Hücre kültürü, hücrelerin kontrollü koşullar altında, genellikle doğal ortamlarının dışında büyütüldüğü süreçtir. İlgili hücreler canlı dokudan izole edildikten sonra dikkatlice kontrol edilen koşullar altında muhafaza edilebilirler.
Hücre Kültürü Nasıl Çalışır?
Hücre kültürü, bir süspansiyon veya birlikte gelişen (tek tabakalı) bir kültür olarak, seçilen hücre tipi için özel olarak belirlenen bir ortamda (besiyeri ya da medyum) büyüyen hücreleri içerir. Genel olarak bu ortam, amino asitler, glikoz, vitaminler, inorganik tuzlar ve lipitler gibi bileşikler içerir. Ayrıca hayvan serumu, büyüme faktörleri, hormonlar, antibiyotikler ve antioksidanlar içerebilir. Buzağı serumu gibi diğer bileşenlerle desteklenebilen serum bazlı, serumsuz, hayvansız, proteinsiz ve kimyasal olarak tanımlanmış seçenekler dahil olmak üzere çeşitli ortam türleri mevcuttur. Hücreler daha sonra sıcaklık, oksijen ve karbondioksit içeriği gibi optimum hücre büyüme koşullarının sürdürülmesini sağlamak için bir inkübatörde kültürlenir.
Kültürlenmiş hücreler, sağlıklı büyümeyi sürdürmek için sürekli bir besin kaynağına ihtiyaç duyar ve bu nedenle besiyerinin düzenli olarak yenilenmesi gerekir. Ek olarak, birlikte gelişen hücre çizgilerinin, büyümenin devamını sağlamak için mevcut yüzey alanının tamamen kaplandığı hücre doluluk oranına ulaştıklarında alt kültürlenmesi gerekir. Hem ortam değişimi hem de alt kültürleme sırasında kültürün kimyasal veya biyolojik herhangi bir kontaminasyona maruz kalmasını önlemek çok önemlidir.
Hücre Kültürü Ne İçin Yapılır?
Hücre kültürünün araştırma, biyo-üretim ve tanı alanında birçok uygulaması vardır. Hayvan, bitki ve bakteri hücre kültürleri, biyolojik süreçleri ve genetiği incelemek ve aşılar, proteinler, enzimler, antikorlar ve hormonlar dahil olmak üzere biyolojik olarak elde edilen moleküller üretmek için rutin olarak kullanılır. Örneğin, ilaç keşfi ve geliştirilmesinde, memeli hücre kültürleri, hastalığın araştırılması için modeller sağlayarak hedefin tanımlanması ve validasyonuna izin verir. Ayrıca potansiyel yeni ilaçların etkinliğini ve güvenliğini test etmek için yüksek verimli hücre bazlı tarama testlerinde kullanılırlar. Klinik bir ortamda, hücre kültürü teknikleri genellikle bulaşıcı hastalıktan sorumlu organizmayı ve onu tedavi etmek için en etkili antimikrobiyal maddeleri belirlemek için kullanılır.
Neden Hücre Kültürü Tekniklerini Kullanmalısınız?
Hücre kültürü teknikleri, hücresel ve moleküler biyolojide son derece önemli bir araçtır. Araştırmacılara, hücrelerin normal fizyolojisi ve biyokimyasını, ilaçların ve toksik bileşiklerin etkilerini ve mutagenez ve karsinogenezi incelemek için mükemmel model sistemler sağlarlar.
Suyun Hücre Kültürüne Etkisi Nedir?
Kontamine kültürler ve hücre ölümü, aşağı yönlü deneyleri olumsuz etkileyebilecek önemli bir sorundur. Su, hücre kültürü çalışmalarının birçok aşamasında kullanılır. Tampon ve ortamın ana bileşenidir ve katkı maddeleri ve ilaçların çözünmesi için kullanılabilir. Kültürler, kirletici mikroorganizmalar, biyolojik olarak aktif hücre kalıntıları ve yan ürünler ve organik ve inorganik bileşiklerden olumsuz etkilendiğinden, başarılı deneyler için saf su kullanımı gereklidir.
