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31973L0046

Vierte Richtlinie 73/46/EWG der Kommission vom 5. Dezember 1972 zur Festlegung gemeinschaftlicher Analysemethoden für die amtliche Untersuchung von Futtermitteln

Amtsblatt Nr. L 083 vom 30/03/1973 S. 0021 - 0034 Finnische Sonderausgabe: Kapitel 3 Band 5 S. 0115  Griechische Sonderausgabe: Kapitel 03 Band 9 S. 0114  Schwedische Sonderausgabe: Kapitel 3 Band 5 S. 0115  Spanische Sonderausgabe: Kapitel 03 Band 6 S. 0230  Portugiesische Sonderausgabe: Kapitel 03 Band 6 S. 0230

++++  VIERTE RICHTLINIE DER KOMMISSION  vom 5 . Dezember 1972  zur Festlegung gemeinschaftlicher Analysemethoden für die amtliche Untersuchung von Futtermitteln   ( 73/46/EWG )  DIE KOMMISSION DER EUROPÄISCHEN GEMEINSCHAFTEN -  gestützt auf den Vertrag zur Gründung der Europäischen Wirtschaftsgemeinschaft ,  gestützt auf die Richtlinie des Rates vom 20 . Juli 1970 über die Einführung gemeinschaftlicher Probenahmeverfahren und Analysemethoden für die amtliche Untersuchung von Futtermitteln ( 1 ) in der Fassung der Richtlinie vom 20 . Juli 1972 ( 2 ) , insbesondere auf Artikel 2 ,  in Erwägung nachstehender Gründe :  Die obengenannte Richtlinie bestimmt , daß die amtlichen Untersuchungen von Futtermitteln zur Feststellung , ob die auf Grund der Rechts - oder Verwaltungsvorschriften festgelegten Anforderungen hinsichtlich Beschaffenheit und Zusammensetzung der Futtermittel erfuellt sind , nach gemeinschaftlichen Probenahmeverfahren und Analysemethoden durchgeführt werden .  Die Richtlinien Nr . 71/250/EWG , Nr . 71/393/EWG und Nr . 72/199/EWG der Kommission vom 15 . Juni 1971 ( 3 ) , vom 18 . November 1971 ( 4 ) und vom 27 . April 1972 ( 5 ) haben bereits eine Reihe von Analysemethoden festgelegt . Der Stand der seitdem durchgeführten Arbeiten ermöglicht es nunmehr , eine vierte Serie von Analysemethoden festzulegen .  Die in dieser Richtlinie vorgesehenen Maßnahmen entsprechen der Stellungnahme des Ständigen Futtermittelausschusses -  HAT FOLGENDE RICHTLINIE ERLASSEN :  Artikel 1  Die Mitgliedstaaten schreiben vor , daß die Analysen für die amtliche Untersuchung von Futtermitteln auf den Gehalt an Feuchtigkeit in tierischen und pflanzlichen Fetten und Ölen sowie auf den Gehalt an Magnesium und Rohfaser in Futtermitteln nach den in Anlage I zu dieser Richtlinie beschriebenen Methoden durchgeführt werden .  Die allgemeinen Bestimmungen des Teils 1 ( Einführung ) der Anlage zur Ersten Richtlinie Nr . 71/250/EWG der Kommission vom 15 . Juni 1971 finden für die in Anlage I zu dieser Richtlinie beschriebenen Methoden Anwendung .  Artikel 2  Die Mitgliedstaaten schreiben vor , daß die Analysen für die amtliche Untersuchung von Futtermitteln auf ihren Gehalt an Retinol ( Vitamin A ) , Thiamin ( Aneurin , Vitamin B1 ) sowie Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure  ( Vitamin C ) nach den in Anlage II zu dieser Richtlinie beschriebenen Methoden durchgeführt werden .  Die allgemeinen Bestimmungen des Teils 1 ( Einführung ) der Anlage zur Ersten Richtlinie Nr . 71/250/EWG der Kommission vom 15 . Juni 1971 , mit Ausnahme des die Vorbereitung der Analyseprobe betreffenden Teils , finden für die in Anlage II zu dieser Richtlinie beschriebenen Methoden Anwendung .  Artikel 3  Die Mitgliedstaaten setzen spätestens zum 1 . Januar 1974 die erforderlichen Rechts - oder Verwaltungsvorschriften in Kraft , um den Bestimmungen dieser Richtlinie nachzukommen . Sie setzen die Kommission unverzueglich hiervon in Kenntnis .  Artikel 4  Diese Richtlinie ist an alle Mitgliedstaaten gerichtet .  