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32003L0099

Directiva 2003/99/CE del Parlamento Europeo y del Consejo, de 17 de noviembre de 2003, sobre la vigilancia de las zoonosis y los agentes zoonóticos y por la que se modifica la Decisión 90/424/CEE del Consejo y se deroga la Directiva 92/117/CEE del Consejo

Diario Oficial n° L 325 de 12/12/2003 p. 0031 - 0040

Directiva 2003/99/CE del Parlamento Europeo y del Consejode 17 de noviembre de 2003sobre la vigilancia de las zoonosis y los agentes zoonóticos y por la que se modifica la Decisión 90/424/CEE del Consejo y se deroga la Directiva 92/117/CEE del ConsejoEL PARLAMENTO EUROPEO Y EL CONSEJO DE LA UNIÓN EUROPEA,Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Europea, y en particular la letra b) del apartado 4 de su artículo 152,Vista la propuesta de la Comisión(1),Visto el dictamen del Comité Económico y Social Europeo(2),Previa consulta al Comité de las Regiones,De conformidad con el procedimiento establecido en el artículo 251 del Tratado(3),Considerando lo siguiente:(1) Los animales vivos y los productos de origen animal se recogen en la lista del anexo I del Tratado. La ganadería y la puesta en el mercado de los alimentos de origen animal constituyen una importante fuente de ingresos para los agricultores. La aplicación de medidas veterinarias destinadas a elevar el nivel de la salud pública y de la sanidad animal en la Comunidad contribuye al desarrollo racional del sector agrícola.(2) La protección de la salud humana frente a las enfermedades e infecciones transmisibles directa o indirectamente entre animales y seres humanos (zoonosis) reviste una importancia capital.(3) Las zoonosis que se transmiten por los alimentos pueden causar dolencias a los seres humanos y pérdidas económicas a la industria agroalimentaria.(4) Las zoonosis que se transmiten por fuentes distintas de los alimentos, especialmente las que lo hacen por medio de la fauna salvaje y de los animales de compañía, también constituyen un motivo de preocupación.(5) La Directiva 92/117/CEE del Consejo, de 17 de diciembre de 1992, relativa a las medidas de protección contra determinadas zoonosis y determinados agentes productores de zoonosis en animales y productos de origen animal, a fin de evitar el brote de infecciones e intoxicaciones procedentes de los alimentos(4), preveía el establecimiento de mecanismos de vigilancia de determinadas zoonosis tanto en los Estados miembros como a escala comunitaria.(6) Con la cooperación con el laboratorio comunitario de referencia de epidemiología de las zoonosis, la Comisión recoge anualmente los resultados de la vigilancia de los Estados miembros y se encarga de su recopilación. La publicación de los resultados ha tenido lugar anualmente desde 1995. Sirven de base para valorar la situación actual de las zoonosis y de los agentes zoonóticos. Sin embargo, los sistemas de recopilación de datos no están armonizados y, por consiguiente, no es posible hacer comparaciones entre los Estados miembros.(7) Otras disposiciones comunitarias prevén la vigilancia y el control de ciertas zoonosis en la población animal. En particular, la Directiva 64/432/CEE del Consejo, de 26 de junio de 1964, relativa a problemas de policía sanitaria en materia de intercambios intracomunitarios de animales de las especies bovina y porcina(5), trata de la tuberculosis bovina y la brucelosis bovina. La Directiva 91/68/CEE del Consejo, de 28 de enero de 1991, relativa a las normas de policía sanitaria que regulan los intercambios intracomunitarios de animales de las especies ovina y caprina(6), trata de la brucelosis ovina y caprina. La presente Directiva no debe crear una duplicación innecesaria de los requisitos vigentes.(8) Además, un futuro reglamento del Parlamento Europeo y del Consejo sobre higiene de los productos alimenticios debe abarcar también aspectos específicos necesarios para la prevención, el control y la vigilancia de las zoonosis y de los agentes zoonóticos e incluir normas específicas relativas a la calidad microbiológica de los alimentos.(9) La Directiva 92/117/CEE establece que se recojan datos sobre los casos de zoonosis en seres humanos. El objeto de la Decisión n° 2119/98/CE del Parlamento Europeo y del Consejo, de 24 de septiembre de 1998, por la que se crea una red de vigilancia epidemiológica y de control de las enfermedades transmisibles en la Comunidad(7), es potenciar la recopilación de esos datos y contribuir a mejorar la prevención y el control de las enfermedades transmisibles en la Comunidad.(10) La recopilación de datos sobre la presencia de zoonosis y agentes zoonóticos en los animales, los alimentos, los piensos y los seres humanos es necesaria para determinar las tendencias y las fuentes de zoonosis.(11) En el dictamen sobre las zoonosis que aprobó el 12 de abril de 2000, el Comité científico de medidas veterinarias relacionadas con la salud pública consideró que las medidas vigentes en ese momento para controlar las infecciones zoonóticas de origen alimentario eran insuficientes. Además, consideró que los datos epidemiológicos que los Estados miembros estaban recogiendo eran incompletos, además de no ser totalmente comparables. En consecuencia, el Comité recomendaba mejorar las medidas de vigilancia y señalaba opciones para la gestión del riesgo. En particular, el Comité destacaba como prioridades de salud pública el género Salmonella, el género Campylobacter, Escherichia coli verotoxigénica, Listeria monocytogenes, el género Cryptosporidium, Echinococcus granulosus/multilocularis y Trichinella spiralis.(12) Así pues, es necesario mejorar los sistemas actuales de vigilancia y recopilación de datos establecidos por la Directiva 92/117/CEE. Al mismo tiempo, el Reglamento (CE) n° 2160/2003 del Parlamento Europeo y del Consejo, de 17 de noviembre de 2003, sobre el control de la salmonela y otros agentes zoonóticos específicos transmitidos por los alimentos(8), sustituirá a las medidas específicas de control establecidas por la Directiva 92/117/CEE. Por lo tanto, debe derogarse la Directiva 92/117/CEE.(13) Para recoger y analizar los datos pertinentes debe emplearse el nuevo marco de asesoramiento y apoyo científicos en cuestiones de seguridad alimentaria establecido por el Reglamento (CE) n° 178/2002 del Parlamento Europeo y del Consejo, de 28 de enero de 2002, por el que se establecen los principios y los requisitos generales de la legislación alimentaria, se crea la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria y se fijan procedimientos relativos a la seguridad alimentaria(9).(14) Cuando sea necesario, para facilitar la recopilación y comparación de los datos, la vigilancia debe tener lugar sobre una base armonizada. Esto permitiría evaluar las tendencias y las fuentes de zoonosis y agentes zoonóticos en la Comunidad. Los datos que se recopilen, sumados a los procedentes de otras fuentes, deben servir de base para realizar una evaluación del riesgo de los organismos zoonóticos.(15) Es preciso dar prioridad a las zoonosis que más riesgo entrañan para la salud humana. No obstante, los sistemas de vigilancia deben facilitar también la detección de enfermedades zoonóticas emergentes o de nueva aparición y las nuevas cepas de organismos zoonóticos.(16) La alarmante aparición de resistencia a los antibióticos (como los medicamentos antimicrobianos y los aditivos antimicrobianos en los piensos) es una característica que debe vigilarse. Debe preverse que dicha vigilancia no sólo cubra los agentes zoonóticos sino también otros agentes en la medida en que constituyan una amenaza para la salud pública. En particular, podría ser apropiada la vigilancia de los organismos indicadores. Estos organismos constituyen una reserva de genes de resistencia, que pueden transferir a bacterias patógenas.(17) Además de la vigilancia general, puede que surjan necesidades específicas que requieran la creación de programas de vigilancia coordinados. En este sentido, merecen especial atención las zoonosis enumeradas en el anexo I del Reglamento (CE) n° 2160/2003.(18) Si se investigan pormenorizadamente, los brotes de zoonosis de origen alimentario ofrecen una oportunidad para determinar el agente patógeno, el vector alimentario y los factores de transformación y manipulación del alimento que han dado lugar al brote. Por ello resulta conveniente disponer que se efectúen esas investigaciones y que exista una buena cooperación entre las distintas autoridades.(19) Las encefalopatías espongiformes transmisibles son tratadas por el Reglamento (CE) n° 999/2001 del Parlamento Europeo y del Consejo, de 22 de mayo de 2001, por el que se establecen disposiciones para la prevención, el control y la erradicación de determinadas encefalopatías espongiformes transmisibles(10).(20) Para asegurarse de que se puedan utilizar efectivamente los datos que se recopilen sobre las zoonosis y los agentes zoonóticos, deben establecerse normas adecuadas sobre el intercambio de toda la información pertinente. Dicha información debe ser recopilada en los Estados miembros, que la comunicarán a la Comisión mediante informes que deben ser transmitidos a la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria y que también han de hacerse públicos de manera apropiada y sin demora.(21) Los informes deben transmitirse con periodicidad anual, si bien en determinadas circunstancias podrá ser necesario presentar informes adicionales.(22) Puede ser conveniente designar laboratorios nacionales y comunitarios de referencia que orienten y ayuden en la realización de análisis y pruebas relacionados con las zoonosis y los agentes zoonóticos que entran en el ámbito de la presente Directiva.