나타냈다.참고예 4 항 CD33 항체항 CD33 항체는 일본 공개특허공보 평8-48637호를 참조하여 제작했다. 그 배열을 배열 번호 29, 30 에 나타냈다.참고예 5 항 CD70 항체항 CD70 항체는 일본 공표특허공보 2008-538292 를 참조하여 제작했다. 그 배열을 배열 번호 31, 32 에 나타냈다.실시예 1 4-아미노-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]부탄아미드[화학식 70]공정 1 ： tert-부틸(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)카르바메이트 4-(tert-부톡시카르보닐아미노)부탄산 (0.237 g, 1.13 m㏖) 을 디클로로메탄 (10 ㎖) 에 용해하고, N-하이드록시숙신이미드(0.130 g, 1.13 m㏖) 및, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드염산염 (0.216 g, 1.13 m㏖) 을 첨가하여 1 시간 교반했다. 그 반응 용액을 화합물 (4) 의 메실산염 (0.500 g, 0.94 m㏖) 및, 트리에틸아민 (0.157 ㎖, 1.13 m㏖) 을 첨가한 N,N-디메틸―포름아미드 용액 (10 ㎖) 에 적하하여, 실온에서 1 일간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 8 ： 2 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.595 g, 정량적) 을 얻었다.공정 2 ： 4-아미노-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]부탄아미드 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (0.388 g, 0.61 m㏖) 을 디클로로메탄 (9 ㎖) 에 용해했다. 트리플루오로아세트산 (9 ㎖) 을 첨가하여 4 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 ： 물 = 7 ： 3 ： 1 (v/v/v) 의 분배 유기층] 로 정제하여, 표기 화합물의 트리플루오로아세트산염 (0.343 g, 정량적) 을 얻었다. 항체-약물 콘주게이트 (13), (14) 를 담암 마우스에 투여했을 때에, 이 화합물이 종양 중에서 확인되었다.실시예 2 항체-약물 콘주게이트 (1)[화학식 71]공정 1 ： N-(tert-부톡시카르보닐)글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S, 9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 N-(tert-부톡시카르보닐)글리실글리실-L-페닐알라닐글리신 (0.081 g, 0.19 m㏖) 을 디클로로메탄 (3 ㎖) 에 용해하고, N-하이드록시숙신이미드 (0.021 g, 0.19 m㏖) 및, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드염산염 (0.036 g, 0.19 m㏖) 을 첨가하여 3.5 시간 교반했다. 그 반응 용액을 실시예 1 의 화합물 (0.080 g, 0.15 m㏖) 을 첨가한 N,N-디메틸―포름아미드 용액 (1.5 ㎖) 에 적하하여, 실온에서 4 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 8 ： 2 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.106 g, 73 ％) 을 얻었다.공정 2 ： 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드트리플루오로아세트산염 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (1.97 g, 2.10 m㏖) 을 디클로로메탄 (7 ㎖) 에 용해했다. 트리플루오로아세트산 (7 ㎖) 을 첨가하여 1 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 톨루엔을 첨가하여 공비하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 ： 물 = 7 ： 3 ： 1 (v/v/v) 의 분배 유기층] 로 정제하여, 표기 화합물 (1.97 g, 99 ％) 을 얻었다.공정 3 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (337 mg, 0.353 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (1.2 ㎖) 용액에, 트리에틸아민 (44.3 ㎖, 0.318 m㏖), 6-말레이미드헥사노에이트N-숙신이미딜 (119.7 mg, 0.388 m㏖) 을 첨가하여 실온에서 1 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 5 ： 1 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (278.0 mg, 76 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 4 ： 항체-약물 콘주게이트 (1) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하여, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하고, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣어, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.025 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC ； 0.109 ㎖) 와 상기 공정 3 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.039 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 40 분간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.008 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 13.02 mg/㎖, 항체 수량 ： 9.1 mg (73 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.4실시예 3 항체-약물 콘주게이트 (2)[화학식 72]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (2) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (4.0 ㎖) 을 15 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.118 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.200 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.236 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.00471 ㎖) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 17.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.80 mg/㎖, 항체 수량 ： 26.1 mg (65 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.9실시예 4 항체-약물 콘주게이트 (3)[화학식 73]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (3) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하여, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하고, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣고, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 0.051 ㎖ (항체 1 분자에 대해 6.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC ； 0.067 ㎖) 와 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.085 ㎖； 항체 1 분자에 대해 10.0 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 60 분간 교반하고, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.013 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서 εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.67 mg/㎖, 항체 수량 ： 10.02 mg (80 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.3실시예 5 항체-약물 콘주게이트 (4)[화학식 74]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (4) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하여, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하고, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣고, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.051 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC ； 0.025 ㎖) 와 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.127 ㎖； 항체 1 분자에 대해 15.0 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 60 분간 교반하고, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.019 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치) ,εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.19 mg/㎖, 항체 수량 ： 7.14 mg (57 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.5실시예 6 항체-약물 콘주게이트 (5)[화학식 75]실시예 4 와 실시예 5 의 항체-약물 콘주게이트의 거의 전체량을 혼합하고, 공통 조작 A 를 사용하여 용액을 농축하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 15.37 mg, 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.7실시예 7 항체-약물 콘주게이트 (6)[화학식 76]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (6) 항체의 환원 ： 참고예 3 에서 제작한 항 CD30 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.75 를 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 2 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 0.0297 ㎖ (항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물 10 mM 디메틸술폭시드 용액 (0.0593 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0119 ㎖； 항체 1 분자에 대해 18.4 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 270400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.99 mg/㎖, 항체 수량 ： 5.94 mg (59 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.3실시예 8 항체-약물 콘주게이트 (7)[화학식 77]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (7) 항체의 환원 ： 참고예 3 에서 제작한 항 CD30 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.75 를 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 2 ㎖ 튜브에 채취하고, 30 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0148 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.9 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물 30 mM 디메틸술폭시드 용액 (0.0297 ㎖； 항체 1 분자에 대해 13.8 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0178 ㎖； 항체 1 분자에 대해 27.6 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 270400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.99 mg/㎖, 항체 수량 ： 5.94 mg (59 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.8실시예 9 항체-약물 콘주게이트 (8)[화학식 78]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (8) 항체의 환원 ： 참고예 4 에서 제작한 항 CD33 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.66 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 2 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0297 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물 10 mM 디메틸술폭시드 용액 (0.0593 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0119 ㎖； 항체 1 분자에 대해 18.4 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서 εA, 280 = 256400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.06 mg/㎖, 항체 수량 ： 6.36 mg (64 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.4실시예 10 항체-약물 콘주게이트 (9)[화학식 79]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (9) 항체의 환원 ： 참고예 4 에서 제작한 항 CD33 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.66 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 2 ㎖ 튜브에 채취하고, 30 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0148 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.9 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물 30 mM 디메틸술폭시드 용액 (0.0297 ㎖； 항체 1 분자에 대해 13.8 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0178 ㎖； 항체 1 분자에 대해 27.6 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서 εA, 280 = 256400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.95 mg/㎖, 항체 수량 ： 5.70 mg (57 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.7실시예 11 항체-약물 콘주게이트 (10)[화학식 80]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (10) 항체의 환원 ： 참고예 5 에서 제작한 항 CD70 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.69 를 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 2 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0297 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물 10 mM 디메틸술폭시드 용액 (0.0593 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0119 ㎖； 항체 1 분자에 대해 18.4 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서 εA, 280 = 262400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.00 mg/㎖, 항체 수량 ： 6.00 mg (60 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.2실시예 12 항체-약물 콘주게이트 (11)[화학식 81]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (11) 항체의 환원 ： 참고예 5 에서 제작한 항 CD70 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.69 를 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 2 ㎖ 튜브에 채취하고, 30 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0148 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.9 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 2 의 공정 3 에서 얻은 화합물 30 mM 디메틸술폭시드 용액 (0.0297 ㎖； 항체 1 분자에 대해 13.8 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0178 ㎖； 항체 1 분자에 대해 27.6 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 262400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.96 mg/㎖, 항체 수량 ： 5.76 mg (58 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.6실시예 13 항체-약물 콘주게이트 (12)[화학식 82]공정 1 ： N-[3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 실시예 2 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (80 mg, 0.084 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 3-말레이미드프로피온산N-숙신이미딜 (24.6 mg, 0.0924 m㏖) 을 사용하여, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (60.0 mg, 73 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (12) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 4 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 12.16 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.5 mg (68 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.4실시예 14 항체-약물 콘주게이트 (13)[화학식 83]공정 1 ： N-｛3-[2-(2-｛[3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일]아미노｝에톡시)에톡시]프로파노일｝글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 실시예 2 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (100 mg, 0.119 m㏖) 을, 트리에틸아민 대신에 디이소프로필에틸아민 (20.8 ㎕, 0.119 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 3-(2-(2-(3-말레인이미드프로판아미드)에톡시)에톡시)프로판산N-숙신이미딜 (50.7 mg, 0.119 m㏖) 을 사용하여, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (66.5 mg, 48 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (13) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 4 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 12.76 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.9 mg (71 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.4실시예 15 항체-약물 콘주게이트 (14)[화학식 84]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (14) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 4 의 공정 1 과 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 1.60 mg/㎖, 항체 수량 ： 9.60 mg (77 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.1실시예 16 항체-약물 콘주게이트 (15)[화학식 85]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (15) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 5 의 공정 1 과 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 1.64 mg/㎖, 항체 수량 ： 9.84 mg (79 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.1실시예 17 항체-약물 콘주게이트 (16)[화학식 86]실시예 15 와 실시예 16 의 항체-약물 콘주게이트의 거의 전체량을 혼합하고, 공통 조작 A 를 사용하여 용액을 농축하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 17.30 mg, 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.5실시예 18 항체-약물 콘주게이트 (17)[화학식 87]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (17) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (100 ㎖, 항체 1 g) 을 250 ㎖ 플라스크에 넣어, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (2.43 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.6 당량) 을 첨가하고, 추가로 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (5 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 부근인 것을 pH 미터로 확인한 후, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (3.51 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) 및 디메틸술폭시드 (2.14 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 15 ℃ 수욕 중에서 교반자로 130 분 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC 수용액 (0.547 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액에 대해, 한외 여과막 (머크 주식회사, Pellicon XL Cassette, Biomax 50KDa), 튜브 펌프 (미국 콜 파머사 마스터 플렉스 펌프 model 77521-40, 펌프 헤드 model 7518-00) 및 튜브 (미국 콜 파머사 마스터 플렉스 튜브 L/S16) 로 구성된 한외 여과 장치를 사용하여, 한외 여과 정제를 실시했다. 즉, 반응액에 정제 완충액으로서 ABS 를 적하하면서 (합계 800 ㎖), 한외 여과 정제를 실시함으로써, 미결합의 약물 링커 및 다른 저분자량 시약을 제거함과 함께 완충액을 ABS 로 치환하고, 또한 농축까지 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 약 70 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 14.5 mg/㎖, 항체 수량 ： 1.0 g (약 100 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.5실시예 19 항체-약물 콘주게이트 (18)[화학식 88]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (18) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (5 ㎖, 항체 50 mg) 을 15 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.135 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4 당량) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 부근인 것을 pH 미터로 확인한 후, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.219 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.064 ㎖) 를 첨가하고, 15 ℃ 수욕 중에서 90 분 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC 수용액 (0.033 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.8 당량) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 19 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 2.17 mg/㎖, 항체 수량 ： 41 mg (82 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.0실시예 20 항체-약물 콘주게이트 (19)[화학식 89]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (19) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (4 ㎖, 항체 40 mg) 을 15 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.140 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 부근인 것을 pH 미터로 확인한 후, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.232 ㎖； 항체 1 분자에 대해 8.6 당량) 을 첨가하고, 15 ℃ 수욕 중에서 90 분 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC 수용액 (0.035 ㎖； 항체 1 분자에 대해 12.9 당량) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 13 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 2.36 mg/㎖, 항체 수량 ： 31 mg (77 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.9실시예 21 항체-약물 콘주게이트 (20)[화학식 90]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (20) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖, 항체 12.5 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0287 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.4 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0439 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0267 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 15 ℃ 의 수욕 중에서 1 시간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0066 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.7 mg (70 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.5실시예 22 항체-약물 콘주게이트 (21)[화학식 91]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (21) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖, 항체 12.5 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0439 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) (0.0287 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.4 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0726 ㎖； 항체 1 분자에 대해 8.6 당량) 을 실온하 첨가하고, 15 ℃ 의 수욕 중에서 1 시간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.011 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.3 mg (66 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.5실시예 23 항체-약물 콘주게이트 (22)[화학식 92]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (22) 항체의 환원 ： 참고예 3 에서 제작한 항 CD30 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.75 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0065 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.5 당량) 을 첨가하여, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0116 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0098 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0017 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 270400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.86 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.2 mg (54 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 2.5실시예 24 항체-약물 콘주게이트 (23)[화학식 93]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (23) 항체의 환원 ： 참고예 3 에서 제작한 항 CD30 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.75 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.35 ㎖, 항체 3.5 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0113 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5 당량) 을 첨가하여, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0204 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량) 및 프로필렌글리콜 (칸토 화학 주식회사, 0.18 ㎖) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0031 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 270400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.41 mg/㎖, 항체 수량 ： 1.0 mg (29 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.1실시예 25 항체-약물 콘주게이트 (24)[화학식 94]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (24) 항체의 환원 ： 참고예 4 에서 제작한 항 CD33 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.66 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0065 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0058 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0116 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0101 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0017 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 256400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.25 mg/㎖, 항체 수량 ： 3.1 mg (78 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.7실시예 26 항체-약물 콘주게이트 (25)[화학식 95]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (25) 항체의 환원 ： 참고예 4 에서 제작한 항 CD33 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.66 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0129 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.006 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0233 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0035 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 256400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.17 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.9 mg (73 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.3실시예 27 항체-약물 콘주게이트 (26)[화학식 96]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (26) 항체의 환원 ： 참고예 5 에서 제작한 항 CD70 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.69 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0065 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0058 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0116 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0101 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0017 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 262400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.14 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.9 mg (71 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.8실시예 28 항체-약물 콘주게이트 (27)[화학식 97]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (27) 항체의 환원 ： 참고예 5 에서 제작한 항 CD70 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.69 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0129 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.006 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 14 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0233 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0035 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 262400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 4964 (실측치), εD, 370 = 18982 (실측치) 를 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.13 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.8 mg (71 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.4실시예 29 항체-약물 콘주게이트 (28)[화학식 98]공정 1 ： N-[19-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-17-옥소-4,7,10,13-테트라옥소-16-아자노나데칸-1-오일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 실시예 2 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (90 mg, 0.107 m㏖) 을, 트리에틸아민 대신에 디이소프로필에틸아민 (18.7 ㎕, 0.107 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 1-말레인이미드-3-옥소-7,10,13,16-테트라옥사-4-아자노나데칸-19-산N-숙신이미딜 (55.1 mg, 0.107 m㏖) 을 사용하고, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (50 mg, 37 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (28) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣고, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.025 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC ； 0.102 ㎖) 와 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.047 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.5 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 40 분간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.009) ㎖ 를 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 13.60 mg/㎖, 항체 수량 ： 9.5 mg (76 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.3실시예 30 항체-약물 콘주게이트 (29)[화학식 99]공정 1 ： N-(tert-부톡시카르보닐)-β-알라닐글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 실시예 2 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (0.839 g, 1.00 m㏖) 을, 4-(tert-부톡시카르보닐아미노)부탄산 대신에 N-(tert-부톡시카르보닐)-β-알라닌을 사용하여 실시예 1 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 얻어진 미정제 생성물을 정제하지 않고 다음의 공정에 사용했다.공정 2 ： β-알라닐글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 상기 공정 1 에서 얻은 미정제 생성물을, 실시예 2 의 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (0.610 g, 67 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 3 ： N-(브로모아세틸)-β-알라닐글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 2-브로모아세트산 (96.3 mg, 0.693 m㏖) 의 디클로로메탄 (4.5 ㎖) 용액에, N-하이드록시숙신이미드 (79.7 mg, 0.693 m㏖), 1,3-디이소프로필카르보디이미드 (0.107 ㎖, 0.693 m㏖) 를 첨가하여 실온에서 교반했다. 반응 용액을, 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (473 mg, 0.462 m㏖), 트리에틸아민 (0.154 ㎖, 1.11 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (4.5 ㎖) 용액에 0 ℃ 에서 첨가하여, 실온에서 1 시간 교반했다. 반응 용액을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [용출 용매 ： 클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 85 ： 15 (v/v)] 로 정제하고, 얻어진 고체를 클로로포름 ： 메탄올 ： 디에틸에테르 혼합 용매로 세정함으로써, 표기 화합물 (191 mg, 40 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 4 ： 항체-약물 콘주게이트 (29) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣고, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.025 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC ； 0.09 ㎖) 와 상기 공정 3 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.059 ㎖； 항체 1 분자에 대해 7.0 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 40 분간 교반하고, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.009 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 13.9 mg/㎖, 항체 수량 ： 9.7 mg (78 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.2실시예 31 항체-약물 콘주게이트 (30)[화학식 100]참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 실시예 30 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 4 의 공정 1 과 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 1.94 mg/㎖, 항체 수량 ： 11.64 mg (93 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.6실시예 32 항체-약물 콘주게이트 (31)[화학식 101]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (31) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 실시예 30 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 5 의 공정 1 과 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 1.90 mg/㎖, 항체 수량 ： 11.40 mg (91 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.7실시예 33 항체-약물 콘주게이트 (32)[화학식 102]실시예 31 과 실시예 32 의 항체-약물 콘주게이트의 거의 전체량을 혼합하고, 공통 조작 A 를 사용하여 용액을 농축하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 21.06 mg, 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.0실시예 34 항체-약물 콘주게이트 (33)[화학식 103]공정 1 ： tert-부틸4-(｛N6-(tert-부톡시카르보닐)-N2-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]-L-리실｝아미노)부타노에이트 Nε-(tert-부톡시카르보닐)-Nα-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]-L-리신 (1.00 g, 2.14 m㏖), N-하이드록시숙신이미드 (0.370 g, 3.20 m㏖), 및 tert-부틸4-아미노부탄산에스테르염산염 (0.830 g, 4.27 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (10.0 ㎖) 용액에 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드염산염 (0.610 g, 3.20 m㏖) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.410 ㎖, 2.35 m㏖) 을 첨가하여, 실온에서 3 일간 교반했다. 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 10 ％ 시트르산 수용액, 포화 탄산수소나트륨 수용액, 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 감압하 용매를 증류 제거하여, 표기 화합물 (1.35 g, 정량적) 을 무색 고체로서 얻었다.공정 2 ： tert-부틸4-｛[N6-(tert-부톡시카르보닐)-L-리실]아미노｝부타노에이트 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (1.35 g, 2.22 m㏖) 의 N,N-디메틸포름아미드 (8.00 ㎖) 용액에, 피페리딘 (2.00 ㎖) 을 첨가하여, 실온에서 1.5 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하여, 표기 화합물을 포함하는 혼합물을 얻었다. 본 혼합물은 더 이상의 정제는 실시하지 않고 다음의 반응에 사용했다.공정 3 ： N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]-L-발릴-N6-(tert-부톡시카르보닐)-N-(4-tert-부톡시-4-옥소부틸)-L-리신아미드 상기 공정 2 에서 얻은 혼합물 (2.22 m㏖) 의 N,N-디메틸포름아미드 (30.0 ㎖) 용액에, N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]-L-발린 (1.13 g, 3.32 m㏖), N-하이드록시숙신이미드 (0.310 g, 2.66 m㏖), 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드염산염 (0.550 g, 2.88 m㏖) 을 첨가하여 실온에서 18 시간 교반했다. 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 포화 탄산수소나트륨 수용액 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 감압하 용매를 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 9 ： 1 (v/v)] 로 정제하여, (0.363 g, 23 ％) 를 무색 고체로서 얻었다.공정 4 ： N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]-L-발릴-N-(3-카르복시프로필)-L-리신아미드포름산염 상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (0.363 mg, 0.512 m㏖) 에 포름산 (10.0 ㎖) 을 첨가하여 실온에서 4 시간 교반했다. 감압하 용매를 증류 제거하여, 표기 화합물을 얻었다. 본 화합물은 더 이상의 정제는 실시하지 않고 다음의 반응에 사용했다.공정 5 ： N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]-L-발릴-N6-(tert-부톡시카르보닐)-N-(3-카르복시프로필)-L-리신아미드 상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (0.512 m㏖) 의 1,4-디옥산 (5.00 ㎖) 현탁액에, 포화 탄산수소나트륨 수용액 (20.0 ㎖) 및 디-tert-부틸디카르보네이트 (0.178 ㎖, 0.769 m㏖) 를 첨가하여 실온에서 3 시간 교반했다. 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 10 ％ 시트르산 수용액 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 감압하 용매를 증류 제거하여, 표기 화합물 (0.295 g, 88 ％) 을 무색 고체로서 얻었다.공정 6 ： N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]-L-발릴-N6-(tert-부톡시카르보닐)-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)-L-리신아미드 화합물 (4) 의 메실산염 (0.240 g, 0.452 m㏖) 을, 4-(tert-부톡시카르보닐아미노)부탄산 대신에 상기 공정 5 에서 얻은 화합물 (0.295 g, 0.452 m㏖) 을 사용하고, 실시예 1 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (0.208 g, 43 ％) 을 담등색 고체로서 얻었다.MS(ESI)m/z ： 1071(M＋H)＋공정 7 ： L-발릴-N6-(tert-부톡시카르보닐)-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)-L-리신아미드 상기 공정 6 에서 얻은 화합물 (0.208 g, 0.194 m㏖) 을, 상기 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물을 포함하는 혼합물을 얻었다. 본 혼합물은 더 이상의 정제는 실시하지 않고 다음의 반응에 사용했다.공정 8 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]-L-발릴-N6-(tert-부톡시카르보닐)-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)-L-리신아미드 상기 공정 7 에서 얻은 혼합물 (0.194 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (0.133 g, 56 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 9 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]-L-발릴-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)-L-리신아미드트리플루오로아세트산염상기 공정 8 에서 얻은 화합물 (0.110 mg, 0.106 m㏖) 의 디클로로메탄 (10.0 ㎖) 용액에, 트리플루오로아세트산 (4.00 ㎖) 을 첨가하여, 실온에서 5 시간 교반했다. 감압하 용매를 증류 제거하여, 표기 화합물 (70.0 mg, 64 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 10 ： 항체-약물 콘주게이트 (33) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 9 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 29 의 공정 2 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 12.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.4 mg (67 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.2실시예 35 항체-약물 콘주게이트 (34)[화학식 104]공정 1 ： N-(3-술파닐프로파노일)글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 실시예 2 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (84.0 mg, 0.100 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 3-메르캅토프로피온산N-숙신이미딜을 사용하여 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (61.2 mg, 66 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (34) 항체의 SMCC 유도체화 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 공통 조작 C-2 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.5/EDTA 로 치환하여, 20 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (0.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 여기에 succinimidyl-4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate (SMCC, Thermo Fisher Scientific Inc.) 를 27.6 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.0063 ㎖； 항체 1 분자에 대해 약 2.55 당량 상당) 을 실온하 첨가하여, 실온에서 2 시간 반응시켰다. 이 반응액을 공통 조작 D-2 를 사용한 정제를 실시하여, SMCC 유도체화된 항체를 약 5 mg 포함하는 용액을 0.7 ㎖ 얻었다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, DMSO (0.045 ㎖) 와 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.015 ㎖； 항체 1 분자에 대해 약 2.4 당량 상당) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 16 시간 교반하고, 약물 링커를 항체에 결합시켰다.