Sudaki Ne Tür Kirleticiler Hücre Kültürü Sonuçlarını Etkileyebilir?
Hücre kültürü çalışmalarını etkileyen ana safsızlık türleri, bakteriler, endotoksinler, organik bileşikler ve iyonik kirleticilerdir.
Bakteriler
Bakteriler, tipik hücre kültürü koşullarında gelişir ve ilgili hücreleri göre hızla çoğalarak besin seviyelerinin düşmesine ve toksik yan ürünlerin artmasına neden olabilir. Bakteriyel kontaminasyon, ortam pH'ında ani değişikliklere ve önceden saf olan kültürlerin kontaminasyonuna da yol açabilir.
Endotoksinler
Endotoksinler çoğu Gram-negatif bakteri tarafından salınır. Bu endotoksinler, CD14 endotoksin reseptörlerinden yoksun olanlar da dahil olmak üzere çeşitli hücre tiplerini etkiler ve makrofajları ve mononükleer fagositleri farklı pro-enflamatuar sitokinleri serbest bırakmak için uyarır. Ortaya çıkan olumsuz etkiler, hücre büyümesi ve fonksiyonundaki değişiklikler, rekombinant proteinlerin üretimi ve klonlamanın verimliliğinde azalmadır.
Organik Bileşikler
Hümik asitler, tanenler, böcek ilaçları ve endokrin bozucular gibi suda yaygın olarak bulunan küçük organik bileşikler hücre gelişimini etkileyebilir. Bu organik bileşikler, bakteriyel büyüme için kontrolsüz bir besin kaynağı sağlar ve hücre kültürü için materyallerin hazırlanmasında kullanılan sudan uzaklaştırılmalıdır.
İyonlar
İyonik kirleticiler, özellikle çok değerlikli iyonlar ve ağır metaller düşük seviyelerde tutulmalıdır. Ağır metallerin - örneğin cıva ve kurşun - çeşitli hücre türleri için sitotoksik olduğu bilinmektedir.
Hücre kültürü için saf su kalitesi gereksinimleri nelerdir?
Uygulamanız için doğru saf su tipini kullanmak çok önemlidir. Memeli hücre kültürü için tipik olarak apirojenik Tip I ultra saf su gerekir. Ancak daha az hassas olan bakteri hücre kültürleri için Tip II+ saf su uygundur. Hücrelerin bakteriyel, maya kaynaklı ve viral kontaminantlardan etkin bir şekilde arındırılmasını sağlamak için ortam ve tamponların hazırlanmasında Tip I su kullanılmalıdır.
Hücre Kültürü Uygulamaları İçin Gereken Saf Su Özellikleri
Uygulama Resistivite (MΩ.cm)* TOC (ppb) Filtre (µm) Bakteriler (CFU / ml) Endotoksinler (EU / ml) Nükleazlar Saf Su Tipi
Bakteriyel Hücre Kültürü >1 <50 <0.2 <1 NA NA Tip II+
Memeli Hücre Kültürü >18 <10 <0.2 <1 <0.002 Tespit edilmedi. Tip I
Bitki Doku Kültürü >18 <10 <0.2 <1 <0.002 Tespit edilmedi. Tip I
Histoloji >1 <50 <0.2 <1 NA NA Tip II+
Hidroponik >1 <50 <0.2 <1 NA NA Tip II+
ELGA Labwater, hücre kültürü çalışmaları için su saflığı sorunlarına nasıl çözümler üretiyor?
