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31983L0514

Tercera Directiva 83/514/CEE de la Comisión, de 27 de septiembre de 1983, sobre la aproximación de las legislaciones de los Estados Miembros relativas a los métodos de análisis necesarios para el control de la composición de los productos cosméticos

Diario Oficial n° L 291 de 24/10/1983 p. 0009 - 0046 Edición especial en finés : Capítulo 13 Tomo 13 p. 0125  Edición especial en español: Capítulo 15 Tomo 4 p. 0139  Edición especial sueca: Capítulo 13 Tomo 13 p. 0125  Edición especial en portugués: Capítulo 15 Tomo 4 p. 0139

 TERCERA DIRECTIVA DE LA COMISIÓN    de 27 de septiembre de 1983    sobre la aproximación de las legislaciones   de los Estados miembros relativas a los métodos   de análisis necesarios para el control de la   composición de los productos cosméticos     ( 83/514/CEE )    LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS ,    Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Económica   Europea ,    Vista la Directiva 76/768/CEE del Consejo , de 27 de julio   de 1976 , sobre la aproximación de las legislaciones de   los Estados miembros en materia de productos cosméticos   (1) , modificada en el último lugar por la   Directiva 83/341/CEE (2) y , en particular , el apartado 1   del artículo 8 ,    Considerando que la Directiva 76/768/CEE prevé unos   controles oficiales de los productos cosméticos tendentes   a comprobar que se cumplen las condiciones previstas por las   disposiciones comunitarias relativas a la composición de   los productos cosméticos ;    Considerando que conviene establecer , a la mayor   brevedad , todos los métodos de análisis necesarios y   que habiéndose realizado dos etapas para alcanzar este   objetivo mediante la fijación de determinados métodos   en las Directivas 80/1335/CEE (3) y 83/434/CEE (4) de la   Comisión , la fijación de los métodos de   determinación del diclorometano y del   1,1,1-tricloroetano , de identificación y de   determinación de la 8-hidroxiquinoleína y de su   sulfato , de determinación del amoniaco ,   de identificación y de determinación del   nitrometano , de identificación y de determinación del   ácido tioglicólico en los productos para el rizado o   desrizado de los cabellos y los depilatorios , de   identificación y de determinación del hexaclorofeno ,   de determinación de la tosilcloramida sódica ,   de determinación de los compuestos fluorados   en las pastas dentífricas , de identificación y de   determinación de los compuestos organomercuriales , de   determinación de los sulfuros alcalinos y alcalinotérreos   que constituyen una tercera etapa ,    Considerando que las medidas previstas en la presente   Directiva se atienen al dictamen del Comité para la   adaptación al progreso técnico de la   Directiva 76/768/CEE ,    HA ADOPTADO LA PRESENTE DIRECTIVA :    Artículo 1    Los Estados miembros adoptarán todas las medidas   apropiadas para que , durante los controles oficiales de los   productos cosméticos :     - la determinación del diclorometano y del   1,1,1-tricloroetano ,     - la identificación y la determinación de la   8-hidroxiquinoleína y de su sulfato     - la determinación del amoniaco ,     - la identificación y la determinación del   nitrometano ,     - la identificación y la determinación del ácido   tioglicólico en los productos para el rizado o desrizado   de los cabellos y los depilatorios ,     - la identificación y la determinación del   hexaclorofeno ,     - la determinación de la tosilcloramida sódica ,     - la determinación de los compuestos fluorados en las   pastas dentífricas ,     - la identificación de los compuestos orgamercuriales ,     - la determinación de los sulfuros alcalinos y   alcalinotérreos ,    se efectuaren según los métodos descritos en el   Anexo .    Artículo 2    Los Estados miembros aplicarán las disposiciones   legales , reglamentarias o administrativas necesarias para   cumplir las disposiciones de la presente Directiva a más   tardar el 31 de diciembre de 1984 e informarán de ello   inmediatamente a la Comisión .    Artículo 3    Los destinatarios de la presente Directiva serán los   Estados miembros .    Hecho en Bruselas , el 27 de septiembre de 1983 .    Por la Comisión    Miembro de la Comisión    Frans ANDRIESSEN    (1) DO n º L 262 de 27 . 9 . 1976 , p. 169 .    (2) DO n º L 188 de 13 . 7 . 1983 , p. 15 .    (3) DO n º L 383 de 31 . 12 . 1980 , p. 27 .    (4) DO n º L 185 de 30 . 6 . 1982 , p. 1 .    ANEXO    DETERMINACIÓN DEL DICLOROMETANO Y DEL   1,1,1-TRICLOROETANO    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método describe la determinación   del diclorometano ( cloruro de metileno ) y del   1,1,1-tricloroetano ( metilcloroformo ) .    Se aplica a todos los productos cosméticos   que puedan contener estos compuestos .    2 . DEFINICIÓN    El contenido de diclorometano y de 1,1,1-tricloroetano   de la muestra determinado por este método se   expresa en porcentaje de masa .    3 . PRINCIPIO    La determinación se efectúa por cromatografía   en fase gaseosa utilizando el triclorometano   ( cloroformo ) como patrón interno .    4 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1 . Triclorometano ( CHCl3 ) .    4.2 . Tetracloruro de carbono ( CCl4 ) .    4.3 . Diclorometano ( CH2Cl2 ) .    4.4 . 1,1,1-tricloroetano ( CH3CCl3 ) .    4.5 . Acetona .    4.6 . Nitrógeno .    5 . APARATOS    5.1 . Material habitual de laboratorio y de   cromatografía en fase gaseosa .    5.2 . Cromatógrafo provisto de detector   catarométrico .    5.3 . Frasco de trasvase de 50-100 ml ; véase   toma de muestras , 5.3 (1) .    5.4 . Jeringa para gases a presión ( véase   método de toma de muestras , 5.4.2.2 ) (1) .    6 . MÉTODO    6.1 . Muestra no presurizada : pesar exactamente   la muestra en un matraz cónico tapado . Introducir   una cantidad exactamente pesada de CHCl3 ( 4.1 )   equivalente a la cantidad supuesta de CH2Cl2 y   CH3CCl3 que contiene la muestra . Homogeneizar .    6.2 . Muestra presurizada : utilizar el método   de toma de muestras descrito en el capítulo « toma   de muestras » . Tener en cuenta sin embargo   las precisiones siguientes .    6.2.1 . Introducir en el frasco de trasvase una   cantidad de patrón interno ( 4.1 ) equivalente   a la cantidad supuesta de CH2Cl2 y/o CH3CCl3   contenida en la muestra . Homogeneizar . Enjuagar   el volumen muerto de la válvula del frasco de   trasvase con 0,5 ml de CCl4 ( 4.2 ) , que deja   de evaporar . Determinar la masa del patrón   interno por pesada diferencial del frasco de trasvase .    6.2.2 . La boquilla de teflón de la jeringa ,   una vez llenada ésta con la muestra , se   enjuagará con nitrógeno ( 4.6 ) , de manera   que no quede en la boquilla ningún residuo de   la muestra antes de proceder a la inyección en   el cromatógrafo .    6.2.3 . Después de cada toma , la boquilla   de la válvula o la pieza de trasvase eventualmente   utilizada deberá enjuagarse varias veces con   acetona ( 4.5 ) ( utilizando una jeringuilla   hipodérmica ) , secándola después a fondo   con nitrógeno ( 4.6 ) .    6.2.4 . para cada análisis , efectuar las   mediciones en dos frascos de trasvase diferentes ,   realizando 5 mediciones por frasco .    7 . CONDICIONES CROMATOGRÁFICAS    7.1 . Precolumna    Tubo inoxidable .    Longitud : 30 cm    Diámetro : 3 ó 6 mm .    Llenado : chromosorb con las mismas características   que el de la columna .    7.2 . Columna    La fase estacionaria está constituida por el   Hallcomid M 18 depositado sobre chromosorb . Debe   dar un grado de resolución ( R ) igual a   1,5 como mínimo :    R = 2 ( d' r2 - d' r1 ) / ( W1 + W2 )    donde :    r1 y r2 = tiempo de retención ( expresado   en min ) ;    w1 y w2 = anchura de los picos a media altura   ( en mm ) ;    d' = velocidad de avance del papel ( en mm/min ) .    7.3 . A modo de ejemplo , las condiciones operativas   siguientes dan los resultados pretendidos :    Columna * I * II *    Material : * tubo inoxidable * tubo inoxidable *    Longitud : * 350 cm * 400 cm *    Diámetro : * 3 mm * 6 mm *    Llenado : * * *    chromosorb : * WAW * WAW-DMCS-HP *    granulometría : * 100-120 mallas * 60-80 mallas *    fase estacionaria : * Hallcomid M 18 10 % *   Hallcomid M 18 20 % *    Temperaturas : * * *    columna : * 65 ° C * 75 ° C *    inyector : * 150 ° C * 125 ° C *    detector : * 150 ° C * 200 ° C *    Gas vector : * * *    helio , caudal : * 45 ml/min * 60 ml/min *    presión de entrada * 2,5 bar * 2,0 bar *    Inyección : * 15 µl * 15 µl *    8 . ESTABLECIMIENTO DE LOS COEFICIENTES DE   PROPORCIONALIDAD    Constituir en un matraz cónico la mezcla   siguiente exactamente pesada :    CH2Cl2 ( 4.3 ) : 30 % m/m diclorometano .    CH3CCl3 ( 4.4 ) : 35 % m/m tricloroetano .    CHCl3 ( 4.1 ) : 35 % m/m triclorometano .    Sirve para establecer los coeficientes de   proporcionalidad .    9 . CÁLCULOS    9.1 . Cálculo de un coeficiente de proporcionalidad   de una sustancia ( p ) con relación a una   sustancia ( a ) elegida como patrón interno    Sea la sustancia « p »    k p = su coeficiente de proporcionalidad ,    m p = su masa en la mezcla ,    A p = el área de su pico    Sea la sustancia « a » :    k a = su coeficiente de proporcionalidad elegido   igual a 1 ,    m a = su masa en la mezcla ,    A A = el área de su pico    k p = ( m p × A p ) / ( m a × A p )    A modo de ejemplo , se han obtenido los coeficientes   de proporcionalidad siguientes ( para CHCl3 : k = 1 ) :    CH2Cl2 : k1 = 0,78 ± 0,003    CH3CCl3 : k2 = 1,00 ± 0,03    9.2 . Cálculo de los porcentajes de CH2Cl2 y   CH3CCl3 presentes en la muestra a analizar    Sea :    k1 = el coeficiente de proporcionalidad de CH2Cl2 ,    k2 = el coeficiente de proporcionalidad de CH3CCl3 ,    m a = la masa de CHCl3 ,    m e = la masa de la muestra a analizar ,    A a = el área del pico de CHCl3 ,    A1 = el área del pico de CH2CCl2 ,    A2 = el área del pico de CH3CCl3 .    Se tendrá :     % ( m/m ) CH2Cl2 = ( m a × A1 × k1 × 100 ) /   ( A a × m e )     % ( m/m ) CH3CCl3 = ( m a × A2 × k2 × 100 ) /   ( A a × m e )    10 . REPETIBILIDAD (2)    Para un contenido en compuestos clorados del 25 %   ( m/m ) la diferencia entre los resultados de   dos determinaciones paralelas efectuadas sobre la   misma muestra no debe sobrepasar el 2,5 por 100 .    IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DE LA   8-HIDROXIQUINOLEÍNA Y DE SU SULFATO    1 . OBJETO Y CAMPO DE AMPLIACIÓN    El presente método describe la identificación   y la determinación de la 8-hidroxiquinoleína y de   su sulfato .    2 . DEFINICIÓN    El contenido de 8-hidroxiquinoleína de la muestra ,   determinado por este método , se expresa en porcentaje   de masa de 8-hidroxiquinoleína .    3 . PRINCIPIO    3.1 . Identificación    Se efectúa por cromatografía en capa fina .    3.2 . Determinación    Se efectúa por fotocolorimetría a 410 mm de un   complejo de cobre obtenido por reacción con el licor   Fehling .    4 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1 . 8-Hidroxiquinoleína .    4.2 . Benceno ( debido a la toxicidad del producto ,   se adoptarán las oportunas precauciones ) .    4.3 . Cloroformo .    4.4 . Solución de hidróxido de sodio al 50 % m/m .    4.5 . Sulfato de cobre ( CuSO4 5H2O ) .    4.6 . Tartrato doble de potasio y de sodio .    4.7 . Acido clorhídrico 1N .    4.8 . Acido sulfúrico 1N .    4.9 . Solución de hidróxido de potasio 1N .    4.10 . Etanol .    4.11 . Butanol 1 .    4.12 . Acido acético glacial .    4.13 . Acido clorhídrico 0,1N .    4.14 . Celite 545 o equivalente .    4.15 . Soluciones testigo    4.15.1 . Poner 100 mg de 8-hidroxiquinoleina ( 4.1 )   en un matraz aforado de 100 ml y disolver con una   pequeña cantidad de ácido sulfúrico 1N ( 4.8 ) .   Completar hasta la señal con el ácido sulfúrico   1N ( 4.8 ) .    4.15.2 . Poner 100 mg de 8-hidroxiquinoleína ( 4.1 )   en un matraz aforado de 100 ml . Disolver en etanol   ( 4.10 ) . Completar hasta la señal con el mismo   disolvente y mezclar .    4.16 . Licor de Fehling    Solución A    En un matraz aforado de 100 ml , pesar 7 g de sulfato   de cobre ( 4.5 ) . Disolver en una pequeña cantidad   de agua , completar con agua hasta la señal y mezclar .    Solución B    En un matraz aforado de 100 ml , pesar 35 g de tartrato   doble de potasio y de sodio ( 4.6 ) y disolverlos   en 50 ml de agua . Añadir 20 ml de hidróxido de sodio   al 50 % ( 4.4 ) . Completar con agua hasta la señal   y mezclar .    Inmediatamente antes del empleo , en un matraz aforado   de 100 ml echar mediante una pipeta 10 ml de solución A   y 10 ml de solución B . Completar hasta la señal   con agua y mezclar .    4.17 . Disolventes de desarrollo    Disolvente I : 1-butanol , ácido acético ,   agua ( 80-20-20 ) ( v/v/v ) .    Disolvente II : cloroformo , ácido acético   ( 95-5 ) ( v/v ) .    4.18 . Solución al 1 % de 2,6-dicloro-4-(cloroimino)   ciclohexa-2,5-dienona en etanol ( 4.10 ) .    4.19 . Solución de carbonato de sodio al 1 % ( m/v ) .    4.20 . Solución al 30 % ( v/v ) de etanol ( 4.10 )   en agua .    4.21 . Solución de dihidrogenoetilendiaminatetracetato   disódico al 5 % ( m/v ) .    4.22 . Solución tampón de pH 7    Pesar 27 g de KH2PO4 y 70 g de K2HPO4.3H2O en un   matraz aforado de 1 l . Disolver . Completar hasta la   señal y mezclar .    4.23 . Capas finas de sílice listas para su uso    Grosor : 0,25 mm ( Kieselgel 60 Merck o equivalente ) .   Antes de su uso , cada placa se vaporiza con 10 ml   del reactivo 4.21 y se seca a 80 ° C .    5 . APARATOS    5.1 . Matraces esmerilados de fondo redondo de 100 ml .    5.2 . Matraces aforados .    5.3 . Pipetas graduadas de 10 y 5 ml .    5.4 . Pipetas aforadas de 20 , 15 , 10 y 5 ml .    5.5 . ampolla de decautación 100 , 50 y 25 ml .    5.6 . Filtros plegados de 9 cm de diámetro .    5.7 . Evaporador rotatorio .    5.8 . Refrigerante de reflujo esmerilado .    5.9 . Espectofotómetro .    5.10 . Cubetas de 1 cm de trayecto óptico .    5.11 . Agitador calefactor .    5.12 . Columna de vidrio para cromatografía de 160 mm   de altura y 8 mm de diámetro , cuya parte inferior   presenta un estrechamiento obturado por un tapón   de lana de vidrio y cuya parte superior está   diseñada de manera que se pueda eluir bajo presión .    6 . MÉTODO    6.1 . Identificación    6.1.1 . Muestras líquidas    6.1.1.1 . Una vez llevado a 7 el pH de una fracción   de la muestra que se ha de analizar , depositar   5 y 10 µl de la misma en cada uno de los puntos   de la línea de partida de una placa recubierta de   una capa fina de gel de sílice tratada previamente   como se indica en el punto 4.23 .    6.1.1.2 . En otros dos puntos de la línea de   partida depositar 10 y 30 µl de la solución   testigo ( 4.15.2 ) , y se revela luego la placa en   uno de los dos disolventes ( 4.17 ) .    6.1.1.3 . Cuando el frente del disolvente ha   avanzado 15 cm , secar la placa a 110 ° C durante   15 minutos . Bajo luz UV ( 366 nm ) , las manchas de   8-hidroxiquinoleína se caracterizan por una fluorescencia   amarilla .    6.1.1.4 . La placa se vaporiza a continuación con   una solución acuosa de carbonato de sodio al 1 %   ( 4.19 ) y , una vez secada , con una solución al   1 % de 2,6-dicloro-4-(cloroimino)ciclohexa-2,5-dienona   ( 4.18 ) . La 8-hidroxiquinoleína aparece en forma   de mancha azul .    6.1.2 . Muestras sólidas y cremas    6.1.2.1 . Poner lg de la muestra en suspensión en   5 ml de la solución tampón de pH 7 ( 4.22 ) .   Trasvasar con 10 ml de cloroformo a una ampolla de   decantación y agitar . Una vez recogida la capa   clorofórmica , extraer otras dos veces la suspensión   acuosa con 10 ml de cloroformo ( 4.3 ) . Reunir y filtrar   los extractos clorofórmicos en un matraz de fondo   redondo de 100 ml ( 5.1 ) . Concentrar hasta sequedad   casi total en el evaporador rotatorio . Recoger el   residuo en 2 ml de cloroformo y depositar 10 y 30 µl   de la solución obtenida sobre una placa de gel de   silíce ( 4.23 ) , procediendo como se indica en el   punto 6.1.1.1 .    6.1.2.2 . Una vez depositados los 10 y 30 µl   de la solución testigo ( 4.15.2 ) , proceder como se   indica en los puntos 6.1.1.2 , 6.1.1.3 y 6.1.1.4 .    6.2 . Determinación    6.2.1 . Muestras líquidas    6.2.1.1 . En un matraz esmerilado de fondo redondo   de 100 ml , pesar 5 g de la muestra . Añadir 1 ml de   ácido sulfúrico 1 N ( 4.8 ) y concentrar la mezcla   hasta sequedad casi total bajo presión reducida a   50 ° C .    6.2.1.2 . Disolver este residuo en 20 ml de agua   caliente . Trasvasar a un matraz aforado de 100 ml   y enjuagar tres veces seguidas con 20 ml de agua .   Completar con agua hasta 100 ml y mezclar .    6.2.1.3 . Con una pipeta echar 5 ml de esta solución   en una ampolla de decantación de 50 ml ( 5.5 ) .   Después de añadir 10 ml de licor de Fehling ( 4.16 ) ,   extraer tres veces el complejo de cobre formado con   8 ml de cloroformo ( 4.3 ) .    6.2.1.4 . Reunir las fases clorofórmicas filtradas   en un matraz aforado de 25 ml ( 5.2 ) . Completar con   cloroformo ( 4.3 ) hasta la señal y agitar . Medir   la densidad óptica de la solución amarilla a 410 nm   con relación al cloroformo .    6.2.2 . Muestras sólidas y cremas    6.2.2.1 . En un matraz de fondo redondo de 100 ml   ( 5.1 ) , pesar 0,500 g de la muestra . Añadir   30 ml de benceno ( 4.2 ) y 20 ml de ácido clorhídrico   1 N ( 4.7 ) . Hervir a reflujo durante 30 minutos con   agitación .    6.2.2.2 . Trasvasar el contenido del matraz a una   ampolla de decantación de 100 ml ( 5.5 ) y enjuagar   con 5 ml de ácido clorhídrico 1 N ( 4.7 ) . Pasar   la fase acuosa a un matraz de fondo redondo ( 5.1 ) .   Lavar la fase bencénica con 5 ml de ácido   clorhídrico 1 N ( 4.7 ) y recoger en el matraz las   aguas de lavado . Proseguir como se indica en el   punto 6.2.2.4 .    6.2.2.3 . En el caso de emulsiones no apropiadas para   la continuación del análisis . Mezclar 0,500 g de   la muestra con 2 g de celite 545 ( 4.14 ) de modo que   se obtenga un polvo fluido . Colocar la mezcla por   pequeñas fracciones en la columna de vidrio para   cromatografía ( 5.12 ) . Después de cada adición ,   comprimir el contenido de la columna . Una vez introducida   en la columna la totalidad de la mezcla muestra-celite ,   eluir con ácido clorhídrico 0,1 N ( 4.13 ) de modo   que se obtengan 10 ml de eluato en unos 10 minutos . En   caso necesario , puede efectuarse esta elución   ejerciendo una ligera sobrepresión con nitrógeno .    Durante la elución , conviene cerciorarse de que   existe siempre ácido clorhídrico por encima de   la mezcla muestra-celite . Los 10 primeros ml de eluato   se tratan luego como se indica en el punto 6.2.2.4 .    6.2.2.4 . Las fases acuosas ( 6.2.2.2 ) o los eluatos   ( 6.2.2.3 ) se reúnen y concentran hasta sequedad   casi total en el evaporador rotatorio bajo presión   reducida .    6.2.2.5 . Disolver el residuo en 6 ml de la solución   de hidróxido de sodio 1 N ( 4.9 ) . Añadir 20 ml   de licor de Fehling ( 4.16 ) y trasvasar a una ampolla   de decantación de 50 ml ( 5.5 ) . Enjuagar el matraz   con 8 ml de cloroformo ( 4.3 ) y trasvasar a la ampolla   de decantación . Después de agitar , la fase   clorofórmica se filtra y se recoge en un matraz   aforado de 50 ml ( 5.2 ) .    6.2.2.6 . La fase acuosa se extrae de nuevo tres   veces con 8 ml de cloroformo ( 4.3 ) . Las fases   clorofórmicas se filtran y se recogen en el matraz   aforado de 50 ml . Completar con cloroformo hasta la   señal y agitar . Medir la densidad óptica de la   solución amarilla a 410 nm con relación al   cloroformo .    7 . CURVA PATRóN    7.1 . En una serie de matraces de fondo redondo de   100 ml ( 5.1 ) , cada uno de los cuales contiene 3 ml   de una solución acuosa de etanol al 30 % ( 4.20 ) ,   echar con una pipeta 5 , 10 , 15 y 20 ml de la   solución testigo ( 4.15.1 ) y proceder como se   indica en 6.2.1 .    8 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    8.1 . Muestras líquidas    8-Hidroxiquinoleína % ( m/m ) = ( a × 100 ) /m    donde :    a = número de mg de 8-hidroxiquinoleína observados   en la curva patrón (3) ,    m ( mg ) = masa de la muestra ( 6.2.1.1 ) .    8.2 . Muestras sólidas y cremas    8-Hidroxiquinoleína % ( m/m ) = ( 2a × 100 ) /m    donde :    a = número de mg de 8-hidroxiquinoleína observados   en la curva patrón (3) ,    m ( mg ) = masa de la muestra ( 6.2.2.1 ) .    9 . REPETIBILIDAD (3)    Para un contenido de hidroxi-8-quinoleína del 0,3 % ,   la diferencia entre los resultados de dos determinaciones   paralelas efectuadas sobre la misma muestra no debe   sobrepasar el 0,02 % .    