(23) La Decisión 90/424/CEE del Consejo, de 26 de junio de 1990, relativa a determinados gastos en el sector veterinario(11), debe modificarse por lo que se refiere a las normas de desarrollo por las que se rige la contribución financiera de la Comunidad a algunas medidas relacionadas con la vigilancia y el control de las zoonosis y los agentes zoonóticos.(24) Es preciso establecer procedimientos apropiados para modificar algunas disposiciones de la presente Directiva en función de los avances técnicos y científicos y para adoptar medidas de ejecución y medidas transitorias.(25) Para tener en cuenta el progreso científico y técnico debe asegurarse una cooperación estrecha y eficaz entre la Comisión y los Estados miembros en el Comité permanente creado por el Reglamento (CE) n° 178/2002.(26) Los Estados miembros no pueden por sí solos recoger datos comparables que sirvan de base para la evaluación del riesgo de los organismos zoonóticos que revistan importancia a escala de la Comunidad. La recopilación de dichos datos se puede lograr mejor a nivel comunitario. Por consiguiente, la Comunidad puede adoptar medidas conforme al principio de subsidiariedad consagrado en el artículo 5 del Tratado. De acuerdo con el principio de proporcionalidad establecido en ese mismo artículo, la presente Directiva no excede de lo necesario para alcanzar esos objetivos. La responsabilidad de crear y mantener sistemas de vigilancia debe recaer en los Estados miembros.(27) Las medidas necesarias para la ejecución de la presente Directiva deben aprobarse con arreglo a la Decisión 1999/468/CE del Consejo, de 28 de junio de 1999, por la que se establecen los procedimientos para el ejercicio de las competencias de ejecución atribuidas a la Comisión(12).HAN ADOPTADO LA PRESENTE DIRECTIVA:CAPÍTULO I DISPOSICIONES INTRODUCTORIASArtículo 1Objeto y ámbito de aplicación1. La finalidad de la presente Directiva es asegurar la adecuada vigilancia de las zoonosis, los agentes zoonóticos, y la resistencia a los antimicrobianos asociada, así como la debida investigación epidemiológica de los brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos, de forma que pueda recogerse en la Comunidad la información necesaria para evaluar las tendencias y las fuentes pertinentes.2. La presente Directiva regula:a) la vigilancia de las zoonosis y de los agentes zoonóticos;b) la vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos asociada;c) la investigación epidemiológica de los brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos, yd) el intercambio de información sobre las zoonosis y los agentes zoonóticos.3. La presente Directiva se aplicará sin perjuicio de disposiciones comunitarias más específicas sobre sanidad animal, nutrición animal, higiene de los alimentos, enfermedades humanas transmisibles, salud y seguridad en el lugar de trabajo, ingeniería genética y encefalopatías espongiformes transmisibles.Artículo 2DefinicionesA los efectos de la presente Directiva, se aplicarán las definiciones siguientes:1) las definiciones establecidas en el Reglamento (CE) n° 178/2002, y2) las definiciones siguientes:a) zoonosis: cualquier enfermedad o infección transmisible de manera natural entre los animales y las personas, directa o indirectamente;b) agente zoonótico: cualquier virus, bacteria, hongo, parásito u otro agente biológico que pueda causar una zoonosis;c) resistencia a los antimicrobianos: la capacidad de los microorganismos de ciertas especies para sobrevivir o incluso desarrollarse en presencia de una determinada concentración de un agente antimicrobiano que normalmente debería destruirlos o inhibir su crecimiento;d) brote de enfermedad transmitida por los alimentos: la incidencia observada, en determinadas circunstancias, de dos o más casos de la misma enfermedad o infección en seres humanos, o una situación en la que el número de casos observados supera el número esperado y en la que los casos tienen su origen, o tienen un origen probable, en la misma fuente alimentaria, ye) vigilancia: un sistema de recogida, análisis y difusión de datos sobre la presencia de zoonosis, agentes zoonóticos y resistencia a los antimicrobianos ligada a ellos.Artículo 3Obligaciones generales1. Los Estados miembros asegurarán la recogida, análisis y publicación sin demora de datos sobre la presencia de zoonosis y agentes zoonóticos y sobre la resistencia a los antimicrobianos ligada a ellos de acuerdo con los requisitos de la presente Directiva y de cualesquiera disposiciones que se adopten en virtud de ella.2. Cada Estado miembro nombrará una o varias autoridades competentes a efectos de la presente Directiva y comunicará dicho nombramiento a la Comisión. Si un Estado miembro nombra a más de una autoridad competente, deberá:a) notificar a la Comisión la autoridad competente que actuará como punto de enlace para los contactos con la Comisión, yb) garantizar que las autoridades competentes cooperen para velar por el adecuado cumplimiento de los requisitos de la presente Directiva.3. Cada Estado miembro garantizará una cooperación continuada y eficaz basada en un libre intercambio de información general y, cuando sea necesario, de datos específicos, entre la autoridad o autoridades competentes que hayan designado para los fines de la presente Directiva y:a) las autoridades competentes en materia de normativa comunitaria sobre sanidad animal;b) las autoridades competentes en materia de normativa comunitaria sobre alimentación animal;c) las autoridades competentes en materia de normativa comunitaria sobre higiene de los alimentos;d) las estructuras o autoridades señaladas en el artículo 1 de la Decisión n° 2119/98/CE;e) otras autoridades y organizaciones interesadas.4. Cada Estado miembro velará por que los funcionarios de la autoridad o autoridades competentes mencionadas en el apartado 2 reciban una formación inicial y continua adecuada en materia de ciencia veterinaria, microbiología o epidemiología, según convenga.CAPÍTULO II VIGILANCIA DE LAS ZOONOSIS Y DE LOS AGENTES ZOONÓTICOSArtículo 4Normas generales de vigilancia de las zoonosis y de los agentes zoonóticos1. Los Estados miembros recopilarán datos pertinentes y comparables para determinar y caracterizar peligros, evaluar la exposición a zoonosis y agentes zoonóticos y caracterizar los riesgos que entrañan.2. La vigilancia se llevará a cabo en la o las fases de la cadena alimentaria más apropiada según la zoonosis o el agente zoonótico en cuestión; es decir:a) a nivel de la producción primaria, y/ob) en las demás fases de la cadena alimentaria, incluidos los alimentos y los piensos.3. Serán objeto de esta vigilancia las zoonosis y los agentes zoonóticos enumerados en la parte A del anexo I. Cuando la situación epidemiológica de un Estado miembro lo justifique, también se someterán a vigilancia las zoonosis y los agentes zoonóticos enumerados en la parte B del anexo I.4. El anexo I podrá modificarse con arreglo al procedimiento establecido en el apartado 2 del artículo 12, a fin de añadir en sus listas zoonosis o agentes zoonóticos o de suprimirlos de ellas, teniendo en cuenta, entre otros, los criterios siguientes:a) su incidencia en la población humana y animal y en los piensos y alimentos;b) la gravedad de sus efectos para las personas;c) sus consecuencias económicas para la atención sanitaria a personas y animales y para las empresas del sector alimentario;d) las tendencias epidemiológicas en la población humana y animal y en los piensos y alimentos.5. La vigilancia se basará en los sistemas vigentes en los Estados miembros. No obstante, cuando sea necesario para facilitar la recopilación y comparación de datos, se podrá, de conformidad con el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12 y teniendo en cuenta otras normas comunitarias establecidas en los ámbitos de la sanidad animal, la higiene de los alimentos y enfermedades humanas transmisibles, establecer normas de desarrollo de la vigilancia de las zoonosis y los agentes zoonóticos enumerados en el anexo I.Dichas normas de desarrollo establecerán los requisitos mínimos para la vigilancia de determinadas zoonosis o agentes zoonóticos. En particular, podrán especificar:a) la población o subpoblaciones animales o las fases de la cadena alimentaria a las que alcanza la vigilancia;b) la naturaleza y el tipo de datos que habrán de recopilarse;c) las definiciones de casos;d) los planes de muestreo que deberán seguirse;e) los métodos de laboratorio que deberán utilizarse para realizar análisis, yf) la frecuencia de presentación de informes, incluyendo directrices para la comunicación entre las autoridades locales, regionales y centrales.6. Cuando se considere la posibilidad de proponer normas de desarrollo de conformidad con lo dispuesto en el apartado 5 para armonizar la vigilancia rutinaria de las zoonosis y agentes zoonóticos, la Comisión dará prioridad a las zoonosis y agentes zoonóticos enumerados en la parte A del anexo I.Artículo 5Programas coordinados de vigilancia1. De no bastar los datos recopilados mediante la vigilancia rutinaria con arreglo al artículo 4, podrán establecerse programas coordinados de vigilancia de una o más zoonosis y/o de uno o varios agentes zoonóticos según el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12. Podrán establecerse programas coordinados de vigilancia, en especial cuando existan necesidades específicas, para evaluar riesgos o fijar valores de referencia en relación con zoonosis o agentes zoonóticos en algún Estado miembro o a escala comunitaria.2. Cuando se establezca un programa coordinado de vigilancia, se hará especial referencia a las zoonosis y a los agentes zoonóticos de las poblaciones animales que se indican en el anexo I del Reglamento (CE) n° 2160/2003.3. Las normas mínimas relativas al