정제 ： 상기 용액을, 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 3.5 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 3.85 mg/㎖, 항체 수량 ： 0.8 mg (16 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 2.9실시예 36 항체-약물 콘주게이트 (35)[화학식 105]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (35) 항체의 SMCC 유도체화 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 공통 조작 C-2 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.5/EDTA 로 치환하여, 20 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (0.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 여기에 succinimidyl-4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate (SMCC, Thermo Fisher Scientific Inc.) 를 27.6 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.0125 ㎖； 항체 1 분자에 대해 약 5.1 당량 상당) 을 실온하 첨가하여, 실온에서 2 시간 반응시켰다. 이 반응액을 공통 조작 D-2 를 사용한 정제를 실시하여, SMCC 유도체화된 항체를 약 5 mg 포함하는 용액을 0.7 ㎖ 얻었다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, DMSO (0.03 ㎖) 와 실시예 35 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.03 ㎖； 항체 1 분자에 대해 약 4.8 당량 상당) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 16 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다.정제 ： 상기 용액을, 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 3.5 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 2.43 mg/㎖, 항체 수량 ： 0.5 mg (10 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 4.2실시예 37 항체-약물 콘주게이트 (36)[화학식 106]공정 1 ： N-｛8-[(2,5-디옥소피롤리딘-1-일)옥시]-8-옥소옥타노일｝글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(4-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-4-옥소부틸)글리신아미드 실시예 2 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (84.0 mg, 0.100 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 수베르산디(N-숙신이미딜) 을 사용하여 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (77.1 mg, 71 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (36) 항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 공통 조작 C-2 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.5/EDTA 로 치환하여, 20 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (0.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 여기에, 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 DMSO 용액 0.025 ㎖ (항체 1 분자에 대해 약 3.7 당량 상당) 를 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 16 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 정제 ： 상기 용액을, 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 3.5 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 6.25 mg/㎖, 항체 수량 ： 1.3 mg (26 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.2실시예 38 항체-약물 콘주게이트 (37)[화학식 107]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (37) 항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 공통 조작 C-2 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.5/EDTA 로 치환하여, 20 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (0.5 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣은 후, 여기에, DMSO (0.025 ㎖) 와 실시예 37 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.025 ㎖； 항체 1 분자에 대해 약 7.4 당량 상당) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 16 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다.정제 ： 상기 용액을, 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 3.5 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 4.36 mg/㎖, 항체 수량 ： 0.9 mg (18 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 4.1실시예 39 항체-약물 콘주게이트 (38)[화학식 108]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (38) 항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 참고예 3 에서 제작한 항 CD30 항체를, 공통 조작 C-2 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.75 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.5/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣은 후, 여기에, DMSO (0.017 ㎖) 와 실시예 37 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.023 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량 상당) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 4 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다.정제 ： 상기 용액을, 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 270400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 2670 (실측치), εD, 370 = 15820 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.55 mg/㎖, 항체 수량 ： 1.4 mg (34 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 2.7실시예 40 항체-약물 콘주게이트 (39)[화학식 109]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (39) 항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 참고예 4 에서 제작한 항 CD33 항체를, 공통 조작 C-2 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.66 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.5/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣은 후, 여기에, DMSO (0.017 ㎖) 와 실시예 37 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.023 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량 상당) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 4 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다.정제 ： 상기 용액을, 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 256400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 2670 (실측치), εD, 370 = 15820 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.93 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.3 mg (58 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 4.0실시예 41 항체-약물 콘주게이트 (40)[화학식 110]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (40) 항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 참고예 5 에서 제작한 항 CD70 항체를, 공통 조작 C-2 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.69 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.5/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣은 후, 여기에, DMSO (0.017 ㎖) 와 실시예 37 의 공정 1 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 DMSO 용액 (0.023 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량 상당) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 4 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다.정제 ： 상기 용액을, 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 262400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 2670 (실측치), εD, 370 = 15820 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.04 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.6 mg (65 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 4.1실시예 42 2-(2-아미노에톡시)-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아세트아미드[화학식 111]공정 1 ： tert-부틸[2-(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)에틸]카르바메이트 화합물 (4) 의 메실산염 (3.10 g, 5.47 ㏖) 을, 4-(tert-부톡시카르보닐아미노)부탄산 대신에 ｛2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]에톡시｝아세트산 (J. Med. Chem., 1992 년, 35 권, 2928 항) (1.55 g, 6.01 m㏖) 을 사용하고, 실시예 1 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (2.56 g, 73 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 2-(2-아미노에톡시)-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아세트아미드 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (1.50 g, 2.36 ㏖) 을, 실시예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물의 트리플루오로염산염 (1.50 g, 정량적) 을 담황색 고체로서 얻었다. 항체-약물 콘주게이트 (41) 을 담암 마우스에 투여했을 때에, 이 화합물이 종양 중에서 확인되었다.실시예 43 항체-약물 콘주게이트 (41)[화학식 112]공정 1 ： N-(tert-부톡시카르보닐)글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[2-(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)에틸]글리신아미드 실시예 42 의 화합물 (554 mg, 0.85 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (775 mg, 95 ％) 을 얻었다.공정 2 ： 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[2-(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)에틸]글리신아미드트리플루오로아세트산염 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (630 mg, 0.659 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (588 mg, 92 ％) 을 얻었다.공정 3 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[2-(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)에틸]글리신아미드 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (240 mg, 0.247 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (162 mg, 62 ％) 을 얻었다.공정 4 ： 항체-약물 콘주게이트 (41) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 3 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 29 의 공정 2 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 12.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.4 mg (67 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.5실시예 44 항체-약물 콘주게이트 (42)[화학식 113]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (42) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 실시예 43 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 5 의 공정 1 과 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 0.83 mg/㎖, 항체 수량 ： 4.98 mg (40 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.2실시예 45 항체-약물 콘주게이트 (43)[화학식 114]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (43) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 실시예 43 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 4 의 공정 1 과 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 1.06 mg/㎖, 항체 수량 ： 6.36 mg (51 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.3실시예 46 항체-약물 콘주게이트 (44)[화학식 115]실시예 44 와 실시예 45 의 항체-약물 콘주게이트의 거의 전체량을 혼합하고, 공통 조작 A 를 사용하여 용액을 농축하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 10.21 mg, 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.6실시예 47 항체-약물 콘주게이트 (45)[화학식 116]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (45) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖, 항체 12.5 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0287 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.4 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 43 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0439 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0267 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 15 ℃ 의 수욕 중에서 1 시간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0066 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5193 (실측치), εD, 370 = 20347 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 9.3 mg (74 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.7실시예 48 항체-약물 콘주게이트 (46)[화학식 117]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (46) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖, 항체 12.5 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0439 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) (0.0287 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.4 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 43 의 공정 3 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0726 ㎖； 항체 1 분자에 대해 8.6 당량) 을 실온하 첨가하고, 15 ℃ 의 수욕 중에서 1 시간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.011 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5193 (실측치), εD, 370 = 20347 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 7.8 mg (62 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.2실시예 49 N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드[화학식 118]공정 1 ： tert-부틸(3-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-3-옥소프로필)카르바메이트 화합물 (4) 의 메실산염 (500 mg, 0.941 m㏖) 을, 4-(tert-부톡시카르보닐아미노)부탄산 대신에 N-(tert-부톡시카르보닐)-β-알라닌을 사용하여, 실시예 1 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (616 mg, 정량적) 을 황갈색 고체로서 얻었다.공정 2 ： N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (499 mg, 86 ％) 의 트리플루오로아세트산염을 황색 고체로서 얻었다.실시예 50 항체-약물 콘주게이트 (47)[화학식 119]공정 1 ： N-(tert-부톡시카르보닐)글리실글리실-L-페닐알라닐글리실-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드 실시예 49 의 화합물 (484 mg, 0.780 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (626 mg, 87 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 글리실글리실-L-페닐알라닐글리실-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드트리플루오로아세트산염 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (624 mg, 0.675 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (626 mg, 92 ％) 을 황색 고체로서 얻었다.공정 3 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐글리실-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (60.0 mg, 0.0646 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (14.0 mg, 21 ％) 을 고체로서 얻었다.공정 4 ： 항체-약물 콘주게이트 (47) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 3 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 4 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 12.27 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.6 mg (69 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.4실시예 51 항체-약물 콘주게이트 (48)[화학식 120]공정 1 ： N-[3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일]글리실글리실-L-페닐알라닐글리실-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드 실시예 50 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (60.0 mg, 0.0646 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 3-말레이미드프로피온산N-숙신이미딜을 사용하여, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (36.0 mg, 57 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (48) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 4 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 11.59 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.1 mg (65 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.7실시예 52 항체-약물 콘주게이트 (49)[화학식 121]공정 1 ： N-｛3-[2-(2-｛[3-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)프로파노일]아미노｝)에톡시]프로파노일｝글리실글리실-L-페닐알라닐글리실-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드 실시예 50 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (60.0 mg, 0.0646 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 3-(2-(2-(3-말레인이미드프로판아미드)에톡시)에톡시)프로판산N-숙신이미딜을 사용하여, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (23.0 mg, 31 ％) 을 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (49) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 29 의 공정 2 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 14.50 mg/㎖, 항체 수량 ： 10.2 mg (82 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.8실시예 53 항체-약물 콘주게이트 (50)[화학식 122]공정 1 ： N-[19-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)-17-옥소-4,7,10,13-테트라옥사-16-아자노난데칸-1-오일]글리실글리실-L-페닐알라닐글리실-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-β-알라닌아미드 실시예 50 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (60.0 mg, 0.0646 m㏖) 을, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 대신에 1-말레인이미드-3-옥소-7,10,13,16-테트라옥사-4-아자노나데칸산N-숙신이미딜을 사용하여, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (23.0 mg, 29 ％) 을 고체로서 얻었다.공정 2 ： 항체-약물 콘주게이트 (50) 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체 및 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 4 와 동일한 방법에 의해, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 13.47 mg/㎖, 항체 수량 ： 9.4 mg (75 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.1실시예 54 항체-약물 콘주게이트 (51)[화학식 123]공정 1 ： tert-부틸(6-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-6-옥소헥실)카르바메이트 화합물 (4) 의 메실산염 (0.500 g, 0.882 m㏖) 을, 4-(tert-부톡시카르보닐아미노)부탄산 대신에 6-(tert-부톡시카르보닐아미노)헥산산을 사용하여, 실시예 1 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (0.620 g, 정량적) 을 얻었다.공정 2 ： 6-아미노-N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]헥산아미드트리플루오로아세트산염 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (0.397 g, 0.611 m㏖) 을, 실시예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (0.342 g, 84 ％) 을 얻었다.공정 3 ： N-(tert-부톡시카르보닐)글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(6-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-6-옥소헥실)글리신아미드 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (0.170 g, 0.516 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (0.225 g, 91 ％) 을 얻었다.공정 4 ： 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(6-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-6-옥소헥실)글리신아미드 상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (0.105 g, 0.108 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 2 와 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (0.068 mg, 65 ％) 을 얻었다.공정 5 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-(6-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-6-옥소헥실)글리신아미드 상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (58 mg, 0.060 m㏖) 을, 실시예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시켜, 표기 화합물 (39 mg, 62 ％) 을 얻었다.공정 6 ： 항체-약물 콘주게이트 (51) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0147 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.3 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 상기 공정 5 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0295 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.00590 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 PBS 7.4 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.97 mg/㎖, 항체 수량 ： 5.82 mg (58 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 1.7실시예 55 항체-약물 콘주게이트 (52)[화학식 124]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (52) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0295 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 54 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0590 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0118 ㎖； 항체 1 분자에 대해 18.4 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 PBS 7.4 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.94 mg/㎖, 항체 수량 ： 5.64 mg (56 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.1실시예 56 항체-약물 콘주게이트 (53)[화학식 125]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (53) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0147 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.3 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 54 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0295 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.00590 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 PBS 7.4 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.22 mg/㎖, 항체 수량 ： 7.32 mg (73 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 1.5실시예 57 항체-약물 콘주게이트 (54)[화학식 126]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (54) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.0 ㎖) 을 1.5 ㎖ 튜브에 채취하고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0295 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.050 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액을 22 ℃ 에서 10 분간 인큐베이트한 후에 실시예 54 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0590 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.2 당량) 을 첨가하고, 22 ℃ 에서 40 분간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0118 ㎖； 항체 1 분자에 대해 18.4 당량) 을 첨가하고, 다시 22 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 PBS 7.4 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.06 mg/㎖, 항체 수량 ： 6.36 mg (64 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.0실시예 58 항체-약물 콘주게이트 (55)[화학식 127]공정 1 ： (｛N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실｝아미노)메틸아세테이트 N-9-플루오레닐메톡시카르보닐글리실글리신 (4.33 g, 12.2 m㏖), 테트라하이드로푸란 (120 ㎖), 및 톨루엔 (40.0 ㎖) 으로 이루어지는 혼합물에, 피리딘 (1.16 ㎖, 14.7 m㏖ 및 4 아세트산납 (6.84 g, 14.7 m㏖) 을 첨가하여, 5 시간 가열 환류했다. 반응액을 실온까지 냉각시킨 후, 불용물을 셀라이트 여과에 의해 제거하여, 감압하 농축했다. 얻어진 잔류물을 아세트산에틸에 용해하고, 물 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압하에서 증류 제거한 후, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [헥산 ： 아세트산에틸 = 9 ： 1 (v/v) ∼ 아세트산에틸] 로 정제하여, 표기 화합물 (3.00 g, 67 ％) 을 무색 고체로서 얻었다.공정 2 ： 벤질[(｛N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실｝아미노)메톡시]아세테이트 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (3.68 g, 10.0 m㏖) 및 벤질글리콜레이트 (4.99 g, 30.0 m㏖) 의 테트라하이드로푸란 (40.0 ㎖) 용액에, 칼륨tert-부톡시드 (2.24 g, 20.0 m㏖) 를 0 ℃ 에서 첨가하여, 실온에서 15 분간 교반했다. 반응 용액에 아세트산에틸, 물을 0 ℃ 에서 첨가하여, 아세트산에틸, 클로로포름으로 추출하고, 얻어진 유기층을 황산나트륨으로 건조시켜, 여과했다. 용매를 감압 증류 제거하여, 얻어진 잔류물을 디옥산 (40.0 ㎖), 물 (10.0 ㎖) 에 용해하고, 탄산수소나트륨 (1.01 g, 12.0 m㏖), 클로로포름산9-플루오레닐메틸 (2.59 g, 10.0 m㏖) 을 첨가하여, 실온에서 2 시간 교반했다. 반응 용액에 물을 첨가하여, 아세트산에틸로 추출하고, 얻어진 유기층을 황산나트륨으로 건조시켜, 여과했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [헥산 ： 아세트산에틸 = 100 ： 0 (v/v) ∼ 0 ： 100] 로 정제하여, 무색 유상의 표기 화합물 (1.88 g, 40 ％) 을 얻었다.공정 3 ： [(｛N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실｝아미노)메톡시]아세트산 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (1.88 g, 3.96 m㏖) 을 에탄올 (40.0 ㎖), 아세트산에틸 (20.0 ㎖) 에 용해했다. 팔라듐탄소 촉매 (376 mg) 를 첨가하여, 수소 분위기하, 실온에서 2 시간 교반했다. 불용물을 셀라이트 여과에 의해 제거하고, 용매를 감압 증류 제거하여, 표기 화합물 (1.52 g, 정량적) 을 무색 고체로서 얻었다.공정 4 ： 9H-플루오렌-9-일메틸(2-｛[(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)메틸]아미노｝-2-옥소에틸)카르바메이트 빙랭하, 화합물 (4) 의 메실산염 (0.283 g, 0.533 m㏖), N-하이드록시숙신이미드 (61.4 mg, 0.533 m㏖), 및 상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (0.205 g, 0.533 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (10.0 ㎖) 용액에, N,N-디이소프로필에틸아민 (92.9 ㎕, 0.533 m㏖) 및 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (0.143 g, 0.693 m㏖) 를 첨가하여, 실온에서 3 일간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 ： 물 = 7 ： 3 ： 1 (v/v/v) 의 분배 유기층] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.352 g, 82 ％) 을 담갈색 고체로서 얻었다.공정 5 ： N-[(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (0.881 g, 1.10 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (11.0 ㎖) 용액에, 피페리딘 (1.1 ㎖) 을 첨가하여, 실온에서 2 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하여, 표기 화합물을 포함하는 혼합물을 얻었다. 본 혼합물은 더 이상의 정제는 실시하지 않고 다음의 반응에 사용했다.공정 6 ： N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 빙랭하, 상기 공정 5 에서 얻은 혼합물 (0.439 m㏖), N-하이드록시숙신이미드 (0.101 g, 0.878 m㏖), 및 N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌 (일본 공개특허공보 2002-60351호에 기재된 화합물) (0.440 g, 0.878 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (50.0 ㎖) 용액에, N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (0.181 g, 0.878 m㏖) 를 첨가하여, 실온에서 4 일간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 9 ： 1 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.269 g, 58 ％) 을 담등색 고체로서 얻었다.MS(ESI)m/z ： 1063(M＋H)＋공정 7 ： 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 상기 공정 6 에서 얻은 화합물 (0.269 g, 0.253 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (4.00 ㎖) 용액에, 피페리딘 (0.251 ㎖, 2.53 m㏖) 을 첨가하여, 실온에서 2 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하여, 표기 화합물을 포함하는 혼합물을 얻었다. 본 혼합물은 더 이상의 정제는 실시하지 않고 다음의 반응에 사용했다.공정 8 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 상기 공정 7 에서 얻은 화합물 (0.253 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (10.0 ㎖) 용액에, 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 (0.156 g, 0.506 m㏖) 을 첨가하여, 실온에서 3 일간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 9 ： 1 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.100 g, 38 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 9 ： 항체-약물 콘주게이트 (55) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣고, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.025 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC) 0.109 ㎖ 와 상기 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.039 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.6 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 40 분간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.008 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 12.57 mg/㎖, 항체 수량 ： 8.8 mg (70 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.2실시예 59 항체-약물 콘주게이트 (56)[화학식 128]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (56) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣고, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.051 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC ； 0.067 ㎖) 와 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.085 ㎖； 항체 1 분자에 대해 10.0 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 60 분간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.013 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.33 mg/㎖, 항체 수량 ： 7.98 mg (64 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 4.9실시예 60 항체-약물 콘주게이트 (57)[화학식 129]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (57) 항체의 환원 ： 참고예 2 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 C-1 및 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 를 사용하고, 매체를 PBS 6.0/EDTA 로 치환하여, 10 mg/㎖ 의 항체 농도로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖) 을 1.5 ㎖ 폴리프로필렌제 튜브에 넣고, 여기에 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.051 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.0 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에, 디메틸술폭시드 (Sigma-Aldrich Co. LLC ； 0.025 ㎖) 와 실시예 58 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.127 ㎖； 항체 1 분자에 대해 15.0 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 60 분간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.019 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온하 20 분간 교반하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5000 (실측 평균치), εD, 370 = 19000 (실측 평균치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.91 mg/㎖, 항체 수량 ： 5.46 mg (44 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.3실시예 61 항체-약물 콘주게이트 (58)[화학식 130]실시예 59 와 실시예 60 의 항체-약물 콘주게이트의 거의 전체량을 혼합하고, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 A 를 사용하여 용액을 농축하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 12.30 mg, 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.4실시예 62 항체-약물 콘주게이트 (59)[화학식 131]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (59) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (100 ㎖, 항체 1 g) 을 250 ㎖ 플라스크에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (2.43 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.6 당량) 을 첨가하고, 추가로 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (5 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 부근인 것을 pH 미터로 확인한 후, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (3.51 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) 및 디메틸술폭시드 (2.14 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 15 ℃ 수욕 중에서 교반자로 130 분 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC 수용액 (0.547 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액에 대해, 한외 여과막 (머크 주식회사, Pellicon XL Cassette, Biomax 50KDa), 튜브 펌프 (미국 콜 파머사 마스터 플렉스 펌프 model 77521-40, 펌프 헤드 model 7518-00) 및 튜브 (미국 콜 파머사 마스터 플렉스 튜브 L/S16) 로 구성된 한외 여과 장치를 사용하여, 한외 여과 정제를 실시했다. 즉, 반응액에 정제 완충액으로서 ABS 를 적하하면서 (합계 800 ㎖), 한외 여과 정제를 실시함으로써, 미결합의 약물 링커 및 다른 저분자량 시약을 제거함과 함께 완충액을 ABS 로 치환하고, 또한 농축까지 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 약 70 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 14.2 mg/㎖, 항체 수량 ： 1.0 g (약 100 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.2실시예 63 항체-약물 콘주게이트 (60)[화학식 132]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (60) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (5 ㎖, 항체 50 mg) 을 15 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.075 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4 당량) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 부근인 것을 pH 미터로 확인한 후, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.219 ㎖； 항체 1 분자에 대해 6.