DETERMINACIÓN DEL AMONIACO    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método describe la determinación del   amoniaco libre en el conjunto de los diferentes   productos cosméticos .    2 . DEFINICIÓN    El contenido de amoniaco de la muestra determinado   por este método se expresa en porcentaje de masa   de NH3 .    3 . PRINCIPIO    Se añade una solución de cloruro de bario al   producto cosmético en un medio de metanol-agua .   El precipitado eventualmente formado se filtra o se   centrifuga . Esta manera de proceder evita que , en   el curso de la destilación por vapor , se arrastren   determinadas sales de amonio , como el carbonato ,   el bicarbonato , sales de ácido graso etc. , con   excepción del acetato de amonio .    El amoniaco se arrastra por vapor a partir del filtrado   o del líquido que sobremana y se determina por   titulación de regreso con indicador o por   titulación potenciométrica directa .    4 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1 . Metanol .    4.2 . Solución de cloruro de bario dihidratado   al 25 % ( m/v ) .    4.3 . Solución de ácido ortobórico al 4 % ( m/v ) .    4.4 . Solución titulada de ácido sulfúrico 0,5 N .    4.5 . Antiespumante líquido .    4.6 . Solución titulada de hidróxido de sodio 0,5 N .    4.7 . Indicador : mezclar 5 ml de una solución de   azul de metileno al 0,1 % en etanol y 2 ml de una   solución de azul de metileno al 0,1 % en agua .    5 . APARATOS    5.1 . Material habitual de laboratorio .    5.2 . Centrífuga con tubos cerrados .    5.3 . Aparato de arrastre por vapor .    5.4 . Potenciógrafo .   5.5 . Electrodo de vidrio y electrodo de   referencia al dicloruro de dimercurio   ( calomelanos ).    6 . MÉTODO    6.1 . En un matraz aforado de 100 ml , pesar con   una precisión de 1 mg una masa de muestra ( m )   que corresponda como máximo a 150 mg de NH3 .    6.2 . Añadir :    agua : 10 ml ;    metanol : 10 ml ( 4.1 ) ;    solución de cloruro de bario ( 4.2 ) : 10 ml .    Completar con metanol ( 4.1 ) hasta la señal .    6.3 . Homogeneizar y dejar una noche   en el refrigerador ( 5 ° C ) .    6.4 . La solución , fría todavía ,   se filtra o se centrifuga en tubos cerrados ,   durante 10 minutos , hasta obtener un líquido   sobrenadante límpido .    6.5 . Con una pipeta , introducir en el   aparato de arrastre ( 5.3 ) 40 ml de la solución   clara y luego , eventualmente , 0,5 ml de   antiespumante líquido ( 4.5 ) .    6.6 . Destilar y recoger 200 ml de destilado   en un vaso de 250 ml que contenga 10,0 ml de   ácido sulfúrico 0,5 N ( 4.4 ) y 0,1 ml del   indicador ( 4.7 ) .    6.7 . Determinar de regreso el exceso de   ácido sulfúrico con la solución de   hidróxido de sodio ( 4.6 ) .    6.8 . En el caso de una determinación   potenciométrica , recoger 200 ml de destilado   en un vaso de 250 ml que contenga 25 ml de la   solución de ácido ortobórico ( 4.3 ) ,   y titular con el ácido sulfúrico 0,5 N ( 4.4 ) .    7 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    7.1 . Titulación de regreso con indicador    Sea :    V1 ( ml ) = volumen de la solución de   hidróxido de sodio 0,5 N ( 4.6 ) utilizado ,    T1 = título de la solución de   hidróxido de sodio 0,5 N ( 4.6 ) ,    T2 = título de la solución de ácido   sulfúrico 0,5 N ( 4.4 ) ,    m ( mg ) = masa de la muestra ( 6.1 ) .    NH3 % ( m/m ) = ( 10 T2 - V1T1 ) × 17 × 100/0,4 m =   ( 10 T2 - V1T1 ) × 4250/m    7.2 . Titulación potenciométrica directa    donde :    V2 ( ml ) = volumen de la solución de   ácido sulfúrico 0,5 N ( 4.4 ) utilizado ,    T2 = título de la solución de ácido   sulfúrico 0,5 N ( 4.4 ) ;    m ( mg ) = masa de la muestra ( 6.1 ) .    NH3 % ( m/m ) = ( V2 × T2 × 17 × 100 ) /0,4 m =   ( V2 × T2 × 4250 ) /m    8 . REPETIBILIDAD (4)    Para un contenido de NH3 del orden del 6 % ,   la diferencia entre los resultados de dos   determinaciones paralelas efectuadas sobre la   misma muestra no debe sobrepasar el 0,6 % .    IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DEL   NITROMETANO    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método se aplica a la identificación   y a la determinación del nitrometano en los   productos cosméticos acondicionados en forma de   aerosol , para una concentración inferior o   igual al 0,3 % .    2 . DEFINICIÓN    El contenido de nitrometano de la muestra   determinado por este método se expresa en   porcentaje de masa de nitrometano en la totalidad   del contenido del aerosol .    3 . PRINCIPIO    El nitrometano se identifica por reacción   coloreada . Su determinación se realiza por   cromatografía en fase gaseosa previa   adición de un patrón interno .    4 . IDENTIFICACIÓN    4.1 . Reactivos    Todos los reactivos deben ser de calidad   analítica .    4.1.1 . Solución de hidróxido de sodio 0,5 N .    4.1.2 . Reactivo de Folin    Disolver en agua 0,1 g de la sal sódica del   ácido 1,2-naftoquinona 4-sulfónico y completar   hasta 100 ml .    4.2 . Método    Añadir 10 ml de 4.1.1 y 1 ml de 4.1.2 a 1 ml   de muestra . Una coloración violeta indica la   presencia de nitrometano .    5 . DETERMINACIÓN    5.1 . Reactivos    Todos los reactivos deben ser de   calidad analítica .    5.1.1 . Cloroformo ( patrón interno 1 ) .    5.1.2 . 2,4-dimetilheptano ( patrón interno 2 ) .    5.1.3 . Etanol al 95 %    5.1.4 . Nitrometano .    5.1.5 . Solución de referencia al cloroformo    En un matraz aforado de 25 ml ... previamente   tarado ... introducir unos 650 mg de cloroformo   ( 5.1.1 ) . Pesar de nuevo el matraz y su contenido   cuidadosamente . Completar hasta 25 ml con etanol   al 95 % ( 5.1.3 ) . Pesar y calcular el porcentaje   en masa de cloroformo en esta solución .    5.1.6 . Solución de referencia al dimetilheptano    Proceder como en el caso de la solución   de referencia al cloroformo , sólo que   introduciendo 270 mg de 2,4-dimetilheptano ( 5.1.2 )   en un matraz aforado de 25 ml .    5.2 . Aparatos    5.2.1 . Cromatógrafo para fase gaseosa con   detector de ionización de llama .    5.2.2 . Aparatos para toma de muestras de los   aerosoles ( frasco de trasvase , microjeringa ,   racor , etc. ) , tal como se describe en el capítulo II   del Anexo de la Directiva 80/1335/CEE de la   Comisión de 22 de diciembre de 1980 (5) .    5.2.3 . Material habitual de laboratorio .    5.3 . Método    5.3.1 . Preparación de la muestra    En un frasco de trasvase de 100 ml , previamente   tarado y purgado de aire ( de acuerdo con el   método descrito en el apartado 5.4 del   capítulo II del Anexo de la Directiva 80/1335/CEE   de la Comisión de 22 de diciembre de 1980 )   o en el que se ha hecho el vacío , introducir   unos 5 ml de uno cualquiera de los patrones   de internos 5.1.5 ó 5.1.6 .    Utilizar una jeringa de vidrio de 10 ó 20 ml ,   sin aguja , adaptada a la pieza de trasvase   según la técnica descrita en el apartado 5   del capítulo II de la mencionada Directiva .    Siguiendo la misma técnica , introducir en el   frasco unos 50 g del contenido de la muestra de   aerosol . Pesar de nuevo para determinar la cantidad   de muestra introducida . Mezclar cuidadosamente .   Inyectar aproximadamente 10 µl utilizando la   microjeringa ( 5.2.2 ) . Realizar 5 inyecciones .    5.3.2 . Preparación de la referencia    En un matraz aforado de 50 ml , pesar con   precisión unos 500 mg de nitrometano ( 5.1.4 )   con 500 mg de cloroformo ( 5.1.1 ) ó 210 mg   de 2,4-dimetilheptano ( 5.1.2 ) . Completar hasta   el volumen con etanol al 95 % ( 5.1.3 ) .   Mezclar cuidadosamente . Introducir 5 ml de esta   solución en un matraz aforado de 20 ml . Completar   hasta el volumen con etanol al 95 % ( 5.1.3 ) .   Inyectar unos 10 µl utilizando la   microjeringa ( 5.2.2 ) . Realizar 5 inyecciones .    5.3.3 . Condiciones de la cromatografía en   fase gaseosa    5.3.3.1 . Columna    Se trata de una columna en dos partes , la   primera contiene didecilftalato sobre Gas Chrome Q   como fase estacionaria , la segunda , contiene   Ucon 50 HB 280 X sobre Gas Chrome Q como fase   estacionaria .    La columna doble así preparada debe dar   una resolución R igual o superior a 1,5 ,   partiendo de la base que ;    R = 2 ( d'r2 - d'r1 ) / ( W1 × W2 )    donde    r1 y r2 = tiempo de retención en min ,    W1 y W2 = anchura de los picos a media altura en mm ,    d' = velocidad de desarrollo en mm/min .    A modo de ejemplo las dos partes siguientes dan   la resolución pretendida .    Parte A :    material : acero inoxidable ,    longitud : 1,5 m ,    diámetro : 3 mm ,    carga : 20 % de didecilftalato sobre Gas Chrome Q   100-120 mallas .    Parte B :    material : acero inoxidable ,    longitud : 1,5 m ,    diámetro : 3 mm ,    carga : 20 % de Ucon 50 HB 280 X sobre Gas   Chrome Q 100-120 mallas .    5.3.3.2 . Detector    Ionización de llama . El electrómetro   del detector debe ajustarse a una sensibilidad de   8 × 10 -10 A    5.3.3.3 . Temperaturas    Inyector : 150 ° C .    Detector : 150 ° C .    Columna : entre 50 ° C y 80 ° C , según   el tipo de columna y los aparatos utilizados .    5.3.3.4 . Gas    Gas vector : nitrógeno .    Presión : 2,1 bar .    Caudal : 40 ml/min .    detector : gas recomendado por el fabricante .    6 . CÁLCULOS    6.1 . Factor de respuesta del nitrometano ,   calculado con respecto al patrón interno   utilizado    Si n representa el nitrometano :    k n = el factor de respuesta ,    m' n = su masa en g en la mezcla ,    S' n = la superficie de su pico ,    y si c representa el patrón interno ,   cloroformo o 2,4-dimetilheptano :    m' c = su masa en g en la mezcla ,    S' c = la superficie de su pico    La fórmula será entonces la siguiente :    k n = m' n/m' c × S' c/S' n    k n depende de los aparatos utilizados .    6.2 . Concentración de nitrometano en la muestra    Si n representa el nitrometano :    k n = el factor de respuesta ,    S n = la superficie de su pico ,    y si c representa el patrón interno , cloroformo o   2,4-dimetilheptano :    m c = la masa en g en la mezcla ,    S e = la superficie de su pico ,    M = la masa en g de la muestra de aerosol transferida .    