establecimiento de programas coordinados de vigilancia figuran en el anexo III.Artículo 6Obligaciones de los explotadores de empresas alimentarias1. Los Estados miembros velarán por que los explotadores de empresas alimentarias, cuando hagan exámenes de detección de zoonosis y de agentes zoonóticos que están sujetos a vigilancia con arreglo al apartado 2 del artículo 4:a) conserven los resultados y dispongan la conservación de toda cepa pertinente durante el período que determine la autoridad competente, yb) comuniquen los resultados o proporcionen las cepas a la autoridad competente que lo solicite.2. Podrán establecerse normas de desarrollo para la aplicación del presente artículo según el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.CAPÍTULO III RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOSArtículo 7Vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos1. Los Estados miembros se cerciorarán, teniendo en cuenta los requisitos establecidos en el anexo II, de que la vigilancia arroje datos comparables sobre la aparición de resistencia a los antimicrobianos en agentes zoonóticos y, en la medida en que supongan una amenaza para la salud pública, en otros agentes.2. Dicha vigilancia complementará la vigilancia de las cepas humanas llevada a cabo según la Decisión n° 2119/98/CE.3. Las normas de desarrollo para la aplicación del presente artículo se establecerán de acuerdo con el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.CAPÍTULO IV BROTES DE ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR LOS ALIMENTOSArtículo 8Investigación epidemiológica de los brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos1. Los Estados miembros velarán por que cuando el explotador de una empresa alimentaria proporcione información a la autoridad competente en los términos del apartado 3 del artículo 19 del Reglamento (CE) n° 178/2002, el alimento en cuestión, o una muestra adecuada del mismo, se conserve de modo que sea posible su examen en un laboratorio o la investigación de cualquier otro brote epidémico.2. La autoridad competente abrirá una investigación sobre un brote de enfermedades transmitidas por los alimentos en cooperación con las autoridades indicadas en el artículo 1 de la Decisión n° 2119/98/CE. La investigación irá dirigida a obtener datos sobre las características epidemiológicas, los alimentos sospechosos y las causas probables del brote. En la medida de lo posible, la investigación incluirá estudios epidemiológicos y microbiológicos adecuados. La autoridad competente remitirá a la Comisión (quien lo enviará a la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria) un informe resumido de los resultados de las investigaciones llevadas a cabo que contenga la información indicada en la parte E del anexo IV.3. Podrán establecerse normas de desarrollo relativas a la investigación de brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos de acuerdo con el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.4. Los apartados 1 y 2 se aplicarán sin perjuicio de las disposiciones comunitarias sobre la seguridad de los productos, sobre los sistemas de alerta rápida y de respuesta para la prevención y el control de las enfermedades humanas transmisibles, sobre la higiene de los alimentos y las prescripciones generales de la legislación alimentaria, en particular las relativas a las medidas de urgencia y los procedimientos de retirada del mercado aplicables a los alimentos y a los piensos.CAPÍTULO V INTERCAMBIO DE INFORMACIÓNArtículo 9Evaluación de las tendencias y fuentes de las zoonosis, de los agentes zoonóticos y de la resistencia a los antimicrobianos1. Los Estados miembros evaluarán en su territorio las tendencias y las fuentes de las zoonosis, de los agentes zoonóticos y de la resistencia a los antimicrobianos.Cada Estado miembro remitirá a la Comisión cada año a finales de mayo un informe sobre las tendencias y las fuentes de las zoonosis, de los agentes zoonóticos y de la resistencia a los antimicrobianos que incluya los datos recopilados el año anterior conforme a los artículos 4, 7 y 8. Los informes, y sus resúmenes, se harán públicos.Los informes contendrán también la información referida en la letra b) del apartado 2 del artículo 3 del Reglamento (CE) n° 2160/2003.En el anexo IV se establecen los requisitos mínimos que deben cumplir los informes. Podrán establecerse normas de desarrollo relativas a la evaluación de esos informes, incluidos el formato y la información mínima que deben contener, de acuerdo con el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.Cuando las circunstancias lo requieran, la Comisión podrá solicitar información complementaria específica. Los Estados miembros presentarán a la Comisión informes con arreglo a esa petición, o bien por iniciativa propia.2. La Comisión enviará los informes mencionados en el apartado 1 a la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria, que los examinará y a finales de noviembre publicará un informe de síntesis sobre las tendencias y las fuentes de las zoonosis, los agentes zoonóticos y la resistencia a los antimicrobianos en la Comunidad.Al elaborar el informe de síntesis, la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria podrá tener en cuenta otros datos previstos en el marco de la legislación comunitaria, tales como:- el artículo 8 de la Directiva 64/432/CEE,- el apartado 2 del artículo 14 de la Directiva 89/397/CEE(13),- el artículo 24 de la Decisión 90/424/CEE,- el artículo 4 de la Decisión n° 2119/98/CE.3. Los Estados miembros proporcionarán a la Comisión los resultados de los programas coordinados de vigilancia establecidos de conformidad con lo dispuesto en el artículo 5. La Comisión enviará los resultados a la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria. Los resultados, y sus resúmenes, se harán públicos.CAPÍTULO VI LABORATORIOSArtículo 10Laboratorios comunitarios y nacionales de referencia1. Para los análisis y pruebas en relación con las zoonosis, los agentes zoonóticos y la resistencia a los antimicrobianos relacionada con ellos, podrán designarse uno o más laboratorios comunitarios de referencia de acuerdo con el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.2. Sin perjuicio de las disposiciones pertinentes de la Decisión 90/424/CEE, las responsabilidades y los cometidos de los laboratorios comunitarios de referencia, especialmente en lo que atañe a la coordinación de sus actividades con las de los laboratorios nacionales de referencia, se establecerán de acuerdo con el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.3. Los Estados miembros designarán laboratorios nacionales de referencia para cada campo en el que se haya designado un laboratorio comunitario de referencia e informarán de ello a la Comisión.4. Algunas responsabilidades y algunos cometidos de los laboratorios nacionales de referencia, especialmente en lo que atañe a la coordinación de sus actividades con los correspondientes laboratorios de referencia de los Estados miembros, podrán establecerse de acuerdo con el procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.CAPÍTULO VII APLICACIÓNArtículo 11Modificaciones de los anexos y medidas transitorias o de ejecuciónPodrán modificarse los anexos II, III y IV y adoptarse las medidas transitorias o de ejecución pertinentes con arreglo al procedimiento a que se refiere el apartado 2 del artículo 12.Artículo 12Procedimiento de Comité1. La Comisión estará asistida por el Comité permanente de la cadena alimentaria y de sanidad animal creado por el Reglamento (CE) n° 178/2002, o, cuando proceda, por el Comité creado por la Decisión n° 2119/98/CE.2. En los casos en que se haga referencia al presente apartado, serán de aplicación los artículos 5 y 7 de la Decisión 1999/468/CE, observando lo dispuesto en su artículo 8.El plazo contemplado en el apartado 5 del artículo 6 de la Decisión 1999/468/CE queda fijado en tres meses.3. El Comité aprobará su reglamento interno.Artículo 13Consulta a la Autoridad Europea de Seguridad AlimentariaLa Comisión consultará a la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria sobre cualquier cuestión que entre en el ámbito de aplicación de la presente Directiva y que pudiera tener una repercusión importante en la salud pública, en particular antes de proponer cualquier modificación de los anexos I o II o antes de establecer cualquier programa coordinado de vigilancia de conformidad con lo dispuesto en el artículo 5.Artículo 14Incorporación al Derecho nacional1. Los Estados miembros adoptarán y publicarán las disposiciones legales, reglamentarias y administrativas necesarias para dar cumplimiento a lo dispuesto en la presente Directiva a más tardar el 12 de abril de 2004. Informarán inmediatamente de ello a la Comisión.Aplicarán dichas disposiciones a más tardar el 12 de junio de 2004.Cuando los Estados miembros adopten dichas disposiciones, éstas harán referencia a la presente Directiva o irán acompañadas de dicha referencia en su publicación oficial. Los Estados miembros establecerán las modalidades de la mencionada referencia.2. Los Estados miembros comunicarán a la Comisión el texto de las disposiciones de Derecho interno que adopten en el ámbito regulado por la presente Directiva.CAPÍTULO VIII DISPOSICIONES FINALESArtículo 15DerogaciónLa derogación de la Directiva 92/117/CEE surtirá efecto a partir del 12 de junio de 2004.No obstante, tanto las medidas que los Estados miembros hayan adoptado en virtud del apartado 1 del artículo 8 de la Directiva 92/117/CEE y las aplicadas de conformidad con el apartado 1 del artículo 10 de la misma, así como los planes aprobados al amparo del apartado 3 de su artículo 8 seguirán en vigor hasta que se aprueben los programas de control