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고정된 배양세포를 10％ 정상 염소 혈청을 포함하는 PBS로 구성된 블로킹 용액내에서 30분간 상온에서 인큐베이션하고, 이어서, 인간 NGF에 특이적인 1차 항체 (1:200, 생쥐 모노클로날 항체, Chemicn, Temecula, CA)와 상온에서 1시간 인큐베이션하고, Alexa Flur 594항 생쥐, 토끼 IgG (Mlecular Prbes, Eugene, OR)와 함께 상온에서 1시간 인큐베이션하고, PBS에서 세척하고, Gelvatl와 함께 슬라이드상에 올렸다.