El porcentaje m/m de nitrometano en la muestra   será entonces igual a :    m e/M × ( k n × S n ) /S c × 100    7 . REPETIBILIDAD (6)    Para un contenido de nitrometano del orden del 0,3 %   ( m/m ) , la diferencia entre los resultados de dos   determinaciones paralelas efectuadas sobre la misma   muestra no debe sobrepasar de 0,03 %    IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DEL ÁCIDO   TIOGLICÓLICO EN LOS PRODUCTOS PARA EL RIZADO O   DESRIZADO DEL CABELLO Y EN LOS DEPILATORIOS    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACION    El presente método describe la identificación   y determinación del ácido tioglicólico en los   productos utilizados para el rizado o desrizado del   cabello y en los depilatorios , en presencia de otros   reductores eventuales .    2 . DEFINICIÓN    El contenido en ácido tioglicólico de la muestra ,   determinado mediante este método , se expresa en   porcentaje de masa de ácido tioglicólico .    3 . PRINCIPIO    El ácido tioglicólico se identifica , bien por   una reacción de coloración , o bien por cromatografía   en capa fina . Su determinación se realiza por   yodometría o por cromatografía en fase gaseosa .    4 . IDENTIFICACIÓN    4.1 . Identificación por vía química    4.1.1 . Reactivos    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1.1.1 . Papel al di(acetato) de plomo .    4.1.1.2 . Solución de ácido clorhídrico 1:1 .    4.1.2 . Procedimiento    4.1.2.1 . Identificación del ácido tioglicólico   por reacción de coloración con el di(acetato) de plomo    Depositar una gota de la muestra a analizar sobre   papel de di(acetato) de plomo ( 4.1.1.1 ) . Una coloración   amarilla intensa indica la presencia probable de   ácido tioglicólico .    Sensibilidad : 0,5 %    4.1.2.2 . Caracterización de los sulfuros por   formación de H2S previo paso por medio ácido .    En un tubo de ensayo , introducir algunos mg de la   muestra a analizar . Añadir 2 ml de agua destilada   y 1 ml de HCl 1:1 ( 4.1.1.2 ) . Se produce un   desprendimiento de H2S , reconocible por su olor y   por la formación del precipitado negro de PbS sobre   el papel de di(acetato) de plomo ( 4.1.1.1 ) .    Sensibilidad : 50 ppm .    4.1.2.3 . Caracterización de los sulfitos por   formación de SO2 previo paso por medio ácido .    Proceder como en el punto 4.1.2.2 . Llevar a ebullición .    El SO2 se reconoce por su olor y por sus propiedades   reductoras frente al MnO4 , por ejemplo    4.2 . Identificación por cromatografía en capa fina    4.2.1 . Reactivos    Todos los reactivos , salvo que se indique lo contrario ,   deben ser de calidad analítica .    4.2.1.1 . Ácido tioglicólico controlado   yodométricamente , pureza * 98 % ( ATG )    4.2.1.2 . Ácido ditioglicólico , pureza * 99 %   ( ADTG ) .    4.2.1.3 . Ácido tioláctico , pureza * 95 % ( ATL ) .    4.2.1.4 . Ácido 3-mercaptopropionico , pureza * 98 %   ( AMP ) .    4.2.1.5 . 1-tioglicerol , pureza * 98 % ( TG ) .    4.2.1.6 . Gel de sílice G. HR o placas listas para   empleo correspondientes , de 0,25 mm de grosor activadas   a 110 ° C durante 30 minutos .    4.2.1.7 . Óxido de aluminio F 254 tipo E Merk ( o   equivalente ) o placas listas para el empleo de 0,25 mm   de grosor .    4.2.1.8 . Ácido clorhídrico concentrado ( d (20,4) =   1,19 ) .    4.2.1.9 . Acetato de etilo .    4.2.1.10 . Cloroformo .    4.2.1.11 . Diisopropiléter .    4.2.1.12 . Tetracloruro de carbono .    4.2.1.13 . Ácido acético glacial .    4.2.1.14 . Solución acuosa de yoduro de potasio   al 1 % ( m/v ) .    4.2.1.15 . Solución acuosa de cloruro de platino   al 0,1 % ( m/v ) .    4.2.1.16 . Disolventes de desarrollo .    4.2.1.16.1 . Acetato de etilo , cloroformo ,   diisopropiléter , ácido acético glacial   ( 20:20:10:10: ) ( en vol. ) .    4.2.1.16.2 . Cloroformo , ácido acético glacial   ( 90:20 ) ( en vol. ) .    4.2.1.17 . Reveladores .    4.2.1.17.1 . Mezclar directamente antes del empleo   volúmenes iguales de la solución ( 4.2.1.14 ) y de   la solución ( 4.2.1.15 ) .    4.2.1.17.2 . Solución de bromo al 5 % ( m/v ) .    Disolver 5 g de bromo en 100 ml de Ccl4 ( 4.2.1.12 ) .    4.2.1.17.3 . Solución de fluoresceína al 0,1 %   ( m/v ) .    Disolver 100 mg de fluoresceína en 100 ml de etanol   al 95 % .    4.2.1.17.4 . Solución acuosa de heptamolibdato de   hexaamonio al 10 % ( m/v ) .    4.2.1.18 . Soluciones de referencia .    4.2.1.18.1 . Solución acuosa de ácido tioglicólico   al 0,4 % ( m/v ) .    4.2.1.18.2 . Solución acuosa de ácido ditioglicólico   al 0,4 % ( m/v ) .    4.2.1.18.3 . Solución acuosa de ácido tioláctico   al 0,4 % ( m/v ) .    4.2.1.18.4 . Solución acuosa de ácido   3-mercaptopropiónico al 0,4 % ( m/v ) .    4.2.1.18.5 . Solución acuosa de 1-tioglicerol al   0,4 % ( m/v ) .    4.2.2 . Aparatos    Material habitual de laboratorio para cromatografía   en capa fina .    4.2.3 . Método    4.2.3.1 . Tratamiento de las muestras .    Acidificar con algunas gotas de ácido clorhídrico   ( 4.2.1.8 ) , hasta obtener un pH = 1 y filtrar si es   necesario . En algunos casos , puede ser aconsejable   diluir la muestra . En tal caso , acidificar con el   ácido clorhídrico antes de efectuar la disolución .    4.2.3.2 . Desarrollo    Depositar sobre la placa 1 µl de la solución de   muestra ( 4.2.3.1 ) y 1 µl de cada una de las 5   soluciones de referencia ( 4.2.1.18 ) . Secar prudentemente   con una corriente débil de nitrógeno y desarrollar   con los disolventes ( 4.2.1.16.1 ) ó ( 4.2.1.16.2 ) .   Secar lo más rápidamente posible con nitrógeno   con el fin de evitar la oxidación de los tioles .    4.2.3.3 . Revelado    Pulverizar sobre la placa del reactivo ( 4.2.1.17.1 )   ó ( 4.2.1.17.3 ) ó ( 4.2.1.17.4 ) . Cuando se haya   pulverizado sobre la placa del reactivo ( 4.2.1.17.4 )   sólo se conseguirá un buen revelado cuando el tiempo   de secado de la capa no exceda de 1/2 hora .    4.2.3.4 . Lectura    Compara los valores de los Rf y el color de las   soluciones de referencia con los de la solución de   muestra . Los Rf medios sobre capa de sílice se   dan a continuación a título indicativo y tienen   tan sólo un valor comparativo . En efecto dependen :     - del estado de activación de la capa en el momento   de realizar la cromatografía .     - de la temperatura de la cubeta de cromatografía .    Cuadro de los Rf obtenidos sobre capa de sílice     * Disolventes de desarrollo *     * 4.2.1.16.1 * 4.2.1.16.2 *    Ácido tioglicólico * 0,25 * 0,80 *    Ácido tioláctico * 0,40 * 0,95 *    Ácido ditiodiglicólico * 0,00 * 0,35 *    Ácido 3-mercaptopropiónico * 0,45 * 0,95 *    1-tioglicerol * 0,45 * 0,35 *    5 . DETERMINACIÓN (7)    Comienza siempre por una yodometría .    5.1 . Yodometría    5.1.1 . Principio    La determinación se efectúa por oxidación del   grupo SH por I2 en medio ácido , según la ecuación :    2 HOOC-CH2SH + I2 * (HOOC-CH2-S)2 + 2I - + 2H +    5.1.2 . Reactivos    Solución titulada de yodo 0,1 N .    5.1.3 . Aparatos    Material habitual de laboratorio    5.1.4 . Procedimiento    En un matraz de Erlenmeyer tapado de 150 ml , que   contenga 50 ml de agua destilada , pesar con precisión   de 0,500 a 1 g de muestra .    Añadir 5 ml de HCl 1:1 ( 4.1.1.2 ) ( pH de la   solución cercano a 0 ) y titular con el yodo 0,1 N   ( 5.1.2 ) hasta que aparezca una caloración amarilla .   Puede utilizarse un indicador ( almidón , cloroformo ,   etc. )    5.1.5 . Cálculo    El contenido de ácido tioglicólico se calcula   mediante la fórmula :     % ( m/m ) = ( 92 × n × 100 ) / ( 1000 × 10 × m ) =   0,92 n/m    donde :    m = masa en g de la toma de ensayo ;    n = volumen de yodo 0,1 N utilizado .    5.1.6 . Observación    Si el resultado , calculado en ácido tioglicólico ,   es inferior en un 0,1 % a las concentraciones máximas   autorizadas , no es útil realizar otras determinaciones .   Si el resultado es igual o superior a las concentraciones   máximas autorizadas , y si la identificación ha   revelado la presencia de varios reductores , es necesario   entonces efectuar una determinación por cromatografía   en fase gaseosa .    5.2 . Cromatografía en fase gaseosa    5.2.1 . Principio    El ácido tioglicólico se separa del excipiente   por precipitación en forma de di(acetato) de cadmio .   Previa metilación con el diazometano , preparado   bien ... , bien previamente en solución etérea ,   el derivado metilado del ácido tioglicólico se   determina por cromatografía gas/líquido utilizando   el caprilato de metilo como patrón interno .    5.2.2 . Reactivos    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    5.2.2.1 . Ácido tioglicólico puro ( de título   conocido ) .    5.2.2.2 .Ácido clorhídrico concentrado   ( d (20,4) = 1,19 ) .    5.2.2.3 . Metanol .    5.2.2.4 . Solución acuosa de di(acetato) de cadmio   2 H2O al 10 % .    5.2.2.5 . Solución de caprilato de metilo al 2 %   ( m/v ) en metanol .    5.2.2.6 . Solución tampón acética de pH 5    acetato de sodio , 3 H2O : 77 g ,    acido acético glacial : 27,5 ml ,    agua desmineralizada , ...    5.2.2.7 . Solución recién preparada de ácido   clorhídrico 3 N en metanol .    5.2.2.8 . N-metil-N-nitroso-N'-nitroguadina .    5.2.2.9 . Solución de hidróxido de sodio 5 N .    5.2.2.10 . Solución titulada de yodo 0,1 N .    5.2.2.11 . Éter dietílico    5.2.2.12 . Solución de diazometano preparada a   partir de la N-metil-N-nitroso p. tolueno sulfonamida   según Fieser ( " Reagents for Organic Synthesis " ,   Ed. Wiley , 1967 ) .    La solución obtenida contiene aproximadamente 1,5 g   de diazometano en 100 ml de Éter dietílico ( 5.2.2.11 ) .    El diazometano es un gas tóxico y muy inestable ,   por lo que todas las manipulaciones deben realizarse   bajo una potente campana extractora ; hay que evitar   asimismo la utilización de aparatos con juntas   esmeriladas .    5.2.3 . Aparatos    5.2.3.1 . Material habitual de laboratorio .    5.2.3.2 . Aparato para la preparación extemporánea   del diazometano ( An. Chem. 1973 , 45 , 2302 ) .    5.2.3.3 . Aparato para la preparación extemporánea   previa del diazometano según Fieser .    5.2.4 . Preparación de la muestra    En un tubo de centrifugación de 50 ml , pesar con   precisión una masa de muestra tal que la cantidad   supuesta de ácido tioglicólico sea del orden de   50 a 70 mg .    Acidificar con algunas gotas de HCl concentrado   ( 5.2.2.2 ) hasta obtener un pH cercano a 3 .    Añadir 5 ml de agua desmineralizada y 10ml de   solución tampón acética ( 5.2.2.6 ) .   