respectivos de acuerdo con el artículo 5 del Reglamento (CE) n° 2160/2003.Artículo 16Modificación de la Decisión 90/424/CEELa Decisión 90/424/CEE se modifica como sigue:1) El artículo 29 se sustituye por el texto siguiente:"Artículo 291. Los Estados miembros podrán solicitar una participación financiera de la Comunidad para la vigilancia y el control de las zoonosis especificadas en el grupo 2 del anexo, en el marco de lo dispuesto en los apartados 2 a 11 del artículo 24.2. En cuanto al control de las zoonosis, la participación financiera de la Comunidad formará parte del programa nacional de control a que se refiere el artículo 5 del Reglamento (CE) n° 2160/2003 del Parlamento Europeo y del Consejo, de 17 de noviembre de 2003, sobre el control de la salmonela y otros agentes zoonóticos específicos transmitidos por los alimentos(14). El nivel de la participación financiera de la Comunidad se fijará en un máximo del 50 % de los gastos afrontados en la aplicación de las medidas de control obligatorias.".2) Se inserta el artículo siguiente:"Artículo 29 bisLos Estados miembros podrán solicitar la participación financiera de la Comunidad a que se refiere el apartado 2 del artículo 29 para un plan nacional que haya sido aprobado sobre la base de la Directiva 92/117/CEE hasta la fecha en que los correspondientes programas de control hayan sido aprobados conforme al artículo 6 del Reglamento (CE) n° 2160/2003".3) En el anexo, se añaden las siguientes entradas en la lista del grupo 2:"- Campilobacteriosis y sus agentes causales- Listeriosis y sus agentes causales- Salmonelosis (salmonela zoonótica) y sus agentes causales- Triquinosis y sus agentes causales- Escherichia coli verotoxigénica.".Artículo 17Entrada en vigorLa presente Directiva entrará en vigor el día de su publicación en el Diario Oficial de la Unión Europea.Artículo 18DestinatariosLos destinatarios de la presente Directiva son los Estados miembros.Hecho en Bruselas, el 17 de noviembre de 2003.Por el Parlamento EuropeoEl PresidenteP. CoxPor el ConsejoEl PresidenteG. Alemanno(1) DO C 304 E de 30.10.2001, p. 250.(2) DO C 94 de 18.4.2002, p. 18.(3) Dictamen del Parlamento Europeo de 15 de mayo de 2002 (DO C 180 E de 31.7.2003, p. 161), Posición Común del Consejo de 20 de febrero de 2003 (DO C 90 E de 15.4.2003, p. 9) y Posición del Parlamento Europeo de 19 de junio de 2003 (no publicada aún en el Diario Oficial).(4) DO L 62 de 15.3.1993, p. 38; Directiva cuya última modificación la constituye el Reglamento (CE) n° 806/2003 (DO L 122 de 16.5.2003, p. 1).(5) DO 121 de 29.7.1964, p. 1977; Directiva cuya última modificación la constituye el Reglamento (CE) n° 1226/2002 de la Comisión (DO L 179 de 9.7.2002, p. 13).(6) DO L 46 de 19.2.1991, p. 19; Directiva cuya última modificación la constituye la Decisión 2003/708/CE de la Comisión (DO L 258 de 10.10.2003, p. 11).(7) DO L 268 de 3.10.1998, p. 1.(8) Véase la página 1 del presente Diario Oficial.(9) DO L 31 de 1.2.2002, p. 1.(10) DO L 147 de 31.5.2001, p. 1; Reglamento cuya última modificación la constituye el Reglamento (CE) n° 1494/2002 de la Comisión (DO L 225 de 22.8.2002, p. 3).(11) DO L 224 de 18.8.1990, p. 19; Decisión cuya última modificación la constituye la Decisión 2001/572/CE (DO L 203 de 28.7.2001, p. 16).(12) DO L 184 de 17.7.1999, p. 23.(13) Directiva 89/397/CEE del Consejo, de 14 de junio de 1989, relativa al control oficial de los productos alimenticios (DO L 186 de 30.6.1989, p. 23).(14) DO L 325 de 12.12.2003, p. 1.ANEXO IA. Zoonosis y agentes zoonóticos que deben ser objeto de vigilancia- Brucelosis y sus agentes causales- Campilobacteriosis y sus agentes causales- Equinococosis y sus agentes causales- Listeriosis y sus agentes causales- Salmonelosis y sus agentes causales- Triquinosis y sus agentes causales- Tuberculosis por Mycobacterium bovis- Escherichia coli verotoxigénica.B. Lista de zoonosis y agentes zoonóticos que deben ser objeto de vigilancia en función de la situación epidemiológica1. Zoonosis víricas- Calicivirus- Virus de la hepatitis A- Virus de la gripe- Rabia- Virus transmitidos por artrópodos.2. Zoonosis bacterianas- Borreliosis y sus agentes causales- Botulismo y sus agentes causales- Leptospirosis y sus agentes causales- Psitacosis y sus agentes causales- Tuberculosis distintas de la indicada en la parte A- Vibriosis y sus agentes causales- Yersiniosis y sus agentes causales.3. Zoonosis parasitarias- Anisakiasis y sus agentes causales- Criptosporidiosis y sus agentes causales- Cisticercosis y sus agentes causales- Toxoplasmosis y sus agentes causales.4. Otras zoonosis y agentes zoonóticosANEXO IIRequisitos en materia de vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos con arreglo al artículo 7A. Requisitos generalesLos Estados miembros deberán velar por que el sistema de vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos dispuesto en el artículo 7 suministre como mínimo la siguiente información:1. especies animales objeto de vigilancia,2. especies o cepas bacterianas objeto de vigilancia,3. estrategia de muestreo utilizada en la vigilancia,4. antimicrobianos objeto de vigilancia,5. métodos de laboratorio utilizados para detectar la resistencia,6. métodos de laboratorio utilizados para determinar las cepas microbianas,7. métodos seguidos para recopilar los datos.B. Requisitos específicosLos Estados miembros deberán velar por que el sistema de vigilancia proporcione, como mínimo, información pertinente sobre un número representativo de cepas de Salmonella spp, Campylobacter jejuni y Campylobacter coli procedentes de ganado vacuno, ganado porcino y aves de corral así como los alimentos de origen animal derivados de estas especies.ANEXO IIIProgramas coordinados de vigilancia contemplados en el artículo 5Al crear un programa coordinado de vigilancia deberán definirse, como mínimo, las siguientes características del mismo:- su propósito,- su duración,- su ámbito geográfico o región,- las zoonosis o agentes zoonóticos que se vayan a vigilar,- el tipo de muestras y demás datos solicitados,- los planes mínimos de muestreo,- el tipo de métodos de ensayo en laboratorio,- los cometidos de las autoridades competentes,- los recursos que hayan de asignarse,- una estimación de los costes y cómo se van a sufragar, y- el método y el plazo de comunicación de los resultados.ANEXO IVRequisitos a que deben ajustarse los informes que deben presentarse con arreglo al apartado 1 del artículo 9En el informe indicado en el apartado 1 del artículo 9 debe figurar como mínimo la siguiente información. Las partes A a D se aplicarán a los informes sobre vigilancia elaborados de conformidad con los artículos 4 o 7. La parte E se aplicará a los informes elaborados de conformidad con el artículo 8.A. En un principio deberán detallarse los siguientes datos con respecto a cada zoonosis y agente zoonótico (posteriormente sólo deberán comunicarse las modificaciones):a) sistemas de vigilancia (estrategias de muestreo, frecuencia de muestreo, tipo de muestras, definición de caso y métodos de diagnóstico utilizados);b) política de vacunación y demás actuaciones preventivas;c) mecanismos de control y, cuando proceda, programas de control;d) medidas en caso de resultados positivos o de casos aislados;e) sistemas de notificación existentes;f) antecedentes de la enfermedad o infección en el país.B. Deberán comunicarse anualmente:a) la población animal sensible pertinente (así como la fecha a la que corresponden las cifras):- número de rebaños o manadas de aves,- número total de animales, y- en su caso, los métodos de producción utilizados;b) el número y una descripción general de los laboratorios e instituciones que intervienen en la vigilancia.C. Deberán describirse anualmente los siguientes pormenores con respecto a cada agente zoonótico y a cada categoría de datos, junto con sus consecuencias:a) modificaciones de los sistemas ya descritos;b) modificaciones de métodos descritos anteriormente;c) resultados de las investigaciones y de otras tipificaciones o métodos de caracterización en laboratorio (comunicados por separado para cada categoría);d) evaluación nacional de la situación reciente, de las tendencias y de las fuentes de infección;e) importancia como enfermedad zoonótica;f) importancia para los casos humanos, como fuente de infección para el hombre, de los resultados obtenidos en animales y alimentos;g) estrategias de control reconocidas que puedan servir para prevenir o reducir la transmisión del agente zoonótico al ser humano;h) en caso necesario, cualquier actuación específica decidida en el Estado miembro o propuesta para toda la Comunidad a la vista de la situación reciente.D. Comunicación de los resultados de los exámenesLos resultados deben darse detallando el número de unidades epidemiológicas examinadas (manadas, rebaños, muestras, lotes) y el número de muestras positivas según la clasificación del caso. Si ha lugar, los resultados se presentarán de tal forma que se vea la distribución geográfica de la zoonosis o del agente zoonótico.E. Datos sobre brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos:a) número total de brotes en el año;b) número de personas fallecidas y enfermas con motivo de esos brotes;c) agentes causantes de los brotes, adjuntando cuando sea posible el serotipo o cualquier otra descripción precisa del agente. Si la identificación del agente causante no es posible, detallar los motivos de esa imposibilidad;d) alimentos implicados en el brote y otros vectores posibles;e) identificación del tipo de lugar en que los alimentos implicados en el brote fueron producidos/comprados/adquiridos/consumidos;f) factores que han contribuido, como, por ejemplo, una higiene deficiente en el proceso de transformación del alimento.