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.064 ㎖) 를 첨가하고, 15 ℃ 수욕 중에서 90 분 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC 수용액 (0.033 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9.8 당량) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 19 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 2.19 mg/㎖, 항체 수량 ： 42 mg (83 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 4.7실시예 64 항체-약물 콘주게이트 (61)[화학식 133]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (61) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4P 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (4 ㎖, 항체 40 mg) 을 15 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.14 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 부근인 것을 pH 미터로 확인한 후, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.232 ㎖； 항체 1 분자에 대해 8.6 당량) 을 첨가하고, 15 ℃ 수욕 중에서 60 분 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC 수용액 (0.035 ㎖； 항체 1 분자에 대해 12.9 당량) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 13 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 2.03 mg/㎖, 항체 수량 ： 26 mg (66 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.7실시예 65 항체-약물 콘주게이트 (62)[화학식 134]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (62) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖, 항체 12.5 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0287 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.4 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0439 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0267 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 15 ℃ 의 수욕 중에서 1 시간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0066 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 7.8 mg (62 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.4실시예 66 항체-약물 콘주게이트 (63)[화학식 135]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (63) 항체의 환원 ： 참고예 1 에서 제작한 M30-H1-L4 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.61 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (1.25 ㎖, 항체 12.5 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0439 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5.2 당량) (0.0287 ㎖； 항체 1 분자에 대해 3.4 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0625 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.4 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0726 ㎖； 항체 1 분자에 대해 8.6 당량) 을 실온하 첨가하고, 15 ℃ 의 수욕 중에서 1 시간 인큐베이트하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.011 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하고, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 6 ㎖ 얻은 후, 공통 조작 A 를 사용하여, 용액을 농축했다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 235300 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 10.0 mg/㎖, 항체 수량 ： 7.3 mg (58 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 5.4실시예 67 항체-약물 콘주게이트 (64)[화학식 136]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (64) 항체의 환원 ： 참고예 3 에서 제작한 항 CD30 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.75 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.5/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0065 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0058 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0116 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0101 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0017 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 270400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.96 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.4 mg (60 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.7실시예 68 항체-약물 콘주게이트 (65)[화학식 137]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (65) 항체의 환원 ： 참고예 3 에서 제작한 항 CD30 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.75 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0129 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.006 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0233 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0035 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 270400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 0.39 mg/㎖, 항체 수량 ： 1.0 mg (24 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 6.8실시예 69 항체-약물 콘주게이트 (66)[화학식 138]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (66) 항체의 환원 ： 참고예 4 에서 제작한 항 CD33 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.66 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0065 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0058 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0116 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0101 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0017 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 256400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.19 mg/㎖, 항체 수량 ： 3.0 mg (74 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.8실시예 70 항체-약물 콘주게이트 (67)[화학식 139]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (67) 항체의 환원 ： 참고예 4 에서 제작한 항 CD33 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.66 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0129 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.006 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0233 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0035 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 256400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.24 mg/㎖, 항체 수량 ： 3.1 mg (78 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.0실시예 71 항체-약물 콘주게이트 (68)[화학식 140]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (68) 항체의 환원 ： 참고예 5 에서 제작한 항 CD70 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.69 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0065 ㎖； 항체 1 분자에 대해 2.5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.0058 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0116 ㎖； 항체 1 분자에 대해 4.5 당량) 및 디메틸술폭시드 (0.0101 ㎖) 를 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하여, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0017 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 262400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.10 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.8 mg (69 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 3.8실시예 72 항체-약물 콘주게이트 (69)[화학식 141]공정 1 ： 항체-약물 콘주게이트 (69) 항체의 환원 ： 참고예 5 에서 제작한 항 CD70 항체를, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 B (280 nm 흡광 계수로서 1.69 ㎖mg-1cm-1 을 사용) 및 C-1 을 사용하여, PBS 6.0/EDTA 로 10 mg/㎖ 로 조제했다. 본 용액 (0.4 ㎖, 항체 4 mg) 을 1.5 ㎖ 튜브에 넣고, 10 mM TCEP (토쿄 화성공업 주식회사) 수용액 (0.0129 ㎖； 항체 1 분자에 대해 5 당량) 및 1 M 인산수소 2 칼륨 수용액 (Nacalai Tesque, Inc. ； 0.006 ㎖) 을 첨가했다. 본 용액의 pH 가 7.0 ± 0.1 내인 것을 확인한 후에, 37 ℃ 에서 1 시간 인큐베이트함으로써, 항체 내 힌지부의 디술파이드 결합을 환원시켰다.항체와 약물 링커의 콘쥬게이션 ： 상기 용액에 대해, 실시예 58 의 공정 8 에서 얻은 화합물을 10 mM 포함하는 디메틸술폭시드 용액 (0.0233 ㎖； 항체 1 분자에 대해 9 당량) 을 실온하 첨가하고, 튜브·로테이터 (MTR-103, 아즈원 주식회사) 를 사용하여 실온하 1 시간 교반하고, 약물 링커를 항체에 결합시켰다. 다음으로, 100 mM NAC (Sigma-Aldrich Co. LLC) 수용액 (0.0035 ㎖) 을 첨가하고, 다시 실온에서 20 분간 인큐베이트하여, 약물 링커의 반응을 정지시켰다.정제 ： 상기 용액을, 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 D-1 (완충액으로서 ABS 를 사용) 을 사용한 정제를 실시하여, 표기 항체-약물 콘주게이트를 함유하는 용액을 2.5 ㎖ 얻었다.특성 평가 ： 제조 방법 1 에 기재한 공통 조작 E (몰 흡광 계수로서, εA, 280 = 262400 (계산 추정치), εA, 370 = 0 (계산 추정치), εD, 280 = 5178 (실측치), εD, 370 = 20217 (실측치) 을 사용) 를 사용하여, 하기의 특성치를 얻었다.항체 농도 ： 1.16 mg/㎖, 항체 수량 ： 2.9 mg (73 ％), 항체 1 분자당 약물 평균 결합수 (n) ： 7.0실시예 73 (실시예 58 의 공정 8 의 화합물의 별도 합성법)[화학식 142]공정 1 ： tert-부틸N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라니네이트빙랭하, tert-부틸N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라니네이트 (J. Pept. Res., 1999 년, 53 권, 393 항) (0.400 g, 0.717 m㏖) 의 THF (12.0 ㎖) 용액에, 1,8-디아자비시클로[5.4.0]-7-운데센 (0.400 ㎖) 을 첨가하여 실온에서 4 일간 교반한 후, 추가로 6-말레이미드헥산산N-숙신이미딜 (0.221 g, 0.717 m㏖) 을 첨가하여 3 시간 교반했다. 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 10 ％ 시트르산 수용액, 포화 탄산수소나트륨 수용액, 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압하에서 증류 제거한 후, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 9 ： 1 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.295 g, 78 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닌 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (0.295 g, 0.558 m㏖) 의 디클로로메탄 (8.00 ㎖) 용액에, 트리플루오로아세트산 (4.00 ㎖) 을 첨가하여 실온에서 18 시간 교반 했다. 용매를 감압 증류 제거하여, 표기 화합물 (0.240 g, 91 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 3 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (0.572 g, 1.21 m㏖) 을 디클로로메탄 (12.0 ㎖) 에 용해하고, N-하이드록시숙신이미드 (0.152 g, 1.32 m㏖) 및, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드염산염 (0.253 g, 1.32 m㏖) 을 첨가하여 1 시간 교반했다. 그 반응 용액을 실시예 58 의 공정 5 에서 얻은 혼합물 (1.10 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (22.0 ㎖) 용액에 첨가하여, 실온에서 3 시간 교반했다. 반응 용액에 10 ％ 시트르산 수용액을 첨가하여, 클로로포름으로 추출하고, 얻어진 유기층을 황산나트륨으로 건조시켜, 여과했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 8 ： 2 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.351 g, 31 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다. 기기 데이터는 실시예 58 의 공정 8 의 화합물과 동일했다.실시예 74 (실시예 58 의 공정 8 의 화합물의 별도 합성법)[화학식 143]공정 1 ： 벤질[(｛N-[(9H-플루오렌-9-일메톡시)카르보닐]글리실｝아미노)메톡시]아세테이트 실시예 58 의 공정 1 에서 얻은 화합물 (7.37 g, 20.0 m㏖) 의 테트라하이드로푸란 (200 ㎖) 용액에, 벤질글리콜레이트 (6.65 g, 40.0 m㏖), 및 p-톨루엔술폰 산 1 수화물 (0.381 g, 2.00 m㏖) 을 0 ℃ 에서 첨가하고, 실온에서 2 시간 30 분간 교반했다. 반응 용액에 포화 탄산수소나트륨 수용액을 첨가하여, 아세트산에틸로 추출하고, 얻어진 유기층을 황산나트륨으로 건조시켜, 여과했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [헥산 ： 아세트산에틸 = 100 ： 0 (v/v) ∼ 0 ： 100] 로 정제하여, 표기 화합물 (6.75 g, 71 ％) 을 무색 고체로서 얻었다. 기기 데이터는 실시예 58 의 공정 2 의 화합물과 동일했다.공정 2 ： N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌-N-｛[(2-(벤질옥시)-2-옥소에톡시]메틸｝글리신아미드 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (6.60 g, 13.9 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (140 ㎖) 용액에, 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데카-7-엔 (2.22 g, 14.6 m㏖) 을 0 ℃ 에서 첨가하여, 실온에서 15 분간 교반했다. 반응 용액에, N-[(벤질옥시)카르보닐]글리실글리실-L-페닐알라닌 (6.33 g, 15.3 m㏖), N-하이드록시숙신이미드 (1.92 g, 16.7 m㏖) 및, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드염산염 (3.20 g, 16.7 m㏖) 의 N,N-디메틸포름아미드 (140 ㎖) 용액을, 미리 실온에서, 1 시간 교반한 것을 첨가하여 실온에서, 4 시간 교반했다. 반응 용액에 0.1 N 염산을 첨가하여 클로로포름으로 추출하고, 얻어진 유기층을 황산나트륨으로 건조시켜, 여과했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 8 ： 2 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (7.10 g, 79 ％) 을 무색 고체로서 얻었다.공정 3 ： 글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (7.00 g, 10.8 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (216 ㎖) 용액에, 팔라듐탄소 촉매 (7.00 g) 를 첨가하고, 수소 분위기하, 실온에서 24 시간 교반했다. 불용물을 셀라이트 여과에 의해 제거하고, 용매를 감압 증류 제거했다. 얻어진 잔류물을 물에 용해하여, 불용물을 셀라이트 여과에 의해 제거하고, 용매를 감압 증류 제거하는 조작을 2 회 반복하여, 표기 화합물 (3.77 g, 82 ％) 을 무색 고체로서 얻었다.공정 4 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(카르복시메톡시)메틸]글리신아미드 상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (3.59 g, 8.48 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (85.0 ㎖) 용액에, 6-말레이미드헥사노에이트N-숙신이미딜 (2.88 g, 9.33 m㏖), 및 트리에틸아민 (0.858 g, 8.48 m㏖) 을 첨가하여, 실온에서 1 시간 교반했다. 반응 용액에 0.1 N 염산을 첨가하여, 클로로포름, 및 클로로포름과 메탄올의 혼합 용매 [클로로포름 ： 메탄올 = 4 ： 1 (v/v)] 로 추출하고, 얻어진 유기층을 황산나트륨으로 건조시켜, 여과했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 ： 물 = 7 ： 3 ： 1 (v/v/v) 의 분배 유기층] 로 정제하여, 표기 화합물 (3.70 g, 71 ％) 을 무색 고체로서 얻었다.공정 5 ： N-[6-(2,5-디옥소-2,5-디하이드로-1H-피롤-1-일)헥사노일]글리실글리실-L-페닐알라닐-N-[(2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에톡시)메틸]글리신아미드 화합물 (4) 의 메실산염 (1.14 g, 2.00 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (40.0 ㎖) 용액에, 트리에틸아민 (0.202 g, 2.00 m㏖), 상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (1.48 g, 2.40 m㏖), 및 16.4 ％ 함수의 4-(4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-4-메틸모르폴리늄클로라이드 (0.993 g, 3.00 m㏖) 를 0 ℃ 에서 첨가하여, 실온에서 1 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 8 ： 2 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (1.69 g, 82 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다. 기기 데이터는 실시예 58 의 공정 8 의 화합물과 동일했다.실시예 75 N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-2-하이드록시아세트아미드[화학식 144]공정 1 ： 2-｛[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]아미노｝-2-옥소에틸아세테이트빙랭하, 화합물 (4) 의 메실산염 (0.500 g, 0.941 m㏖) 의 N,N-디메틸―포름아미드 (20.0 ㎖) 현탁액에, N,N-디이소프로필에틸아민 (0.492 ㎖, 2.82 m㏖) 및 아세톡시아세틸클로라이드 (0.121 ㎖, 1.13 m㏖) 를 첨가하여, 실온에서 1 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 ： 물 = 7 ： 3 ： 1 (v/v/v) 의 분배 유기층] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.505 g, 정량적) 을 담황색 고체로서 얻었다.공정 2 ： N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-2-하이드록시아세트아미드 상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (0.504 g, 0.941 m㏖) 의 메탄올 (50.0 ㎖) 현탁액에, 테트라하이드로푸란 (20.0 ㎖) 및 1 N 수산화나트륨 수용액 (4.00 ㎖, 4.00 m㏖) 을 첨가하여 실온에서 1 시간 교반했다. 1 N 염산 (5.00 ㎖, 5.00 m㏖) 을 첨가하여 반응을 정지하고, 용매를 감압 증류 제거했다. 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 ： 물 = 7 ： 3 ： 1 (v/v/v) 의 분배 유기층] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.412 g, 89 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다. 항체-약물 콘주게이트 (55), (56) 을 담암 마우스에 투여했을 때에, 이 화합물이 종양 중에서 확인되었다.실시예 76 (실시예 75 의 화합물의 별도 합성법)[화학식 145]공정 1 ： N-[(1S,9S)-9-에틸-5-플루오로-9-하이드록시-4-메틸-10,13-디옥소-2,3,9,10,13,15-헥사하이드로-1H,12H-벤조[de]피라노[3',4'：6,7]인돌리지노[1,2-b]퀴놀린-1-일]-2-하이드록시아세트아미드글리콜산 (0.0201 g, 0.27 m㏖) 을 N,N-디메틸―포름아미드 (1.0 ㎖) 에 용해하고, N-하이드록시숙신이미드 (0.0302 g, 0.27 m㏖) 및, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드염산염 (0.0508 g, 0.27 m㏖) 을 첨가하여 1 시간 교반했다. 그 반응 용액을 화합물 (4) 의 메실산염 (0.1 g, 0.176 m㏖) 의 N,N-디메틸포름아미드 (1.0 ㎖) 현탁액에, 트리에틸아민 (0.025 ㎖, 0.18 m㏖) 을 첨가하여 실온에서 24 시간 교반했다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔류물을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름 ∼ 클로로포름 ： 메탄올 = 10 ： 1 (v/v)] 로 정제하여, 표기 화합물 (0.080 g, 92 ％) 을 담황색 고체로서 얻었다. 기기 데이터는 실시예 75 의 공정 2 에서 얻은 화합물과 동일했다.(시험예 1) 전체 길이 인간 B7-H3 베어리언트 1 발현 벡터의 제작LNCaP 세포 (American Type Culture Collection ： ATCC) total RNA 로부터 합성한 cDNA 를 주형으로 프라이머 세트 ： 프라이머 1 ： 5'-ctatagggagacccaagctggctagcatgctgcgtcggcggggcag-3' (배열 번호 22) 및, 프라이머 2 ： 5'-aacgggccctctagactcgagcggccgctcaggctatttcttgtccatcatcttctttgctgtcag-3' (배열 번호 23)을 사용하여 PCR 반응을 실시하고, 인간 B7-H3 베어리언트 1 을 코드하는 cDNA 를 증폭했다.다음으로, 얻어진 PCR 산물을 MagExtractor PCR ＆ Gel cleanup (TOYOBO 사) 으로 정제했다. 또한, 제한 효소 (NheI/NotI) 로 소화한 후, MagExtractor PCR ＆ Gel cleanup (TOYOBO 사) 으로 정제했다. pcDNA 3.1 (＋) 플라스미드 DNA (라이프 테크놀로지사) 를 동일한 제한 효소 (NheI/NotI) 로 소화한 후, MagExtractor PCR ＆ Gel cleanup (TOYOBO 사) 으로 정제했다.상기 정제 DNA 용액을 혼합하고, 추가로 Ligation high (TOYOBO 사) 를 첨가하고, 16 ℃ 에서 8 시간 인큐베이트하여, 라이게이션했다.상기 반응물을 대장균 DH5α 콘피텐트셀 (라이프 테크놀로지사) 에 첨가하여 형질 전환했다.상기에서 얻어진 콜로니에 대해, PCR 프라이머와 BGH reverse Primer 로 콜로니 다이렉트 PCR 을 실시하여, 후보 클론을 셀렉션했다.얻어진 후보 클론을 액체 배지 (LB/Amp) 에서 배양하고, MagExtractor-Plasmid-(TOYOBO 사) 로 플라스미드 DNA 를 추출했다.얻어진 플라스미드 DNA 를 주형으로프라이머 3 (CMV promoter 프라이머) ： 5'-cgcaaatgggcggtaggcgtg-3' (배열 번호 24)및, 프라이머 4 (BGH reverse 프라이머) ： 5'-tagaaggcacagtcgagg-3' (배열 번호 25)간의 시퀀스 해석을 실시하여, 취득 클론과 제공 CDS 배열을 비교했다.배열을 확인 후, 얻어진 클론을 200 ㎖ 의 LB/Amp 배지에서 배양하고, VioGene 사 Plasmid Midi V-100 키트를 사용하여, 플라스미드 DNA 의 추출을 실시했다.본 벡터를 pcDNA 3.1-B7-H3 이라고 명명했다. 본 벡터에 클로닝된 B7-H3 베어리언트 1 유전자의 ORF 부분의 배열은 배열표의 배열 번호 26 (도 16) 의 뉴클레오티드 번호 1 내지 1602 에 나타나 있다. 또, B7-H3 베어리언트 1 의 아미노산 배열은 배열표의 배열 번호 1 에 나타나 있다.(시험예 2) B7-H3 베어리언트 1 유전자 안정 발현 CCRF-CEM 세포의 조제시험예 1 에서 제작된 pcDNA 3.1-B7-H3 을, CCRF-CEM 세포 (ATCC) 에 Nucleofector II (론자사 제조) 를 이용하여 전기 천공법으로 트랜스펙션했다. 그 후, 10 ％ 소 태아 혈청 (FBS) 함유 RPMI1640 배지 (라이프 테크놀로지사) (이후 10 ％ FBS-RPMI1640) 중에서 37 ℃, 5 ％ CO2 의 조건하에서 다시 이틀 밤 배양했다.2 일간 배양 후, pcDNA 3.1-B7-H3 이 안정적으로 삽입된 CCRF-CEM 세포를 선택하기 위해, 750 ㎍/㎖ G418 (라이프 테크놀로지사) 함유 10 ％ FBS-RPMI1640 에서 배양을 개시했다.1 개월간 배양 후, 단일 세포 클론을 얻기 위해 한계 기석법을 이용하여 클로닝을 실시했다. 구체적으로는, G418 에 대한 내성을 가진 세포를 10 cell/㎖ 로 희석하여 96 well 플레이트에 100 ㎕/well 의 농도로 파종, 배양하고, 개별의 well 로부터 증식한 세포를 회수했다.회수된 각 클론의 B7-H3 발현을 확인하기 위해서는, 플로사이트메트리법을 이용했다. 구체적으로는, 회수된 각 클론을 5 ％ FBS 함유 PBS 로 2 회 세정한 후, 10 ㎍/㎖ M30 을 포함하는 5 ％ FBS 함유 PBS 를 첨가하여 현탁하고, 4 ℃ 에서 30 분간 정치했다. 5 ％ FBS 함유 PBS 로 2 회 세정한 후, 5 ％ FBS 함유 PBS 로 1000 배로 희석한 Fluorescein-conjugated goat IgG fraction to mouse IgG (Whole Molecule) (ICN Pharmaceuticals 사 제조 ＃55493) 를 첨가하여 현탁하고, 4 ℃ 에서 30 분간 정치했다. 5 ％ FBS 함유 PBS 로 2 회 세정한 후, 5 ％ FBS 함유 PBS 로 재현탁하고, 플로우사이트미터 (FC500 ： BeckmanCoulter 사) 로 검출을 실시했다.본 조작에 의해 얻어진, B7-H3 베어리언트 1 유전자 안정 발현 CCRF-CEM 세포를 CEM＿V1＿3.1＿2 세포라고 명명했다. 친주인 CCRF-CEM 세포는 B7-H3 비발현 세포주로서 사용했다.(시험예 3) 항체-약물 콘주게이트의 세포 상해성 시험 (1)시험예 2 에서 제작된 CEM＿V1＿3.1＿2 세포, CCRF-CEM 세포 (ATCC) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 RPMI1640 (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. CEM＿V1＿3.1＿2 세포, CCRF-CEM 세포를 배지에서 8 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 65 ㎕ 의 배지를 넣은 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트에 25 ㎕ 씩 첨가하여 하룻밤 배양했다. 다음날, 배지에서 1000 nM, 200 nM, 40 nM, 8 nM, 1.6 nM, 0.32 nM, 0.064 nM 으로 희석한 M30-H1-L4 항체, M30-H1-L4P 항체 및 항체-약물 콘주게이트를 마이크로 플레이트에 10 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 배지를 10 ㎕ 씩 첨가했다. 37 도, 5 ％ CO2 하에서 3 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더 (PerkinElmer) 로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 a b ： 피검물질의 농도 b c ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b 각 농도에 있어서의 세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 10) CEM＿V1＿3.1＿2 세포에 대해, 항체-약물 콘주게이트 (5), (16), (21), (32), (44), (45), (46), (52), (54) 는 IC50 ＜ 0.1 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 항체-약물 콘주게이트 (1), (12), (13), (20), (28), (29), (35), (36), (37), (41), (49), (53) 은 0.1 ＜ IC50 ＜ 1 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 항체-약물 콘주게이트 (33), (34), (47), (48), (50), (51) 은 1 ＜ IC50 ＜ 100 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 한편, CCRF-CEM 세포에 대해서는 상기의 어느 항체-약물 콘주게이트도 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 100 (nM)). M30-H1-L4 항체 및 M30-H1-L4P 항체는 어느 세포에 대해서도 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 100 (nM)).(시험예 4) 항체-약물 콘주게이트의 세포 상해성 시험 (2)항원 양성 세포의 SR 세포 (ATCC), 항원 음성 세포의 Daudi 세포 (ATCC) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 RPMI1640 (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. SR 세포, Daudi 세포를 배지에서 2.8 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트에 90 ㎕ 씩 첨가했다. 2 시간 후, 배지에서 40 nM, 8 nM, 1.6 nM, 320 pM, 64 pM, 12.8 pM, 2.6 pM 으로 희석한 항 CD30 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (6), (7) 을 마이크로 플레이트에 10 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 배지를 10 ㎕ 씩 첨가했다. 37 도, 5 ％ CO2 하에서 3 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더 (PerkinElmer) 로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 a b ： 피검물질의 농도 b c ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b 각 농도에 있어서의 세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 12) 항체-약물 콘주게이트 (6), (7) 은 SR 세포에 대해 IC50 ＜ 0.01 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 한편, Daudi 세포에 대해서는 항체-약물 콘주게이트 (6), (7) 은 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 4.0 (nM)). 또, 항 CD30 항체는 어느 세포에 대해서도 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 4.0 (nM)).(시험예 5) 항체-약물 콘주게이트의 세포 상해성 시험 (3)항원 양성 세포의 SR 세포 (ATCC) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 RPMI1640 (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. SR 세포를 배지에서 2.8 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트에 90 ㎕ 씩 첨가했다. 2 시간 후, 배지에서 1000 nM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, 100 pM, 10 pM, 1 pM 으로 희석한 항 CD30 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (22), (23), (38), (64), (65) 를 마이크로 플레이트에 10 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 배지를 10 ㎕ 씩 첨가했다. 37 도, 5 ％ CO2 하에서 6 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더 (PerkinElmer) 로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 ab ： 피검물질의 농도 bc ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b 각 농도에 있어서의 세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 12) 항체-약물 콘주게이트 (23), (38), (64), (65) 는 SR 세포에 대해 IC50 ＜ 0.01 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 항체-약물 콘주게이트 (22) 는 SR 세포에 대해 IC50 ＜ 0.1 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 또, 항 CD30 항체는 SR 세포에 대해 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 4.0 (nM)).(시험예 6) 항체-약물 콘주게이트의 세포 상해성 시험 (4)항원 양성 세포의 HL-60 세포 (ATCC), 항원 음성 세포의 Raji 세포 (ATCC) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 RPMI1640 (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. HL-60 세포, Raji 세포를 배지에서 8 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 65 ㎕ 의 배지를 넣은 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트에 25 ㎕ 씩 첨가했다. 배지에서 1000 nM, 200 nM, 40 nM, 8 nM, 1.6 nM, 0.32 nM, 0.064 nM 으로 희석한 항 CD33 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (8), (9) 를 마이크로 플레이트에 10 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 배지를 10 ㎕ 씩 첨가했다. 37 도, 5 ％ CO2 하에서 3 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더 (PerkinElmer) 로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 ab ： 피검물질의 농도 bc ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b 각 농도에 있어서의 세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 5) 항체-약물 콘주게이트 (8), (9) 는 HL-60 세포에 대해서는 IC50 ＜ 0.1 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 한편, Raji 세포에 대해서는 항체-약물 콘주게이트 (8), (9) 는 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 100 (nM)). 또, 항 CD33 항체는 어느 세포에 대해서도 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 100 (nM)).(시험예 7) 항체-약물 콘주게이트의 세포 상해성 시험 (5)항원 양성 세포의 NOMO-1 세포 (HSRRB) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 RPMI1640 (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. NOMO-1 세포를 배지에서 2.8 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트에 90 ㎕ 씩 첨가했다. 2 시간 후, 배지에서 1000 nM, 200 nM, 40 nM, 8 nM, 1.6 nM, 0.32 nM, 0.064 nM 으로 희석한 항 CD33 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (24), (25), (67) 을 마이크로 플레이트에 10 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 배지를 10 ㎕ 씩 첨가했다. 37 도, 5 ％ CO2 하에서 6 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더 (PerkinElmer) 로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 ab ： 피검물질의 농도 bc ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b 각 농도에 있어서의 세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 5) NOMO-1 세포에 대해, 항체-약물 콘주게이트 (25) 는 IC50 ＜ 0.1 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 항체-약물 콘주게이트 (24), (67) 은 1 ＜ IC50 ＜ 100 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 또, 항 CD33 항체는 NOMO-1 세포에 대해 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 100 (nM)).(시험예 8) 항체-약물 콘주게이트의 세포 상해성 시험 (6)항원 양성 세포의 U251 세포 (ATCC), 항원 음성 세포의 MCF-7 세포 (ATCC) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 RPMI1640 (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. U251 세포, MCF-7 세포를 배지에서 2.8 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트에 90 ㎕ 씩 첨가하여 하룻밤 배양했다. 다음날, 각 배지에서 1000 nM, 200 nM, 40 nM, 8 nM, 1.6 nM, 0.32 nM, 0.064 nM 으로 희석한 항 CD70 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (10), (11) 을 마이크로 플레이트에 10 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 배지를 10 ㎕ 씩 첨가했다. 37 도, 5 ％ CO2 하에서 6 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더 (PerkinElmer) 로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 ab ： 피검물질의 농도 bc ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b 각 농도에 있어서의 세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 12) 항체-약물 콘주게이트 (10), (11) 은 U251 세포에 대해 IC50 ＜ 1 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 한편, MCF-7 세포에 대해서는 항체-약물 콘주게이트 (10), (11) 은 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (≥ 90 (nM)). 또, 항 CD70 항체는 어느 세포에 대해서도 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 100 (nM)).(시험예 9) 항체-약물 콘주게이트의 세포 상해성 시험 (7)항원 양성 세포의 U251 세포 (ATCC) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 RPMI1640 (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. U251 세포를 배지에서 2.8 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트에 90 ㎕ 씩 첨가했다. 2 시간 후, 배지에서 1000 nM, 200 nM, 40 nM, 8 nM, 1.6 nM, 0.32 nM, 0.064 nM 으로 희석한 항 CD70 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (26), (27), (40), (68), (69) 를 마이크로 플레이트에 10 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 배지를 10 ㎕ 씩 첨가했다. 37 도, 5 ％ CO2 하에서 6 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더 (PerkinElmer) 로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 ab ： 피검물질의 농도 bc ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b 각 농도에 있어서의 세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 12) 항체-약물 콘주게이트 (26), (27), (40), (69) 는 U251 세포에 대해 1 ＜ IC50 ＜ 10 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 항체-약물 콘주게이트 (68) 은 10 ＜ IC50 ＜ 100 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 또, 항 CD70 항체는 U251 세포에 대해 세포 상해 활성을 나타내지 않았다 (＞ 100 (nM)).(시험예 10) 유리 약물의 세포 상해성 시험 (8)A375 세포 (ATCC) 는 10 ％ 의 소 태아 혈청 (MOREGATE) 을 포함하는 DMEM (GIBCO) (이하, 배지) 에서 배양했다. A375 세포를 배지에서 4 × 104 cells/㎖ 가 되도록 조제하고, 65 ㎕ 의 배지를 넣은 96 구멍 세포 배양용 마이크로 플레이트 (CORNING) 에 25 ㎕ 씩 첨가하여 하룻밤 배양했다. 다음날, DMSO 로 1000 nM, 200 nM, 40 nM, 8 nM, 1.6 nM, 0.32 nM, 0.064 nM 으로 희석한 피검물질을 마이크로 플레이트에 0.5 ㎕ 씩 첨가했다. 피검물질 비첨가 웰에는 DMSO 를 0.5 ㎕ 씩 첨가했다. 모든 웰에 배지를 10 ㎕ 씩 첨가하여 배지의 액량을 100 ㎕ 로 하고, 37 도, 5 ％ CO2 하에서 6 일간 배양했다. 배양 후, 마이크로 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내어 실온에서 30 분간 정치했다. 배양액과 등량의 CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay (Promega) 를 첨가하여 교반했다. 실온에서 10 분간 정치 후에 플레이트 리더로 발광량을 계측했다. IC50 값은 다음 식으로 산출했다.a ： 피검물질의 농도 ab ： 피검물질의 농도 bc ： 농도 a 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 d ： 농도 b 의 피검물질을 첨가했을 때의 생세포율 a, b 는 생세포율 50 ％ 를 넘는 농도로, a ＞ b세포 생존률은 다음 식으로 산출했다.세포 생존률 (％) = a ÷ b × 100 a ： 피검물질 첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 2) b ： 피검물질 비첨가 웰의 발광량의 평균치 (n = 10) 실시예 (75) 의 화합물, 및 엑사테칸은 A375 세포에 대해 0.1 ＜ IC50 ＜ 1 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 실시예 (42) 의 화합물은 1 ＜ IC50 ＜ 10 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다. 실시예 (1) 의 화합물은 10 ＜ IC50 ＜ 100 (nM) 의 세포 상해 활성을 나타냈다.(시험예 11) 항종양 시험 (1)마우스 ： 5-6 주령의 암컷 BALB/c 누드 마우스 (닛폰 찰스·리버사) 를 실험 사용 전에 SPF 조건화로 4 - 7 일간 순화했다. 마우스에는 멸균한 고형 사료 (FR-2, Funabashi Farms Co., Ltd) 를 급이하고, 멸균한 수도물 (5 - 15 ppm 차아염소산나트륨 용액을 첨가하여 조제) 을 주었다.측정, 계산식 ： 모든 연구에 있어서, 종양의 장경 및 단경을 전자식 디지털 캐리퍼 (CD-15C, Mitutoyo Corp.) 로 1 주간에 2 회 측정하고, 종양 체적 (mm3) 을 계산했다. 계산식은 이하에 나타내는 바와 같다.종양 체적 (mm3) = 1/2 × 장경 (mm) × [단경 (mm)]2 항체-약물 콘주게이트는 모두 생리 식염수 (오오츠카 제약 공장) 로 희석하고, 10 ㎖/kg 의 액량을 꼬리 정맥 내 투여했다. 인간 멜라노마주 A375 세포를 ATCC (American Type Culture Collection) 로부터 구입했다. 생리 식염수에 현탁한 8 × 106 cells 를 암컷 누드 마우스의 우측 복부에 피하 이식하여 (Day 0), Day 11 에 무작위로 군 분류를 실시했다. M30-H1-L4P 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (2) 를 Day 11, 18, 25 에 모두 10 mg/kg 의 용량으로 꼬리 정맥 내 투여했다.결과를 도 17 에 나타낸다. 도면 중의 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 삼각선은 M30-H1-L4P 항체, 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 효과를 나타낸다.항체-약물 콘주게이트 (2) 의 투여에 의해 종양 체적이 현저하게 감소되고, 최종 투여 후는 추가적인 종양 증식이 보이지 않은 것을 나타낸다. 한편, M30-H1-L4P 항체 투여에서는 종양의 증식이 진행되었다.또, 항체-약물 콘주게이트 (2) 가 투여된 마우스에서는, 체중 감소 등의 특히 눈에 띈 소견도 없고, 항체-약물 콘주게이트 (2) 는 독성적으로도 약하고, 안전성도 높다고 생각된다.(시험예 12) 항종양 시험 (2)인간 멜라노마주 A375 세포를 ATCC (American Type Culture Collection) 로부터 구입했다. 생리 식염수에 현탁한 6 × 106 cells 를 암컷 누드 마우스의 우측 복부에 피하 이식하고 (Day 0), Day 18 에 무작위로 군 분류를 실시했다. 항체-약물 콘주게이트 (2) (0.1, 0.3, 1, 3 mg/kg) 를 Day 18, 25, 32 에 각 용량 qw × 3 의 스케줄로 꼬리 정맥 내 투여했다.결과를 도 18 에 나타낸다. 도면 중의 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흑색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (2) 0.1 mg/kg 투여 시, 선 -X- 는 0.3 mg/kg 투여 시, 흑색 삼각선은 1 mg/kg 투여 시, 흰색 둥근선은 3 mg/kg 투여 시의 효과를 나타낸다. 항체-약물 콘주게이트 (2) 는 용량 의존적으로 종양의 축소 효과를 발휘했다.(시험예 13) 항종양 시험 (3)인간 비소세포 폐암주 Calu-6 세포를 ATCC (American Type Culture Collection) 로부터 구입했다. 생리 식염수에 현탁한 5 × 106 cells 를 암컷 누드 마우스의 우측 복부에 피하 이식하고 (Day 0), Day 11 에 무작위로 군 분류를 실시했다. M30-H1-L4P 항체 및 항체-약물 콘주게이트 (2) 를 Day 11, 18, 25 에 qw × 3 의 스케줄로 모두 10 mg/kg 의 용량으로 꼬리 정맥 내 투여했다.결과를 도 19 에 나타낸다. 도면 중의 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 삼각선은 M30-H1-L4P 항체, 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 효과를 나타낸다. 항체-약물 콘주게이트 (2) 의 투여에 의해 종양 체적이 현저하게 감소되고, 최종 투여 후는 추가적인 종양 증식이 보이지 않았다. 한편, M30-H1-L4P 항체 투여에서는 종양의 증식이 진행되었다.또, 항체-약물 콘주게이트 (2) 가 투여된 마우스에서는, 체중 감소 등의 특히 눈에 띈 소견도 없고, 항체-약물 콘주게이트 (2) 는 독성적으로도 약하고, 안전성도 높다고 생각된다.(시험예 14) 항종양 시험 (4)인간 멜라노마주 A375 세포를 ATCC (American Type Culture Collection) 로부터 구입했다. 생리 식염수에 현탁한 8 × 106 cells 를 암컷 누드 마우스의 우측 복부에 피하 이식하고 (Day 0), Day 21 에 무작위로 군 분류를 실시했다. 항체-약물 콘주게이트 (1), (13), (41), (55) 를 Day 21 에 모두 10 mg/kg 의 용량으로 꼬리 정맥 내 투여했다.결과를 도 20 에 나타낸다. 도면 중의 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (1) 투여 시, 흰색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (13) 투여 시, 선 -X- 는 항체-약물 콘주게이트 (41) 투여 시, 흰색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (55) 투여 시의 효과를 나타낸다. 항체-약물 콘주게이트 (1), (13), (41), (55) 의 투여에 의해 종양 체적이 현저하게 감소되고, 모두 종양 증식 억제 효과를 발휘했다.또, 항체-약물 콘주게이트 (1), (13), (41), (55) 가 투여된 마우스에서는, 체중 감소 등의 특히 눈에 띈 소견도 없고, 항체-약물 콘주게이트 (1), (13), (41), (55) 는 독성적으로도 약하고, 안전성도 높다고 생각된다.(시험예 15) 항종양 시험 (5)인간 비소세포 폐암주 Calu-6 세포를 ATCC (American Type Culture Collection) 로부터 구입했다. 생리 식염수에 현탁한 5 × 106 cells 를 암컷 누드 마우스의 우측 복부에 피하 이식하고 (Day 0), Day 12 에 무작위로 군 분류를 실시했다. 항체-약물 콘주게이트 (13), (41), (55) 를 Day 12 에 모두 10 mg/kg 의 용량으로 꼬리 정맥 내 투여했다. 또 비교 대조로서 DE-310 을 Day 12 에 0.1 mg/kg 의 용량으로 꼬리 정맥 내 투여했다. 여기서, 투여량의 표기는 항체-약물 콘주게이트에서는 항체의 투여량에 기초하는 값이며, DE-310 에서는 함유 약물의 투여량에 기초하는 값이므로, 항체-약물 콘주게이트와 DE-310 의 함유 약물량은 대략 1 ： 100 이며, 상기 투여에 의해 동등량의 함유 약제를 투여한 것이 된다.결과를 도 21 에 나타낸다. 도면 중의 흰색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흰색 둥근선은 DE-310, 흰색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (13), 선 -X- 는 항체-약물 콘주게이트 (41), 흰색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (55) 의 효과를 나타낸다. 항체-약물 콘주게이트 (13), (41), (55) 의 투여에 의해 종양 체적이 현저하게 감소된 한편, DE-310 의 투여에서는 종양 체적의 감소는 확인되지 않았다.또, 항체-약물 콘주게이트 (13), (41), (55) 가 투여된 마우스에서는, 체중 감소 등의 특히 눈에 띈 소견도 없고, 이들의 항체-약물 콘주게이트는 독성적으로도 약하고, 안전성도 높다고 생각된다.(시험예 16) 항종양 시험 (6)인간 멜라노마주 A375 세포를 ATCC (American Type Culture Collection) 로부터 구입했다. 생리 식염수에 현탁한 1 × 107 cells 를 암컷 누드 마우스의 우측 복부에 피하 이식하고 (Day 0), Day 11 에 무작위로 군 분류를 실시했다. 항체-약물 콘주게이트 (17), (18), (19), (59), (60), (61) 을 Day 11, 18 에 qw × 2 의 스케줄로 모두 3 mg/kg 의 용량으로 꼬리 정맥 내 투여했다.결과를 도 22 에 나타낸다. 도면 중의 흑색 마름모꼴선은 무처치 종양, 흑색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (17) 투여 시, 흰색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (18) 투여 시, 흰색 둥근선은 항체-약물 콘주게이트 (19) 투여 시, 흑색 삼각선은 항체-약물 콘주게이트 (59) 투여 시, 흰색 사각선은 항체-약물 콘주게이트 (60) 투여 시, 선 -X- 는 항체-약물 콘주게이트 (61) 투여 시의 효과를 나타낸다.항체-약물 콘주게이트 (17), (18), (19), (59), (60), (61) 의 투여에 의해 종양 체적이 현저하게 감소되고, 모두 종양 증식 억제 효과를 발휘했다.또, 항체-약물 콘주게이트 (17), (18), (19), (59), (60), (61) 이 투여된 마우스에서는, 체중 감소 등의 특히 눈에 띈 소견도 없고, 이들의 항체-약물 콘주게이트는 독성적으로도 약하고, 안전성도 높다고 생각된다.배열표 프리텍스트배열 번호 1 - B7-H3 베어리언트 1 의 아미노산 배열배열 번호 2 - B7-H3 베어리언트 2 의 아미노산 배열배열 번호 3 - M30 항체의 CDRH1 의 아미노산 배열배열 번호 4 - M30 항체의 CDRH2 의 아미노산 배열배열 번호 5 - M30 항체의 CDRH3 의 아미노산 배열배열 번호 6 - M30 항체의 CDRL1 의 아미노산 배열배열 번호 7 - M30 항체의 CDRL2 의 아미노산 배열배열 번호 8 - M30 항체의 CDRL3 의 아미노산 배열배열 번호 9 - M30-H1 타입 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 10 - M30-H2 타입 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 11 - M30-H3 타입 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 12 - M30-H4 타입 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 13 - M30-L1 타입 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 14 - M30-L2 타입 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 15 - M30-L3 타입 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 16 - M30-L4 타입 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 17 - M30-L5 타입 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 18 - M30-L6 타입 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 19 - M30-L7 타입 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 20 - M30 항체 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 21 - M30 항체 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 22 - PCR 프라이머 1배열 번호 23 - PCR 프라이머 2배열 번호 24 - CMV promoter 프라이머 ： 프라이머 3 배열 번호 25 - BGH reverse 프라이머 ： 프라이머 4 배열 번호 26 - B7-H3 베어리언트 1 의 뉴클레오티드 배열배열 번호 27 - 항 CD30 항체 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 28 - 항 CD30 항체 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 29 - 항 CD33 항체 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 30 - 항 CD33 항체 경사슬의 아미노산 배열배열 번호 31 - 항 CD70 항체 중사슬의 아미노산 배열배열 번호 32 - 항 CD70 항체 경사슬의 아미노산 배열
	꿈과 끼를 찾고 개발하는 자유학기제 본연의 교육적 순기능이 활성화되기 위하여 교육 본연의 가치를 학교 현장에 접목시키는 교육 제도의 새로운 변화를 모색하는 정책적 노력 이 필요하다(이지연, 2013a; 이지연, 2013b)	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 다섯째, 국가 교육과정의 틀과 대입제도의 변화를 수반할 필요가 있 다. 경쟁적인 진학 시스템을 그대로 둔 채 시행되는 점은 가장 근본적 인 한계로 지적되고 있는 부분이다. 한 학기 동안의 활동이 평가에서 배제되어 자유학기제의 취지에 맞는 학습보다는 사교육에 매진할 우려와 사교육의 활성화 가능성이 제기되고 있다. 체험활동의 효과와 자 유학기제의 취지가 충분히 학부모와 학생들에게 전달될 필요가 있으며, 양질의 체험활동이 계획되고 제공될 수 있도록 최선을 다해야 할 것이다(성은모․노승현, 2013).