Comprobar mediante un papel indicador que el pH   es cercano a 5 .    Añadir acto seguido 5 ml de solución de di(acetato)   de cadmio ( 5.2.2.4 ) .    Esperar 10 minutos y centrifugar durante por lo menos   15 minutos a 4 000 g . Separar el líquido que sobrenada .   Puede ocurrir que éste contenga un insoluble graso   ( caso de una crema ) , que no puede confundirse con   el mercáptido de cadmio acumulado en forma compacta en el   fondo del tubo .    Cerciorarse de la ausencia de precipitación al   añadir al sobrenadante algunas gotas de solución   de di(acetato) de cadmio ( 5.2.2.4 ) .    En el caso de que las identificaciones anteriores hayan   demostrado la ausencia de cualquier otro agente reductor   distinto de los tioles , comprobar por yodometría   que la presencia de los tioles en el líquido que   sobrenada no sobrepasa en un 6 a un 8 % a la cantidad   inicial .    En el tubo de centrifugación que contiene el   precipitado , introducir 10 ml de metanol ( 5.2.2.3 ) ,   dispersar finamente el precipitado con la ayuda   de una varilla y centrifugar de nuevo durante por lo   menos 15 minutos a 4 000 g .    Decantar el líquido que sobrenada y cerciorarse   por yodometría de la ausencia de tioles .    Proceder a un segundo lavado en las mismas condiciones .    En el tubo de centrifugación , añadir :     - 2 ml de solución de caprilato de metilo ( 5.2.2.5 ) ,     - 5 ml de solución de ácido clorhídrico en   metanol ( 5.2.2.7 ) .    Disolver completamente el mercáptido ( puede ocurrir   que subsista un ligero insoluble debido al excipiente ) .    Se obtiene de esta manera la solución S .    En una parte alícuota de la solución S , comprobar   yodométricamente el contenido de tioles que debe   ser como mínimo igual al 90 % del obtenido en el   punto 5.1 .    5.2.5 . Metilación    La metilación se efectúa , o bien extemporáneamente   de acuerdo con el procedimiento descrito en el   punto 5.2.5.1 , o bien con la ayuda de una solución   de diazometano preparada previamente como se indica   en el punto 5.2.5.2 .    5.2.5.1 . Metilación extemporánea    En el aparato ( 5.2.3.2 ) que contiene 1 ml de   dietilóxido ( 5.2.2.11 ) , introducir 50 µl de   la solución S . Metilar conforme al método descrito   en el punto 5.2.3.2 con 300 mg de N-metil-N-nitroso-N'-   nitroguanidina ( 5.2.2.8 ) .    Al cabo de 15 minutos , comprobar que la solución   contiene un exceso de diazometano ( solución amarilla )   y trasvasar a un frasco de 2 ml herméticamente cerrado .   Dejar el frasco una noche en un refrigerador .    Efectuar simultáneamente dos metilaciones .    5.2.5.2 . Metilación con la solución previamente   preparada de diazometano ( 5.2.2.12 ) .    En un frasco provisto de tapón de 5 ml , introducir   1 ml de diazometano ( 5.2.2.12 ) y luego 50 µl   de la solución S . Dejar en un refrigerador durante   una noche .    5.2.6 . Preparación del patrón    Preparar una solución patrón de ácido tioglicólico   de título conocido que contenga unos 60 mg de   ácido tioglicólico en un volumen de 2 ml . Se   obtiene la solución E .    Proceder a la precipitación , a las determinaciones   y a la metilación como se ha indicado en los   puntos 5.2.4 y 5.2.5 .    5.2.7 . Condiciones de la cromatografía en fase   gaseosa    5.2.7.1 . Columna    Material : acero inoxidable .    Longitud : 2 m .    Diámetro : 3 mm .    5.2.7.2 . Llenado    Ftalato de dodecilo 20 % /Chrom . WAW 80-100 mallas    5.2.7.3 . Detector    Ionización de llama .    Conviene que el electrómetro esté ajustado a   una sensibilidad de 8.10 -10 A .    5.2.7.4 . Gas    Gas vector : nitrógeno .    Presión : 2,2 bar .    Caudal : 35 ml/min .    Gas auxiliar : hidrógeno .    Presión : 1,8 bar .    Caudal : 15 ml/min .    Detector : gas recomendado por el fabricante .    5.2.7.5 . Temperaturas    Inyector : 200 ° C .    Detector : 200 ° C .    Columna : 90 ° C .    5.2.7.6 . Registrador    Velocidad de avance : 5 mm/min .    5.2.7.7 . Cantidad inyectada : 3 µl .    Efectuar 5 ensayos con cada muestra metilada .    5.2.7.8 . Las condiciones de la cromatografía se   dan sólo a título indicativo . Permiten obtener   una resolución R * 1,5 , partiendo de la base de que    R = 2 ( d'r2 - d'r1 ) / ( W1 + W2 )    donde :    r1 y r2 = tiempo de retención en min ,    W1 y W2 = anchura de los picos a media altura en mm ,    d' = velocidad de avance en mm/min .    Se aconseja terminar la cromatografía con una   programación de temperatura de 90 ° C a 150 ° C ,   a 10 ° C/min con objeto de eliminar las sustancias   que pudieran interferir en las siguientes   mediciones .    5.2.8 . Cálculos    5.2.8.1 . Coeficiente de proporcionalidad del   ácido tioglicólico .    Se calcula con relación al octanoato de metilo   a partir de la mezcla patrón .    Sea :    t = el ácido tioglicólico ,    k t = su coeficiente de proporcionalidad ,    m't = su masa ( en mg ) en la mezcla ,    S't = la superficie de su pico ,    c = el caprilato de metilo ,    m'c = su masa ( en mg ) en la mezcla ,    S'c = la superficie de su pico .    k t = m' t/m' c × s' c/s' t    Este coeficiente depende de los aparatos utilizados .    5.2.8.2 . Concentración del ácido   tioglicólico en la muestra .    Sea :    t = el ácido tioglicólico .    k t = su coeficiente de proporcionalidad ,    S t = la superficie de su pico    c = el caprilato de metilo ,    m c = su masa ( en mg ) en la mezcla ,    S c = la superficie de su pico ,    M = la masa ( en mg ) de la toma de ensayo inicial .    El porcentaje ( m/m ) de ácido tioglicólico en   la muestra es igual a :    m c/M × ( k t × s t ) /S c × 100    6 . Repetibilidad (8)    Para un contenido de ácido tioglicólico del   8 % ( m/m ) , la diferencia entre los resultados de   dos determinaciones paralelas efectuadas sobre la   misma muestra no debe sobrepasar de 0,8 % .    IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DEL   HEXACLOROFENO    A . IDENTIFICACIÓN    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método es de aplicación a todos los   productos cosméticos .    2 . PRINCIPIO    El hexaclorofeno que contiene la muestra se extrae   mediante el acetato de etilo y se identifica por   cromatografía en capa fina .    3 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    3.1 . Solución de ácido sulfúrico 8 N .    3.2 . Celite AW .    3.3 . Acetato de etilo .    3.4 . Disolvente de desarrollo :    benceno que contiene 1 % v/v de ácido acético glacial .    3.5 . Revelador n º 1 :    Solución de rodamina B : disolver 100 mg de   rodamina B en una mezcla de 150 ml de dietilóxido ,   70 ml de etanol absoluto y 16 ml de agua .    3.6 . Revelador n º 2 :    Solución de 2,6-dibromo-4-(cloroimino)   ciclohexa-2,5-dienona :    disolver 400 mg de 2,6-dibromo-4-(cloroimino)   ciclohexa-2,5-dienona en 100 ml de metanol ( debe   prepararse cada día ) ,    Solución de carbonato de sodio : disolver 10 g   de carbonato de sodio en 100 ml de agua desmineralizada .    3.7 . Solución patrón : solución del 0,05 % m/v   de hexaclorofeno en acetato de etilo ( 3.3 ) .    4 . APARATOS    4.1 . Placas CCF de sílice F 254 20 × 20 cm .    4.2 . Material habitual de laboratorio para   cromatografía en capa fina .    4.3 . Baño mantenido a 26 ° C por termostato .    5 . PREPARACIÓN DE LA MUESTRA    5.1 . Mezclar cuidadosamente 1 g de muestra   homogeneizada con 1 g de celite AW ( 3.2 ) y   1 ml de solución de ácido sulfúrico ( 3.1 ) .    5.2 . Secar a 100 ° C durante 2 horas .    5.3 . Enfriar y reducir el residuo secado a polvo fino .    5.4 . Extraer dos veces con 10 ml de acetato de   etilo cada vez ( 3.3 ) .    Centrifugar después de cada extracción y reunir   las fases de acetato de etilo .    5.5 . Evaporar a 60 ° C .    5.6 . Disolver el residuo en 2 ml de acetato de   etilo ( 3.3 ) .    6 . MÉTODO    6.1 . Poner 2 µl de solución de muestra ( 5.6 )   y 2 µl de solución de referencia ( 3.7 ) sobre   una placa CCF ( 4.1 ) .    6.2 . Saturar el recipiente mantenido por   termostato a 26 ° C con el disolvente de   desarrollo ( 3.4 ) .    6.3 . Colocar la placa CCF en el recipiente y   desarrollar hasta 15 cm .    6.4 . Retirar la placa y secar en estufa a 105 ° C .    6.5 . Revelado    Las manchas de hexaclorofeno se revelan como   se indica en 6.5.1 ó 6.5.2 .    6.5.1 . Pulverizar el revelador n º 1 ( 3.5 )   de manera uniforme sobre la placa . Al cabo de   30 minutos , examinar la placa con luz UV a 254 nm .    6.5.2 . Pulverizar el revelador n º 2 ( 3.6 )   utilizando sucesivamente la solución de   2,6-dibromo-4-(cloroimino)ciclohexa-2,5-dienona   y luego la solución de carbonato de sodio .   Examinar la placa a la luz del día después de 10 minutos   de secado a la temperatura ambiente .    7 . INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS    7.1 . Revelador n º 1 ( 3.5 ) :    El hexaclorofeno se revela en forma de manchas   azuladas sobre fondo amarillo anaranjado fluorescente y   presenta un Rf del orden de 0,5 .    7.2 . Revelador n º 2 ( 3.6 ) :    El hexaclorofeno se revela en forma de manchas   de color azul celeste a azul turquesa sobre fondo blanco y   presenta un Rf del orden de 0,5 .    B . DETERMINACIÓN    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método es aplicable a todos los   productos cosméticos .    2 . DEFINICIÓN    El contenido en hexaclorofeno de la muestra ,   determinado mediante este método se expresa   en porcentaje de masa de hexaclorofeno .    3 . PRINCIPIO    Previa transformación en derivado metilado ,   el hexaclorofeno se determina por cromatografía   en fase gaseosa con detector de captura de electrones .   El método implica la utilización de un patrón   interno .    4 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1 . Acetato de etilo .    4.2 . N-metil-N-nitroso-p-toluenosulfonamida ( diazald ) .    4.3 . Éter dietílico .    4.4 . Metanol .    4.5 . 2-(2-etoxietoxi) etanol ( carbitol ) .    4.6 . Ácido fórmico .    4.7 . Hidróxido de potasio , solución acuosa   al 50 % m/m , de preparación diaria .    4.8 . Hexano para espectroscopia .    4.9 . Bromoclorofeno ( patrón n º 1 ) .    4.10 . 4,4',6,6'-tetraclor-2,2'-tiodifenol   ( patrón n º 2 ) .    4.11 . Eter 2,4,4'-tricloro-2-hidroxidifenilico   ( patrón n º 3 ) .    4.12 . Acetona .    