Avis juridique important

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31990L0207

Directiva 90/207/CEE de la Comisión de 4 de abril de 1990 por la que se modifica la segunda Directiva 82/434/CEE sobre la aproximación de las legislaciones de los Estados Miembros relativas a los métodos de análisis necesarios para el control de la composición de los productos cosméticos

Diario Oficial n° L 108 de 28/04/1990 p. 0092 - 0101 Edición especial en finés : Capítulo 13 Tomo 19 p. 0177  Edición especial sueca: Capítulo 13 Tomo 19 p. 0177

Conservacion : tres dias a 25 *C .   //  No debe observarse evolucion en el color .  5.2.18 .  Formaldehido patron : solucion madre   //  En un matraz aforado de 1 000 ml, introducir 10 g de formaldehido ( 5.2.9 .) y completar hasta 1 000 ml con agua .   //  Determinacion del titulo de la solucion madre :   //  Extraer 5,00 ml, anadir 25 ml de la solucion titulada de iodo ( 5.2.14 ) y 10 ml de solucion de hidroxido de sodio ( 5.2.10 ).  //  Dejar reposar durante cinco minutos .   //  Acidificar con 11 ml de HCL ( 5.2.11 ) y determinar el iodo en exceso con una solucion titulada de tiosulfato de sodio ( 5.2.15 ) en presencia de engrudo de almidon como indicador .  //  1 ml de solucion de iodo consumida ( 5.2.14 ) corresponde a 1,5  ( 1 ) Segun la norma ISO 5725 .  5.2.19 .  Formaldehido patron : solucion diluida   //  Realizar una dilucion al 1/100 de la solucion madre en la fase movil ( 5.2.16 ).   //  1 ml de esta solucion contiene aproximadamente 37 *g de formaldehido . Calcular su contenido exacto .  5.3 .  Aparatos  5.3.1 .  Material habitual de laboratorio  5.3.2 .  Una bomba HPLC sin pulsaciones  5.3.3 .  Una bomba de baja presion sin pulsaciones para el reactivo ( o una segunda bomba HPLC ).  5.3.4 .  Una valvula de inyeccion provista de un bucle de 10 *l  5.3.5 .  Reactor post-columna incluyendo los elementos siguientes :  //  1 bombona tritubular de 1 litro,   //  + 1 calienta bombonas de 1 litro   //  + 2 columnas Vigreux con 10 platos minimo ( refrigeracion por aire )   //  + tubo inoxidable ( para intercambio térmico ) de 1,6 mm _ diametro interior 0,23 mm L = 400 mm   //  + tubo de teflon de 1,6 mm _ diametro interior 0,30 mm _ L = 5 m, ( Tricotin ) ( ver apéndice 1 )   //  + 1 pieza en T sin volumen muerto ( Valco o equivalente )   //  + 3 racores Union sin volumen muerto   //  O : un modulo post-columna de tipo Applied Biosystems PCRS 520 o equivalente provisto de un reactor de 1 ml  5.3.6 .  Filtro acrodisco RCR 0,45 *  5.3.7 .  Cartucho SEPPAK RC18  5.3.8 .  Columnas listas para el empleo :   //  _ Bischoff hypersil RP 18 ( tipo NC ref . C 25.46 1805 ) ( 5 * - L = 250 mm - 0 int . = 4,6 mm )   //  _ o Dupont, Zorbax ODS ( 5 * - L = 250 mm - 0 int . = 4,6 mm )  //  _ o Phase SEP, esferisorbe ODS 2 ( 5* - L = 250 mm _ 0 int . = 4,0 mm )  5.3.9 .  Precolumna   //  _ Bischoff K1 hypersil RP 18 ( ref . KL G 6301 1805 ) 5* - L = 10 mm, o equivalente  5.3.10 .  La columna y la precolumna se conectaran por medio de un sistema Ecotube ( ref . A 15020508 Bischoff ) o equivalente .  5.3.11 .  Realizar el montaje ( 5.3.5 ) segun el esquema del apéndice 2 .  //  Las conexiones después de la valvula de inyeccion deben ser lo mas cortas posible .   //  En el caso de utilizar ( 5.3.6 ), el tubo inoxidable colocado entre la salida del reactor y la entrada del detector tiene por finalidad enfriar la mezcla antes de la deteccion y la temperatura en el detector no es conocida pero es constante .  5.3.12 .  Detector, U.V . visible  5.3.13 .  Registradora  5.3.14 .  Centrifuga  5.3.15 .  Bano de ultrasonidos  5.3.16 .  Agitador vibratorio ( tipo Vortex o equivalente )  5.4 .  Procedimiento  5.4.1 .  Curva patron   //  Las soluciones estandar se preparan por dilucion de la solucion diluida de formaldehido patron ( 5.2.19 ) con la fase movil ( 5.2.16 ).   //  _ 1 ml de solucion patron ( 5.2.19 ) diluida a 20,00 ml aproximadamente 185 *g/100 ml   //  _ 2 ml de solucion patron ( 5.2.19 ) diluida a 20,00 ml aproximadamente 370 *g/100 ml   //  _ 5 ml de solucion patron ( 5.2.19 ) diluida a 25,00 ml aproximadamente 740 *g/100 ml   //  _ 5 ml de solucion patron ( 5.2.19 ) diluida a 20,00 ml aproximadamente 925 *g/100 ml   //  Las soluciones estandar se almacenan durante una hora a la temperatura del laboratorio y deben estar recién preparadas .  //  La linearidad de la curva patron es buena para concentraciones de 100 a 1 500 *g/ml  5.4.2 .  Preparacion de las muestras  5.4.2.1 .  Caso de las emulsiones ( cremas _ maquillajes de base _ delineadores de ojos )   //  Pesar en un frasco con tapon, con una precision de 0,001 g, una masa ( m ) de muestra para ensayo ( en g ) correspondiente a una cantidad supuesta de formaldehido de unos 100 *g .   //  Anadir 20,00 ml de diclorometano ( 5.2.8 ) y 20,00 ml de acido clorhidrico ( 5.2.12 ) medidos exactamente .   //  Mezclar por medio del agitador vibratorio ( 5.3.16 ) y de los ultrasonidos ( 5.3.15 ).   //  Separar las dos fases por centrifugacion ( 3 000 r.p.m . durante 2 minutos ).   //  Por otra parte, lavar un cartucho ( 5.3.7 ) con 2 ml de metanol ( 5.2.7 ) y después acondicionar con 5 ml de agua ( 5.2.1 ).   //  Hacer pasar 4 ml de la fase acuosa del extracto a través del cartucho ( 5.3.8 ), eliminar los primeros 2 ml y recuperar la fraccion siguiente .  5.4.2.2 .  Caso de las lociones y champues   //  Pesar con una precision de 0,001 g una masa ( m ) de muestra para ensayo ( en g ) correspondiente a una cantidad supuesta de formaldehido de unos 500 *g .   //  Completar hasta 100 ml con la fase movil ( 5.2.16 ).   //  La solucion se filtra a través de un filtro ( 5.3.6 ) y se inyecta o se pasa a través de un cartucho ( 5.3.7 ) acondicionado como en el caso anterior ( 5.4.2.1 )   //  Todas las soluciones deben ser inyectadas extemporaneamente .  5.4.3 .  Condiciones cromatograficas   //  _ caudal de la fase movil : 1 ml/min   //  _ caudal del reactivo : 0,5 ml/min   //  _ caudal total a la salida del detector : 1,5 ml/min   //  _ volumen inyectado : 10 *l   //  _ temperatura de elucion : en las separaciones dificiles, la columna se sumerge en un bano de hielo fundente y se espera el equilibrio de las temperaturas .   //  _ temperatura reaccion post-columna : 100 *C   //  _ deteccion : 420 nm   //  _ atenuacion : 0,32 escala plena   //  _ registrador : 10 mv escala plena desarrollo 10 mm/min .   //  NB : El conjunto del sistema cromatografico y post-columna debe enjuagarse con agua después de utilizado ( 5.2.1 ). En el caso de una parada superior a dos dias, a este enjuagado le sigue un enjuagado con metanol ( 5.2.7 ).   //  Antes de reacondicionar el sistema, efectuar una pasada de agua para evitar las recristalizaciones .  5.5 .  Calculo   //  Caso de las emulsiones   //  Contenido en % de formaldehido ( m/m ):  1.2.3.4 //  C  10-6  100 5 m  =  C  10-4 5  m  1.2 // **** ** *** ******** * ******   ** ****** **** * ***  1.2.3.4 // *  // 10-6  100 m  =  C  10-4 m  1.2 // *****   *  ** **** ** * ** ** ******* ******** * *******   *  ** ************ ** *********** **  *g/100ml leida en la curva maestra ( 5.4.1 .)  5.6 .  Repetibilidad ( 1 )   //  Para un contenido de formaldehido del 0,05 % la diferencia entre los resultados de 2 determinaciones paralelas efectuadas en la misma muestra no debe superar el 0,001 %.   //  Para un contenido de formaldehido del 0,2 %, la diferencia entre los resultados de 2 determinaciones paralelas efectuadas en la misma muestra no debe superar el 0,005 %. mg de formaldehido .  ( 1 ) Segun la norma ISO 5725 .  Apéndice 1  CONFECCION DE UN SERPENTIN  ACCESORIOS UTILIZADOS PARA LA REALIZACION DEL " SERPENTIN "  _ 1 bobina de madera :  de un diametro exterior de 5 cm, en medio de la cual se practicara un agujero de 1,5 cm . Se plantaran cuatro puntas de acero equidistantes ( ver esquema de la bobina en la figura 1 y figura 2 ). La separacion entre dos puntas sera de 1,8 cm; las puntas se plantaran a 0,5 cm del agujero .  _ 1 vastago rigido ( del tipo gancho ) para realizar los bucles a partir del tubo de Teflon  _ tubo de Teflon de 1,6 mm _ OE int . 0,3 mm _ Longitud : 5 metros  REALIZACION DEL " SERPENTIN "  Para poner en marcha el serpentin, es preciso enhebrar el tubo de Teflon de arriba a abajo por el agujero central de la bobina ( dejando que el tubo sobresalga aproximadamente unos 10 cm por debajo de la cara inferior, lo que permitira tirar ligeramente de la cadenilla durante la confeccion ) y después enrollar el tubo alrededor de cada una de las cuatro puntas para completar la primera vuelta ( véase figura 3 ).  