Brüssel , den 5 . Dezember 1972  Für die Kommission  Der Präsident  S . L . MANSHOLT  ( 1 ) ABl . Nr . L 170 vom 3 . 8 . 1970 , S . 2 .  ( 2 ) ABl . Nr . L 171 vom 29 . 7 . 1972 , S . 39 .  ( 3 ) ABl . Nr . L 155 vom 12 . 7 . 1971 , S . 13 .  ( 4 ) ABl . Nr . L 279 vom 20 . 12 . 1971 , S . 7 .  ( 5 ) ABl . Nr . L 123 vom 29 . 5 . 1972 , S . 6 .  ANLAGE I  1 . BESTIMMUNG VON FEUCHTIGKEIT IN TIERISCHEN UND PFLANZLICHEN FETTEN UND ÖLEN  1 . Zweck und Anwendungsbereich  Die Methode erlaubt die Bestimmung des Gehalts an Feuchtigkeit ( Wasser und andere fluechtige Bestandteile ) und an fluechtigen Stoffen in tierischen und pflanzlichen Fetten und Ölen .  2 . Prinzip  Die Probe wird bei 103 * C getrocknet , bis kein Gewichtsverlust mehr eintritt . Der Gewichtsverlust wird bestimmt .  3 . Geräte  3.1 . Schale mit flachem Boden , aus korrosionsbeständigem Material , Durchmesser : 8 - 9 cm , Höhe ca . 3 cm  3.2 . Quecksilber-Thermometer , mit verstärkter Kugel und Ausdehnungsraum am oberen Ende , von ca . 80 * C bis mindestens 110 * C graduiert , Länge ca . 10 cm  3.3 . Sandbad oder elektrische Heizplatte  3.4 . Exsikkator , der ein wirksames Trocknungsmittel enthält  3.5 . Analysenwaage .  4 . Ausführung  Etwa 20 g der homogenisierten Probe werden auf 1 mg genau in die trockene tarierte Schale ( 3.1 ) , die das Thermometer ( 3.2 ) enthält , eingewogen und auf dem Sandbad bzw . der Heizplatte ( 3.3 ) so erhitzt , daß bei stetigem Umrühren mit dem Thermometer nach ca . 7 Min . eine Temperatur von 90 * C erreicht wird .  Entsprechend der Häufigkeit , mit der Gasblasen vom Boden der Schale aufsteigen , wird die Heizintensität verringert . Die Temperatur darf 105 * C nicht überschreiten . Das Umrühren wird unter ständigem Abkratzen des Bodens der Schale bis zum Ende der Blasenbildung fortgesetzt .  Um sicherzustellen , daß die Feuchtigkeit völlig entfernt wird , ist das Erhitzen mehrmals bei 103 * C mehr oder weniger 2 * C zu wiederholen , wobei man zwischen aufeinanderfolgenden Erhitzungen auf 93 * C abkühlen lässt . Dann lässt man bis zur Raumtemperatur im Exsikkator ( 3.4 ) abkühlen und wägt . Dieses Verfahren ist zu wiederholen , bis der Gewichtsverlust zwischen zwei aufeinandenfolgenden Wägungen 2 mg nicht überschreitet .  NB : Eine Gewichtserhöhung der Probe nach wiederholter Erwärmung zeigt eine Oxydation des Fettes an . In diesem Fall legt man der Berechnung das Ergebnis der Wägung zugrunde , die kurz vor dem Auftreten der Gewichtszunahme ausgeführt wurde .  5 . Berechnung der Ergebnisse  Der Gehalt an Feuchtigkeit der Probe in v.H . wird durch folgende Formel wiedergegeben :   ( M1 - M2 ) * 100/M0  M0 = Gewicht der Probe in g ,  M1 = Gewicht der Schale mit Inhalt in g vor dem Erhitzen ,  M2 = Gewicht der Schale mit Inhalt ing g nach dem Erhitzen .  Ergebnisse unter 0,05 v.H . sollten mit der Bezeichnung " weniger als 0,05 v.H . " angegeben werden .  Wiederholbarkeit  Der Unterschied zwischen 2 Parallelbestimmungen darf bei ein und derselben Probe 0,05 v.H . absolut nicht überschreiten .  2 . BESTIMMUNG VON MAGNESIUM   - durch Atomabsorptions-Spektrophotometrie -  1 . Zweck und Anwendungsbereich  Die Methode erlaubt die Bestimmung des Gehalts an Magnesium in Futtermitteln . Sie eignet sich besonders zur Bestimmung von Magnesiumgehalten unter 5 v.H .  2 . Prinzip  Die Probe wird verascht und in verdünnter Salzsäure gelöst . Wenn die Probe keine organischen Bestandteile enthält , wird sie unmittelbar in verdünnter Salzsäure gelöst . Die Lösung wird verdünnt und der Magnesiumgehalt durch Atomabsorptions-Spektrophotomctrie bei 285,2 nm im Vergleich zu Eichlösungen bestimmt .  