4.13 . Acido sulfúrico 8 N .    4.14 . Celite AW .    4.15 . Solución de ácido fórmico en   acetato de etilo al 10 % v/v .    4.16 . Hexaclorofeno .    5 . APARATOS    5.1 . Material habitual de laboratorio .    5.2 . Aparatos pequeños para la preparación   de diazometano ( Ref. Anal. Chem. 1973 , 45 , 2302-3 ) .    5.3 . Cromatógrafo en fase gaseosa , equipado   con un detector de captura de electrones .   Fuente : 63 níquel .    6 . MÉTODO    6.1 . Preparación de las soluciones patrón    Se elige la solución patrón de manera que no   interfiera con ninguna de las sustancias contenidas   en el excipiente del producto a analizar . Por   lo general , el más indicado es el patrón   n º 1 ( 4.9 ) .    6.1.1 . Pesar cuidadosamente unos 50 mg de los   patrones n º 1 ( 4.9 ) , 2 ( 4.10 ) o 3 ( 4.11 )   y 50 mg de hexaclorofeno ( 4.16 ) en un matraz   aforado de 100 ml . Completar hasta la señal   con acetato de etilo ( 4.1 ) ( solución A ) .   Diluir en un matraz aforado de 100 ml , 10 ml de   la solución A con acetato de etilo ( 4.1 )   ( solución B ) 10 ml de la solución A ...   100 ml con acetato de etilo ( 4.1 ) ( solución B ) .    6.1.2 . Pesar cuidadosamente unos 50 mg de   los patrones n º 1 ( 4.9 ) , 2 ( 4.10 ) ó   3 ( 4.11 ) en un matraz aforado de 100 ml . Completar   hasta la señal con acetato de etilo ( 4.1 )   ( solución C ) .    6.2 . Preparación de la muestra (9)    Pesar con precisión 1 g de muestra homogeneizada   y mezclar cuidadosamente con 1 ml de ácido sulfúrico   ( 4.13 ) , 15 ml de acetona ( 4.12 ) y 8 g de celite   AW ( 4.14 ) . Secar la mezcla al aire durante   30 minutos sobre baño de vapor , y secar luego   durante 1 hora 30 minutos en un horno ventilado .   Enfriar , reducir el residuo en polvo fino y   transferir a una columna de vidrio . Eluir con el   acetato de etilo y recoger 100 ml . Añadir 2 ml   de solución patrón interna ( solución C )   ( 6.1.2 ) .    6.3 . Metilación de la muestra    Enfriar todos los aparatos y reactivos entre   0 ° C y 4 ° C durante 2 horas . Poner 1,2 ml   de la solución obtenida en ( 6.2 ) y 0,1 ml   de metanol ( 4.4 ) en el compartimiento externo   del aparato de diazometano . Poner unos 200 mg   de diazald ( 4.2 ) en el depósito central , añadir   1 ml de carbitol ( 4.5 ) y 1 ml de éter   dietílico ( 4.3 ) y disolver . Ensamblar los   aparatos , sumergir el aparato hasta la mitad   en un baño a 0 ° C e introducir en el depósito   central , utilizando una jeringa , aproximadamente   1 ml de solución de hidróxido de potasio   enfriado ( 4.7 ) .    Se produce una coloración amarilla , que debe   ser persistente . Si la coloración amarilla   desaparece , repetir la metilación con otros   200 mg de diazald ( 4.2 ) (1) .    Al cabo de 15 minutos , el aparato se retira   del baño y se deja cerrado durante 12 horas a la   temperatura ambiente . Abrir el aparato , retirar   el exceso de diazometano añadiendo algunas gotas   de solución de ácido fórmico en acetato   de etilo ( 4.15 ) y trasvasar la solución orgánica   a un matraz aforado de 25 ml . Completar hasta el   volumen con hexano ( 4.8 ) .    Inyectar 1,5 µl de esta solución en el   cromatógrafo .    6.4 . Metilación de la solución patrón    Enfriar todos los reactivos y aparatos hasta una   temperatura comprendida entre 0 ° C y 4 ° C   durante 2 horas . Introducir en el compartimiento   externo del aparato del diazometano :    0,2 ml de solución B ( 6.1.1 ) ,    1 ml de acetato de etilo ( 4.1 ) ,    0,1 ml de metanol ( 4.4 ) .    Continuar la metilación como se describe   en 6.3 . Inyectar 1,5 µl de la solución   obtenida en el cromatógrafo .    7 . CONDICIONES CROMATOGRÁFICAS EN FASE GASEOSA    La fase estacionaria debe dar un grado de   resolución R igual a 1,5 como mínimo .    R = 2 ( d'r2 - d'r1 ) / ( W1 + W2 )    donde :    r1 y r2 = tiempo de retención expresado   en min ,    W1 y W2 = anchura de los picos a media altura ,    d' = velocidad de avance del papel en mm/min .    Las condiciones operativas siguientes permiten   obtener este resultado .    Columna : acero inoxidable .    Diámetro : 3 mm .    Longitud : 170 cm .    Llenado : 10 % OV 17 sobre chromosorb WAW 80 a   100 mallas .    Temperaturas : columna , detector , inyector : 280 ° C .    Gas vector : nitrógeno U , exento de oxígeno .    Presión : 2,3 bar .    Caudal : 30 ml/min .    8 . CALCULOS    8.1 . Coeficiente de proporcionalidad del   hexaclorofeno    Se calcula en función del patrón elegido   y con respecto a la mezcla patrón .    Sea :    h = el hexaclorofeno ,    k h = su coeficiente de proporcionalidad ,    m' h = su masa en la mezcla patrón en g ,    A' h = la superficie de su pico ,    s = el patrón elegido ,    m' s = su masa en la mezcla en g ,    A' s = la superficie de su pico .    De donde :    k h = m' h/m' s × A' s/A' h    8.2 . Contenido de hexaclorofeno en la muestra    Sea :    h = el hexaclorofeno ,    k h = su coeficiente de proporcionalidad ,    A h = la superficie de su pico ,    s = el patrón elegido ,    m s = su masa en la mezcla en g ,    A s = la superficie de su pico ,    M = la masa de la muestra tomada en g .    De donde el porcentaje en masa de hexaclorofeno   en la muestra será igual a :     ( m s × k h × A h × 100 ) / ( M × A s )    9 . REPETIBILIDAD (11)    Para un contenido de hexaclorofeno del 0,1 % ( m/m ) ,   la diferencia entre los resultados de dos   determinaciones paralelas efectuadas sobre la   misma muestra no debe sobrepasar el 0,005 % .    DETERMINACIÓN DE LA TOSILCLORAMIDA SÓDICA   ( CLORAMINA T )    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método describe la determinación   de la tosilcloramida sódica total ( cloramida T )   en los productos cosméticos por cromatografía   en capa fina .    2 . DEFINICIÓN    El contenido en cloramina T de la muestra ,   establecido por este método , se expresa en   porcentaje de masa .    3 . PRINCIPIO    En medio clorhídrico y en caliente , la   cloramina T se hidroliza totalmente en 4-toluenosulfonamida .   La cantidad de 4-toluenosulfonamida formada se   determina por fotodensitometría después   de cromatografía en capa fina .    4 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1 . Tosilcloramida sódica ( cloramina T ) .    4.2 . Solución patrón de 4-toluenosulfonamida :   disolver 50 mg de 4-tolueno-sulfonamida en 100 ml   de etanol ( 4.5 ) .    4.3 . Acido clorhídrico al 37 % ( m/m ) ( d (20,4) =   1,18 ) .    4.4 . Éter dietílico .    4.5 . Etanol al 96 % ( v/v ) .    4.6 . Disolvente de desarrollo    4.6.1 . Butanol-1/etanol 96 % ( 4.5 ) /agua   ( 40-4-9 v/v/v ) ,    o    4.6.2 . Cloroformo/acetona ( 6-4 v/v ) .    4.7 . Placas CCF de silicagel 60 sin indicador   fluorescente .    4.8 . Permanganato de potasio .    4.9 . Acido clorhídrico al 15 % ( m/m ) .    4.10 . Reactivo de pulverización : solución   al 1 % ( m/v ) de o-toluidina en etanol ( 4.5 ) .    5 . MATERIAL    5.1 . Material habitual de laboratorio .    5.2 . Material habitual para cromatografía en   capa fina .    5.3 . Fotodensitómetro .    6 . MÉTODO    6.1 . Hidrólisis    Pesar con exactitud en un matraz de 50 ml ,   aproximadamente 1 g ( m ) de la muestra , añadir 5 ml   de agua , 5 ml de ácido clorhídrico ( 4.3 ) , hervir   durante 1 hora a reflujo . Trasvasar inmediatamente   la suspensión todavía caliente con agua a un   matraz aforado de 50 ml . Enfriar y completar con agua   hasta la señal . Centrifugar durante 5 minutos como   mínimo a 3000 r.p.m. y filtrar el líquido que   sobrenada .    6.2 . Extracción    6.2.1 . Tomar 30 ml del filtrado y extraer por tres   veces con 15 ml de dietiléter ( 4.4 ) . Secar en caso   necesario las fases etéreas y recogerlas en un   matraz aforado de 50 ml . Completar hasta la señal   con dietiléter ( 4.4 ) .    6.2.2 . Tomar 25 ml del extracto etéreo y evaporar   en seco bajo corriente de nitrógeno . Recoger el   extracto con 1 ml de etanol ( 4.5 ) .   6.3 . Cromatografía en capa fina    6.3.1 . Depositar puntualmente sobre una placa de   silicagel 60 ( 4.7 ) 20 µl del residuo disuelto en   etanol ( 6.2 ) .    De la misma manera , depositar 8 , 12 , 16 y 20 µl   de la solución patrón de 4-toluenosulfonamida ( 4.2 ) .    6.3.2 . Desarrollar luego hasta una altura aproximada   de unos 15 cm , en el disolvente ( 4.6.1 ) ó ( 4.6.2 ) .    6.3.3 . Una vez evaporado totalmente el disolvente ,   dejar la placa durante 2 a 3 minutos en una atmósfera   de vapor de cloro , que se obtiene vertiendo unos 100 ml   de ácido clorhídrico ( 4.9 ) sobre unos 2 g de   permanganato de potasio ( 4.8 ) en un recipiente   cerrado . Eliminar el exceso de cloro calentando la   placa a 100 ° C durante 5 minutos . Pulverizar el   reactivo sobre la placa ( 4.10 ) .    6.4 . Medición    Al cabo de 1 hora aproximadamente , medir la intensidad   de la coloración de las manchas violetas por   fotodensitometría a 525 nm ( 5.3 ) .    6.5 . Establecimiento de la curva patrón    A partir de la altura de los picos obtenidos , trazar   la recta patrón en función de las cantidades   ( 4 , 6 , 8 , 10 µg ) de 4-toluenosulfonamida .    7 . OBSERVACIÓN    El método puede controlarse a partir de soluciones   al 0,1 ó 0,2 % de cloramida T ( 4.1 ) tratadas en las   mismas condiciones que la muestra ( 6 )    8 . CÁLCULO    El contenido de la muestra , expresado en porcentaje   de masa , se cálcula mediante la fórmula siguiente :     % ( m/m ) de cloramina T = ( 1,33 × a ) / ( 60 × m )    donde :   1,33 = factor de conversión de la 4-toluenosulfonamida   en cloramina T ,    a ( µg ) = cantidad de 4-toluenosulfonamida   expresada en µg contenida en la muestra leída   en la recta patrón    m ( g ) = masa de la toma de ensayo expresada en   gramos .    9 . REPETIBILIDAD (12)    Para un contenido de cloramina T del orden del   0,2 % ( m/m ) , la diferencia entre los resultados de   dos determinaciones paralelas efectuadas sobre la misma   muestra no debe sobrepasar el 0,03 %    DETERMINACIÓN DE LOS COMPUESTOS FLUORADOS EN LAS   PASTAS DENTÍFRICAS    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método describe la determinación del   flúor total contenido en las pastas dentífricas .   Está indicado en el caso de concentraciones que no   sobrepasen el 0,25 % .    2 . DEFINICIÓN    El contenido en flúor de la muestra determinado   mediante este método se expresa en porcentaje de masa .    