	녹색 에너지 플랜트의 주력 시장도 기존의 유럽 지역 위주에서 중국을 위시한 아시아 태평양 지역, 미국, 캐나다 등 북미 그리고 중남미 국가 등 다양한 지역으로 확대되면서 이들 지역에 대한 정보와 더불어 국제협력의 중요성이 앞으로 중요한 요인이 될 것으로 예상한다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 우리나라의 최근 녹색 에너지 플랜트 부문의 산업 동향을 보면 국내 산업이 정체되어 해외 진출이나 수출에 의존하는 경향을 보인다. 우리나라의 대표적인 녹색 에너지 플랜트 산업인 태양광과 풍력부문의 벨류체인별 수출 형태를 보면 부가가치가 낮은 특정 품목에 대한 수출 의존도가 높고 또한 세계 경기 침체 등 외부적인 요인에 의해 매출 등이 민감하게 변동되는 취약성도 있다. 세계적으로 녹색 에너지 플랜트 부문의 경쟁이 치열하다 보니 녹색 에너지 플랜트 부분의 국제 경쟁력은 얼마나 비용을 절감할 수 있는지 그리고 고품위 고순질의 소재나 부품을 얼마나 안정적이고 값싸게 공급하고 공급받을수 있는지가 중요한 잣대가 될 전망이다.
	세아상역의 그룹사 세아STX엔테크는 탈황·탈질설비와 신재생에너지 관련 경험, 태양광 발전 설비 시스템 도입 등을 바탕으로 온실가스 저감의 친환경 기업으로 성장하고 있다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 의류 수출업계 선두 기업 세아상역은 그룹사 세아STX엔테크(옛 STX중공업 플랜트부문)를 통해 친환경 기업으로의 본격 도약을 선언했다. 지난해 그룹사로 합류한 세아STX엔테크는 탈황·탈질설비와 신재생에너지 관련 풍부한 경험을 갖고 있으며, 기존 세아상역의 해외법인들에 대해 혁신적인 온실가스 저감을 진행하고 있다. 세아상역은 중미 지역 법인들에 태양광 발전 설비 시스템을 도입하고 있다. 북중미 아이티에 위치한 자사 법인 S&H Global 신축 공장 중 하나에 태양광 설비 시범 설치를 검토 중이다. 태양광 시스템이 도입된 공장은 사용 전력의 자급자족을 목표로 하고 있다. 세아는 아이티에 그치지 않고, 타 국가에 진출한 생산법인들에도 태양광 설비 증축을 적극적으로 모색 중이다. 인근 니카라과에서는 수력발전소 건립을 추진하고 있다. 연간 1155GW(기가와트)에 달하는 발전량이 기대되는 이 시설을 통해 세아의 현지 생산법인은 물론, 전 국가적인 신재생에너지 공급에 큰 보탬이 될 전망이다. 직접적인 친환경 사업에 있어서도 세아의 기존 성공 사례를 이용해 혁신적인 결과를 기대한다. 인도네시아 내에 위치한 원단 생산 자회사 Win Textile은 염색·워싱 등 원단 후가공에서 발생하는 오폐수를 정화하기 위해 최신 시설의 폐수처리장을 운영하고 여기서 나온 하수 슬러지(하수처리 과정에서 생긴 침전물)를 굳혀 현지 환경 인증을 취득한 자체 연료로 재활용한다. 세아STX엔테크는 이 점에 착안, 폐수 슬러지 연료를 좀 더 정제해 상용 판매가 가능한 수준의 친환경 연료를 개발하고 있다. 이를 통해 1t의 슬러지 연료를 생산하는 데 1.16t의 이산화탄소를 절감할 수 있게 돼 사업성 제고, 대기오염 문제 해결에도 공헌할 예정이다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	혹은 덕선이가 올림픽 준비로 바쁜 나날들을 보낼 때 바로 옆 동네(마들평야와 창동)에서 벌어졌던 일들이다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 20세기 후반 도봉구의 주거환경을 표현하기에는 한 편의 글보다 드라마의 한 장면이 더 효과적일 수 있다. 논문 하나 보다 “응답하라 1988”의 ‘덕선이네’의 하루 일과가 1988년 도봉구, 그 안에서도 쌍문동에 살았던 주민들의 생활과 주거환경을 효과적으로 잘 보여준다. “응답하라 1988” 뿐일까? 그 이전에 KBS 주말드라마 “목욕탕집 남자들” 이 있었고, 애니메이션 “아기 공룡 둘리” 도 쌍문동이 메인 생활공간이다. 20세기 후반의 도봉은 이미 대중문화에서 훌륭히 잘 드러났다. 그러나 드라마나 만화영화에서 소비되었던 도봉의 모습에서 담아내지 못한 것들이 있다. 대중문화에서 다루기에 재미없고 지루하여 글로 설명하고 규명해야 하는 부분이다. 드라마 속 주인공들이 왜 쌍문동에서 살기 시작했는지, 쌍문동이란 공간이 어떻게 만들어졌는지 그 과정에 대한 이야기다. 80년대 ‘평범한’ 이웃으로 그려진 ‘덕선이네’가 왜 하필 쌍문동 단독주택에 살았는지 따위 일수도 있겠다.
	본 연구에서는 북한의 에너지와 자원 교역을 중심으로 최근 동향과 북한의 에너지 및 자원의 상황을 살펴보았다. 에너지와 광물자원부문은 다른 부문과 마찬가지로 신뢰할 만한 데이터가 부족한데 북한과 중국의 자원 교류 데이터를 발표하고 있는 중국 해관의 통계를 바탕으로 북한의 사정을 확인해 볼 수 있다. 일단 북한의 석탄 수출이 2010년부터 급격히 늘어난다. 그 전에는 북한의 대(對)중국 석탄 수출이 통상 1~3억달러 수준이었는데, 작년에는 12억달러 정도로 3~4배 증가했다. 이같이 북한의 대중 석탄수출이 크게 늘어난 것은 북한의 대일 석탄수출이 막히면서 이 물량을 다시 한국으로 수출하다가 2008~2009년경부터 다시 한국으로의 수출 길이 막히면서 이것이 중국으로 전환된 것으로 보인다. 북한의 석탄수출이 늘어난 또 하나의 이유는 북-중간의 구상무역 방식의 석탄교역이 급증한 결과로도 분석하고 있다. 국경지대 중국 기업들이 북한에 탄광설비와 자금을 제공하면 북한이 석탄을 생산하여 석탄으로 변제하는 방식의 교역이 크게 증가한 것이다. 또, 작년에 북한과의 교역을 위하여 북한을 많이 오고갔던 한 사업자에게 들은 바에 따르면 북한 당국은 개인의 상업적 탄광 생산 및 수출을 일부 허용했다고 한다. 북한 당국이 일정분의 조세만 지불하면 개인 생산 및 수출을 허용함에 따라 많은 석탄 사업자들이 활동하고 있다는 것이다. 이 때문에 북한의 전체 석탄 생산량이 증가했을 가능성도 점쳐지고 있다. 한편 작년에는 상반기 때 석탄 수출이 크게 증가한 반면 8월 이후에는 석탄 수출이 크게 줄고 있다. 2011년에도 하반기 때에는 수출이 줄어드는 경향을 보였지만 2012년 하반기에는 더 큰 폭으로 떨어지고 있다. 이는 석탄 수출을 늘리는 데에 있어서 북한 자체의 한계도 있을 것으로 보인다. 화력발전소의 석탄공급이 제대로 이루어지지 않거나, 개인 생산에 대한 규제 강화나, 장비, 부품도입의 문제 등으로 추정할 수 있겠다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 북한의 에너지 교역실태 연구 요약문: 본 연구는 북한의 에너지 동향과 자원 상황에 대해 알아보았는데, 석탄 수출 분야는 2010년부터 급격히 늘어났는데 한국으로의 수출길이 막히자 중국으로 전환되었으며, 북한 당국이 개인의 상업적인 탄광 생산을 제한적으로 허용해 많은 석탄 사업자들이 활발하게 활동하고 있기 때문에 전체 석탄 생산량이 증가한 것으로 보인다.
	제목: 수묵비엔날레, 초?중생 체험학습장‘각광’ 2018 전남국제수묵비엔날레의 수묵화체험과 VR수묵 체험 등의 프로그램은 아이들이 전통 수묵에 대해 고리타분하다는 선입견을 바꿔주었고 이에 힘입어 10월까지 학생 5000여명이 참여할 것으로 전망된다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 수묵화 체험? VR 수묵체험‘51팀 5천여명 예약’ 광양뉴스 [email protected] 아이들에게 고리타분하게만 느껴졌던 전통 수묵이 2018 전남국제수묵비엔날레의 수묵화체험과 VR수묵 체험 등 대중화 프로그램에 힘입어 친근하게 다가서면서 특별한 추억을 선물하고 있다. 국내 가을학기를 맞아 학교별로 현장 체험학습 발길이 이어지고 있는 것. 이미 10월까지 학생 단체 관람팀만 51팀이 예약을 완료해 5000여명이 체험에 나설 것으로 보인다. 실제로 지난 5일 목포 신흥초 5학년 학생 140명이 비엔날레1관인 목포문화예술회관을 찾았다. 비엔날레1관은 현대수묵의 면면을 자세히 들여다볼 수 있는 전 세계의 수묵작품과 미디어아트, 아트월, 수묵체험 공간 등으로 구성돼 있다. 아이들은 사전에 편성된 조에 따라 차례로 입장해 작품해설사(도슨트)와 함께 전시관 곳곳을 질서 있게 관람했다. 특히 부채나 머그컵 등에 직접 수묵화를 그려보는 체험과 VR수묵체험은 학생 단체관람객의 단골코스로 인기가 높다. 수묵화부채, 수묵머그컵, 컵받침을 직접 꾸며 가져갈 수 있어 아이들은 세상에 하나밖에 없는 소중한 추억선물을 받을 수 있다. 체험을 마친 아이들은‘수채화 붓과 느낌이 달라 신기하다’,‘먹으로만 그려 어려웠지만 도전하는 마음이 즐거웠다’,‘수묵이 뭔지 알게 됐다’등의 소감을 밝히며 수묵에 대한 친근감을 표현했다. 현재까지 초·중학교 51팀이 체험학습을 예약한 가운데, 체험 학생들의 반응이 좋아 행사가 진행될수록 체험 관람객이 더 늘어날 전망이다. 목포문화예술회관에서 전시를 관람한 뒤 해안도로를 가로질러 놓인‘문화의 다리’를 도보로 건너면 맞은편에 수묵화 체험 공간이 있다. 여기서는 지난 5월부터 7월까지 목포와 진도지역 초·중학교에서 진행한 수묵놀이교실 참여 학생들의 작품을 감상할 수 있다. 최병용 전남국제수묵비엔날레 사무국장은“하루 체험을 통해 언뜻 보면 멀고도 어렵게만 느껴지는 수묵이지만 아이들은 두려움 없이 다가가 있는 그대로 작품을 눈에 담아가는 듯하다”며“한 번의 체험으로 완성될 순 없지만 어린 시절의 수준높은 미술체험은 훗날 아이들의 정신세계를 풍성하게 해주고 세계를 바라보는 안목을 길러줄 것으로 기대한다”고 말했다. 한편 수묵에 대한 고정관념을 깨뜨리고 완전히 새로운 수묵세계를 열게 될 이번 전남국제수묵비엔날레는 오는 10월 31일까지 목포와 진도 총 6개의 전시관에서 열린다. 국내·외 작가 271명의 작품 312점이 제각각 메시지를 품고 관람객을 기다리고 있다. 입장권은 티켓링크 또는 비엔날레 누리집(sumukbiennale.org)을 통해 구매할 수 있고, 목포문화예술회관과 진도 운림산방에 가면 현장 발권도 할 수 있다. 제공= 전남도청
	19일 방송된 SBS 예능프로그램 '불타는 청춘'에 등장한 '홍성대왕딸기'는 신품종 '아리향'으로, 기존 딸기보다 크기는 50% 이상 크고 28% 더 단단한 신품종으로서 새로운 농가 소득원으로 주목받는 것으로 전해졌다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 정영식 농촌진흥청이 20일 충남 홍성의 한 딸기 재배 농가에서 딸기 신품종 '아리향'을 선보이고 평가하는 자리를 마련한다. 아리향은 딸기 품종 다양화를 위해 지난해 개발한 품종으로, 알이 크고 단단한 것이 특징이다. 사진=농촌진흥청 제공 19일 방송된 SBS 예능프로그램 '불타는 청춘'에 등장한 '홍성대왕딸기'가 시선을 빼앗고 있다. 지난 1월 방송된 KBS뉴스에 따르면 이른바 '홍성대왕딸기'라 불리는 이 딸기는 기존 딸기보다 훨씬 더 크고 단단한 신품종 딸기로 워낙 크기가 커 특수포장이 필요할 정도며 당도도 높아 새로운 농가 소득원으로 주목받는 것으로 전해졌다. 해당 딸기는 농촌진흥청이 개발한 신품종 딸기 '아리향'으로 기존 딸기보다 크기는 50% 이상 크고 28% 더 단단한 게 특징이다. 아리향은 딸기 품종 다양화를 위해 지난해 개발한 품종으로, 알이 크고 단단한 것이 특징이다. 당도와 산도가 조화를 이뤄 폭넓은 소비층을 형성할 것으로 기대를 모으고 있다. 농진청은 "아리향은 기존 품종보다 50% 이상 크기가 크고 28%가량 더 단단하다"며 "비타민C 함량은 생과 100ｇ당 73㎎으로 다른 품종보다 풍부하다. 4∼5알만 먹어도 성인에게 필요한 하루 비타민C 권장량을 충족한다"고 소개했다. 충남 홍성은 아리향을 1㏊ 규모로 시범 재배하고 있으며 이달부터 내년 봄까지 약 30t을 백화점 등에 납품할 계획이다.
	광주 중년밴드 '블럼'은 40대에서 60대까지 연령층도 다양한 이들이 음악학원에서 드럼을 함께 배우다가 모임을 결성해 젊은 날의 꿈을 펼치려 열정을 다하고 있다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: [광주 중년 밴드 ‘블럼’] 생활에 쫓겨 접었던 음악의 꿈 학원서 만난 14명 의기투합 올드팝·트로트…레퍼토리 다양 매년 2차례 자선공연도 광주 서구 매월동의 한 컨테이너 박스에서 연습에 한창인 중년밴드 ‘블럼’. 왼쪽부터 김옥룡(베이스기타), 김승주(보컬), 김용관(드럼), 맹순희, 이지선(이상 기타)씨가 연주에 앞서 포즈를 취하고 있다. /김진수 기자 [email protected] “열정과 끼로 똘똘 뭉친 우리 밴드의 활약을 기대하세요.” 지난 24일 광주 서구 매월동. 논밭 사이에 우둑히 서 있는 컨테이너 박스에서 음악소리가 들려온다. 농기구 자재창고로나 쓰일 법한 이 곳에서 중년 남녀로 이뤄진 밴드 ‘블럼’이 한창 연습에 열중이다. 지난 2012년 서구 금호동의 한 음악학원에서 만나 드럼을 함께 배우던 이들은 학원에서의 연습으로는 음악에 대한 갈증이 풀리지 않자 2014년 모임을 결성해 현재까지 활동을 지속하고 있다. 음악에 대한 열정만으로 뭉쳐진 블럼밴드는 모두 14명의 회원으로 구성됐다. 단지 드럼을 배우기 위해 찾은 학원이었지만 드럼 이외에도 기타, 키보드 등의 악기에도 관심 갖고 아는 것이나 모르는 것들을 서로 알려주고 익혀가며 밴드를 꾸려가는 중이다. 활동 초기에는 마땅한 연습실이 없어 1인에 3만원씩하는 스튜디오에서 연습을 해오며 실력을 키웠지만 꾸준히 새어나가는 연습비용에 부담을 느껴 올해 6월 드러머 김용관(55)씨의 도움으로 현재의 컨테이너에서 연주하고 있다. 40대에서 60대까지 연령층도 다양한 블럼밴드는 음악을 한다면 ‘딴따라’로 치부하던 60~70년대 부모의 반대와 금전적인 어려움으로 접었던 열정을 다시 펼치고 있다. 베이스 기타와 드럼을 연주하는 아버지들, 가족밴드를 만들기 위해 아들과 함께 악기에 도전했다가 오히려 자신이 음악에 매료됐다는 어머니 등 저마다 음악을 다시 시작하게된 이유와 사정은 다르다. 하지만 생업과 자녀 양육 때문에 잠시 접어두었던 젊은 날의 꿈을 다시 펼치기 위해 모였다는 게 공통된 동기다. 자동차 수리업자, 고속버스 운전기사, 압화 지도자, 캘리그래피 강사 등 직업들도 다양해 함께 모이는 시간이 맞지 않아 한번 모였다 하면 서너 시간은 거뜬히 연주하며 실력을 키우고 있다. 연주목록도 다양하다. 80~90년대에 풍미했던 대학가요제 수상곡과 올드팝송을 주로 연주하고 최근에는 요즘 유행하는 가수 박군의 ‘한잔해’라는 트로트곡까지 레퍼토리에 포함시키려 맹연습 중이다. 연습에 대한 성과를 점검하고 봉사도 할 겸 매년 2차례씩 소화자매원을 찾아 자선 공연을 열고 주민행사 등에서도 공연을 펼치며 밴드 이름을 대중들에게 알리고 있다. 베이스 기타의 저음이 심장소리 같다는 김옥룡(54)씨는 “군대 다녀오고 결혼한 후 애들 키우느라 정신 없던 시기가 지나고 여유가 생겨 취미거리를 찾다가 학창시절 밴드활동의 기억이 잊혀지지 않아 시작하게 됐다”며 “음악으로 뭉친 만큼 좋은 추억이 되도록 노력하겠다”고 말했다. 악기별로 필요한 악보복사부터 회원들 합주 시간 정하기까지 모임에서 궂은일을 도맡아하는 이지선(45)씨도 “결혼 후 피아노 학원을 잠시 다닐 때 할머니가 통기타 치시는 모습에 반해 기타로 전향했다”며 “살아가는데 음악적인 요소가 필요할 것 같아 지금까지도 악기를 곁에 두고 연주하고 있다. 회원들과 좋은 음악 함께 하면서 친목을 다져나가고 싶다”고 말했다. 블럼밴드에서 최고령자이자 회장을 맡고 있는 김승주(60)씨는 “오직 음악에 대한 열정으로 모였다. 더욱 더 매진해 봉사활동도 계속하고 직장인 밴드 대회에도 나가 이름도 알리며 광주에서 알아주는 중년밴드가 되도록 노력하겠다”고 밝혔다. /김진수 기자 [email protected]
	현대상선은 '친환경설비 설치 상생 펀드 '조성을 위한 MOU를 체결 하였으며, 국제해사기구(IMO)의 황산화물 배출 기준을 따르기 위해 내년 상반기까지 컨테이너선 19척에 스크러버(황산화물 정화설비)를 설치하기로 했다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 황호선 한국해양진흥공사 사장(왼쪽 네 번째)과 유창근 현대상선 사장(다섯 번째)이 친환경설비 상생펀드 참여사 대표들과 서명식을 마친 후 기념촬영을 하고 있다. 현대상선이 현재 운항 중인 주요 컨테이너선 19척에 내년 상반기까지 스크러버를 설치하기로 했다. 스크러버는 황산화물 등 선박에서 나오는 배기가스를 정화해주는 친환경설비다. 현대상선은 21일 서울 여의도 한국선주협회 사무실에서 '친환경설비 설치 상생 펀드' 조성을 위한 업무협약(MOU)을 체결했다. 협약식에는 황호선 한국해양진흥공사 사장과 유창근 현대상선 사장, 하명호 현대종합상사 사장, 서석원 SK트레이딩인터내셔널 사장, 안광헌 현대글로벌서비스 사장, 신준섭 디섹 사장, 윤영준 파나시아 사장 등이 참석했다. 현대상선은 이 펀드와 자기 자금, 대출 등을 통해 주요 컨테이너선 19척에 스크러버를 장착할 계획이다. 소요 재원은 총 1,533억원이며 해양진흥공사 보증부 대출 623억원과 친환경설비 상생 펀드 자금 450억원, 현대상선 자기 자금 460억원 등으로 자금을 충당할 계획이다. 현대상선 관계자는 "내년부터 본격적으로 적용되는 국제해사기구 규제에 대응하기 위해 이미 작년 7월 스크러버를 장착한 1만1,000TEU(1TEU는 20피트짜리 컨테이너 1개) 규모의 컨테이너선 2척을 인도받았다"며 "내년 2분기부터 인도 예정인 2만3,000TEU급 12척 등 초대형 컨테이너선 20척에도 스크러버를 장착하도록 발주한 상황"이라고 말했다. 국제해사기구(IMO)는 내년 1월부터 공해상에서 운항하는 모든 선박의 황산화물 배출 기준을 현재 3.5%에서 0.5%로 낮출 계획이다. 이를 충족하기 위해서는 선박에 스크러버를 설치하거나 선박 연료를 저유황유 또는 액화천연가스(LNG) 연료로 교체해야 한다.
