Sau thất bại của Pháp tại Pavia năm 1525, khiến các lực lượng đế quốc Tây Ban Nha của Charles V chiếm ưu thế ở Ý, Francesco gia nhập Liên minh Cognac chống lại hoàng đế cùng với Venice, Florence Đức Giáo hoàng và người Pháp. Điều này nhanh chóng dẫn đến việc ông bị trục xuất khỏi Milan bởi các lực lượng đế quốc, nhưng ông đã quản lý để duy trì quyền kiểm soát các thành phố khác nhau trong công quốc, và một lần nữa được phục hồi cho chính Milan bởi hòa bình được ký kết tại Cambrai năm 1529.
1525