3 . PRINCIPIO    El flúor del compuesto fluorado se transforma en   trietilfluorosilano ( TEFS ) por reacción directa   con trietilclorosilano ( TECS ) en medio ácido , y   simultáneamente , se extrae con xileno que contenga   ciclohexano como patrón interno . La solución   obtenida se analiza por cromatografía en fase gaseosa .    4 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1 . Fluoruro de sodio secado a 120 ° C hasta   obtener una masa constante .    4.2 . Agua bidestilada o de calidad equivalente .    4.3 . Acido clorhídrico concentrado ( d (20,4) = 1,19 .    4.4 . Ciclohexano ( CH ) .    4.5 . Xileno que no haga aparecer picos en el   cromatógrama antes del pico disolvente , cuando se   le someta a cromatografía en las mismas condiciones   que las muestras ( 6.1 ) . En caso necesario ,   purificar por destilación ( 5.8 ) .    4.6 . Trietilclorosilano ( TECS Merck o equivalente ) .    4.7 . Soluciones patrón de fluoruro    4.7.1 . Solución patrón de 0,250 mg/ml de fluoruro .   Pesar exactamente 138,1 mg de fluoruro de sodio ( 4.1 )   y disolverlos en agua ( 4.2 ) . Trasvasar cuantitativamente   la solución a un matraz aforado de 250 ml ( 5.5 ) .   Completar con agua ( 4.2 ) hasta la señal y mezclar .    4.7.2 . Solución patrón diluida de 0,050 mg/ml de   fluoruro . Con una pipeta , pasar 20 ml de la solución   ( 4.7.1 ) a un matraz aforado de 100 ml ( 5.5 ) .   Completar con agua ( 4.2 ) hasta la señal y mezclar .    4.8 . Solución de patrón interno    Mezclar 1 ml de ciclohexano ( 4.4 ) con 5 ml de   xileno ( 4.5 ) .    4.9 . Solución de patrón interno de trietilclorosilano    Con un pipeta ( 5.7 ) , pasar 0,6 ml de TECS ( 4.6 ) y   0,12 ml de la solución de patrón interno ( 4.8 )   a un matraz aforado de 10 ml . Completar con xileno ( 4.5 )   hasta la señal y mezclar . Esta solución debe   prepararse cada día .    4.10 . Acido perclórico al 70 % ( m/v ) .    4.11 . Acido perclórico al 20 % ( m/v ) en agua ( 4.2 ) .    5 . APARATOS    5.1 . Material habitual de laboratorio .    5.2 . Cromatógrafo para fase gaseosa equipado con   un detector de ionización de llama .    5.3 . Homogeneizador Vórtex o equivalente .    5.4 . Agitador Buhler tipo SMB1 o equivalente .    5.5 . Matraces aforados de 100 a 250 ml de   polipropileno .    5.6 . Tubos de centrifugación de 20 ml de vidrio   con tapones de rosca recubiertos de teflón Sovirel   tipo 611 - 56 o equivalente . Limpiar los tubos y los   tapones de la manera siguiente : lavar durante varias   horas en ácido perclórico ( 4.11 ) , enjuagar cinco   veces con agua ( 4.2 ) y secar a 100 ° C .    5.7 . Pipetas regulables capaces de proporcionar   volúmenes de 50 a 200 µl , con boquilla de plástico   de uso único .    5.8 . Aparato de destilación provisto de una columna   Schneider de 3 bolas o de una columna de Vigreux   equivalente .    6 . MÉTODO    6.1 . Análisis de la muestra    6.1.1 . Coger un tubo de pasta dentífrica sin abrir   y abrirlo . Pasar la totalidad de su contenido a un   recipiente de plástico , mezclar cuidadosamente y   conservar en condiciones que impidan el deterioro   del producto .    6.1.2 . Pesar con exactitud unos 150 mg ( m ) de   muestra en un tubo de centrifugación ( 5.6 ) ,   añadir 5 ml de agua ( 4.2 ) y homogeneizar ( 5.3 )    6.1.3 . Añadir 1 ml de xileno ( 4.5 ) .    6.1.4 . Añadir gota a gota 5 ml de ácido   clorhídrico ( 4.3 ) y homogeneizar ( 5.3 )    6.1.5 . Con una pipeta , añadir 0,5 ml de   solución de patrón interno de trietilclorosilano   ( 4.9 ) en el tubo de centrifugación ( 5.6 ) .    6.1.6 . Cerrar el tubo de centrifugación mediante   el tapón de rosca y mezclar cuidadosamente durante   45 minutos con el agitador ( 5.4 ) regulado a   150 sacudidas por minuto .    6.1.7 . Centrifugar durante 10 minutos a una velocidad   tal que se obtenga una separación neta de las   fases . Destapar el tubo , recoger la fase orgánica   e inyectar 3 µl de la misma en la columna del   cromatógrafo de fase gaseosa ( 5.2 ) .    Observación    Se necesitan unos 20 minutos para que queden eluidos   todos los componentes .    6.1.8 . Repetir la inyección , calcular la relación   media del área de los picos A TEFS/A CH y leer en   la curva patrón ( 6.3 ) la cantidad de fluoruro   correspondiente en mg ( m1 ) .    6.1.9 . Calcular el contenido de fluoruro total de la   muestra en porcentaje de masa de fluoruro como se   indica en el punto 7 .    6.2 . Condiciones cromatográficas    6.2.1 . Columna .    Material : acero inoxidable .    Longitud : 180 cm .    Diámetro : 3 mm .    Llenado : Gaschrom Q 80 - 100 mallas .    Fase estacionaria : aceite de silicona DC 200   ( o equivalente ) : 20 %    Mantener la columna durante toda una noche a 100 ° C ,   con un caudal para el gas vector de 25 ml/min de   nitrógeno . Esta operación debe repetirse   cada noche .    Cada 4 ó 5 inyecciones , poner de nuevo la   columna en condiciones calentándola durante   media hora a 100 ° C .    Temperaturas :    columna : 70 ° C    inyector : 150 ° C    detector : 250 ° C    gas vector : nitrógeno , a 35 ml/min .    6.3 . Curva patrón    6.3.1 . Con una pipeta , introducir en una serie   de 6 tubos de centrifugación ( 5.6 ) 0 , 1 , 2 , 3 , 4   y 5 ml de la solución patrón de fluoruro diluida   ( 4.7.2 ) . Completar el volumen de cada tubo   hasta 5 ml con agua ( 4.2 ) .    6.3.2 . Proceder como se indica desde 6.1.3 hasta   6.1.6 ambos incluidos .    6.3.3 . Inyectar 3 µl de la fase orgánica en   la columna del cromatógrafo de fase gaseosa ( 5.2 ) .    6.3.4 . Repetir la inyección y calcular la   relación media del área de los picos A TEFS/A CH .    6.3.5 . Establecer una curva patrón que ponga   en relación la masa de fluoruro ( mg ) en las   soluciones patrón ( 6.3.1 ) y la relación de las   áreas de los picos A TEFS/A CH calculada en 6.3.4 .   Trazar la curva patrón .    7 . CÁLCULO    La concentración de flúor total en la muestra ,   en porcentaje de masa se obtiene por la fórmula   siguiente :     % m/m F - = m1/m × 100    donde :    m = fracción de muestra en mg ( 6.1.2 ) ,    m1 = cantidad de flúor leída en la curva patrón   en mg ( 6.1.8 ) .    8 . REPETIBILIDAD (13)    Para un contenido de flúor de orden del 0,15 % ( m/m ) ,   la diferencia entre los resultados de dos determinaciones   paralelas efectuadas en la misma muestra no debe   sobrepasar el 0,012 % .    IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DE LOS COMPUESTOS   ORGANOMERCURIALES    OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método permite la identificación en   los productos cosméticos para los ojos de los   derivados organomercuriales que se utilizan como   agentes conservadores .    Es aplicable al tiomersal ( DCI ) 2-(etilmercuriotio)   benzoato de sodio , así como al fenilmercurio y   sus sales .    A . IDENTIFICACIÓN    1 . PRINCIPIO    Los derivados organomercuriales son complejos que se   presentan en forma de ditizonatos . Después de extraer   los ditizonatos con tetracloruro de carbono , se procede   a una cromatografía en capa fina de gel de sílice .   Las manchas de ditizonatos aparecen con una   coloración anaranjada .    2 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben de ser de calidad analítica .    2.1 . Ácido sulfúrico al 25 % v/v .    2.2 . Solución de 1,5-difenil-3-tiocarbazona   ( ditizona ) : 0,8 mg de ditizona en 100 ml de   tetracloruro de carbono ( 2.4 ) .    2.3 . Nitrógeno .    2.4 . Tetracloruro de carbono .    2.5 . Disolvente de desarrollo : hexano-acetona   ( 90/10 v/v ) .    2.6 . Soluciones patrón al 0,001 % en agua de :     - 2-(etilmercuriotio) benzoato ,     - cloruro de etilmercurio o cloruro de metilmercurio ,     - nitrato o acetato de fenilmercurio ,     - dicloruro de mercurio o di(acetato) de mercurio    2.7 . Placas de sílice G listas para su empleo   ( Merck 5721 o equivalentes ) .    2.8 . Cloruro de sodio .    3 . APARATOS    3.1 . Material habitual de laboratorio .    3.2 . Equipo habitual para cromatografía en capa fina .    3.3 . Filtro separador de fases .    4 . MÉTODO    4.1 . Extracción    4.1.1 . En un tubo de centrifugación , diluir por   trituración un gramo de muestra en 20 ml de agua   destilada . Dispersar al máximo calentando a 60 ° C   en baño de María . Añadir 4 g de cloruro de sodio   ( 2.8 ) , agitar y dejar enfriar .    4.1.2 . Centrifugar durante por lo menos 20 minutos   a 4500 r.p.m. hasta separar la mayor parte de la   fase sólida . Filtrar en una ampolla de decantación   y añadir 0,25 ml de la solución de ácido   sulfúrico ( 2.1 ) .    4.1.3 . Extraer varias veces con 2 ó 3 ml de la   solución de ditizona ( 2.2 ) , hasta que la   última fase orgánica quede de color verde .    4.1.4 . Filtrar cada fase orgánica por el filtro   separador de fases ( 3.3 ) .    4.1.5 . Evaporador en seco bajo corriente de nitrógeno   ( 2.3 ) .    4.1.6 . Recoger con 0,5 ml de tetracloruro de carbono   ( 2.4 ) . Depositar inmediatamente esta solución   como se indica en el punto 4.2.1 .    4.2 . Separación e identificación    4.2.1 . Depositar inmediatamente sobre la placa   de sílice G ( 2.7 ) 50 µl de la solución en el   tetracloruro de carbono obtenida en el punto 4.1.6 .    Tratar simultáneamente 10 ml de solución patrón   ( 2.6 ) como se ha indicado en el punto 4.1 , y   depositar sobre la misma placa 50 µl de las   soluciones obtenidas ( 4.1.6 )    4.2.2 . Revelar la placa en el disolvente ( 2.5 )   hasta una altura de 15 cm . Los compuestos   organomercuriales aparecen en forma de manchas   coloreadas , cuya coloración permanece estable   si la placa se cubre inmediatamente después de la   evaporación del disolvente .    A título indicativo , se obtienen los Rf siguientes :     * Rf * Color *    Tiomersal * 0,33 * Naranja *    Cloruro de etilmercurio * 0,29 * Naranja *    Cloruro de metilmercurio * 0,29 * Naranja *    Fenilmercurio y sus sales * 0,21 * Naranja *    Dicloruro de mercurio * 0,10 * Naranja *    Di(acetato) de mercurio * 0,10 * Naranja *    1,5-difenil-3-tiocarbazona * 0,09 * Rosa *    B . DETERMINACIÓN    1 . DEFINICIÓN    El contenido en compuesto organomercurial de la   muestra determinado mediante este método se expresa   en porcentaje de masa de mercurio .    