	이 같은 2대 재정준칙은 1997년 7월 예산에서 처음 발표, 1998년 예산안에서 재공표되었으며, 차입준칙은 투자지출에 한해 차입을 허용하는 것으로 경상지출의 자금조달을 위한 차입금지를 명시하며, 지속가능한 투자준칙은 GDP 대비 공공부문의 순부채 비중이 안정적 수준으로 유지되어야 한다는 것으로 다른 조건이 동일하다면, 통상 GDP의 40% 이내로 유지되어야 함을 공표한다. 그러나 2008년 경기침체로 인하여 경상수지 적자와 공공부문 순부채가 크게 증가하여 재정준칙에서 설정한 범위를 넘어섰고, 이에 재무부는 2008년 사전예산에서 한시적 재정준칙을 채택한다. 특히, 지속가능한 투자원칙은 금융위기 이전까지 잘 지켜졌으나 금융위기 이후 공공부문 순부채가 급격하게 증가하게 되었다. 반면에, 한시적 재정준칙은 중기적인 재정안정성에 대해 명확한 정책방향을 제시한다는 전제 하, 재정적자 및 공공부문 부채 기준의 일시적 이탈을 허용하고 경기 조정된 경상수지 등 재정지표로 재정정책 방향을 설정한다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: PAYGO제도 도입을 위한 국회 의사절차 개선 방안 및 재정 건전성 제고를 위한 효과적 대안 요약문: 1997년 7월 발표된 2대 재정준칙 즉 차입준칙과 지속 가능한 투자준칙은 2008년 금융위기 전까지 유지되었다. 그러나 2008년 금융위기로 인한 경기침체로 경상수지 적자와 공공부분 순부채가 크게 증가하자 재무부는 2008년 사전예산에서 한시적 재정준칙을 채택했다.
	하지만 몸짓만으로는 내용을 전달하는데 어려움과 지루함이 따르기 때문에 노래를 곁들임으로써 전달력을 높였다는 점이 뮤지컬 형식의 원류라고 볼 수 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 무대에서는 각종 무구(舞具)들과 포구문이 관중의 시선을 끈다. 붉은 칠을 한 나무로 만들어 용과 봉황을 그리고 무늬가 있는 비단으로 장식했으며 문에 구멍을 내어 풍류안을 만든 포구문. 이를 무대 중앙에 세우고 무대(舞隊: 춤추는 여자 무용수)가 악공과 기녀와 함께 무대의 남쪽에 정렬한다. 무용수들이 들고 있는 큰 비단 양산, 화려한 부채, 깃발 등의 장식품들이 시각적으로 무대를 다채롭게 장식한다. 드디어 악공이 연주를 시작하면, 죽간자가 등장하고 공연 시작을 알리는 구호(口號: 임금에게 바치는 노래)를 올린다. 이어 여자 무용수들과 기녀들이 등장해 차례로 6곡 내외의 노래에 맞춰 춤을 추는데 그 내용은 임금의 덕을 칭송하고, 건강과 장수를 빌며, 나라와 백성의 평안을 기원하는 것이다.
	국가 또는 지방자치단체가 종전부터 일반 공중의 통행로로 사실상 공용되던 토지에 대하여 필요한 공사를 하여 도로로서의 형태를 갖춘 다음 사실상 지배주체로서 도로를 점유하게 된 경우, 자연발생적 도로에 관하여 그 소유자가 사용수익권을 포기하고 스스로 도로로 제공한 것으로 보기 어렵다고 한 원심판결을 수긍한 사례.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: [1] 자연발생적 도로에 관하여 그 소유자가 사용수익권을 포기하고 스스로 도로로 제공한 것으로 보기 어렵다고 한 원심판결을 수긍한 사례. [2] 국가 또는 지방자치단체가 종전부터 일반 공중의 통행로로 사실상 공용되던 토지에 대하여 필요한 공사를 하여 도로로서의 형태를 갖춘 다음 사실상 지배주체로서 도로를 점유하게 된 경우, 그 토지에 대한 임료 상당의 부당이득액을 산정하기 위한 기초가격은 도로로 제한받는 상태, 즉 도로인 현황대로 감정평가하여야 한다.
	본고에서는 복잡성을 띠고 있는 월평균 가계소득에 관련된 제 변인들을 파악하기 위해 패널 데이터를 이용한 연구 모형을 설정하고 이를 통해 가계소득에 결정적으로 영향을 미치는 제 변인에 대하여 조사, 분석, 검증한다.	주어진 문장을 읽고 간략하게 요약해주세요. 문장: 가구당 월평균 가계소득은 그룹(지역)별, 시간별로 다양한 원인에 의해서 가게소득 결정요인이 이루어지고 있어 복잡성을 띠고 있다. 본 연구에서는 복잡성을 띠고 있는 월평균 가계소득에 관련된 제 변인들을 파악하기 위해 패널 데이터를 이용한 연구 모형을 설정하고 이를 통해 가계소득에 결정적으로 영향을 미치는 제 변인에 대하여 조사, 분석, 검증한다. 본 연구는 3그룹(전국, 6개 광역시, 서울)을 분석대상으로 하였다. 분석기간은 2005년 1월부터 2009년 9월까지의 자료를 이용하였고. 월평균 가계 소득액을 종속변수로 설정하고 물가의 대용 변수로서 소비자물가지수, 주택매매가격지수, 경기변수로서 선행종합지수, 금리 및 증권변수로서 주택담보대출 과 종합주가지수 사회현상 변수로서 고용률, 보건 의료비 지출률을 설명(독립)변수로 투입하였다. 월평균 가계소득 요인을 추정한 결과 선행(경기)종합지수와 주택담보 대출은 정(+)의 영향을 미치는 유의한 변수로 나타나고 고용률, 주택매매가격지수와 보건의료비 지출률은 음(-)의 영향을 나타내는 유의적인 변수이지만 소비자물가지수와 종합주가지수는 음(-)의 영향을 나타내는 비유의적인 변수로서 월평균가계소득에는 큰 영향을 주지는 않은 것으로 나타났다.
	발표자의 지적과 같이 ‘민사사건의 형사화’에 대한 실효성 있는 억제방안과, 특히 우리 법원이 현실적으로 취할 수 있는 입장 등에 관하여 발표자의 고견을 듣고 싶습니다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: [질의] 먼저, 사적 자치가 우선되어야 할 민사영역에 대하여 국가 형벌권이 개입하는 것 자체에 대해서는 그 보충성을 감안하여 필요, 최소한으로 자제되어야 한다는 발표자의 견해에 전적으로 동의합니다. 오늘날 우리사회에서 계약불이행 등과 같은 민사상의 분쟁이 일어나면, 그 계약 등으로 피해를 입은 자는 이를 민사적으로 해결하려하지 않고 형사적 수단을 사용하여 처리하려는 관행이 일반화되어 있다고 보이는데, 그 주된 원인은 발표자의 견해와 같이 민사재판의 증거확보를 위한 방편으로 수사기관의 이용, 심리적 압박을 통한 채권회수, 이에 부응한 사법기관의 조치(법원의 방조 등) 등이라고 보입니다.
	이는 미국우선주의(America first)와 양립할 수 없는 개념이며, 미국과는 다른 방식으로 국제 질서와 규범을 창출해 나가겠다는 생각이 내포되어 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 이 구상 속에서 핵심 과제는 미국을 극복해야 한다는 것인데, 그 전략으로 이번에 나온 신형국제관계에 주목하고 싶다. 시진핑 1기에 중국은 미국을 향해 신형대국관계를 집요하게 요구하였으나 한 번도 미국의 승인을 받지 못했다. 집권 2기에는 해양강국과 신형대국관계라는 표현이 사라지는 대신 신형국제관계가 등장했다. 신형국제관계는 미국에 의존하는 질서와 규범의 창출이 아니라 중국이 주도하여 모든 국가를 아우르는 국제관계를 만들어 나가는 을 추구하며, 그 핵심은 공존, 공영, 호혜, 상호 존중, 나아가 국제질서의 민주화까지 포함한다.
	제목: 아이들과 가볼만한 순천만 가을정원 페스타 '고향으로 떠나는 추억여행', '아빠가 들려주는 동화같은 이야기'를 테마로 순천만 가을정원 페스타가 펼쳐지며 꽃길을 따라 마술공연과 코믹쇼, 버스킹도 펼쳐저 아이들과 함께 가볼만 하다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 가을을 대표하는 국화꽃을 화려하게 수놓은 이번 가을정원에서는 '고향으로 떠나는 추억 여행','아빠가 들려주는 동화 같은 이야기'를 테마로 펼쳐진다. 밤에는 색색의 조명으로 환상적인 국가정원으로 변신한다. 가을정원 페스타 조감도 국가정원 동문에서는 국화터널을 지나 오래된 앨범을 넘기면 순천만의 나룻배와 두루미를 만나고 옛집에서 동심으로 돌아가 전통놀이를 즐길 수 있다. 서문에서는 기린, 공작, 물고기와 함께 동심 가득한 이야기를 마음껏 꾸밀 수 있다. 가을 소풍의 절정은 습지센터 앞 밤하늘 별 속에서 헤엄치는 고래의 모습이다. 나무도감원, 도시숲, 나눔숲 등 국가정원 구석구석에서도 핑크뮬리를 비롯한 코스모스, 구절초, 메리골드 같은 화려하고 이색적인 모습을 감상할 수 있다. 이 뿐인가. 꽃길을 따라 산책하면 마술공연과(헬로포터, 사이언티스트 등) 코믹쇼(삐에로빈코믹쇼, 바바와콩가 등), 버스킹(홍동균밴드와 싱어송라이터)이 펼쳐진다. 국가정원 동문 낙우송길과 중국정원 앞 광장에서 두 컨셉의 공연이 하루 두 차례 선보인다. 회당 공연시간은 30분 정도다. 또 9일부터 23일까지 제6회 대한민국 한평정원 페스티벌이 열린다. '행복한 정원', '따뜻한 정원','편안한 정원'을 주제로 정원 작가와 일반인 그리고 학생들의 열정이 담긴 한 평 크기의 51개의 정원이 만들어지는 이색적인 모습을 만날 수 있다. 시상은 농림축산식품부장관상 1팀, 행정안전부장관상 1팀, 산림청장상 1팀, 도지사상 3팀, 순천시장상 9팀이며 상금으로는 600만원에서 100만원까지 다양하다. 순천만국가정원에 꾸며진 가을정원 조감도 오는 25일부터 27일까지 3일간 순천만국가정원과 순천만생태문화교육원에서는 17개 광역자치단체들이 참여하는 '2019 대한민국 균형발전박람회'가 열린다. 주요 행사로는 생태문화교육원에서 열리는 정책세션, 혁신가 워크숍이다. 또 국가정원에서 토크콘서트와 버스킹 가든 스테이지 공연이 펼쳐진다. 순천만국제교향악 축제도 열린다. 25일부터 30일까지 5일 동안 순천만국가정원과 문화예술회관 대극장에서 진행된다. 순천만국가정원에서는 균형발전박람회 개막 축하기념으로 25, 26일 이틀동안 19시부터 정영훈, 임동혁의 오프닝 콘서트, 프라임필하모닉 오케스트라 공연이 펼쳐질 예정이다.
	새만금 외해 연구개발사업에 대한 정책적, 기술적, 경제적 관점에서 타당성을 평가하는 것은 대규모 재원이 투입되는 연구개발사업 추진 여부를 결정하는 과정에서 필요한 사항이다. 이 연구개발사업에 대한 타당성을 평가할 때 세가지 요소항목을 평가해야 하지만, 예산 및 인력의 제약으로 기술적 타당성 검증을 위한 특허 분석이나 경제적 타당성 검증을 위한 별도 연구는 간접 자료를 활용하였다. 이에 따라 기술적 타당성은 우리나라 해양환경기술 개발 수준을 한국해양과학기술진흥원의 ‘MTRM 2020(해양과학기술개발로드맵’의 기술격차 자료를 이용하여 도출하였다. 경제적 타당성은 해양환경관리에 대한 경제적 타당성 연구사례를 활용하여 기술하였다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 새만금 외해 해양환경관리 연구개발 추진 로드맵 요약문: 사업 추진 여부 결정 과정에 필요한 새만금 외해 연구개발사업 타당성 평가의 세 가지 요소 항목 중 기술적, 경제적 부문은 예산 및 인력 제약으로 간접자료를 활용하였다.
	즉, 우리의 심사기준이 3류를 상품의 기능을 중심으로 “미용제품”과 “세제”로 나누어 “향료, 다른 류에 속하지 않는 화장품”(G12)과 “비누와 세제, 치약”(G13)으로 구 분하고 있는 것과는 대조적으로 Taxonomy 그룹타이틀은 용도를 중심으로 “인체용 세면 용품”과 “비인체용 세정 및 방향제”로 구분하고 있다는 점이 특징적이라 할 만하다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 우리의 심사기준과는 달리 “세정제(G1301) 및 방향제(G1202)”를 하나의 그룹타이틀로 구 분하고 있는 반면에, “향료류”(G1202)를 “세면용품”의 subgroup 타이틀로 구분하고 있으 며, “바디세정제(G1301B) 및 뷰티케어제(G1201B)”를 하나의 subgroup 타이틀로 구분하 고 있다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 제공하세요.	함께	이 문제에서는 주어진 텍스트 내의 <MASK>로 표시된 부분에 들어갈 적절한 단어를 예측해야 합니다. <MASK>가 위치한 문장의 전체 문맥을 분석하여, 문장의 나머지 내용과 일관되게 <MASK>에 들어갈 가장 적합한 단어를 답하세요. #텍스트: 관계중독(Relationship Adiction)이란 상대방과 관계를 형성하고 유지하는데 중독적인 양상을 보이는 것을 의미한다(Martin, 1994). 일반적으로 무언가에 중독된다는 것은 자신에게 신체적, 정신적으로 해로운 결과를 준다는 사실을 알면서도 그 행동을 지속하고, 중독이 된 대상에 대한 강박관념과 집착에 빠지며, 중독물에 대한 자신의 생각과 행동을 조절하지 못하는 특징을 내포한다(Bireda, 205; Schaefer, 2010). 관계에 중독된다는 것도 이에 근거한다. 종종 자신에게 해로운 관계일지라도 상대방과 <MASK> 있어야 한다는 강박감에 사로잡혀 집착하게 되고 상대나 관계에 대한감정이나 행동의 통제가 불가능하여 그 관계를 끊어내지 못하는 이들이 있다. 즉, 관계중독이란현재 맺고 있는 관계 자체가 중독물의 핵심으로, 자신이 맺고 있는 관계가 잘못이란 것을 알면서도 상대방과 <MASK> 있어야만 한다는 강박감에 사로잡혀 사람이나 관계에 대한 감정을 통제할 수없는 상태를 의미하는 것이다(Martin, 1994;Whiteman & Petersen, 2004). Whiteman과Petersen(2004)은 관계중독을 사랑중독, 사람중독, 성중독의 3가지 하위유형으로 구분하였고, 관계중독을 사랑중독이라 명명한 Peabody(2010)은 이를 사람에 대한 중독, 관계에 대한 중독, 사랑에 대한중독으로 구분하기도 하였다.
	제목: ‘국제 도시 광주’ 경쟁력 업그레이드 광주는 2015년 하계 유니버시아드에 이어 2019 광주세계수영대회까지 성공적으로 마무리하며 도시 경쟁력을 크게 높였으며, 이와 동시에 지역민들의 자발적이고 헌신적인 참여가 빛났다는 평가를 받았다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: U대회·수영대회 세계 스포츠 메가이벤트 성공적 마무리 나눔과 연대 시민정신·남도 문화자산 지역 성장동력 승화 광주세계수영대회 결산 <2> 도시 브랜드 높였다 광주세계수영선수권 대회 서포터즈와 시민들이 29일 광주시 광산구 수영대회 선수촌에서 퇴촌하는 각국 선수단을 위해 환송행사를 열고 있다. <광주세계수영선수권대회 조직위 제공> ‘빛고을’ 광주가 ‘2019 광주세계수영대회’를 성공적으로 마무리하면서 도시 경쟁력을 크게 높였다는 평가다. 지난 2015년 하계 유니버시아드(이하 U대회)에 이어 ‘2019 광주세계수영대회’까지 세계적인 스포츠 메가이벤트를 두 차례나 성공으로 이끌면서 광주를 전 세계 속에 다시 한번 각인시켰기 때문이다. 저비용으로도 훌륭한 시설과 원활한 진행, 시민들의 자발적 참여 등을 통해 성공 대회를 이끌었고, 맛과 멋, 흥의 남도 문화가 ‘한류 열풍’과 함께 세계 속에서 빛을 발했다. 대회비용을 최대한 절약하는 동시에 독특하고 아름다운 남도문화 자산 활용을 극대화해 새로운 지역성장 동력으로 승화시켰다는 점은 이번 대회의 가장 큰 성과로 남을 전망이다. 무엇보다 자발적이고 헌신적인 시민참여로 지역민들의 애향심과 자부심, 공동체 의식이 더욱 및나는 대회였다는 평가다. 자원봉사와 시민서포터즈를 통한 광주시민들의 자발적인 참여와 후원은 U대회에 이어 나눔과 연대의 ‘광주 시민정신’을 더욱 돋보이게 했다는 분석이다. 특히 의향(義鄕)·예향(藝鄕)·미향(味鄕)의 삼향(三鄕)을 전 세계에 널리 확산시키면서 광주만의 도시 브랜드를 한층 업 그레이드 시켰다는 평가도 받고 있다. 한 도시의 고유한 역사적·사회적 자산과 정체성에 따라 사람들에게 인식되는 브랜드를 도시 브랜드로 정의하고 있는 만큼 이번 대회를 통해 광주의 역사와 정체성, 그리고 성숙한 시민의식까지 긍정적인 이미지를 전 세계인들에게 심어주는 계기가 됐기 때문이다. 대회 기간 중 광주만의 맛과 멋, 흥을 제대로 알릴 수 있는 다양한 문화행사와 축제가 광주시내 곳곳에서 열렸고, 이를 관람한 인원만 8만9000여명으로 집계될 정도로 큰 인기를 끌었다. 이 가운데 시민들의 자발적인 참여와 후원으로 진행된 선수단 문화체험관광은 ‘의향’ 광주의 정의로움과 ‘예향’ 광주의 전통문화예술, ‘미향’ 광주의 맛깔스러운 음식을 세계인들에게 알리는 기회가 됐다. 대회 기간 중 한국 민주주의에 이정표를 세운 5·18 사적지를 운행하는 시티투어와 각종 관광상품도 600여명의 외국인 선수와 임원들이 이용해 민주·인권·평화의 ‘광주정신’을 세계에 널리 알리는 데 기여했다. 이처럼 국제대회 성공 개최의 힘을 이제 도시 브랜드 향상과 지역경제를 업그레이드하는 새로운 동력으로 삼아야 할 것으로 보인다. U대회와 수영대회를 통해 국제적 경쟁력을 입증한 남도 음식, 전통시장, 고품격 문화관광 자원, 인권 유산 등 광주만의 유산을 지역경제 활성화와 연계한다면 광주가 새로운 도약을 할 수 있는 계기가 될 것으로 전망된다. 광주시 관계자는 “국내 다른 지방자치단체들이 이번 광주 수영대회를 ‘국제대회 성공 도시 모델’로 벤치마킹에 나서고 있고, 오는 2021년 세계수영선수권대회 개최 도시인 일본 후쿠오카시도 광주 대회를 벤치마킹하고 나서고 있다”면서 “광주가 두 번의 국제 대회를 성공적으로 치를 수 있었던 것은 그만큼 도시 경쟁력을 갖추고 있기 때문으로 해석될 수 있다”고 설명했다. /최권일 기자 [email protected]
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	특히 외국인의 경우 고추장이 가지는 특유의 냄새 때문에 기피하는 식품 중의 하나이며 고추장의 맛을 배가시키면서 외국인의 입맛에도 맞고 냄새도 최대한 줄여서 건강식품으로서의 해외수출을 할 수 있도록 하는 것이 한국인이 해결해야할 숙제로 남는 것이다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 일반적으로 종래의 고추장은 엿기름 추출물에 찹쌀이나 쌀가루 등의 전분을 호화 시킨 후 여기에 엿기름 추출물을 넣어 전분을 액화, 당화시킨 후 여기에 메주가루와 고춧가루를 혼합하고 소금을 넣은 후 자연발효 및 숙성시켜 제조하는 것으로, 전분을 엿기름으로 유래시키는 당질, 메주콩속의 단백질, 지방 등의 영양 성분과 고추의 캡사이신(capsaicin), 캡산틴(capsanthin) 등이 다량 함유되어 있고, 매우면서도 감미가 있으며 맛이 담백한 전통 조미료중의 하나이다. 이와 같은 영양 성분에도 불구하고 종래의 고추장은 장맛 특유의 냄새와 짠맛이나 매운맛이 지나치게 강하여 어린이나 외국인에게 기피감을 주고 바람직하지 않게 남아있는 엿기름 추출물 유래의 효소작용이나 고춧가루로부터 혼입되기 쉬운 잡균에 의해 고추장 보존시 변질의 우려가 있는 문제점이 있다.특히 외국인의 경우 고추장이 가지는 특유의 냄새 때문에 기피하는 식품 중의 하나이며 고추장의 맛을 배가시키면서 외국인의 입맛에도 맞고 냄새도 최대한 줄여서 건강식품으로서의 해외수출을 할 수 있도록 하는 것이 한국인이 해결해야할 숙제로 남는 것이다.한편, 최근에는 황칠의 우수성이 널리 알려지면서 널리 건강 음료로 널리 사용되기도 하는 데 황칠에 대해서 살펴보면, 황칠나무(黃漆木)는 쌍떡잎식물 산형화목 두릅나무과의 상록교목에 속하는 것으로 그 표피에 상처를 내면 노란 액체(진액)가 나오는데 이것을 모아 칠하는 것을 황칠 이라고 하며 전통적인 가구의 도료로 사용하였으나 황칠의 효능이 알려지면서 황칠이 음료로 널리 사용되고 있는 것이다.즉, 황칠이 지니고 있는 효과로는 잡 냄새를 없애주고, 맛을 향상시키는 조미 효과와, 인체에 흡수되고 나면 몸에 안 좋은 지방을 제거하는 효과, 혈액 내 몸에 있는 나쁜 콜레스테롤을 감소시키고, 몸에 좋은 콜레스테롤은 증가시키는 기능 등 건강 식품으로서의 기능을 함께 가지고 있는 것으로 현재 황칠을 이용한 다양한 제품이 개발되어 시판되고 있는 것이다.그러나 황칠은 잡 냄새를 잡아주기는 하나 황칠 자체가 가지고 있는 맛과 향이 사람이 음료 하기에는 약간 거부감을 느끼게 되는 폐단이 있는 맛과 향에 있어 다소 거부감이 있는 문제점도 있는 것이다.이와 같은 효능이 알려지면서 소금에 황칠을 표면에 도포한 소금도 개발이 되어 국내 특허등록된 사례도 있다.선 출원된 황칠 소금은 소금의 외 표면에 황칠을 분무한 황칠소금이 공개특허공보 제10-2012-0049644호로 출원공개된 바 있으며, 공개특허 제10-2012-0066094호는 액상의 황칠과 소금을 1:1의 비율로 넣고 교반기에서 교반 한 후 800~1000도의 고온으로 덕음 시켜 수분을 증발시킨 후 건조시키는 황칠소금이 제공된 바 있고, 황칠과 동충하초를 효소 액을 사용하여 발효시키는 발효소금이 공개특허 제10-2013-0127043호로 제공된 바 있다.그러나 이와 같은 모든 소금은 소금의 외 표면을 황칠로 코팅하는 방법으로 이루어져 있기 때문에 소금이 굵은 소금으로만 사용 가능하고 가는 소금으로 만들기 위해 분쇄하는 경우 소금의 곁 부분에 해당하는 소금은 노란색을 띄나 내부에 해당하는 소금은 소금 자체의 힌 색상과 노란색이 뒤 섞이는 색상이 되게 되어 상품성과 효과가 저하되는 문제점이 있는 것이다.
	이들 학부모지원단과 50여 명의 강사들은 수시로 모임을 갖고 문제점을 개선하여 프로그램의 질 관리에 성공하고 있다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 학부모들은 방과후학교의 운영 주체가 되어, 프로그램 개설부터 강사 채용까지 직접 참여하고 있다. 성남장안초에는 방과후학교 운영 과정에서 생기는 모든 문제에 대해 개선방안을 연구하고, 프로그램을 지속적으로 모니터링하는 학부모지원단이 있다. 학부모지원단은 방과후학교를 유지하고 운영하게 하는 든든한 버팀목이다. 91명의 모니터요원은 각각의 프로그램을 매의 눈으로 개선할 사항은 없는지 꼼꼼하게 점검한다. 영어, 영재과학, 음악, 수학, 언어/한국사/다문화, 미술/과학, 스포츠/특별영역별로 학부모위원으로 구성된 소위원회와 방과후학교 담당교사들로 구성되어 있다.
	2007년 중국야구리그(CBL) 시즌은 톈진 라이온스가 광둥 레오파스를 3승 1패로 물리치고 결승전에서 우승했습니다. 베이징 타이거즈와 쓰촨 드래곤스, 상하이 골든이글스, 장쑤 호프스타스 등 다른 팀들과도 경쟁했으나 톈진 라이온스가 최종적으로 우승했습니다. 각 팀별 경기 수, 승패, 승점 및 개인 수상 목록도 제공되었습니다.	2007년 중국 야구리그에서 톈진 라이온스가 우승한 결과는?
