限制酶

限制酶（英语：restriction enzyme）又称限制内切酶或限制性内切酶，全称限制性核酸内切酶，是一种能将双股DNA切开的酶。切割方法是将糖类分子与磷酸之间的键结切断，进而于两条DNA链上各产生一个切口，且不破坏核苷酸与碱基。切割形式有两种，分别是可产生具有突出单股DNA的黏状末端，以及末端平整无凸起的平滑末端。由于断开的DNA片段可由另一种称为DNA连接酶的酵素黏合，因此染色体或DNA上不同的限制片段，得以经由剪接作用而结合在一起。
限制酶在分子生物学与遗传工程领域有广泛的应用，此类酵素最早发现于某些品系的大肠杆菌体内，这些品系能够“限制”噬菌体对其感染，因此得名。科学家认为限制酶是细菌所演化出来对抗病毒感染，并帮助将已殖入的病毒序列移除的机制。是限制修饰系统的一部分。约翰霍普金斯大学的丹尼尔·那森斯、汉弥尔顿·史密斯与伯克利加州大学的沃纳·亚伯因为限制酶的发现及研究，而共同获得1978年的诺贝尔生理学或医学奖。此酵素最早的应用之一，是用来将胰岛素转基因到大肠杆菌，使其具备生产人类胰岛素的能力。

类型

根据限制酶的结构，辅因子的需求切位与作用方式，可将限制酶分为三种类型，分别是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。

第一型限制酶

同时具有修饰及限制性切割的作用；另有识别DNA上特定碱基序列的能力，通常其切割位距离识别位点可达数千个碱基之远，并不能准确定位切割位点，所以并不常用。例如：EcoB、EcoK。

第二型限制酶

只具有限制性切割的作用，修饰作用由其他酶进行。所识别的位置多为短的回文序列；所剪切的碱基序列通常即为所识别的序列。是遗传工程上，实用性较高的限制酶种类。例如：EcoRI、HindIII。

第三型限制酶

与第一型限制酶类似，同时具有修饰及识别切割的作用。可识别短的不对称序列，切割位与识别序列约距24-26个碱基对，并不能准确定位切割位点，所以并不常用。例如：EcoPI、HinfIII。