Elga Labwater’ın su saflaştırma sistemlerindeki uzmanlığı ve köklü itibarı, deneyimli ekibinin kullanıcıların uygulamaları için gerekli saf suyun özelliklerini belirleyebilmelerini sağlar. Elga, hücre kültürü uygulamaları için her birinin kendine özgü avantajları ve sınırlamaları olan bir dizi su saflaştırma sistemi sunmaktadır. Örneğin, CENTRA® merkezi saflaştırma ve dağıtım sistemleri serisi, büyük hacimlerde saf suyun laboratuvarlarda üretilmesi, depolanması ve dağıtılması aşamalarında devrim yaratmıştır. CENTRA R-200, saatte 200 litrelik reverse ozmoz modülü ve 0,2 µm filtreler ile Tip I (Ultra Saf), Tip II ve Tip III saf su sağlayan eksiksiz bir su saflaştırma, depolama, kontrol ve dağıtım sistemidir.
Sonuç
Hücre kültürü, hücresel ve moleküler biyolojide kritik önemde bir araçtır ve kullanılacak saf su gereksinimleri kültür türüne göre belirlenir. Bakteriyel hücre kültürü için gereken saf su, en azından Tip II+ kalitede olmalıdır. Daha hassas memeli hücre kültürü, yüksek dirençli (> 18 MΩ.cm) Tip I ultra saf su gerektirir ve esasen bakteri, endotoksin ve diğer kirleticiler uzaklaştırılmıştır.
ELGA’nın geniş su saflaştırma sistemleri yelpazesi, dünya çapındaki laboratuvarların sudaki safsızlıklar konusunda endişelenmeden hücre kültürü tekniklerini uygulamalarına yardımcı olur.
Kaynak: https://www.elgalabwater.com/cell-tissue-cultures
Takip Et
Facebook
Twitter
LinkedIn
Instagram
YouTube
Paylaş
Facebook
Twitter
LinkedIn
Bunları da beğenebilirsiniz!
Antibiyotik Direncine Karşı Mücadelede Otomatik Pipetleme Robotlarının Kullanımı
Bristol Southmead Hastanesi'ndeki bilim insanları, Gram negatif enfeksiyonlara karşı savaşta önemli bir görev üstleniyorlar ve yeni Gram negatif antibiyotikler geliştirmek için Avrupa GNA NOW projesinde ilaç şirketleri ve diğer araştırma grupları ile iş birliği yapıyorlar.
30 Mar 2021
Devamı...
Covid-19 Tanı Testlerinde Hücre Parçalanmasının Rolü
Dünyanın dikkati, yüksek hızda uygulanabilir Covid-19 aşıları geliştirmeye ve dağıtmaya odaklansa da hızlı ve doğru tanı testlerinin virüsün yayılmasını durdurmada öncelik olmaya devam ettiğini göz ardı etmemeliyiz. Pandeminin ilk günlerinde, yetersiz ulaşılabilirlik, yanlış sonuçlar ve sonuç almanın uzun sürmesi, COVID-19 testine yönelik yaygın şikayetlerdi. Test ve sonuçlar arasındaki uzun bekleme süreleri genellikle haftalar aldı ve yanlış negatif test sonuçları, test zamanına bağlı olarak yaklaşık %20 oranında rapor edildi. Bu virüsün tanımlanması ve test edilmesi zorlayıcı olmaktadır, ancak iyileştirilmiş geri dönüş süreleri ile doğru tanı testleri Covid-19'un yayılmasını durdurmak için etkili yollardır.
23 Mar 2021
Devamı...
ICP-MS ve ICP-OES analizlerinde saf suyun önemi nedir?
ICP-MS, sıvılarda birden fazla elementi belirlemenin en hassas yoludur. Çözeltiler, yüksek enerjili bir plazmada atomize ve iyonize edilir ve ortaya çıkan iyonlar, kütle spektrometresi ile ölçülür. ICP-OES, mevcut elementleri belirlemek için plazmadan yayılan ışığı kullanır.
9 Mar 2021
Devamı...