	제니퍼 클라이드는 미국 출신으로 대한민국에서 활동하는 방송인이다. 한국계 미국인으로, 미국 펜실베이니아주에서 태어났다. 서울국제학교를 졸업한 후 뉴욕의 파슨스 디자인 대학교와 홍익대학교 산업 디자인과를 다니며 학력을 쌓았다. 아리랑 TV 리포터로 첫 방송 경력을 쌓은 뒤, 현재는 아리랑, EBS 등의 방송국에서 영어 관련 프로그램에 참여하고 있다. 또한 서울교통공사, 한국철도공사, 서울시내버스, 수도권 전철, 수도권 전철, 서울 지하철, 부산 도시철도, 대구 도시철도, 광주 도시철도, 서울시티투어버스, 용인 경전철, 의정부 경전철 공항철도 등의 안내방송에도 참여하고 있다. 또한 성우로서 다양한 애니메이션과 드라마에 목소리를 냈으며, 영어 강좌인 Speak Out English, Speaking Master Class, Business English 등에도 참여하고 있다.	"제니퍼 클라이드는 미국에서 태어났나요?"
	본 발명은 심장근육 세포의 수축력을 실시간으로 정밀하게 측정할 수 있는 센서가 집적화된 폴리머 구조체 검사 장치 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 자세하게는 폴리다이메틸실록세인(Polydimethylsiloxane, PDMS)으로 구성된 다이어프램 위에, 배양된 심장근육 세포의 수축력에 의해 변형되는 다이어프램의 변위를 레이저 변위계를 이용하여 측정하며, 또한 집적화된 센서를 이용하여 다이어프램의 스트레스에 의해 발생하는 저항변화를 통하여 심장근육 세포의 수축력을 측정하는 폴리머 구조체 검사 장치 및 그 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 폴리머 구조체 검사 장치는, 심장근육 세포의 수축력이 작용하게 되는 다이어프램에 스트레인 센서 및 레이져 변위계 측정을 위한 반사판이 집적화되어, 두 가지의 다른 방식으로 세포의 수축력을 측정함으로써 정밀한 측정 및 분석이 가능한 효과를 보인다. 또한 본 발명에 따른 폴리머 구조체 검사 장치의 다이어프램은 4면이 고정단으로 형성되어 세포 성장시 표면에서 발생하는 응력에 의한 초기 bending이 감소함으로써 레이져 변위계 사용에 용이하며, 각 웰(well) 별로 병렬 구조체 적용에 따른 평균값 확보, 병렬 웰 플레이트(well plate) 사용에 따른 다중 약물 검사 및 레이져 변위계 측정 시 스테이지 구동에 따른 고속 약물 검사가 가능한 효과를 보인다.	주어진 문장을 읽고 간략하게 요약해주세요. 문장: [ 발명의 명칭 ] 고속 다중 약물 심장 독성 검사 플랫폼 High-Speed and Multi-Analysis Test Platform for Cardiotoxic Effect of Drug [ 기술분야 ] 본 발명은 심장근육 세포의 수축력을 실시간으로 정밀하게 측정할 수 있는 센서가 집적화된 폴리머 구조체 검사 장치 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 자세하게는 폴리다이메틸실록세인(Polydimethylsiloxane, PDMS)으로 구성된 다이어프램 위에, 배양된 심장근육 세포의 수축력에 의해 변형되는 다이어프램의 변위를 레이저 변위계를 이용하여 측정하며, 또한 집적화된 센서를 이용하여 다이어프램의 스트레스에 의해 발생하는 저항변화를 통하여 심장근육 세포의 수축력을 측정하는 폴리머 구조체 검사 장치 및 그 제조방법에 관한 것이다. [ 배경기술 ] 고혈압, 당노병과 더불어 심장병은 3대 성인변의 하나로 꼽히고 있다. 이중 심장병으로 인한 사망은 세계적으로 연간 1,700만 명에 이르고 있고 문제가 가장 심각한 나라 중의 하나인 미국의 경우에는 하루에 약 2,600명이 심장병으로 사망하고 있다. 따라서 선진국을 중심으로 심장 질환 관련 약물과 치료법의 개발이 활발하여 세계적인 시장 규모가 약 45억 달러에 이르고 있다. 우리나라에서도 심장병의 중요성이 인식되어 활발한 연구가 진행되고 있다.비만, 당뇨, 고혈압 등 여러 가지 병인으로 인해 심장에 혈압 과부하(pressure overlode)가 걸리면 심장은 심근비대라는 현상으로 반응하게 된다. 심장은 출생 전에는 자율 박동하면서 활발하게 세포 분열을 하지만. 출생 직후부터 발생학적으로 분화가 완전히 종결된 기관으로 더 이상의 세포증식이 불가능하다. 따라서 심장의 기능(cardiac output)을 증가시켜야 할 필요가 생기면, 기존의 심장근 세포의 크기를 증가시켜 심근의 수축능력(contractility)을 올리는 것이 유일한 대책인데 이런 생리 현상을 심근비대하고 한다. 심장근(cardiac muscle)이란 심장 벽에서 발견되는 불수의 가로무늬근의 하나로서, 카디오미오사이트(cardiomyocytes) 또는 카디악 미오사이트(cardiac myocytes)라고 불리기도 한다. 심장근은 가로무늬가 있는 점과 수축한다는 점에서 골격근(skeletal muscle)과 유사한 점이 있으나, 그 구조, 기능, 수축조절 및 자극-수축 반응의 측면에 있어서 평활근(smooth muscle)과는 근본적으로 다르다.심근비대는 외부의 자극에 의한 보상 반응(compensation)으로 여겨지고, 그 자체로는 큰 문제로 여겨지지는 않는다. 그러나 이 심근비대가 일정 기간 오래 지속되면 심부전으로 악화될 수 있는 가능성이 매우 높다. 심부전은 각종 스트레스가 지속되어 그 허용범위를 넘어서게 되면 심장 근육 세포의 쇠퇴 및 사멸에 의해 심장의 벽이 얇아지고 심방과 심실의 내강이 확장되어 심장의 기능이 매우 저하되어 있는 것을 일컫는다. 인간의 경우 여러 가지 병인으로 심근비대(보다 정확하게는 LVH, left ventricular hypertrophy)가 발생하거나 관상동맥의 폐색으로 인한 심근경색(MI , myocardial infarction)이 발생하게 된다. 이것은 각각 심장의 이완기(diastolic) 및 수축기(systolic) 기능장애를 가져오게 되는데, 이것은 사람에 따라 수년에서 수십년 동안 별 특이한 증상 없이 유지될 수 있다. 그러나 이것들이 일단 심부전(heart failure)으로 진행이 되면 수개월에서 수년 사이에 급사할 수 있는 가능성이 매우 높다. 이러한 심부전의 치료를 위한 약제의 연구 개발 또는 개인별 약물 적합성 등의 영향 평가가 필요하게 되며, 이때 약물 투여 시에 심장근육 세포의 수축력을 측정하여 약품 적합성 및 심장근육 세포에 대한 독성을 평가할 수 있다. 또한, 심장근육 세포의 수축력을 정량적으로 측정하는 것은 심부전의 명확한 메커니즘을 이해하는 데 도움이 될 뿐만 아니라 심장질환을 앓는 세포의 분자적 변화(molecular alterations) 에 대한 연구에도 큰 도움이 될 수 있다.기존에 심장근육 세포에 의해 발생하는 수축력을 측정하기 위한 방법으로는, 두 개의 마이크로 피펫을 사용하는 방법, 마이크로 기둥 어레이를 사용하는 방법, 캔틸레버를 사용하여 측정하는 방법 등이 사용되고 있다.그러나 마이크로 피펫을 이용하여 세포의 전압을 측정하는 방법은 electrode가 물리적으로 닿기 어려운 세포 내 compartment에서의 전압, patch electrode보다 크기가 작은 미생물막에서의 전압 등을 측정하기 어려다는 단점이 있다.또한 마이크로 기둥 어레이를 이용한 방법은 탄성체 기둥 위에 부착된 세포의 수축력에 의해 독립적으로 구부러진 기둥의 구부러진 정도와 방향을 분석하여 세포가 만들어내는 힘의 크기와 방향을 측정하는데, 측정을 위한 광학현미경 사용에 따른 정확성이 떨어지며, 작은 수축력에 의한 변화 측정이 어려우며, 탄성체 기둥 위에 세포를 성장 시키는 것이 용이하지 않다는 단점이 있다.캔틸레버는 MEMS 장치에서 자주 사용되는데, 작동장치로서 뿐만 아니라 센서로도 유용하게 사용된다. 캔틸레버를 이용한 방법은 캔틸레버 위에 성장된 세포의 수축력에 의해 발생하는 캔틸레버의 변위를 광학현미경 또는 레이저 변위계를 사용하여 측정한다. 광학현미경을 이용할 경우 해상도가 일반적으로 1μm 이내이며, 레이저 변위계를 사용하여 측정하는 방법은 세포 성장시 표면에서 발생하는 응력에 의해 발생하는 캔틸레버의 초기 bending에 의해 레이저 변위계의 측정이 용이하지 않다. 뿐만 아니라 두 가지 방법 모두 기존의 상용 well plate와는 다른 형태를 갖는 구조적 한계성으로 인해 구조물 상부에 세포를 성장시키는 것이 용이하지 않아 추가적인 공정을 필요로 하게 한다는 단점이 있다.이에 따라 본 발명자들은, 배양된 심장근육 세포의 수축력에 의해 변형되는 다이어프램 판의 변위를 레이저 변위계를 이용하여 측정하며, 또한 집적화된 센서를 이용하여 다이어프램의 스트레스에 의해 발생하는 저항변화를 통하여 심장근육 세포의 수축력을 측정하는 폴리머 구조체 검사 장치를 완성하였고, 고속으로 다중 약물을 정확히 검사할 수 있는 것을 확인하여 발명을 완성하였다.관련 종래 기술의 예로는 대한민국 특허등록번호 제10-1147849호(발명의 명칭 : 약물 검사 장치)가 있다. 이 발명은 캔틸레버 형태의 세포 자극부를 이용해 세포의 중량과 임피던스 변화를 감지하여 피진단 약물에 대한 세포의 활성 변화를 스크리닝하고 이를 정량적이고 정성적으로 정확하게 출력하는 약물 검사 장치인데, 심장근육 세포에 대한 독성 측정하는 경우에 맞게 고속으로 실시간 측정을 하고 다중 검사를 수행할 수 있는 구조를 갖지 못한 한계점이 있었다. [ 발명의 개요 ] [ 해결하려는 과제 ] 본 발명의 목적은 상술한 바와 같은 종래의 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 심장 근육 세포의 수축력을 실시간으로 정밀하게 측정할 수 있는 센서가 집적화된 검사 장치 및 그 제조방법을 제공함으로써 기존 검사방법의 문제점을 해결하고자 하는 것이다. [ 과제의 해결 수단 ] 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 세포가 수용되는 다이어프램 판; 상기 다이어프램 판을 상부에서 둘러싸는 상부 몸체부; 및 상기 다이어프램 판을 하부에서 둘러싸는 하부 몸체부;를 구비하되, 상기 다이어프램 판의 하면에, 복수의 응력조절 전극, 복수의 스트레인 센서 및 레이저 변위계 반사판이, 상기 다이어프램 상면에, 세포가 수용되는 곳인 방사형 미세 그루브 패턴을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리머 다이어프램 구조체를 제공한다.상기 세포는 심장근육 세포인 것을 특징으로 한다.상기 다이어프램 판의 재질은 PDMS(Polydimethylsiloxane) 또는 SU-8 폴리머인 것을 특징으로 한다.상기 방사형 미세 그루브 패턴은, 상기 심장근육 세포의 수축력에 의한 상기 다이어프램 판의 변위를 향상시키기 위해 상기 다이어프램 판의 상면에 형성되며, 상기 방사형 미세 그루브 패턴 위에 상기 심장근육 세포를 성장시킴으로써 그루브 방향으로 세포를 정렬시키는 것을 특징으로 한다.상기 다이어프램의 변위 측정은, 집적화된 스트레인 센서의 전기 저항 변화를 검출하여 이루어지며, 휘트스톤 브릿지(Wheastone bridge) 회로를 구성하는 도전선 패턴 또는 상기 레이져 변위계 반사판을 통해 측정되는 것을 특징으로 한다. 또한, 본 발명은 상기 폴리머 다이어프램 구조체를 복수 개 구비하는 웰(Well)을, 하나 이상 포함하고 플레이트 형태를 한, 세포의 수축력 측정용 폴리머 구조체 검사 장치를 제공한다.또한, 본 발명은 (1) 실리콘 웨이퍼 표면에 감광제를 통해 포토리소그래피 공정을 수행하여, 방사형 미세 그루브 패턴을 형성하는 단계; (2) 폴리머를 코팅하여 폴리머 다이어프램 판을 형성하는 단계; (3) 금속층을 이용한 리프트-오프(lift-off) 공정을 수행하여, 응력조절 전극, 스트레인 센서 및 레이저 변위계 반사판을 형성하는 단계; 및 (4) 다이어프램 판과 일체가 되어 이를 지지하는 하부 몸체부와 상부 몸체부를 형성하는 단계;를 포함하는, 심장근육 세포의 수축력 측정용 폴리머 다이어프램 구조체의 제조방법을 제공한다.상기 감광제는 AZ계열의 AZ5214 감광제이고, 상기 폴리머는 PDMS(Polydimethylsiloxane) 폴리머인 것을 특징으로 한다.또한, 본 발명은 (1) 피진단 약물을 폴리머 다이어프램 구조체 상의 심장근육 세포에 투여하는 단계; (2) 폴리머 다이어프램 구조체로부터 전기저항 변위값과 레이저 변위계 수축값을 획득하는 단계; (3) 상기 획득한 전기저항 변위값과 레이저 변위계 수축값을 기준표와 비교하여, 피진단 약물의 독성을 판단하는 단계;를 포함하는, 약물의 심장근육 세포에 대한 독성을 폴리머 다이어프램 구조체를 이용하여 측정하는 방법을 제공한다. [ 발명의 효과 ] 본 발명에 따른 폴리머 구조체 검사 장치는, 심장근육 세포의 수축력이 작용하게 되는 다이어프램에 스트레인 센서 및 레이져 변위계 측정을 위한 반사판이 집적화되어, 두 가지의 다른 방식으로 세포의 수축력을 측정함으로써 정밀한 측정 및 분석이 가능한 효과를 보인다.또한 본 발명에 따른 폴리머 구조체 검사 장치의 다이어프램은 4면이 고정단으로 형성되어 세포 성장시 표면에서 발생하는 응력에 의한 초기 bending이 감소함으로써 레이져 변위계 사용에 용이하며, 각 웰(well) 별로 병렬 구조체 적용에 따른 평균값 확보, 병렬 웰 플레이트(well plate) 사용에 따른 다중 약물 검사 및 레이져 변위계 측정 시 스테이지 구동에 따른 고속 약물 검사가 가능한 효과를 보인다. [ 도면의 간단한 설명 ] 도 1은 폴리머 구조체 검사 장치의 전체 구조와 상세 구조를 보인 구조도. (a)는 폴리머 구조체 검사 장치를 이루는 하나의 폴리머 다이어프램 구조체의 다이어프램 판 상면에 방사형 미세 그루브 패턴이 형성된다는 것을 나타낸 그림. (b)는 복수의 폴리머 다이어프램 구조체가 하나의 웰(Well)의 내부에 존재하고, 복수의 웰(Well)이 하나의 폴리머 구조체 검사 장치에 존재하는 것을 보인 그림. (c)는 방사형 미세 그루브 패턴의 모습을 보이는 단면도. (d)는 방사형 미세 그루브 패턴을 위쪽에서 아래로 바라본 모습. (e)는 방사형 미세 그루브 패턴이 없는 상태에서 심장근육 세포가 무질서하게 성장하는 모습을 보이는 사진. (f)는 방사형 미세 그루브 패턴이 있는 상태에서 심장근육 세포가 패턴을 따라 질서있게 성장하는 모습을 보이는 사진. 도 2는 폴리머 구조체 검사 장치(1000)의 모습을 보이는 사시도. 복수의 웰(Well)(200)에 복수의 폴리머 다이어프램 구조체(100)가 존재하여 다중 약물 검사를 가능하게 한다.도 3은 하나의 폴리머 다이어프램 구조체(100)의 모습을 보이는 사시도. 원형의 다이어프램 판(110)이 있으며 그 상면에 방사형 미세 그루브 패턴(118)이 형성된다. 방사형 미세 그루브 패턴(118)의 사진도 함께 볼 수 있다. 상부 몸체부(120)와 하부 몸체부(130)가 다이어프램 판(110)을 둘러싸는 형태로 폴리머 다이어프램 구조체(100)가 형성됨을 알 수 있다. 도 4는 폴리머 다이어프램 구조체(100)의 단면을 보인 사시도. 다이어프램 판(110)의 하면에 응력조절 전극(112), 스트레인 센서(114) 및 레이저 변위계 반사판(116)이 위치한다.도 5는 폴리머 구조체 검사 장치를 이루는 하나의 폴리머 다이어프램 구조체를 제조하는 순서도.도 6은 폴리머 구조체 검사 장치를 이루는 하나의 폴리머 다이어프램 구조체의 제작과정을 순차적으로 보인 모식도.도 7은 폴리머 구조체 검사 장치를 이용하여 세포에 미치는 피진단 약물의 독성을 파악하는 과정의 순서도.도 8은 PDMS 다이어프램에 미세한 크랙이 발생했을 때 변위 감도가 높아지는 원리를 설명한 개념도. a)는 거미 다리에 있는 미세한 크랙으로 이루어진 감각기관의 모식도. b)는 외부 자극으로 크랙 부분이 벌어져 저항이 커지는 것을 보이는 사진. c)는 다이어프램 표면에 스트레인이 발생하게 되어 센서의 저항 변화가 증가하는 양상을 보이는 그래프. [ 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 ] 이하, 본 발명을 상세히 설명한다.일 관점에서 본 발명은, 세포가 수용되는 다이어프램 판; 상기 다이어프램 판을 상부에서 둘러싸는 상부 몸체부; 및 상기 다이어프램 판을 하부에서 둘러싸는 하부 몸체부;를 구비하되, 상기 다이어프램 판의 하면에, 복수의 응력조절 전극, 복수의 스트레인 센서 및 레이저 변위계 반사판이, 상기 다이어프램 상면에, 세포가 수용되는 곳인 방사형 미세 그루브 패턴을 포함하는 것을 특징으로 하는 폴리머 다이어프램 구조체를 제공한다.상기 세포는 심장근육 세포인 것이 바람직하다.상기 다이어프램 판의 재질은 PDMS(Polydimethylsiloxane)인 것이 바람직하다. 이외에도 생체에 적합한 SU-8 폴리머를 다이어프램 판의 재질로 사용할 수 있다.상기 방사형 미세 그루브 패턴은 상기 심장근육 세포의 수축력에 의한 상기 다이어프램 판의 변위를 향상시키기 위해 상기 다이어프램 판의 상면에 형성되며, 상기 방사형 미세 그루브 패턴 위에 상기 심장근육 세포를 성장시킴으로써 그루브 방향으로 세포를 정렬시키는 것이 바람직하다.상기 다이어프램 판의 변위 측정은, 집적화된 스트레인 센서의 전기 저항 변화를 검출하여 이루어지며, 휘트스톤 브릿지(Wheastone bridge) 회로를 구성하는 도전선 패턴 또는 상기 레이져 변위계 반사판을 통해 측정되는 것이 바람직하다. 다른 관점에서 본 발명은 상기 폴리머 다이어프램 구조체를 복수 개 구비하는 웰(Well)을, 하나 이상 포함하고 플레이트 형태를 한, 세포의 수축력 측정용 폴리머 구조체 검사 장치를 제공한다.또 다른 관점에서 본 발명은 (1) 실리콘 웨이퍼 표면에 감광제를 통해 포토리소그래피 공정을 수행하여, 방사형 미세 그루브 패턴을 형성하는 단계; (2) 폴리머를 코팅하여 폴리머 다이어프램 판을 형성하는 단계; (3) 금속층을 이용한 리프트-오프(lift-off) 공정을 수행하여, 응력조절 전극, 스트레인 센서 및 레이저 변위계 반사판을 형성하는 단계; 및 (4) 다이어프램 판과 일체가 되어 이를 지지하는 하부 몸체부와 상부 몸체부를 형성하는 단계;를 포함하는, 심장근육 세포의 수축력 측정용 폴리머 다이어프램 구조체의 제조방법을 제공한다.상기 감광제는 AZ계열의 AZ5214 또는 AZ1512 감광제이고, 상기 폴리머는 PDMS(Polydimethylsiloxane) 폴리머인 것이 바람직하다.또 다른 관점에서 본 발명은 (1) 피진단 약물을 폴리머 다이어프램 구조체 상의 심장근육 세포에 투여하는 단계; (2) 폴리머 다이어프램 구조체로부터 전기저항 변위값과 레이저 변위계 수축값을 획득하는 단계; (3) 상기 획득한 전기저항 변위값과 레이저 변위계 수축값을 기준표와 비교하여, 피진단 약물의 독성을 판단하는 단계;를 포함하는, 약물의 심장근육 세포에 대한 독성을 폴리머 다이어프램 구조체를 이용하여 측정하는 방법을 제공한다.상기 폴리머 다이어프램 구조체를 이용하여 약물의 심장근육 세포에 대한 독성을 측정하는 과정 중에, PDMS 다이어프램에 형성된 미세한 크랙(nano crack)의 간격이 증가하는 경우, 이러한 미세한 크랙으로 인해 전기저항 변위 값 변화가 더욱 높아져서 결과적으로 감도를 높이는 것이 가능하다.이하 본 발명의 실시예에 대하여 첨부된 도면을 참조하여 그 구성 및 작용을 설명한다. 이 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.본 발명에 따른 세포의 수축력 측정용 폴리머 구조체 검사 장치(1000)는, (도 1)의 (b)에 도시된 바와 같이, 세포가 수용되어 배양되는 방사형 미세 그루브 패턴(118)이 형성된 다이어프램 판(110), 상부 몸체부(120) 및 하부 몸체부(130)로 이루어진 폴리머 다이어프램 구조체(100)이 여러 개 존재하는 웰(Well)(200)이 평판(Well plate)에 배열된 모습이다.방사형 미세 그루브 패턴(118)은 (도 1)의 (a)와 같이 원형인 다이어프램 판(110) 윗면에 방사형으로 형성된 모습이며, 확대하면 (도 1)의 (c)와 같이 요철 형태의 미세 그루브로 이루어진 패턴 모습을 갖는다. 위에서 아래로 방사형 미세 그루브 패턴(118)을 보면, (도 1)의 (d)와 같은 모습이다.방사형 미세 그루브 패턴(118)으로 인해, 심장근육 세포를 배양하면 (도 1)의 (f)와 같이 세포가 패턴의 그루브를 따라 질서 있게 성장하지만, 패턴이 없는 상황에서 배양하면 (도 1)의 (e)와 같이 무질서하게 성장하게 된다.(도 2)에서 보이는 폴리머 구조체 검사 장치(1000)는 복수 개의 웰(200)과 그 내부에 있는 폴리머 다이어프램 구조체(100)로 이루어져 있으며, 단일 폴리머 다이어프램 구조체(100)의 모습은 (도 3)과 같다. 육면체 형태의 폴리머 다이어프램 구조체(100)는 중앙부의 원형 다이어프램 판(110)과 상부 몸체부(120) 및 하부 몸체부(130)으로 이루어지며, 방사형 미세 그루브 패턴(118)이 다이어프램 판(110)의 상부에 위치한다.상면에 있는 방사형 미세 그루브 패턴(118)은 생략된 (도 3)의 폴리머 다이어프램 구조체(100) 단면 사시도를 보면, 다이어프램 판(110)의 하면에 응력조절 전극(112), 스트레인 센서(114) 및 레이저 변위계 반사판(116)이 위치한다. 응력조절 전극(112), 스트레인 센서(114) 및 레이저 변위계 반사판(116)은 모두 금속으로 만들어지며, 응력조절 전극(112)은 다이어프램 판(118)의 중앙과 주변부를 잇는 선의 형태를 가지며, 스트레인 센서(114)는 4개 방향의 모서리에 위치한다. 레이저 변위계 반사판(116)은 중앙에 위치하여 레이저의 반사광으로 변위를 측정할 수 있게 한다.이하에서는, 본 발명에 따른 심장근육 세포의 수축력을 측정하는 상기 폴리머 다이어프램 구조체(100)의 제조방법에 관하여 (도 5)와 (도 6)을 참조하여 설명한다. 1) 제조과정 1단계 미세 그루브 패턴 패턴 형성 (S100)실리콘 웨이퍼(도 6의 1. 참조) 표면에 AZ계열의 AZ5214 감광제(제조사: AZ electronic materials)를 통해 포토리소그래피 공정을 수행하여 방사형 미세 그루브 패턴(118)을 형성(도 6의 2. 참조)한다.자세하게는, 실리콘 웨이퍼 표면에 AZ 5214를 웨이퍼의 1/3 정도 로딩(loading)한 후 7,000rpm으로 40초간 스핀 코팅하여 1μm 두께로 AZ 5214를 코팅한다. 코팅된 AZ 5214를 110℃의 핫 플레이트(hot plate)에서 1분 정도 굽는다. 이렇게 구워진 웨이퍼와 레지스트를 마스크를 이용하여 UV 노광 처리한다. 이때 노광시간은 7초 정도인 것이 바람직하다. 다음으로 상기 기판을 AZ 5214용 디벨로퍼인 AZ 300(제조사: AZ electronic materials)가 들어 있는 페트리디쉬에 넣고 약20초 동안 디벨로프 공정을 거친 뒤, UV가 조사된 부분의 포토레지스트층을 선택적으로 제거시킨다. 마지막으로, 상기 기판을 꺼내어 순수한 물(D.I water)로 세척하여 방사형 미세 그루브 패턴(118) 형성을 완료한다.2) 제조과정 2단계 PDMS 폴리머 코팅 (S200)실리콘 웨이퍼 표면에 패턴이 형성된 일면에 폴리다이메틸실록세인(PDMS: polydimethylsiloxane) 폴리머를 6000rpm에서 40초간 스핀코팅하여 PDMS 레이어를 형성한다.(도 6의 3. 참조). 폴리다이메틸실록세인(PDMS: polydimethylsiloxane) 폴리머 대신에 SU-8 폴리머를 사용할 수도 있다. SU-8 폴리머는, 에폭시를 기반으로 하는 감광성 수지(photoresist)로서, 많은 기능기를 가지는 매우 가지가 많은 형태의 고분자 에폭시 레진으로 구성된다. 3) 제조과정 3단계 스트레인 센서 및 레이저 변위계 반사판 형성 (S300)전극을 형성하기 위한 공정으로 메탈(metal)을 형성하는 공정으로는 공정의 단순화를 위해 식각이 아닌 Lift-Off 공정을 사용한다(도 6의 4. 