La entrada y la salida del serpentin estaran guarnecidas con abrazaderas y tornillos de compresion, por lo que es preciso proceder con atencion para no aplastar el Teflon al realizar el engarce .  A partir de la segunda hilera, hacer pasar el tubo por el exterior de cada punta para formar a continuacion un bucle de la manera siguiente :  _ hacer pasar el tubo de la hilera inferior por encima del tubo de la hilera superior con ayuda del vastago rigido ( véase figura 4 ).  Se repetira dicho trabajo en cada una de las puntas respetando el orden 1 - 2 - 3 - 4, hasta el maximo de los 5 metros o de la longitud deseada .  Dejar aproximadamente 10 cm de tubo para cerrar la cadenilla . Pasar el tubo por cada uno de los 4 bucles y tirar ligeramente : asi la cadenilla queda cerrada .  NB : Existen Tricotins en el mercado confeccionados para las reaciones post-columna ( Supelco )  Esquemas de la bobina  1.2.3Figura 1 Figura 2  Figura 3 1a vuelta Figura 4 2a vuelta Para formar el bucle coger el tubo inferior ( trazo continuo ) y pasarlo por el segundo tubo ( trazo en punteado ) Figura 5  Apéndice 2  1.21  = bomba HPLC  2  = valvula de inyeccion  3  = columna con precolumna  4  = bomba reactiva  5  = pieza en forma de T sin volumen muerto  5'  = pieza en forma de T ( Vortex )  6-6'  = raccord Union sin volumen muerto  7  = serpentin  7'  = reactor  8  = globo de tres tubuladuras con agua hirviendo  9  = calientaglobo  10  = refrigerador  11  = tubo inoxidable intercambiador térmico  11'  = intercambiador térmico  12  = detector UV/visible  13  = modulo postcolumna PCRS 520  5.3.5 .  5.3.6 .  Fase movil Reactivo "*****  DIRECTIVA  DE LA COMISIÓN  de 4 de abril de 1990  por la que se modifica la segunda Directiva 82/434/CEE sobre la aproximación de las legislaciones de los Estados miembros relativas a los métodos de análisis necesarios para el control de la composición de los productos cosméticos  (90/207/CEE)  LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS,  Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Económica Europea,  Considerando que la segunda Directiva 82/434/CEE, de 14 de mayo de 1982, sobre la aproximación de las legislaciones de los Estados miembros relativas a los métodos de análisis necesarios para el control de la composición de los productos cosméticos (1), establece un método común de análisis para la identificación y la determinación del formaldehído libre;  Considerando que, dados los últimos avances científicos y técnicos, es necesario modificar dicho método de análisis;  Considerando que las medidas previstas en la presente Directiva se ajustan al dictamen del Comité para la adaptación al progreso técnico de las directivas ralativas a la eliminación de los obstáculos técnicos a los intercambios en el sector de los productos cosméticos,  HA ADOPTADO LA PRESENTE DIRECTIVA:  Artículo 1  Se sustituye el Capítulo IV del Anexo de la Directiva 82/434/CEE por el Anexo de la presente Directiva.  Artículo 2  Los Estados miembros aplicarán, a más tardar el 31 de diciembre de 1990 las disposiciones legales, reglamentarias o administrativas necesarias para cumplir la presente Directiva e informarán de ello inmediatamente a la Comisión.  Las disposiciones adoptadas en virtud del párrafo primero se referirán explícitamente a la presente Directiva.  Artículo 3  Los destinatarios de la presente Directiva serán los Estados miembros.  Hecho en Bruselas, el 4 de abril de 1990.  Por la Comisión  Karel VAN MIERT  Miembro de la Comisión  (1) DO no L 185 de 30. 6. 1982, p. 1.  ANEXO  « IV. IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DEL FORMALDEHÍDO LIBRE  1.2 // 1.   // OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN   //   // El método describe una identificación y dos determinaciones según la presencia o no de donadores de formaldehído. Se aplica a todos los productos cosméticos.   // 1.1.   // Identificación  // 1.2.   // Determinación global por colorimetría con acetilacetona:   //   // Se aplica este método cuando el formaldehído se utiliza solo o con otros conservantes no donadores de formaldehído.   //   // En caso contrario, y si el resultado sobrepasa la concentración máxima autorizada en el producto acabado, se utiliza el método de confirmación siguiente.   // 1.3.   // Determinación en presencia de donadores de formaldehído:   //   // En el método precedente en el proceso de formación del derivado los donadores (donantes) de formaldehído se separan y conducen a resultados demasiado elevados (formaldehído libre y combinado).   //   // Es necesario separar el formaldehído libre por medio de una cromatografía líquida.   // 2.   // DEFINICIÓN   //   // El contenido en formaldehído libre de la muestra, determinado con arreglo a este método, se expresa en porcentaje de la masa de formaldehído.   // 3.   // IDENTIFICACIÓN   // 3.1.  // Principio   //   // En medio sulfúrico, el formaldehído libre y combinado da una coloración rosa o malva en presencia del reactivo de Schiff.   // 3.2.   // Reactivos   //  // Todos los reactivos deben ser de calidad analítica y el agua ha de ser desmineralizada.   // 3.2.1.   // Fucsina  // 3.2.2.   // Sulfito de sodio hidratado 7H2O   // 3.2.3.  // Ácido clorhídrico concentrado (d=1,19)   // 3.2.4.  // Ácido sulfúrico aproximadamente 1 M   // 3.2.5.  // Reactivo de Schiff   //   // En un vaso, pesar 100 mg de fucsina (3.2.1). Disolverlos en 75 ml de agua a 80 °C. Después de enfriar, añadir 2,5 g de sulfito de sodio (3.2.2) y 1,5 ml de ácido clorhídrico (3.2.3). Completar hasta 100 ml.   //  // Tiempo de conservación: 2 semanas.   // 3.3.  // Procedimiento   // 3.3.1.   // En un vaso de 10 ml, introducir aproximadamente 2 g de muestra.   // 3.3.2.  // Añadir dos gotas de H2SO4 (3.2.4) y 2 ml de reactivo Schiff (3.2.5). Este reactivo debe estar rigurosamente incoloro en el momento de su empleo.   //   // Agitar, dejar en contacto durante 5 minutos.   // 3.3.3.   // Si en un plazo de 5 minutos se observa una coloración rosa o malva, la cantidad de formaldehído presente es superior al 0,01 %. Proceder entonces a la determinación libre y combinada siguiendo el procedimiento del punto 4 y, si es necesario, el del punto 5.   // 4.  // DETERMINACIÓN COLORIMÉTRICA CON ACETILACETONA   // 4.1.  // Principio   //   // El formaldehído reacciona con la acetilacetona en presencia de acetato de amonio para formar la 3-5-diacetil-1-4-dihidrolutidina. Ésta se extrae con el butanol-1. La absorbancia del extracto se mide a 410 nm.  // 4.2.   // Reactivos   //   // Todos los reactivos deben ser de calidad analítica y el agua ha de ser desmineralizada.  // 4.2.1.   // Acetato de amonio anhidro   // 4.2.2.  // Ácido acético concentrado d20 4 = 1,05   // 4.2.3.  // Acetilacetona recién destilada a presión reducida 25 mm Hg 25°, no debiendo presentar ninguna absorción a 410 nm.  // 4.2.4.   // Butanol-1   // 4.2.5.   // Ácido clorhídrico 1 M   // 4.2.6.   // Ácido clorhídrico aproximadamente 0,1 M  // 4.2.7.   // Hidróxido de sodio 1 M   // 4.2.8.   // Engrudo de almidón recién preparado, según la Farmacopea Europea, segunda edición 1980, parte I-VII-1-1 (1 g/50 ml de agua)  // 4.2.9.   // Formaldehído al 37-40 %   // 4.2.10.  // Solución valorada de iodo 0,05 M   // 4.2.11.   // Solución valorada de tiosulfato de sodio 0,1 M   // 4.2.12.  // Reactivo de acetilacetona   //   // En un matraz aforado de 1 000 ml, disolver:   //   // - 150 g de acetato de amonio (4.2.1),   //   // - 2 ml de acetilacetona (4.2.3),   //   // - 3 ml de ácido acético (4.2.2).   //   // Completar hasta 1 000 ml con agua (pH de la solución aproximadamente 6,4).   //  // Este reactivo debe estar recién preparado.   // 4.2.13.  // Reactivo (4.2.12) sin acetilacetona   // 4.2.14.  // Formaldehído-patrón: disolución madre   //   // En un matraz aforado de 1000 ml, introducir 5 g de formaldehído (4.2.9) y completar hasta 1000 ml.   //   // Determinación de la concentración de la disolución madre.   //   // Partir 10,00 ml, añadir 25,00 ml de disolución valorada iodo (4.2.10) y 10 ml de solución de hidróxido de sodio 1 M (4.2.7).   //  // Dejar reposar durante 5 minutos.   //   // Acidificar con 11 ml HCL 1M (4.2.5) y determinar el iodo en exceso con una solución titulada de tiosulfato de sodio (4.2.11) en presencia de engrudo de almidón como indicador.   //   // 1 ml de solución de iodo 0,1N(4.2.10) consumido corresponde a 1,5 mg de formaldehído.   // 4.2.15.   // Formaldehído patrón: solución diluida   //   // Realizar sucesivamente una dilución a 1/20 y después una dilución a una centésima parte de la solución madre en agua desmineralizada.   //   // 1 ml de esta solución contiene aproximadamente 1 mg de formaldehído.   //  // Calcular su contenido exacto.   // 4.3.   // Aparatos  // 4.3.1.   // Material habitual de laboratorio   // 4.3.2.  // Filtro « separador de fases » ref. Whatman 1 PS (o equivalente)   // 4.3.3.   // Centrífuga   // 4.3.4.   // Baño de María regulado a 60 °C   // 4.3.5.   // Espectrofotómetro  // 4.3.6.   // Cubetas de vidrio de 1 cm de recorrido óptico  // 4.4.   // Procedimiento   // 4.4.1.   // Solución de muestra   //   // En un matraz aforado de 100 ml, pesar con una precisión de 0,001 g aproximadamente una masa de muestra para ensayo (g) correspondiente a una cantidad supuesta de formaldehído de unos  150 m g.   //   // Completar hasta 100 ml con agua y mezclar   //   // [Comprobar que el pH es cercano a 6; en caso contrario, efectuar la dilución en la solución de ácido clorhídrico (4.2.6)]  //  // En un matraz cónico de 50 ml, añadir:   //   // - 10,00 ml de solución S,   //   // - 5,00 ml de reactivo de acetilacetona (4.2.12) y agua desmineralizada para obtener un volumen de 30 ml.   // 4.4.2.   // Disolución testigo   //  // La posible interferencia de una coloración de fondo en la muestra para ensayo se elimina de la manera siguiente:   //  // En un matraz cónico de 50 ml, añadir:   //   // - 10,0 ml de disolución S,   //   // - 5,0 ml del reactivo (4.2.13) y agua desmineralizada para obtener un volumen de 30 ml.  // 4.4.3.   // Ensayo en blanco   //   // En un matraz cónico de 50 ml, añadir:   //   // - 5,0 ml de reactivo de acetilacetona (4.2.12) y agua desmineralizada para obtener un volumen de 30 ml.   // 4.4.4.   // Determinación   // 4.4.4.1.  // Agitar las mezclas preparadas en 4.4.1, 4.4.2 y 4.4.3 sumergir los matraces cónicos en un baño de María a 60 °C durante 10 minutos exactamente. Enfriar durante dos minutos en un baño de agua helada.   // 4.4.4.2.   // Trasvasar a una ampolla de decantación de 50 ml que contenga exactamente 10 ml de butanol-1 (4.2.4). Enjuagar con 3 a 5 ml de agua.   //  // Agitar enérgicamente la mezcla durante treinta segundos exactamente.   //   // Dejar decantar.   // 4.4.4.3.  // Filtrar la fase butanólica en filtro « separador de fases » (4.3.2) en las cubetas de medida. Se puede realizar también una centrifugación (3000 r.p.m. durante cinco minutos).  // 4.4.4.4.   // Medir la absorbancia A1 a 410 nm del extracto de la solución de muestra obtenida en el punto (4.4.1). Frente el extracto de la solución testigo del punto (4.4.2).  // 4.4.4.5.   // De la misma manera, medir la absorbancia A2 del extracto del ensayo en blanco obtenido en el punto (4.4.3) Frente butanol-1.   //   // NB: Todas estas operaciones deben ejecutarse en un plazo de veinticinco minutos a partir del momento en que el matraz cónico se coloca en el baño de María a 60 °C.  // 4.4.5.   // Curva patrón   // 4.4.5.1.   // En un matraz cónico de 50 ml introducir:   //   // - 5,00 ml de solución patrón diluida (4.2.15)   //   // - 5,00 ml de reactivo de acetilacetona (4.2.12) y agua desmineralizada para obtener un volumen final de 30 ml.   // 4.4.5.2.   // Continuar según las indicaciones del punto (4.4.4) y medir la absorbancia con relación al butanol-1 (4.2.4).   // 4.4.5.3.   // Repetir el proceso con 10, 15, 20 y 25 ml de solución patrón diluida (4.2.15).   // 4.4.5.4.   // Para obtener el valor del punto 0 (que corresponde a la coloración de los reactivos) proceder como en el punto 4.4.4.5.   // 4.4.5.5.   // Construir la curva patrón después de restar el valor del punto 0 de cada una de las absorbencias obtenidas en los puntos 4.4.5.1 y 4.4.5.3. La ley de Beer se respecta hasta 30 mg de formaldehído.   // 4.5.  // Cálculos   // 4.5.1.   // Restar A2 de A1 y leer en la curva patrón (4.4.5.5) la cantidad C expresada en microgramos de formaldehído contenida en la solución del punto 4.4.1.  // 4.5.2.   // El contenido de formaldehído de la muestra (% m/m) se calcula mediante la fórmula:  1.2.3 //   // % de formaldehído % =  // C 103 ; m 1.2 //  // donde:   //   // m = masa en g de la toma de ensavo.  1.2 // 4.6.   // Repetibilidad (1)   //   // Para un contenido en formaldehído del 0,2 %, la diferencia entre los resultados de dos determinaciones paralelas efectuadas sobre la misma muestra no debe superar el 0,005 % para la determinación colorimétrica con acetilacetona.   //   // Si la determinación del formaldehído libre conduce a resultados superiores a los previstos en la Directiva 76/768/CEE, a saber:   //   // a) comprendidos entre el 0,05 % y el 0,2 % del producto no etiquetado,   //   // b) superiores al 0,2 % del producto etiquetado o no; es obligatorio proceder con arreglo al método descrito en el punto 5.   // 5.   // DETERMINACIÓN EN PRESENCIA DE DONADORES DE FORMALDEHÍDO   // 5.1.   // Principio   //  // El formaldehído libre se separa por cromatografía líquida de alto rendimiento.   //   // Para evitar la separación de los donadores de formaldehído en el momento de la derivatización, previamente se procede a una cromatografía líquida, el fomaldehído separado se transforma en derivado lutidínico amarillo por reacción en línea con la acetilacetona en un reactor postcolumna y el derivado formado se detecta por absorbencia a 420 nm.   // 5.2.   // Reactivos   //   // Todos los reactivos deben ser de calidad analítica y el agua ha de ser desmineralizada.   // 5.2.1.   // Agua Baker o de calidad equivalente   // 5.2.2.   // Acetato de amonio anhidro  // 5.2.3.   // Ácido acético concentrado   // 5.2.4.  // Acetilacetona (conservada a 4 °C)   // 5.2.5.   // Fosfato disódico anhidro   // 5.2.6.   // Ácido ortofosfórico al 85 % (d = 1,7)   // 5.2.7.   // Metanol de calidad espectro  // 5.2.8.   // Diclorometano de calidad espectro   // 5.2.9.  // Formaldehído al 37 - 40 %   // 5.2.10.   // Hidróxido de sodio 1 M   // 5.2.11.   // Ácido clorhídrico 1 M   // 5.2.12.  // Ácido clorhídrico 0,002 M   // 5.2.13.   // Engrudo de almidón recientemente preparado conforme con la Farmacopea Europea   // 5.2.14.   // Solución titulada de iodo 0,1 M  // 5.2.15.   // Solución titulada de tiosulfato de sodio 0,1 M   // 5.2.16.   // Fase móvil   //   // Solución acuosa de fosfato disódico (5.2.5) 0,006 M ajustada a un pH 2,1 con ácido ortofosfórico (5.2.6) .   // 5.2.17.   // Reactivo postcolumna  //   // Disolver en un matraz aforado de 1 000 ml:   //   // - 62,5 g de acetato de amonio (5.2.2),   //   // - 7,5 ml de ácido acético (5.2.3),   //   // - 5 ml de acetilacetona (5.2.4).   //   // Completar hasta 1 000 ml con agua (5.2.1).  //   // Mantener este reactivo al abrigo de la luz.   //  // Conservación: tres días a 25 °C.   //   // No debe observarse evolución en el color.   // 5.2.18.  // Formaldehído patrón: solución madre   //   // En un matraz aforado de 1 000 ml, introducir 10 g de formaldehído (5.2.9.) y completar hasta 1 000 ml con agua.   //   // Determinación del título de la solución madre:   //   // Extraer 5,00 ml, añadir 25 ml de la solución titulada de iodo (5.2.14) y 10 ml de solución de hidróxido de sodio (5.2.10).   //   // Dejar reposar durante cinco minutos.   //   // Acidificar con 11 ml de HCL (5.2.11) y determinar el iodo en exceso con una solución titulada de tiosulfato de sodio (5.2.15) en presencia de engrudo de almidón como indicador.   //   // 1 ml de solución de iodo consumida (5.2.14) corresponde a 1,5 mg de  (1) Según la norma ISO 5725.   // 5.2.19.   // Formaldehído patrón: solución diluida   //  // Realizar una dilución al 1/100 de la solución madre en la fase móvil (5.2.16).   //   // 1 ml de esta solución contiene aproximadamente 37 mg de formaldehído. Calcular su contenido exacto.   // 5.3.   // Aparatos   // 5.3.1.   // Material habitual de laboratorio   // 5.3.2.   // Una bomba HPLC sin pulsaciones   // 5.3.3.   // Una bomba de baja presión sin pulsaciones para el reactivo (o una segunda bomba HPLC).  // 5.3.4.   // Una válvula de inyección provista de un bucle de 10 m,l   // 5.3.5.   // Reactor post-columna incluyendo los elementos siguientes:   //   // 1 bombona tritubular de 1 litro,   //   // + 1 calienta bombonas de 1 litro   //   // + 2 columnas Vigreux con 10 platos mínimo (refrigeración por aire)  //   // + tubo inoxidable (para intercambio térmico) de 1,6 mm - diámetro interior 0,23 mm L = 400 mm   //   // + tubo de teflón de 1,6 mm - diámetro interior 0,30 mm - L = 5 m, (Tricotin) (ver apéndice 1)   //   // + 1 pieza en T sin volumen muerto (Valco o equivalente)   //   // + 3 racores Union sin volumen muerto   //   // O: un módulo post-columna de tipo Applied Biosystems PCRS 520 o equivalente provisto de un reactor de 1 ml  // 5.3.6.   // Filtro acrodisco RCR 0,45 m  // 5.3.7.   // Cartucho SEPPAK RC18   // 5.3.8.   // Columnas listas para el empleo:   //   // - Bischoff hypersil RP 18 (tipo NC ref. C 25.46 1805) (5 m - L = 250 mm - 0 int. = 4,6 mm)   //   // - o Dupont, Zorbax ODS (5 m - L = 250 mm - 0 int. = 4,6 mm)   //   // - o Phase SEP, esferisorbe ODS 2 (5m - L = 250 mm - 0 int. = 4,0 mm)   // 5.3.9.   // Precolumna   //  // - Bischoff K1 hypersil RP 18 (ref. KL G 6301 1805) 5m - L = 10 mm, o equivalente   // 5.3.10.   // La columna y la precolumna se conectarán por medio de un sistema Ecotube (ref. A 15020508 Bischoff) o equivalente.   // 5.3.11.   // Realizar el montaje (5.3.5) según el esquema del apéndice 2.   //  // Las conexiones después de la válvula de inyección deben ser lo más cortas posible.   //   // En el caso de utilizar (5.3.6), el tubo inoxidable colocado entre la salida del reactor y la entrada del detector tiene por finalidad enfriar la mezcla antes de la detección y la temperatura en el detector no es conocida pero es constante.   // 5.3.12.   // Detector, U.V. visible   // 5.3.13.   // Registradora   // 5.3.14.  // Centrífuga   // 5.3.15.   // Baño de ultrasonidos  // 5.3.16.   // Agitador vibratorio (tipo Vortex o equivalente)   // 5.4.   // Procedimiento   // 5.4.1.  // Curva patrón   //   // Las soluciones estándar se preparan por dilución de la solución diluida de formaldehído patrón (5.2.19) con la fase móvil (5.2.16).   //   // - 1 ml de solución patrón (5.2.19) diluida a 20,00 ml aproximadamente 185 mg/100 ml   //   // - 2 ml de solución patrón (5.2.19) diluida a 20,00 ml aproximadamente 370 mg/100 ml   //   // - 5 ml de solución patrón (5.2.19) diluida a 25,00 ml aproximadamente 740 mg/100 ml   //   // - 5 ml de solución patrón (5.2.19) diluida a 20,00 ml aproximadamente 925 mg/100 ml   //   // Las soluciones estándar se almacenan durante una hora a la temperatura del laboratorio y deben estar recién preparadas.  //   // La linearidad de la curva patrón es buena para concentraciones de 100 a 1 500 mg/ml  // 5.4.2.   // Preparación de las muestras   // 5.4.2.1.  // Caso de las emulsiones (cremas - maquillajes de base - delineadores de ojos)   //   // Pesar en un frasco con tapón, con una precisión de 0,001 g, una masa (m) de muestra para ensayo (en g) correspondiente a una cantidad supuesta de formaldehído de unos 100 mg.   //   // Añadir 20,00 ml de diclorometano (5.2.8) y 20,00 ml de ácido clorhídrico (5.2.12) medidos exactamente.   //   // Mezclar por medio del agitador vibratorio (5.3.16) y de los ultrasonidos (5.3.15).   //  // Separar las dos fases por centrifugación (3 000 r.p.m. durante 2 minutos).   //   // Por otra parte, lavar un cartucho (5.3.7) con 2 ml de metanol (5.2.7) y después acondicionar con 5 ml de agua (5.2.1).   //   // Hacer pasar 4 ml de la fase acuosa del extracto a través del cartucho (5.3.8), eliminar los primeros 2 ml y recuperar la fracción siguiente.   // 5.4.2.2.  // Caso de las lociones y champúes   //   // Pesar con una precisión de 0,001 g una masa (m) de muestra para ensayo (en g) correspondiente a una cantidad supuesta de formaldehído de unos 500 mg.   //   // Completar hasta 100 ml con la fase móvil (5.2.16).   //   // La solución se filtra a través de un filtro (5.3.6) y se inyecta o se pasa a través de un cartucho (5.3.7) acondicionado como en el caso anterior (5.4.2.1)   //  // Todas las soluciones deben ser inyectadas extemporáneamente.   // 5.4.3.   // Condiciones cromatográficas   //   // - caudal de la fase móvil: 1 ml/min   //   // - caudal del reactivo: 0,5 ml/min   //   // - caudal total a la salida del detector: 1,5 ml/min   //   // - volumen inyectado: 10 ml   //   // - temperatura de elución: en las separaciones difíciles, la columna se sumerge en un baño de hielo fundente y se espera el equilibrio de las temperaturas.   //   // - temperatura reacción post-columna: 100 °C   //   // - detección: 420 nm   //   // - atenuación: 0,32 escala plena  //   // - registrador: 10 mv escala plena desarrollo 10 mm/min.   //   // NB: El conjunto del sistema cromatográfico y post-columna debe enjuagarse con agua después de utilizado (5.2.1). En el caso de una parada superior a dos días, a este enjuagado le sigue un enjuagado con metanol (5.2.7).   //  // Antes de reacondicionar el sistema, efectuar una pasada de agua para evitar las recristalizaciones.  // 5.5.   // Cálculo  //   // Caso de las emulsiones   //   // Contenido en % de formaldehído (m/m):  1.2.3.4 //   // C ; 10-6 ; 100 5 m   // =  // C ; 10-4 5 ; m  1.2 //   // Psaso de las lopsiones y psiamps  //   // La frmthla pasa a ser:  1.2.3.4 //   // PS ; 10-6 ; 100 m   // =   // C ; 10-4 m  1.2 //   // donde   //   // m = la masa en g de la mthestra sometida a anlisis   //   // PS = la psonpsentrapsin de formaldeido en mg/100ml leída en la curva maestra (5.4.1.)   // 5.6.   // Repetibilidad (1)   //  // Para un contenido de formaldehído del 0,05 % la diferencia entre los resultados de 2 determinaciones paralelas efectuadas en la misma muestra no debe superar el 0,001 %.   //   // Para un contenido de formaldehído del 0,2 %, la diferencia entre los resultados de 2 determinaciones paralelas efectuadas en la misma muestra no debe superar el 0,005 %. formaldehído.  (1) Según la norma ISO 5725.  Apéndice 1  CONFECCIÓN DE UN SERPENTÍN  ACCESORIOS UTILIZADOS PARA LA REALIZACIÓN DEL « SERPENTÍN »  - 1 bobina de madera:  de un diámetro exterior de 5 cm, en medio de la cual se practicará un agujero de 1,5 cm. Se plantarán cuatro puntas de acero equidistantes (ver esquema de la bobina en la figura 1 y figura 2). La separación entre dos puntas será de 1,8 cm; las puntas se plantarán a 0,5 cm del agujero.  - 1 vástago rígido (del tipo gancho) para realizar los bucles a partir del tubo de Teflon  - tubo de Teflon de 1,6 mm - OE int. 0,3 mm - Longitud: 5 metros  REALIZACIÓN DEL « SERPENTÍN »  Para poner en marcha el serpentín, es preciso enhebrar el tubo de Teflon de arriba a abajo por el agujero central de la bobina (dejando que el tubo sobresalga aproximadamente unos 10 cm por debajo de la cara inferior, lo que permitirá tirar ligeramente de la cadenilla durante la confección) y después enrollar el tubo alrededor de cada una de las cuatro puntas para completar la primera vuelta (véase figura 3).  La entrada y la salida del serpentín estarán guarnecidas con abrazaderas y tornillos de compresión, por lo que es preciso proceder con atención para no aplastar el Teflon al realizar el engarce.  A partir de la segunda hilera, hacer pasar el tubo por el exterior de cada punta para formar a continuación un bucle de la manera siguiente:  - hacer pasar el tubo de la hilera inferior por encima del tubo de la hilera superior con ayuda del vástago rígido (véase figura 4).  Se repetirá dicho trabajo en cada una de las puntas respetando el orden 1 - 2 - 3 - 4, hasta el máximo de los 5 metros o de la longitud deseada.  Dejar aproximadamente 10 cm de tubo para cerrar la cadenilla. Pasar el tubo por cada uno de los 4 bucles y tirar ligeramente: así la cadenilla queda cerrada.  NB: Existen Tricotins en el mercado confeccionados para las reaciones post-columna (Supelco) Esquemas de la bobina  1.2.3 // Figura 1 Figura 2  //  // Figura 3 1a vuelta Figura 4 2a vuelta Para formar el bucle coger el tubo inferior (trazo continuo) y pasarlo por el segundo tubo (trazo en punteado) Figura 5  Apéndice 2  1.2 // 1   // = bomba HPLC   // 2   // = válvula de inyección   // 3   // = columna con precolumna   // 4   // = bomba reactiva   // 5   // = pieza en forma de T sin volumen muerto  // 5'   // = pieza en forma de T (Vortex)   // 6-6'   // = raccord Union sin volumen muerto   // 7   // = serpentín  // 7'   // = reactor   // 8   // = globo de tres tubuladuras con agua hirviendo   // 9   // = calientaglobo   // 10   // = refrigerador   // 11   // = tubo inoxidable intercambiador térmico   // 11'   // = intercambiador térmico   // 12   // = detector UV/visible   // 13   // = módulo postcolumna PCRS 520  5.3.5.  5.3.6.  Fase móvil Reactivo »