Sebuah pH sekitar 7 adalah optimum dan sebagai pH bergerak lebih jauh dari pH optimum aktivitas enzim mulai melambat. Setiap enzim menunjukkan aktivitas tertinggi pada suhu tertentu yang disebut suhu optimum. Laju reaksi di atas atau di bawah suhu ini lebih lambat. Peningkatan suhu menyebabkan frekuensi tumbukan meningkat karena molekul bergerak lebih cepat ketika panas disuplai.