참조).좀더 구체적으로, 이미 형성된 방사형 미세 그루브 패턴(118)과 PDMS 폴리머 코팅층 위에, 얇은 코팅제인 AZ1512 레지스트를 이용하여, 금속으로 된 복수의 응력조절 전극(112), 복수의 스트레인 센서(114) 및 레이저 변위계 반사판(116) 형성을 위한 패턴을 만든다. 공정 조건은 2,000 rpm에서 코팅하고, 95 ℃에서 1분간 베이크를 수행하는 것으로 한다. 이렇게 코팅된 웨이퍼는 UV노광기에 의해 7초 정도 노광된 후 현상액(AZ300MIF)에 의해 현상 처리된다. 그리고나서 이렇게 현상된 실리콘 웨이퍼는 증발기(evaporator)에 의해 증착 처리되어 100nm의 금속 박막이 형성된다. 이후, 아세톤 등을 이용하여 희생층으로 사용된 AZ1512를 제거하여 금속 패턴 형성을 완료한다. 4) 제조과정 4단계 하부 몸체부와 상부 몸체부의 형성 (S400)상기 3단계에서 금속 패턴이 만들어지면, 그 위에 PDMS로 이루어진 하부 몸체부(130)를 접합(도 6의 5. 참조)시키고, BHF(Buffered Hydrofluoric acid) 용액을 이용하여 접합부위의 burried oxide층을 제거함으로써 실리콘 기판에서 PDMS 다이어프램과 하부 몸체부를 분리시킨다.(도 6의 6. 참조).다음으로 방향을 뒤집어 PDMS로 이루어진 상부 몸체부(120)를 접합(도 6의 7. 참조)시켜, 다이어프램 판(110)을 둘러싸는 형태로 상부 몸체부(120)과 하부 몸체부(130)이 배치되도록 하여, 폴리머 다이어프램 구조체(100)를 완성한다.5) 폴리머 다이어프램 구조체를 포함하는 폴리머 구조체 검사 장치 형성상기와 같은 4단계의 제조과정을 통해 이루어진 폴리머 다이어프램 구조체(100)는 (도 2)와 같은 모습으로 하나의 웰(Well)(200)에 복수 개의 폴리머 다이어프램 구조체(100)가 배치되고, 각 웰(Well)(200)은 다시 복수 개가 하나의 플레이트 상에 위치하여, 피진단 약물에 의한 심장근육 세포의 수축력을 측정하는, 폴리머 구조체 검사 장치(1000)를 형성한다.한편, 이러한 폴리머 구조체 검사 장치(1000)에 의해, 본 발명에 따라 심장 독성 피진단 약물에 의한 심장근육 세포의 변화를 측정하는 과정을 설명하면 다음과 같다. (도 7)을 참조하여 설명한다. 1) 측정과정 1단계 심장근육 세포 배양 (S500)폴리머 구조체 검사 장치(1000)의 복수의 웰(Well)(200)에 복수 개의 폴리머 다이어프램 구조체(100)가 있고, 각 폴리머 다이어프램 구조체(100)의 다이어프램 판(110)위에 형성된 방사형 미세 그루브 패턴(118)에 심장근육세포(cardiomyocyte)를 올려서 배양한다.성장한 심장근육세포는 (도 1)의 (f)에서 보이는 것처럼 방사형 미세 그루브 패턴(118)이 있는 상태에서는, 패턴을 따라 질서있게 성장하는 모습을 보인다. 이에 비해 (도 1)의 (e)에서 보이는 것처럼 방사형 미세 그루브 패턴(118)이 없는 경우는, 무질서한 성장 모습을 보인다.2) 측정과정 2단계 피진단 약물 투여 (S600)폴리머 구조체 검사 장치(1000)의 복수의 웰(Well)(200)에 피진단 약물을 투여하면, 복수 개의 폴리머 다이어프램 구조체(100) 각각에서 배양되고 성장한 심장근육세포에 피진단 약물이 작용하여, 두 가지의 다른 방식인 세포의 수축으로 인한 전기저항 변위 값 변화와, 레이저 변위계 측정을 통한 세포 수축값 변경을 확인한다.3) 측정과정 3단계 전기저항 변위 값과 레이저 변위계 수축값 획득 (S700)피진단 약물 투여(S600)로 인해 발생한, 세포의 수축으로 인한 전기저항 변위 값 변화는 폴리머 다이어프램 구조체(100)의 스트레인 센서(114) 및 레이저 변위계 반사판(116)으로 측정되어 일정한 계측값 형태로 획득된다.PDMS 다이어프램 위에 형성된 응력 조절 전극은 PDMS 다이어프램의 initial displacement를 발생시켜 세포 수축에 의한 다이어프램의 변위를 향상시킨다.이 때, PDMS 다이어프램에 미세한 크랙(nano crack)이 발생하는 경우가 있는데, 이러한 크랙으로 인해 전기저항 변위 값 변화가 더 높아져서 감도를 높일 수가 있다. 예를 들어, 거미의 다리에 있는 미세한 크랙으로 이루어진 감각기관은, 부드러운 내부와 미세한 크랙이 있는 딱딱한 외피로 구성되어 있고, 이 크랙과 신경세포가 연결되어 있어서, 외부에서 진동 등 자극이 가해질 때 크랙이 벌어지거나 좁아지는 것을 신경세포가 감지하게 되어 있다(도 8a 참조). 이와 유사하게 PDMS 다이어프램에 생성되는 미세한 크랙으로 인해, 심장근육 세포의 수축이라는 외부 자극에 대해 크랙 부분이 벌어지면서 저항이 커지게 되고(도 8b 참조), 결국 심근세포 수축력에 의해 발생하는 다이어프램의 변위로 인해 다이어프램 표면에 스트레인이 발생하게 되고 이에 따라 스트레인 센서의 저항 변화는 증가된다(도 8c 참조). 이를 통해 심장근육 세포 수축에 의한 변위 감도를 더 높일 수 있는 것이다. 4) 측정과정 4단계 다수 검사값에서 평균 계산 (S800)계측값 형태로 획득된 단일 폴리머 다이어프램 구조체(100)에서의 값을, 한 웰(200) 내의 다수 폴리머 다이어프램 구조체(100) 값들로 누적하여, 이러한 다수 검사값에서 평균을 계산한다.5) 측정과정 5단계 피진단 약물의 독성 판단 (S900)다수 검사값에서 평균을 계산(S800)한 값으로, 피진단 약물로 인한 심장근육 세포의 수축 특성을 객관적으로 파악하고, 이를 기준 문헌값 또는 기준표와 비교하여 독성 여부를 판단한다. 이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다. [ 부호의 설명 ] 1000 : 폴리머 구조체 검사 장치100 : 폴리머 다이어프램 구조체200 : 웰(Well)110 : 다이어프램 판120 : 상부 몸체부130 : 하부 몸체부112 : 응력조절 전극114 : 스트레인 센서116 : 레이저 변위계 반사판118 : 방사형 미세 그루브 패턴
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	따라서 작년 참여 경험을 통해 정부기관 ‘K’의 사이트를 알게 되어 나타난 결과로 보인다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 우리나라는 3면이 바다로 해양을 활용하고 지키는 것이 국력의 근간이 된다고 볼 수 있다. 최근 IOT와 5G망이 보급되며, 통신 인프라를 바탕으로 다양한 정보를 제공하려고 하는 시도가 민, 관에서 계속되고 있다. 정부기관 ‘K’에서는 해양 정보들을 수집하고 관리하여 왔다. 이에 따라 수집된 정보들을 KOXX, KBH 웹서비스, AJH 앱서비스 홈페이지와 어플리케이션 통해 국민들이 활용할 수 있도록 개발하였다. 하지만 사용자가 적고 많이 활용되지 않고 있다. 따라서, 현재 제공되는 해양정보 서비스의 문제점을 확인하고 국민들이 해양정보의 원활한 사용을 위해 요구하는 점을 파악하여, 개선하는 것에 본 연구의 목적이 있다. 국민들이 해양 정보 서비스 수집을 위해 사용되는 인터넷 사이트는 주요 포털 사이트 검색을 통한 정보 수집이 높은 비율을 차지하고 있었다. 두번째로는 정부기관 ‘K’에서 제공하는 3개 사이트로 나타났고 기타 다른 민간 사이트를 통한 정보수집이 3번째로 나타났다. 하지만 응답 대상자인 정부기관 ‘K’에서 실시한 국민 서비스 디자인 참여단 패널들은 작년 참여 비율이 높았다.
	농민 46 명이 환경부 장관과 한국수자원공사를 상대로 정부가 일방적으로 창녕함안보를 개방해 광암들 농사에 피해를 입은 보상으로 10 억5859 만여원의 배상을 요구하는 재정 신청서를 냈으며 정부는 과학이 아닌 정치 논리에 기대어 창녕함안보 개방과 같은 무리수를 범해서는 안 된다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 경남 합천 농민 46 명이 최근 환경부 장관과 한국수자원공사를 상대로 10 억5859 만여원의 배상을 요구하는 재정 신청서를 냈다. 정부가 일방적으로 창녕함안보를 개방해 보 상류에 위치한 광암들 농사에 피해를 끼친 책임을 지라는 것이다. 환경부 소속 중앙환경분쟁조정위원회는 그제 농민들의 재정 신청서 제출 사실을 공개하고 일련의 조사 과정을 거쳐 최대한 빨리 처리하겠다고 했다. 광암들 피해 농민들은 농업용 관정(우물)을 설치해 겨울철 비닐하우스 온도를 조절하는 '수막 재배' 방식으로 토마토, 양상추 등을 재배해 왔다. 문제가 생긴 것은 지난해 11 월14 일 정부가 보(洑)의 수문을 열면서부터다. 인근 낙동강 수위가 4.9m에서 3.3m로 낮아지면서 지하수 부족으로 냉해 피해의 직격탄을 맞았다고 농민들은 주장한다. 광암들 피해대책위 변중근 위원장은 어제 언론 인터뷰에서 "정부가 일방적으로 보를 개방해 피해를 끼쳐놓고 1 년 가까이 보상이 안 되고 있는 게 말이 되느냐. 이런 상황에서 대책도 없이 또다시 보를 개방하려고 한다"고 분개했다. 이명박정부 시절 국책사업으로 추진된 4 대강 사업과 16 개 보를 놓고 현지 농민과 환경단체가 갈등을 빚는 것은 어제오늘의 일이 아니다. 지난해 문재인정부 출범 이후 16 개 보 중 10 개를 부분 또는 전면 개방하면서 갈등은 더욱 심화됐다. 창녕함안보만의 문제가 아니다. 낙동강, 영산강, 금강 등 거의 모든 수계에서 유사한 갈등과 충돌이 빚어진다. 정부가 보 개방을 밀어붙이는 명분은 '녹조 현상'이다. 그러나 실제론 4 대강에 대한 '적폐청산'의 일환이란 사실을 모를 사람이 없다. '코드 개방'이란 비판이 제기되는 이유다. 전문가들이 예측했듯이 보 개방이 녹조 퇴치에 효험을 낸 것도 아니다. 과학이 아니라 정치 논리에 기대는 무리수는 뒤탈을 빚게 마련이다. 거듭 혀를 찰 수밖에 없다.
	지난 5월, 고 노무현 전 대통령의 뜻인 '사람 사는 세상'을 꿈꾸는 정치인들과 국민들 속에서 추도식이 진행되었다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 고 노무현 전 대통령 서거 10주기인 지난 5월 23일, 봉하마을에는 많은 추모객들의 발길이 이어졌다. 추도식은 오후 2시부터 엄수됐다. 이 자리에는 노 전 대통령의 첫 번째 청와대 비서실장이었던 문희상 국회의장도 참석했다. 문 의장은 이날 추도사를 낭독하며 고인을 기렸다. "노무현의 그 꿈을 향해 다시 전진하겠습니다. 우리는 지난 10년을 통해 잠시 멈출 수는 있어도 결국 '역사는 진보한다'는 명제가 참이라는 것을 증명할 수 있었습니다. 대통령님은 뒤돌아보지 마십시오. 부디 당신을 사랑한 사람들과의 추억만 간직하고 평안하시기를 간절히 기도합니다." 이낙연 국무총리도 이날 추도사를 통해 "대통령께서 꿈꾸시던 세상을 이루기까지는 갈 길이 멉니다. 그래도 저희들은 그 길을 가겠습니다. 대통령님을 방해하던 잘못된 기성 질서도 남아있습니다. 그래도 저희들은 멈추거나 되돌아가지 않겠습니다"라고 다짐했다. 황교안 자유한국당 대표와 나경원 원내대표는 이날 추도식에 불참했다. 많은 정치인들이 고인의 뜻을 계승하겠다는 뜻을 밝히지만 노 전 대통령이 이루고자 했던 '사람 사는 세상'이 오기까지는 앞으로 더 많은 시간이 필요할지도 모르겠다. 적폐청산은 여전히 갈 길이 멀고, 문재인 대통령이 취임 초부터 강력하게 추진했던 검·경 수사권 조정 역시 안갯속이다. 정치권의 협치는 사라진 지 오래다. 대한민국 국민들은 언제쯤 고인이 꿈꿨던 '사람 사는 세상'에서 '사람답게' 살 수 있을까.
	제목: '이웃집 찰스' 니콜라, 엄마이자 인기 크리에이터? 화가? 웹툰 작가? 1월 15일 화요일 저녁 7시 35분 KBS1 '이웃집 찰스' 172회에서 인기 웹툰 작가이자 크리에이터이며 아들 율의 엄마인 니콜라부부의 이야기를 만날 수 있다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 디지털뉴스팀 사진제공=KBS '이웃집 찰스' KBS '이웃집 찰스' 172회에서는 호주에서 온 팔방미인 니콜라와 그녀의 든든한 지원군이자 동지인 남편 권순홍 씨를 만난다. 호주에서 태어나 단 한 번도 호주 밖을 나가보지 않았던 니콜라 사라 권 (36) 어느 날 워킹 홀리데이로 호주를 찾은 한국인 권순홍(26) 씨와 만나 결혼까지 하게 되면서 현재는 한국에 사는 결혼 8년 차 주부다. 또한 국제 커플로서 남편과의 일상을 담은 웹툰 <마이 코리안 허즈번드>의 작가이자 구독자 수 9만 명 이상의 개인 방송 채널을 운영하는 인기 크리에이터이기도 하다. 팔방미인답게 여러 가지 일을 하는 니콜라지만 가장 중요한 일은 따로 있다. 바로, 15개월 아들 권율을 챙기는 엄마의 역할이다. 불임 판정 이후 시험관 시술까지 시도하며 어렵게 얻은 아이라 니콜라, 권순홍 부부에겐 더없이 소중한 존재다. 하지만 육아의 현실이 녹록지만은 않은데. 게다가 서로 다른 한국과 호주의 육아 방식 차이도 부부에게는 또 하나의 난제라고. 아들 율의 이유식을 두고도 호주식 VS 한국식 대결을 펼친 부부! 과연 이 대결의 승자는 누구였을까? 사진제공=KBS '이웃집 찰스' 지리산 산골 작은 시골 마을에서 딸기 농사를 지으며 사는 니콜라의 시부모님. 5년 전 호주에서의 신혼생활을 접고 한국행을 결심한 니콜라가 제일 처음 한국 생활을 시작했던 곳 역시 바로 산청 시댁이다. 서울로 올라온 지 3년이 지났지만, 아직도 시댁 곳곳에는 니콜라 부부가 살았던 흔적이 가득하다는데. 과연 그곳에는 어떤 추억의 흔적들이 남겨져 있었을까? 국제 커플로서 아들 율이 태어나기도 전에, 자신들의 자식을 위해 좀 더 나은 사회가 만들어지길 바라며 다문화 청소년 협회 일을 시작했던 니콜라, 권순홍 부부. 이들의 마음이 통했던 걸까? 사진제공=KBS '이웃집 찰스' 다문화 바자회에 참석했다 다문화 가정 아이들을 위한 대안학교를 운영 중인 가수 인순이 씨와 깜짝 만남이 이뤄진 것! 가수 인순이 씨는 니콜라, 권순홍 부부와 그의 아들 율을 보자마자 다문화 가정 2세로서의 고충과 엄마로서의 조언을 봇물 터지듯 쏟아냈다고. 사진제공=KBS '이웃집 찰스' 가수 인순이 씨와의 깜짝 만남은 물론 호주인 엄마, 한국인 아빠의 좌충우돌 육아일기까지 1월 15일 화요일 저녁 7시 35분, KBS1 <이웃집 찰스> 172회에서 확인할 수 있다.
	(2005)의 연구에서와 같이, 연관이 있는 에너지 재화를 정상적인 가격이 형성되는 시장재로 가정하여 해당 에너지 재화와 난방 간의 쌍대성 관계를 이용하는 연구는 진행되기 어렵다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 앞서 본장의 2절에서 소개된 특성가격법과 선택실험법은 각각 현시선호모형과 진술선호모형의 대표적인 방법이다. 이 외에도 난방 서비스와 같은 비시장재의 가치를 평가하는 데 광범위하게 사용되는 방법으로, 연관이 있는 시장재와의 쌍대성(duality) 관계를 이용하여 비시장재의 잠재가격(shadow price)을 평가하는 방법이 있다. 예를 들어 Kwon et al. (2005)는 열병합발전으로 생산되는 열의 경제적 가치를 전기와의 쌍대성 관계를 이용하여 추정하였다. 하지만 우리나라에서는 전기를 포함한 대부분의 에너지 관련 재화들을 정부에서 관리·감독하고 있다. Kwon et al.
	'문화가 있는 날'을 맞아 27일과 그 주건에 충북 곳곳에서 '숲속 콘서트', '영아티스트 4인4색 콘서트' 등 다양한 문화예술 행사가 열린다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 박장미 (동양일보 박장미 기자) ‘문화가 있는 날’을 맞아 27일과 그 주간 충북지역 곳곳에서 다채로운 문화예술 행사가 열린다. 충북문화재단(대표이사 김승환)은 도민의 생활 속 문화 참여 확산을 위해 충북문화관에서 ‘숲속 콘서트’를 개최한다. 27일 오후 7시 숲속갤러리에서 열리는 이번 공연은 청주 출신의 세계적인 음악가들의 뒤를 이을 차세대 유망주 4명이 무대에 오르는 ‘영아티스트 4인4색 콘서트’다. 충북도립교향악단 신만식 전속작곡가의 기획으로 진행되는 이번 연주회는 피아니스트 강태인(73회 동아음악콩쿠르 대상), 호르니스트 손석(KCO 전국음악콩쿠르 2위), 피아니스트 지인호(24회 아시아 태평양 국제피아노콩쿠르 주니어 부문 3등), 첼리스트 최아현(오사카 국제콩쿠르 현악 1위)는 고전시대를 대표하는 베토벤부터 힌데미트의 현대음악까지 다양한 시대의 음악들을 선보인다. 이날 오전 11시 청주예술의전당 소공연장에서는 문화가 있는 날 특별기획공연 ‘브런치 콘서트’가 펼쳐진다. 한 마리의 학과 나비, 꽃을 형상화해 부채춤으로 보여주는 ‘화선무’, 화랑을 소재로 한 무용수들의 카리스마 넘치는 안무가 특징인 ‘화랑무’, 절도 있는 움직임과 손목의 방울소리가 특징인 ‘쟁강춤’, 대전무형문화재 20호 ‘살풀이춤’, 섬세하고도 애절한 무태를 보이며 정중동을 고루 갖춘 ‘진주교방굿거리춤’과 역동적이고 생동감 넘치는 ‘설장고’ 등을 볼 수 있다. 도서관에서는 무료 영화가 상영된다. 청주흥덕도서관은 이날 오후 7시 '나미야 잡화점의 기적'을 다목적실에서 상영한다. 원작 소설은 지난 2012년 12월 19일 국내 번역 출간된 이래 6년 연속 베스트셀러 순위 상위권을 차지했으며 2008~2017년 한국에서 가장 많이 팔렸다. 흥덕도서관 홈페이지(www.library.cheongju.go.kr/lib-hd/index.do)의 '문화마당'에서 선착순으로 좌석 예약을 받는다. 예약을 하지 않은 사람은 당일 예약되지 않은 좌석에서 관람할 수 있다. 증평도서관은 오는 2일 오후 2시 마지막 변사 최영준을 초청해 추억의 무성영화 변사극 '아리랑'을 상영, 군민들에게 특별한 추억거리를 선사한다. 무성영화는 영상은 있지만 녹음이 되어 있지 않는 영화로, 영상 속 배우들의 행동을 유추하며 관람하는 영화다. 참여 희망자는 증평군립도서관 홈페이지(http://lib.jp.go.kr)와 전화(043-835-4686)로 예약 하면 된다. 박장미 기자
	제목: 중기부, 소셜벤처 판별기준·가치평가모형 개발 중소벤처기업부는 28일, 그동안 명확한 기준이 없어 정책적 한계가 되어 왔던 소셜벤처의 개념을 정립하여 그에 대한 판별 기준과 가치평가모형을 개발했다고 밝혔다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 중소벤처기업부는 '소셜벤처' 판별 기준과 가치평가모형을 개발했다고 28일 밝혔다. 중기부는 지난해 5월 발표한 '소셜벤처 활성화 방안'의 일환으로 그간 민간전문가 중심의 '소셜벤처전문가협의회'를 통해 소셜벤처 기준 등을 논의해왔다. 소셜벤처는 통상적으로 혁신적인 기술이나 아이디어를 통해 사회적 가치를 창출하는 기업으로 통용된다. 일자리 창출은 물론 사회적 문제를 시장 기능을 통한 비즈니스 모델로 해결하는 등 많은 장점을 갖고 있다. 하지만 소셜벤처에 대한 개념이 모호하고 사회적기업과 혼동되는 등 소셜벤처에 대한 명확한 기준이 없다는 점은 정책적 한계로 지적돼 왔다. 더불어 기업가치평가에 재무적 성과만이 반영되고 계량화가 어려운 사회적 가치는 제외되는 등 소셜벤처의 실질가치가 저평가돼 소셜벤처 활성화에 어려움이 있었다. 이에 중기부는 소셜벤처의 개념을 명확히 하고 정책대상으로 지원할 수 있도록 소셜벤처 판별기준과 가치평가모형을 마련했다. 소셜벤처 판별기준은 사회성과 혁신성장성 여부를 확인할 수 있도록 설계했고 소셜벤처 범위를 넓게 포괄하기 위해 혼합형(체크리스트·점수)으로 구성했다. 가치평가모형은 소셜벤처의 사회적·경제적 가치에 대한 올바른 평가를 위해 사회적가치의 지향성 및 미션, 창출 역량 등과 기술(서비스)의 혁신성, 성장성이 종합적으로 고려되도록 설계했다. 이번에 개발된 판별기준과 가치평가모형은 정부, 지자체, 대기업, 임팩트투자사, 액셀러레이터 등 소셜벤처지원기관이 활용할 수 있도록 배포·공유할 예정이다. 최원영 중기부 벤처혁신정책과장은 "이번에 개발된 판별기준과 가치평가모형은 더 많은 소셜벤처가 창업하고 성장할 수 있는 환경 조성의 밑거름이 되어 소셜벤처 활성화에 크게 이바지할 것으로 기대한다"고 밝혔다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	문제는 인터넷 인구의 급속한 대중적 확산이라는 시대적 상황을 KII의 전략적 목표 개념과 어떻게 연결시킬 것인가 하는 접근 전략에 대한 정책적 지렛대의 발굴이다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 우리나라의 인터넷 인구가 급속하게 양적팽창을 거듭하고 있다. 96년 말까지만 해도 73만 정도의 혁신적 이용자가 주도했던 국내 인터넷 인구는 98년 말에 310만 명에 달하였고 99년 말에는 1,000만 명을 돌파하면서 네트웍 외부성이 본격적으로 발휘되는 전기 다수이용자 시대를 열었다. 또한 금년 말에는 1500만, 2001년 말에는 2천만을 그리고 2005년을 전후하여 인터넷 인구 3천만 시대를 맞이하면서 인터넷이 전국민의 보편적 필수품(Commodity)으로 정착되는 후기 다수이용자 시대로 접어들 것으로 전망된다. 전화 가입자 2천만 시대를 열기까지 1백년이 걸린 것을 고려하면 인터넷 인구 성장의 폭발적 위력을 짐작하고도 남음이 있다. 한편 이러한 상황을 배경으로 2000년도 대통령의 신년사 후속 조치로서 발표된 우리나라의 초고속정보통신망(Korea Information Infrastructure : 이하 KII라칭함) 조기 구축 계획에 의하면, 당초의 2단계 사업(98년~2002년)을 2000년 까지로 단축하고 3단계 사업기간(2003년~2010년)을 2001~2005년으로 조기 시행하는 것으로 되어 있다. 상기 조기 구축 계획의 중심내용은 다음 2가지로 압축된다. 하나는 인터넷 인구의 급성장과 세계 10대 지식정보강국의 추진 등을 배경으로 전국적인 초고속망의 완성시기를 미일 수준인 2005년으로 조기 구축한다는 것이다. 그리고 또 하나는 초고속정보통신망 개념을 첨단 정보통신시설을 총체적으로 활용하는 유무선 복합망 환경 하에서 고정가입자 뿐만 아니라 개인 휴대용 가입자로까지 확대한다는 것이다.
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	과연 세계화 시대에 미술사가 타 문화권들 사이의 교류를 부추기면서 서구중심주의적인 전통적인 미술사의 서사를 쇄신하는 것이 가능한가? 어떠한 이론과 방법들이 서구 중심으로 서술되어 온 미술사의 중심을 해체하는 동시에 새로운 서사의 모델을 제시하는 데 기여할 것인가? 이는 세계 곳곳에서 새로이 출간되는 책과 개최되는 학회의 주제, 또는 대학과 학술연구소에 신설되는 연구 프로젝트에서도 확인되듯이 미술사를 연구하고 교육하는 학자들이 고민하는 현재진행형의 문제이다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: 글로벌리즘(globalism)과 미술의 관계, 특히 글로벌리즘이란 현상이 비서구권 미술을 서술하는 방식에 어떠한 변화를 가져올 것인가는 근래 구미 미술사학계에서 중요한 논쟁거리로 등장했다. 특히 동시대 미술 연구에서는 기존의 미술 및 미술 담론의 중심이었던 구미를 벗어나, 그 범위 너머에서 생산되는 미술의 존재를 인정하고 연구할 필요를 제기하는 목소리가 높다. 글로벌리즘을 필두에 내세운 전시가 잇따라 개최되었고, 이를 다룬 책도 연이어 출판되었다. 또한 글로벌리즘과 미술사학, 그리고 미술사 교육과의 관계를 조명한 『미술사는 글로벌한가?(Is Art History Global)』와 같은 책도 출간되어 국내외 학계의 주목을 받은 바 있다. 동시대 비서구권 미술에 대한 정당한 평가, 또한 “전 세계적으로 실천중인 미술사(a worldwide practice of art history)”에 대한 검토와 평가는 분명 글로벌리즘이 미술계와 미술사학계에 끼친 영향의 소산이라 할 것이다.