Flash kromatografi sistemlerinin bakımı nasıl yapılır?
Arabamızı temizler, bilgisayarımızı günceller ve sağlığımız için doktora gideriz. Süreç ne kadar sinir bozucu olursa olsun, kendimizi ve sahip olduklarımızı korumak hayatta bir zorunluluktur. Sahip olduğumuz en pahalı şeylerden biri olan laboratuvar ekipmanlarının da ömürlerinin uzun olması için düzenli olarak bakımları yapılmalıdır. Bu yazıda, bir flash kromatografi sisteminin bakımının mümkün olan en pragmatik ve verimli şekilde nasıl yapılacağını göstermeye çalışacağım.
2 Mar 2021
Devamı...
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Hiçbir Paylaşımı Kaçırmayın
İletişim Formu
Son paylaşımlar
Farmasötik Nanoteknoloji: Fırsatlar ve Zorluklar
Pipetler Hakkında Bilmeniz Gereken Her Şey
Antipsikotik İlaçlar İçin Rutin Analizlerin Geliştirilmesi
mRNA Teknolojisi ve Lipit Nanopartiküller ile İlgili Son Gelişmeler
Kullanılmış Maskeler Mikroplastik Riski Oluşturuyor
Nükleik Asitler Nasıl Saflaştırılır?
Nükleik Asitlerin Saflık ve Konsantrasyonunun Belirlenmesi
Bir PCR Laboratuvarı Nasıl Kurulur?
Nükleik Asit Ekstraksiyonu İçin Gerekli Ekipmanlar Nelerdir?
Protein Aktivitesinin Glikozilasyon Yoluyla Modifikasyonunun COVID-19’un Şiddetini Tahmin Etmek için Kullanılması
Biyofarmasötikler Nasıl Üretilir?
Hücre Kültürü Çalışmalarında Saf Suyun Önemi Nedir?
Doğal Bileşiklerin Saflaştırılması İçin Tavsiyeler
Antibiyotik Direncine Karşı Mücadelede Otomatik Pipetleme Robotlarının Kullanımı
Covid-19 Tanı Testlerinde Hücre Parçalanmasının Rolü
ICP-MS ve ICP-OES analizlerinde saf suyun önemi nedir?
Flash kromatografi sistemlerinin bakımı nasıl yapılır?
Elektronik Pipetlerin Mikrobiyal Evrim Araştırmalarında Tarama için Kullanılması
Nanoemülsiyonlar: CBD Yağını İçeceklere Karıştırmak
Laboratuvar için Farklı Saf Su Tipleri Hakkında Bilmeniz Gerekenler
2021 için Kromatografi ve Rotary Evaporasyona Yönelik Kristal Küre Tahminleri
INTEGRA VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipetler Yardımıyla Yeni Nesil Bilim İnsanlarını Eğitmek
CBD Yağı Bazlı Nanoemülsiyonlar Üretmek için Kullanılan Yöntemler
Hepatit B Enfeksiyonunu Önlemek için DNA Aşılarının Araştırılması
Gelin bu olağandışı yılı sıra dışı bir blog yazısıyla noktalayalım!
Doğru Rezervuar ile Değerli Reaktiflerinizi Koruyun ve Tasarruf Edin
Tanı Testleri için Kaliteli Enzimler Nasıl Oluşturulur?
Papatya Çayındaki Ağır Metallerin Tespit Edilmesi
INTEGRA çözümleri tanı test ve araştırmalarını nasıl hızlandırıyor?
Kararlı ve steril Propofol nasıl üretilir?
Kromatografi kolonları kuru doldurma (dry packing) yöntemiyle üç adımda nasıl doldurulur?
Gıda Ambalajları için Yeşil Plastiklerin Geliştirilmesi
VOYAGER Aralıkları Ayarlanabilir Elektronik Pipet Basel Üniversitesi'nde immünoloji araştırmalarını nasıl hızlandırıyor?