3 . Reagenzien  3.1 . Salzsäure p.a . , D : 1,16  3.2 . Salzsäure p.a . , D : 1,19  3.3 . Magnesiumband oder -draht , oder Magnesiumsulfat  ( MgSO4 * 7 H2O ) p.a . vakuumgetrocknet bei Raumtemperatur  3.4 . Strontiumsalzlösung ( Chlorid oder Nitrat ) 2,5 v.H . ( G/V ) Strontium ( = 76,08 g SrCl2 * 6 H2O p.a./1 oder 60,38 g Sr(NO3)2 p.a./1 )  3.5 . Magnesium-Standardlösung : 1 g Magnesium  ( 3.3 ) , das zuvor sorgfältig von seinem Oxidfilm befreit wurde , oder eine entsprechende Menge Magnesiumsulfat ( 3.3 ) wird auf 1 mg genau abgewogen und in einn 1 000-ml-Meßkolben gebracht ; dann werden 80 ml Salzsäure ( 3.1 ) hinzugefügt , nach Auflösen des Magnesiums wird auf 1 000 ml mit Wasser aufgefuellt . 1 ml dieser Lösung enthält 1,000 mg Magnesium .  4 . Geräte  4.1 . Veraschungsschalen aus Platin , Quarz oder Porzellan  4.2 . Elektrischer Muffelofen mit Thermostat  4.3 . Atomabsorptions-Spektrophotometer .  5 . Ausführung  5.1 . Herstellung der Analysenlösung  5.1.1 . Futtermittel , die ausschließlich aus anorganischen Bestandteilen bestehen  5 g der Probe , auf ein mg genau gewogen , werden mit 250 - 300 ml Wasser in einen 500-ml-Meßkolben gebracht . Man fügt 40 ml Salzsäure ( 3.1 ) hinzu und hält etwa 30 Min . in leichtem Sieden . Nach dem Abkühlen wird mit Wasser zur Marke aufgefuellt , gemischt und durch ein trockenes Faltenfilter in ein trockenes Becherglas filtriert . Der erste Anteil des Filtrats von etwa 30 ml wird verworfen .  Bei Anwesenheit von Kieselsäure werden 5 g der Probe mit einer ausreichenden Menge ( 15 - 30 ml ) Salzsäure  ( 3.2 ) auf einem Wasserbad zur Trockne eingedampft . Die weitere Behandlung erfolgt wie unter 5.1.2 ab 3 . Satz beschrieben .  5.1.2 . Futtermittel , die überwiegend aus anorganischen Bestandteilen bestehen  5 g der Probe , auf 1 mg genau gewogen , werden bei 550 * C im Muffelofen verascht , bis die Asche keine Kohleteilchen enthält . Zur * oscheidung von Kieselsäure wird die Asche mit einer ausreichenden Menge ( 15 - 30 ml ) Salzsäure ( 3.2 ) versetzt und auf dem Wasserbad zur Trockne eingedampft . Anschließend erhitzt man 1 Std . im Trockenschrank bei 105 * C . Der Rückstand wird mit 10 ml Salzsäure ( 3.1 ) aufgenommen und mit heissem Wasser in einen 500-ml-Meßkolben übergespült . Es wird kurz aufgekocht und nach dem Abkühlen mit Wasser zur Marke aufgefuellt , umgeschüttelt und durch ein trockenes Faltenfilter in ein trockenes Becherglas filtriert . Der erste Anteil des Filtrats von etwa 30 ml wird verworfen .  5.1.3 . Futtermittel , die überwiegend aus organischen Bestandteilen bestehen  5 g der Probe werden auf 1 mg genau in eine Veraschungsschale eingewogen und bei 550 * C im Muffelofen verascht , bis die Asche keine Kohleteilchen enthält . Die Asche wird mit 5 ml Salzsäure ( 3.2 ) übergossen und auf dem Wasserbad zur Trockne eingedampft und hierauf 1 Std . bei 105 * C in einem Trockenschrank getrocknet , um die Kieselsäure unlöslich zu machen . Hierauf wird der Rückstand mit 5 ml Salzsäure ( 3.1 ) aufgenommen und mit heissem Wasser in einen 250-ml-Meßkolben übergespült , kurz aufgekocht und nach dem Abkühlen mit Wasser zur Marke aufgefuellt , gemischt und durch ein trockenes Faltenfilter in trockene Bechergläser filtriert . Der erste Anteil des Filtrats von etwa 30 ml wird verworfen .  