	그러나 그것이 말 그대로 일종의 ‘거래’일 뿐이지 진정한 ‘핵포기’는 아니라는 것이다	주어진 문장 뒤에 자연스럽게 이어질 문장을 생성해주세요. 문장: 이들은 현상인정론자들이라고 할 수 있다. 이들은 북한의 핵포기 가능성에 비관적이다. 북한 핵보유를 묵인할 수밖에 없는 이유는 북핵 문제는 이미 통제 불가능한 지경에 이르렀고 중국과 국제사회에는 북한 핵실험을 막을 방법이 없다는 것이다. 북한 핵보유 묵인론자들은 북한 제3차 핵실험 이후에 제4차 핵실험도 멀지 않을 것이라는 그들이 예상이 적중했음을 자부한다. 그리고 북한은 핵탄두 소형화를 실현한 후에 ‘불필요한 추가적인 핵실험’과 ‘대북 제재의 해제’를 맞교환하는 협상 카드로 관련 국가와 정치적 거래를 할 것이라고 예측한다.
	경기도는 신남방지역 진출 설명회를 개최하고, 베트남에서 '박항서 매직' 특수와 한류열풍에 힘입어 신남방 지역 도내 농식품 수출액이 2017년 보다 39% 늘었다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: 최남춘 도내 실적 전년비 39%↑ … 한류도 영향 미쳐경기도 농식품 수출시장으로 베트남, 태국 등 신남방지역이 급부상했다. 신남방지역에 대한 도내 농식품 수출실적이 큰폭 상승한 것으로, 도의 수출노선 다변화 전략과 정부의 신남방 정책, 베트남 '박항서 매직' 특수, 드라마·K-POP 등 한류 열풍 등이 일조했다는 평가다. 22일 도에 따르면 지난해 신남방 지역 도내 농식품 수출액은 2억6000만달러로, 2017년(1억8000만달러)보다 39% 늘었다. 중국(2억9000만달러)에 이어 두번째로 높다. 지난 2017년 사드 설치 영향으로 도 최대 농식품 수출지역인 중국에서 롯데마트, 이마트 등 대형유통망이 철수하면서 수출이 급감하자 도는 아세안지역 등으로 수출 노선을 다변화했다. 이 결과 2017년도 대비 지난해 농식품 수출액은 베트남(82%), 태국(21%), 인도네시아(65%), 미얀마(62%), 라오스(80%), 브루나이(43%) 등에서 늘었다. 다만 말레이시아, 캄보디아, 인도의 수출액은 각각 3%, 10%, 20% 감소했고, 싱가포르는 1%만 늘어 이 지역에 대한 수출 전략이 필요한 것으로 나타났다. 앞서 도는 지난해 말 베트남 최대 한국농식품유통기업 및 aT 한국농수산식품유통공사 관계자를 초청해 도내 수출 생산자 대상으로 신남방지역 진출 설명회를 개최하기도 했다. 이 행사에 아세안 지역 5개국 12명의 우수 바이어 초청, 도내 25개 업체와 1:1 수출상담회를 진행해 73건 433만7000달러의 수출상담 실적을 올리기도 했다. 게다가 정부의 신남방정책과 베트남에서의 '박항서 매직' 특수, 드라마·K-POP 등 한류 열풍도 수출 환경을 높이는데 영향을 미쳤다. 그 외 수출 국가별로 살펴보면 중국 수출은 2017년 2억5600만달러에서 지난해 2억9000만달러로 늘어나 회복세로 돌아섰다. 사드 설치에 따른 반한 감정과 중국의 수입제재가 약해진 영향을 받은 것으로 풀이된다. 미국은 2017년(2억2000만달러) 대비 11% 증가한 2억5000만달러였다. 반면 일본은 화훼류 수출경쟁력 약화 등으로 2017년과 지난해 1억5000만달러선을 유지하는 등 정체된 상태다. 품목별로 보면 2017년 대비 배(49%), 토마토(28%), 닭고기(138%), 라면(30%) 등이 큰 폭으로 증가한 반면 최대 수출품목인 김은 주변국가(일본, 중국 등)의 김 작황 회복 영향으로 9% 감소했다. 도 관계자는 "올 해에도 농식품 수출확대를 위해 해외마케팅 8억원, 수출농업기반 조성을 위한 신선농산물 수출단지 등 인프라 구축에 85억8000만원을 투자할 계획"이라고 밝혔다. 한편 지난해 도내 농식품 수출은 이상고온, 세계경제불황 등 어려운 국내외 여건에도 2017년 대비 5% 증가했으며, 이는 전국 농식품 수출 증가율 1.9%보다 2.6배 높은 수치로 전국 9개 도 단위 지방자치단체 중 가장 많은 수출금액이다. /최남춘 기자 [email protected]
당신은 인공지능 비서입니다. 주어진 원문을 바탕으로 주어진 질문에 가장 적절한 답변을 생성하세요.	이와 같은 단점을 극복하고자 시편제작에서 구조해석에 이르기까지 그 절차 도중 커다란 오류를 범하지 않기 위해서는 상당한 시간과 전문적이 지식을 요구하게 된다.	다음 텍스트에서 제공된 문맥을 정확히 이해하고, 마지막 문장을 자연스럽고 문맥에 맞게 완성하세요. 문장은 이전 내용과 논리적으로 연결되어야 합니다. #텍스트: X-ray 회절에 비해 전자 회절은 시험 물질과의 보다 강한 상호작용을 수반하게 되어 단결정 X-ray 구조분석에 비해 1000배 이상 작은 시편에 대하여도 충분한 강도를 지닌 회절도형을 얻을 수 있고, 또한 운동학적 조건이 성립되는 얇은 시편일 경우 고분해능 이미지를 통하여 X-ray 회절에서는 불가능한 결정학적 구조인자의 위상을 직접적으로 결정지을 수 있다는 장점이 있다. 이와 반대로 투과전자현미경에 의한 구조 분석은 X-ray 회절에 의한 일반화된 구조 분석 기법과 달리 다음과 같은 여러 가지의 어려움을 수반한다는 단점을 가지고 있다. 첫째로, 특수한 환경을 제외하고는 항상 동력학적 회절 현상과 비선형적 효과를 수반한다. 둘째로, 전자기렌즈 수차에 의한 고분해능 상의 일그러짐, 정대축 방향의 정확도 및 다중 회절 현상 등의 방해인자로 인하여 자료의 직접적인 해석이 매우 어렵기 때문에 반드시 전산모사를 이용하거나 X-ray 구조해석의 병행이 수반되어야 한다. 셋째로, 시편 기울기의 제한으로 인해 하나의 시편 내에서는 완벽한 3D 정보를 획득할 수 없다.
	김학수(2007)는 2002년부터 2004년까지 3,465개의 기업패널자료를 이용하여 조세지원제도가 민간 기업의 연구개발투자에 미치는 영향을 분석하였다. 조세지원 제도에 의해 낮아지게 되는 세후 연구개발투자의 단위당 비용인 사용자 비용을 추정하고, 기업들이 사용자 비용에 어떻게 반응하는지를 실증적으로 분석하였다. 조세지원 확대를 통한 사용자 비용의 1% 감소는 기업이 부담하는 연구개발투자를 0.5~1.1% 증가시켜, 기업의 직접투자를 0.06~0.07% 증가시키는 직접지원에 비해 조세지원이 더욱 큰 효과를 보이고 있다고 밝혔다. 이를 통해 정부의 직접보조금의 일정 부분을 세액공제제도의 확대를 통한 조세지원의 형태로 변화시키는 것이 필요하다고 주장하였다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 재정 상황 변화에 대응한 연구개발 예산 및 조세지원 대응방안 요약문: 조세지원제도가 민간 기업 연구개발 투자에 미치는 영향은 조세지원이 더 큰 효과를 보인다. 따라서 정부는 세엑공제제도 확대를 통한 조세지원 변화가 필요하다.
	제목: [원희복의 인물탐구]제주 4·3 「한라산」 시인 이산하 제주 4·3사건을 숨김없이 고발한 장편서사시 <한라산>을 쓴 이산하 시인의 시인학교 제자와 후배들이 4·3사건 70주년을 맞아 절판됐던 시집을 재발간한다고 한다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: ㆍ"은 내 비명이자 통곡이다" 광주가 매년 5월 몸살을 앓듯이 제주는 4월이 오면 몸살을 앓는다. 4월이 오면 몸살을 앓는 사람이 있다. 이산하 시인(58)이다. 그는 제주 4·3사건을 적나라하게 까발린 장편서사시 <한라산>을 쓴 당사자다. 그것도 권위주의 시절인 1987년 제주 4·3사건을 입에 올리는 것조차 금기시할 때였다. 거기에 반미감정을 가득 담은 서사시 <한라산>은 한마디로 "나를 죽여라"고 항거한 시다. "제주 4·3은 큰 변화가 없다. 국가가 기념식을 한다는 것이 달라진 것이지만…. 제주 4·3에서 가장 큰 약자는 죽은 자들인데. 그들은 아무 변화가 없다. 다음은 죽은 자의 가족인데 거기도 변화 없다. 제주의 일반인도 마찬가지다. 제주 사람들은 70년 동안 이념을 가진 후보보다 무소속 후보에게만 표를 줬다. 최근 좀 달라지긴 했지만…." 가장 참혹한 민간인 집단학살사건제주 4·3사건은 1948년 4월부터 1954년 9월까지 경찰과 우익단체가 자행한 민간인 집단학살사건이다. 제주 4·3평화공원에 1만4231기의 위패가 모셔져 있지만, 2만5000명에서 3만명의 민간인이 학살된 것으로 추정되고 있다. 이는 제2차 세계대전 이후 전쟁을 제외하고 가장 참혹한 민간인 집단학살사건이다. 정부는 '남로당 소탕'이라고 했지만 당시 남로당원은 350여명에 불과했다. 제주 4·3사건은 사회적 공론은커녕 1978년 현기영의 중편소설 <순이삼촌>에서 잠깐 언급됐을 뿐 거의 금기시된 주제였다. 그래도 이번 4·3사건 70주년을 맞는 그는 조금 남다르다. 절판됐던 그의 시집 <한라산>을 시인학교 제자·후배들이 다시 발간하고, 재심 변호사 비용까지 모금하기 때문이다. '혓바닥을 깨물 통곡 없이는 갈 수 없는 땅/ 발가락을 자를 분노 없이는 오를 수 없는 산/ 백두산에서/ 한라산에서/ 지리산에서/ 무등산에서/ 그리고 피어린 한반도의 산하 곳곳에서/ 민족해방과 조국통일을 위하여 싸우다/ 장렬히 산화한 모든 혁명전사들에게/ 이 시를 바친다'로 시작하는 <한라산>은 1987년 무크지 <녹두서평>에 처음 게재됐다. 이후 2003년 시학사에서 다시 출간했지만 지금은 절판됐다. -이번에 나오는 시집은 그때 누락된 부분을 보완한 '진본'이라고 했다. "2003년 한 번 나왔었는데 그때 보완하지 못해 이번에 전면적으로 다듬었다. 1987년 넘긴 <한라산> 원고를 인쇄소에서 거부했다. '센 책'을 많이 만든 녹두출판사조차 이 책만큼은 도저히 힘들다고 했다. 그래서 많은 부분을 완화했다. '일단 4·3사건을 널리 알리는 것이 더 중요하다'고 판단했기 때문이다. 이번에 나온 것은 그때 완화했던 부분을 원래대로 바로잡았다." -그렇다면 이번에 나온 <한라산>은 과거 것보다 훨씬 '빨간색'이겠다. "그렇다.(하~하) '한반도는 미국 성조기의 51번째 별…' 등 미국 관계 내용을 다시 복원했다." 금기시됐던 제주 4·3사건은 그나마 1999년 진상규명 및 명예회복 특별법이 제정되고, 2003년 제주 4·3평화공원이 만들어졌다. 진상규명과 치유·화해의 자리가 마련됐고, 2006년 노무현 대통령이 국가 폭력을 사과했다.
	6호 시설 내에서 중요하게 다루어져야 할 프로그램이 무엇인지 8개 프로그램이 제시 되었으며, 중요도 순으로 3개까지 순위를 정할 것을 요청하였다. 체험활동(4.3%)과 사후관리(7.0%)을 제외하고는 모든 프로그램들이 10%대의 응답으로 고르게 제시되었다. 가장 높은 응답은 ‘비행예방교육’(17.3%), ‘심리치료’(17%), ‘부모 및 가족상담’(16.8%), ‘개인 및 집단상담’(14.5%), 교과/학습교육(검정고시)(13.3%), 직업/진로교육(10.0%) 순이었다. 그들이 관리･감독하는 대상자가 비행청소년이기 때문에 그 어떤 프로그램 보다도 ‘비행예방교육’이 더 중요하게 다뤄져야 한다는 응답이 나온 것으로 분석된다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 소년범 대상 중간처우제도의 활성화 방안 : 6호처분을 중심으로 (A Study on the Improvement Plan of Halfway Treatment for Delinquent Juvenile: Focused on the Protective Disposition No.6) 요약문: 가장 높은 응답은 비행예방교육으로 대상자가 비행청소년이기에 중요하다 나온걸로 분석되며, 심리치료, 부모 및 가족상담, 개인 및 집단상담, 교과/학습교육, 직업/진로교육 순었다.
	모든 부문에서 전반적으로 임금인상 억제를 요구하는 전국적 협약 대신, 바세나르 협약은 사용자와 근로자 당사자 사이에서 임금인상 억제 협상이 이루어지는 지역 수준의 협상을 발전시켰다. 바세나르 협약과 차후 국가적 협약이 폭넓은 가이드라인을 제시하는 동안, 구체적인 임금협약은 산업 수준에서 체결되었다. 모든 단체협약 중 2/3 이상이 2년 동안 새로 체결되었다. 임금상승의 주요 원인이었던 생계비 완전보장 조항은 전체 근로계약 중 약 10%에서만 남아 있고 모두 삭제되었으며, 평균실질임금은 9% 감소하였다. 임금인상 억제에 대한 반대급부로 노조는 일자리 나누기를 위한 주당 근로시간 단축에 합의하거나 사용자로부터 조업일수단축에 대한 동의를 받았다. 1998년 OECD 보고서에서는 바세나르 협약의 ‘일자리를 위한 임금인상 억제’는 네덜란드 모델에 있어서 가장 중요한 요소라고 평가하였다. 협약을 통해 네덜란드에서는 노동비용 감소와 사회 안정, 임금인상 억제, 파업일수 감소 등이 나타났으며, 이는 다시 높은 국제경쟁력, 높은 수익률, 적극적 투자와 급격한 고용창출, 가계신뢰지수․자산가격․개인소비에 대한 피드백의 선순환 구조를 만들어 냈다. 또한 정부의 세금감면 조치는 개인들의 가처분소득을 증가시키고 임금억제를 받아들이도록 유인하였으며, 비임금비용을 감소시켰다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 격차축소를 위한 임금정책 : 노사정 연대임금정책 국제비교 요약문: 바세나르 협약은 전국적 협약 대신 사용자와 근로자 당사자 사이에서 임금인상 억제 협상이 이루어지는 지역 수준의 협상을 발전시켰다. 또 바세나르 협약은 네덜란드 모델에 있어 가장 중요한 요소라 평가 하였고, 이 협약을 통해 노동비용 감소와 사회안정, 임금인상 억제등이 나타났으며, 이는 다시 높은 국제경쟁력, 높은 수익률등 선순환을 이끌어냈다.
	보니 매키(Bonnie McKee, 1984년 1월 20일 ~ )는 미국의 싱어송라이터이자 배우입니다. 그녀의 정규 음반으로는 'Trouble'(2004), 'EP Bonnie McKee'(2003), 'Bombastic'(2015)이 있습니다. 또한 그녀는 오프닝 게스트로 존아스 브라더스 라이브(The Jonas Brothers)(2013), 카르민의 풀즈 투어(Pulses Tour)(2014)에서 공연했습니다. 그녀는 2004년 미국 드라마 '아메리칸 드림스'에서 재니스 조플린과 함께 출연하였고, 2009년 '슈팅 더 문' 에피소드와 2012년 '패션 폴리스'에서도 출연했습니다. 보니 매키는 미국의 여자 가수이며, 팝 및 싱어송라이터로도 활동하고 있습니다. 또한 그녀는 미국의 여자 배우이자 텔레비전 배우로도 알려져 있습니다. 그녀는 캘리포니아 출신이기 때문에 캘리포니아 출신 음악가이자 배우로 분류됩니다.	보니 매키는 미국의 싱어송라이터이자 배우인가요?
	토마스 베어톨트(Thomas Berthold, 1964년 11월 12일, 헤센주 하나우 ~)는 은퇴한 독일의 축구 선수이자 감독이다. 그는 현재 여러 TV 방송사에서 평론가와 분석가로 일하고 있다. 베어톨트는 헤센주 하나우 출신이며, 분데스리가에서 332경기를 출전하여 22골을 득점하였다. 그는 1982년부터 1991년까지 이탈리아에서 활동하였다. 또한 독일 국가대표팀에서 62번 출전하였고, 1990년 FIFA 월드컵을 우승한 선수이다. 현재는 독일 리그 DFB-포칼에서 활동하고 있으며, 독일 축구 국가대표팀 선수와 감독으로도 알려져 있다.	토마스 베어톨트는 무슨 일을 하고 있을까요?
	대구연극협회는 31일(일) 오후 8시 30분 봉산문화회관 가온홀에서 5개 작품이 참가해 27~31일 경연을 펼친 제36회 대구연극제에서 연극인, 문화예술인, 시민 등 100여 명이 참석한 가운데 열린 시상에서 극단 온누리 작품 '외출'이 대구시장상인 대상을 받았다.	주어진 문장을 적절하게 요약해주세요. 문장: [김동석 기자 [email protected]] 제36회 대구연극제가 5일 동안 경연을 마치고 31일 폐막했다. 수상자들이 기념촬영을 했다. 김동석 기자 대구 연극인들의 축제인 제36회 대구연극제에서 극단 온누리 작품 '외출'이 대구시장상인 대상을 받았다. 대구연극협회는 31일(일) 오후 8시 30분 봉산문화회관 가온홀에서 연극인, 문화예술인, 시민 등 100여 명이 참석한 가운데 5일간의 대구연극제를 마치고 시상식 및 폐막식을 가졌다. 이번 연극제에는 극단 고도 '용을 잡는 사람들', 극단 온누리 '외출' 극단 처용 '툇마루가 있는 집' 극단 이송희레퍼터리 '전선위에 걸린 달' 극단 미르 '낙원' 등 5개 작품이 참가해 27~31일 경연을 펼쳤다. 이날 시상식에서 연출상은 이국희(외출), 무대예술상은 박재민(용을 잡는 사람들), 최우수연기상은 최영주(툇마루가 있는 집), 우수연기상은 예병대(용을 잡는 사람들), 이송희(전선위에 걸린 달), 신인연기상은 조용채(툇마루가 있는 집)가 수상했다. 대상 작 극단 온누리 '외출' 대상 수상작 연극 '외출'은 예순 한 살의 평범한 가정주부가 남편의 생일날 둘러앉은 가족들 앞에서 초등학교 남자 동창과 함께 세계여행을 떠날 것이라는 폭탄선언을 터트리는 내용이다. 극단 온누리는 1992년 창단해 역대 대구연극제에서 5차례 대상을 받았고 전국대회에서도 2차례 은상을 받은 수준 높은 극단이다. 극단 온누리 '외출'은 6월 서울에서 열리는 대한민국연극제에 대구대표로 참가하게 된다. 이국희 극단 온누리 대표는 "'외출'은 바쁜 일상 속 허전함과 같은 부재, 여행을 통해 새 세상에 대한 도전, 무던해져버린 감정을 일깨우는 희망의 메시지를 던져준다"며 "가족이라는 울타리에서 우리가 놓치고 있는 것이 무엇인지 생각해보고 내 방식이 아닌 배려와 사랑의 중요성을 부각시켜 제작했다"고 밝혔다. 김윤미 심사위원장은 총평을 통해 "대구연극제의 정체성 방향과 새로운 작품 발굴이라는 두 가지 측면에 초점을 두고 심사를 했다"며 "경연 작품 5개 모두 대구의 특색을 잘 드러냈지만 희곡의 텍스트가 부족한 게 아쉬웠다"고 했다. 이어 "대상 작 '외출'은 여성 중심의 시대적 요구를 잘 반영한 현실성을 확보한 작품이다"며 "가족간의 갈등을 세심하게 처리하고 시간과 공간의 무대전환이 돋보였다"고 평가했다.
	아포노게톤 마드가스카렌시스(Aponogeton madagascariensis)는 마다가스카르 고유의 자생종으로, 수족관에서 판매되고 있지만 야생에서는 멸종위기에 처해 있습니다. 이 식물은 다년생 외떡잎 수생식물로, 직경 3cm 크기의 구근을 가지고 있으며 잎은 길쭉하고 길이는 15-55cm, 너비는 5-16cm입니다. 잎은 수면 아래에서 수평으로 퍼지며 격자모양의 골격망을 가지고 있습니다. 꽃은 기립한 꽃대에서 자라며 꽃대는 1m 길이이고, 수면에서 20cm 돌출됩니다. 이 식물은 빛이 약한 저조도 실외에서 잘 자라지만, 실내에서는 강한 광량을 필요로 합니다. 또한 새 구근을 심은 첫 해에는 잘 자라지만 두 번째 해부터는 성장이 부진하며, 씨앗을 맺지만 발아가 안되거나 성장이 부진할 수 있습니다. 일부 애호가들은 잦은 환수와 여과기의 여과성능을 높이는 방법을 추천하고 있습니다.	아포노게톤 마드가스카렌시스는 어떤 식물인가요?
	금강산 관광은 1998년 11월 18일 금강호가 동해항에서 북한의 장전항을 향해출항하면서 시작됐다. 2000년에 20만여 명의 관광객이 방문하는 등 순조롭게 진행되던 금강산 관광사업은 2001년에 이르러 위기에 직면했다. 관광사업 초기에 과도한 투자비용이 소요돼 사업자가 자금난을 겪게 되고, 해로 관광에 따른 긴 이동시간 및 관광과정의 통제로 인해 관광객이 줄어든 것이 원인이었다. 이러한 문제를 해결하기 위해 육로관광을 조속히 실시할 것을 북한에 촉구해 2003년 9월부터 육로관광을 실시했다. 관광사업자인 현대아산도 관광상품 다양화, 관광코스 개발 및 프로그램 개선 등 자구노력을 진행해 금강산 관광사업이 정상화됐다.	주어진 제목과 요약문에 대한 정보를 토대로, 요약되기 전 문장을 유추해서 생성해주세요. 제목: 2016 통일문제이해 요약문: 금강산 관광은 1998년을 시작으로 순조롭게 진행됐다. 그 후 자금난과 해로 관광의 시간문제 등으로 2001년 위기에 직면했으나 육로관광과 프로그램 개선을 통해 이후 사업은 정상화됐다.
	마거릿 엘리너 애트우드는 캐나다의 작가로, 시인, 소설가, 평론가, 여성주의자, 정치적 활동가로 알려져 있습니다. 그녀는 토론토 대학에서 영문학을 전공하고 하버드 대학에서 석사 과정을 마쳤습니다. 그녀의 대표작으로는 《시녀 이야기》가 있으며, 여성주의자 작품으로 인식됩니다. 그녀의 작품은 캐나다인의 정체성, 인권문제, 여성성, 예술에서의 여성의 묘사, 여성과 남성 간의 관계 등에 초점을 맞추고 있습니다. 또한 소설 《인간 종말 리포트》와 에세이 《Survival A Thematic Guide to Canadian Literature》을 집필하였습니다. 그녀는 아서 C. 클라크상과 맨 부커 상을 수상한 바 있으며, 총독상을 포함한 수많은 상을 받았습니다.	마거릿 엘리너 애트우드는 어떤 작가인가요?
	제목: 청양 남양면, 화재피해 가정에 새 보금자리 2016년 화재로 집을 잃고 화장실도 없는 컨테이너에서 불편한 생활을 하던 A씨에게 원룸 형태의 새 보금자리를 남양면과 청양군 희망복지지원단, 청양군 푸드뱅크남양2팀 자원봉사자 등 130여명이 마련하여 선물 하였다.	주어진 문장에 적절한 제목을 생성하고, 내용을 요약해주세요. 문장: 청양군 남양면에 사는 A씨는 9일 평생 잊지 못할 소중한 선물을 받았다. 2016년 뜻하지 않은 화재로 집을 잃고 화장실도 없는 컨테이너에서 불편한 생활을 감수하던 A씨에게 원룸 형태의 새 보금자리가 생기고, 이날 마을 주민들과 함께 감동적인 집들이를 한 것이다. A씨의 새 보금자리는 남양면(면장 이정호)과 청양군 희망복지지원단, 청양군 푸드뱅크 남양2팀 자원봉사자 등 130여명의 정성스런 손길로 마련됐다. 남양면은 어려운 처지에 놓인 A씨를 통합사례관리대상가정으로 선정해 도울 방법을 찾았고 희망복지지원단이 지원금 500만원, A씨의 자부담 100만원, 푸드뱅크 남양2팀 자원봉사자들의 재능기부와 십시일반 후원금이 더해져 총사업비 2500만원이 준비됐다. 우여곡절을 겪은 A씨는 지난 3일 방과, 거실, 주방, 화장실이 번듯하게 갖춰진 새 집을 대하고 메어오는 목을 어쩔 수 없었다. A씨는 "살아생전 자식들이 편안하게 돌아올 집을 마련할 수 있을지 자나 깨나 걱정뿐이었다"면서 "이렇게 많은 분들의 도움으로 소원을 풀게 되어 너무 고맙고 기쁘다"고 말했다. 한편 남양면은 장평면과 함께 권역형으로 52명의 취약계층 대상자를 사례관리하고 있으며, 주택 외에도 경제, 의료, 건강 등 도움이 필요한 곳 어디든 달려가 상담서비스를 진행 중이다. 이정호 면장은 "어려운 주민을 찾아내고 지역의 봉사단체가 주축이 되어 어려움을 해소할 때 지역 전체의 행복지수도 올라간다"며 "재능기부와 금전적 후원으로 어려운 분들에게 새 삶을 선물하는 분들에게 깊이 감사드린다"고 전했다.

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