2 . PRINCIPIO    El método consiste en una determinación del   mercurio total , por lo que es necesario cerciorarse   previamente de la ausencia de mercurio mineral e   identificar el derivado organomercurial que contiene   la muestra . Después de una mineralización húmeda ,   el mercurio liberado se determina por absorción   atómica sin llama .    3 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    3.1 . Ácido nítrico concentrado ( d (20,4) = 1,41 ) .    3.2 . Ácido sulfúrico concentrado ( d (20,4) = 1,84 ) .    3.3 . Agua bidestilada .    3.4 . Permanganato de potasio : solución al 7 % m/v .    3.5 . Cloruro de hidroxilamonio : solución   al 1,5 % m/v .    3.6 . Peroxodisulfato dipotásico : solución   al 5 % m/v .    3.7 . Dicloruro de estaño : solución al 10 % m/v .    3.8 . Ácido clorhídrico concentrado   ( d (20,4) = 1,18 ) .    3.9 . Lana de vidrio impregnada de dicloruro de   paladio al 1 % m/m .    4 . APARATOS    4.1 . Material habitual de laboratorio .    4.2 . Aparato para la determinación del mercurio   por absorción atómica sin llama ( técnica del   vapor frío ) y sus accesorios de vidrio . Longitud   mínima de la célula de medida : 10 cm    5 . MÉTODO    Adoptar todas las precauciones oportunas para la   determinación de los indicios de mercurio .    5.1 . Mineralización    5.1.1 . Pesar con exactitud 150 mg ( m ) aproximadamente   de muestra . Añadir 10 ml de ácido nítrico   ( 3.1 . ) y dejar digerir durante 3 horas en   baño de María a 55 ° C en un frasco herméticamente   cerrado agitando regularmente . Realizar paralelamente   un ensayo en blanco .    5.1.2 . Después de enfriar , añadir 10 ml de   ácido sulfúrico ( 3.2 . ) y poner de nuevo   en baño de María a 55 ° C durante otros 30 minutos .    5.1.3 . Poner el frasco en un baño de hielo fundente   y añadir con precaución 20 ml de agua ( 3.3 . ) .    5.1.4 . Añadir fracciones de 2 ml de una solución   de permanganato de potasio ( 3.4 . ) , hasta que el   medio quede coloreado . Poner de nuevo en baño de   María a 55 ° C durante 15 minutos .    5.1.5 . Añadir 4 ml de peroxodisulfato dipotásico   ( 3.6 . ) y seguir calentando en baño de María   a 55 ° C durante 30 minutos .    5.1.6 . Enfriar y trasvasar el contenido del frasco   a un matraz aforado de 100 ml .    Enjuagar con 5 ml de cloruro de hidroxilamonio ( 3.5 . )   y después 4 veces con 10 ml de agua ( 3.3 . ) .   El medio debe quedar incoloro . Completar con agua   ( 3.3 . ) hasta la señal .    5.2 . Determinación    5.2.1 . Tomar 10 ml de la solución de mineralización   ( 5.1.6 . ) y depositarlos en el recipiente de vidrio   que sirve para la determinación del mercurio por el   método del vapor frío ( 4.2 . ) .    Diluir con 100 ml de agua ( 3.3 . ) , después con   5 ml de ácido sulfúrico ( 3.2 . ) y 5 ml de   dicloruro de estaño ( 3.7 . ) . Mezclar después   de cada adición . Esperar 30 segundos .   Los iones Hg + + se transforman en mercurio   metálico . Efectuar la medición ( m ) . Sea n la   cifra anotada .    5.2.2 . Poner lana de vidrio impregnada de dicloruro   de paladio ( 3.9 . ) entre el recipiente de reducción   y la célula de medida del instrumento ( 4.2 . ) .   Repetir la operación descrita en el punto 5.2.1 .   Si n no es igual a 0 , la mineralización ha sido   incompleta y hay que repetir todo el análisis .    6 . CÁLCULOS    El contenido de mercurio de la muestra expresado en   porcentaje de masa se calcula mediante la fórmula :     % Hg = n/m    donde :    n = cantidad de mercurio en µg leída en el aparato ;    m = masa en mg de la toma de ensayo .    7 . OBSERVACIONES    7.1 . Para mejorar la mineralización , puede ser   necesario a veces proceder previamente a una dilución   de la toma de ensayo .    7.2 . En el caso de que se sospeche una fijación   del mercurio por absorción en el substrato , será   necesario proceder a una determinación por adición   patrón .    8 . REPETIBILIDAD (14)    Para contenidos de mercurio del 0,007 % , la diferencia   entre los resultados de dos determinaciones paralelas   efectuadas sobre la misma muestra no debe   sobrepasar 0,00035 .    DETERMINACIÓN DE LOS SULFUROS ALCALINOS Y   ALCALINOTÉRREOS    1 . OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN    El presente método describe la determinación   de los sulfuros en los productos cosméticos .   La presencia de tioles o de otras sustancias reductoras   ( incluidos los sulfitos ) no interfiere .    2 . DEFINICIÓN    El contenido en sulfuros de la muestra determinado   mediante este método se expresa en porcentaje de   masa de azufre .    3 . PRINCIPIO    Previa acidificación del medio , el sulfuro de   hidrógeno arrastrado por una corriente de nitrógeno   y luego fijado en forma de sulfuro de cadmio . Este ,   previo filtrado y enjuagado , se titula por yodometría .    4 . REACTIVOS    Todos los reactivos deben ser de calidad analítica .    4.1 . Ácido clorhídrico concentrado   ( d (20,4) = 1,19 ) .    4.2 . Solución titulada de tiosulfato de sodio 0,1 N .    4.3 . Solución de yodo 0,1 N .    4.4 . Sulfuro disódico .    4.5 . Di ( acetato ) de cadmio .    4.6 . Amoniaco concentrado ( d (20,4) = 0,90 ) .    4.7 . Solución amoniacal de di(acetato) de cadmio :   disolver 10 g de di(acetato) de cadmio ( 4.5 ) en   unos 50 ml de agua , añadir amoniaco ( 4.6 ) hasta   que vuelva a disolverse el precipitado ( unos 20 ml )   y completar con agua hasta 100 ml .    4.8 . Nitrógeno .    4.9 . Solución de amoniaco M .    5 . APARATOS    5.1 . Material habitual de laboratorio .    5.2 . Matraz de 100 ml con tres cuellos esmerilados   normalizados .    5.3 . Dos matraces cónicos de 150 ml con cuellos   esmerilados y provistos de un dispositivo que consta   de un tubo de inmersión y un tubo lateral para el   desprendimiento del gas de arrastre .    5.4 . Embudo de cuello largo .    6 . MÉTODO    6.1 . Arrastre de sulfuros    6.1.1 . Elegir un envase que esté aún sin abrir .   Pesar con exactitud en el matraz ( 5.2 . ) una cantidad   de producto que corresponda como máximo a 30 mg   de iones sulfuros . Introducir 60 ml de agua y   dos gotas de antiespumante líquido .    6.1.2 . En cada uno de los dos matraces cónicos   ( 5.3 . ) , introducir 50 ml de la solución ( 4.7 ) .    6.1.3 . Acoplar al matraz ( 5.2 . ) una ampolla , el   tubo de inmersión y el tubo de desprendimiento de gas   ( 5.3 . ) . Mediante un tubo de CPV conectar el   tubo de desprendimiento de gas a los dos matraces   cónicos colocados en serie ( 5.3 . ) .    Nota : Comprobar la estanquidad del montaje de la   manera siguiente : en las condiciones del ensayo ,   sustituir el producto ... determinar por 10 ml de   una solución de sulfuro preparada a partir de ( 4.4 )   que contenga X mg de sulfuro ( determinado por   yodometría ) . Sea Y el número de mg de sulfuro   hallado al término de las manipulaciones . La   diferencia entre las dos cantidades X e Y no debe   ser superior al 3 % .    6.1.4 . Pasar nitrógeno ( 4.8 ) a razón de dos   burbujas por segundo durante 15 minutos para expulsar   el aire contenido en el matraz ( 5.2 ) .    6.1.5 . Calentar el matraz a 85 ° C ± 5 ° C .    6.1.6 . Cortar la corriente de nitrógeno y verter   gota a gota 40 ml de ácido clorhídrico ( 4.1 ) .    6.1.7 . Restablecer la corriente de nitrógeno   ( 4.8 ) en cuanto haya salido la casi totalidad del   ácido , dejando en la ampolla una junta líquida   mínima para evitar los escapes de sulfuro de hidrógeno .    6.1.8 . Dejar de calentar al cabo de 30 minutos y   enfriar el , matraz ( 5.2 ) , pero manteniendo la   corriente de nitrógeno ( 4.8 ) durante 1 hora 30 minutos   como mínimo .    6.2 . Titulación    6.2.1 . Filtrar el sulfuro de cadmio por un filtro   colocado en el embudo de cuello largo ( 5.4 ) .    6.2.2 . Enjuagar los matraces cónicos ( 5.3 )   primero con una solución amoniacal M ( 4.9 )   y verter ésta sobre el filtro ; después enjuagar   con agua y utilizar ésta para lavar el precipitado   retenido en el filtro .    6.2.3 . Terminar el lavado del precipitado con 100 ml   de agua .    6.2.4 . Poner el filtro de papel en el primer matraz   cónico que haya contenido el precipitado .   Añadir 25 ml ( n1 ) de la solución de yodo 0,1 N   ( 4.3 ) , unos 20 ml de ácido clorhídrico ( 4.1 )   y 50 ml de agua .    6.2.5 . Determinar el exceso de yodo mediante la   solución titulada de tiosulfato de sodio 0,1 N   ( 4.2 ) . Sea n2 el número de ml utilizado .    7 . CÁLCULO    El contenido de la muestra , expresado en azufre   en porcentaje de masa , se calcula mediante la fórmula :     % S = ( ( n1x1 - n2x2 ) · 32 ) /20 m    donde :    n1 = número de ml de la solución titulada de yodo   utilizada ( 4.3 ) ,    x1 = normalidad de esta solución ,    n2 = número de ml de la solución titulada de   tiosulfato de sodio ( 4.2 ) ,    x2 = normalidad de esta solución ,    m = masa de la toma de ensayo ( 6.1.1 ) expresada en g .    8 . REPETIBILIDAD (15)    Para un contenido de sulfuros del orden del 2 % ( m/m ) ,   la diferencia entre los resultados de dos determinaciones   paralelas efectuadas sobre la misma muestra no debe   sobrepasar el 0,2 % .    (1) DO n º L 383 de 31 . 12 . 1980 , p. 27 .    (2) Según la norma ISO 5725 .    (3) Según la norma ISO 5725 .    (4) Según la norma ISO 5725 .    (5) DO n º L 383 de 31 . 12 . 1980 , p. 27 .    (6) Según la norma ISO 5725 .    (7) Observación : La determinación del ácido   tioglicólico debe hacerse en productos todavía   no utilizado y recién destapados , a fin de evitar   cualquier oxidación .    (8) Según la norma ISO 5725 .    (9) Debido a la gran variedad de productos en los   que puede hallarse presente el hexaclorofeno , es   importante comprobar primero la recuperación del   hexaclorofeno en la muestra por este procedimiento   antes de anotar los resultados . Si las recuperaciones   son escasas , podrán introducirse modificaciones   de acuerdo con las partes interesadas , por ejemplo ,   cambiar el disolvente ( benceno en vez de acetato de   etilo , etc. ) .    (10) La persistencia de esta coloración amarilla   indica un exceso de diazometano que es necesario para   obtener una metilación completa de la muestra .    (11) Según la norma ISO 5725 .    (12) Según la norma 5725 .    (13) Según la norma ISO 5725 .    (14) Según la norma ISO 5725 .    (15) Según la norma ISO 5725 .