5.2 . Messung der Atomabsorption  Aus der Magnesium-Standardlösung ( 3.5 ) werden durch Verdünnen mit Wasser mindestens 5 Eichlösungen steigender Konzentrationen hergestellt , entsprechend dem optimalen Meßbereich des Atomabsorptions-Spektrophotometers . Jeder Eichlösung werden 10 ml Strontiumsalzlösung ( 3.4 ) zugesetzt , bevor mit Wasser zu einem Volumen von 100 ml aufgefuellt wird .  Ein aliquoter Teil des nach 5.1.1 , 5.1.2 oder 5.1.3 gewonnenen Filtrats wird mit Wasser so verdünnt , daß man eine Magnesiumkonzentration erhält , die im Konzentrationsbereich der Eichlösungen liegt . Die Salzsäurekonzentration dieser Lösung darf 0,4 N nicht überschreiten . Vor dem Auffuellen auf ein Volumen von 100 ml werden 10 ml Strontiumsalzlösung ( 3.4 ) hinzugefügt .  Die Messung der Atomabsorption erfolgt bei der Analysenlösung und den Eichlösungen bei einer Wellenlänge von 285,2 nm .  6 . Berechnung der Ergebnisse  Der Magnesiumgehalt der Probe ist mit Hilfe der Eichlösungen zu berechnen . Das Ergebnis ist in v.H . der Probe auszudrücken .  Wiederholbarkeit  Der Unterschied zwischen 2 Parallelbestimmungen darf bei ein und derselben Probe 5 v.H . relativ nicht überschreiten .  3 . BESTIMMUNG VON ROHFASER  1 . Zweck und Anwendungsbereich  Die Methode erlanbt die Bestimmung des Gehalts an säure - und alkaliunlöslichen fettfreien organischen Bestandteilen in Futtermitteln , konventionell ausgedrückt als Rohfaser .  2 . Prinzip  Die gegebenenfalls entfettete Probe wird nacheinander mit kochender Schwefelsäure und mit kochender Kaliumhydroxidlösung bestimmter Konzentrationen behandelt . Der Rückstand wird durch Filtration über Asbest abgetrennt , gewaschen , getrocknet , gewogen und bei 900 * C verascht . Der Gewichtsverlust bei dieser Veraschung entspricht der Rohfaser der Einwaage .  3 . Reagenzien  3.1 . 0,26 N Schwefelsäure  3.2 . Behandelter Asbests Asbest für Gooch-Tiegel wird mit etwa dem 5fachen Gewicht an verdunnter Salzsäure ( 1 Vol . Salzsäure , D : 1,19 + 3 Vol . Wasser ) versetzt . Man kocht die Mischung etwa 45 Min . lang , lässt abkühlen und filtriert durch einen Büchner-Trichter . Der Rückstand wird mit Wasser gewaschen , bis das letzte Waschwasser völlig frei von Säure ist , anschließend wird mit Aceton ( 3.6 ) nachgewaschen . Der Asbest wird im Trockenschrank getrocknet , anschließend 2 Std . bei 900 * C geglüht und nach dem Abkühlen in einem geschlossenen Gefäß aufbewahrt . Der so behandelte Asbest kann mehrfach verwendet werden . Er muß den Anforderungen entsprechen , die bei 5.1 im Blindversuch genannt sind .  3.3 . Antischaummittel ( z.B . Silikon )  3.4 . 0,23 N Kaliumhydroxidlösung  3.5 . 0,5 N Salzsäure  3.6 . Aceton , rein  3.7 . Diäthyläther , rein .  4 . Geräte  4.1 . Bechergläser , mindestens 600 ml Inhalt , mit Marke bei 200 ml  4.2 . Porzellanplatten , Durchmesser : ca . 80 mm , Dicke : ca . 4 mm , mit ungefähr 32 Löchern von je ca . 4 mm Durchmesser  4.3 . Saugflaschen mit durchbohrtem Gummistopfen , ca . 2 l Inhalt , mit Marke bei 800 ml und mit einem Glastrichter von 120 mm Durchmesser versehen  4.4 . Filterplatten , Durchmesser : ca . 40 mm , Dicke : ca . 4 mm , Rand konisch dem Trichter angepasst ( 4.3 ) , mit ca . 16 Löchern von je ca . 4 mm Durchmesser , mit einem Drahtgeflecht bedeckt , das eine Maschenweite von ca . 1 mm besitzt . Filterplatten und Drahtgeflecht müssen beständig gegen Säure und Lauge sein  4.5 . Veraschungsschalen aus Platin oder Quarz  4.6 . Elektrischer Muffelofen mit Thermostat  4.7 . Exsikkator  4.8 . Vorbereitung des Asbestfilters  2,0 g behandelter Asbest ( 3.2 ) werden in 100 ml Wasser aufgeschwemmt . Unter Anwendung von Vakuum wird über eine Filterplatte , welche mit einem Drahtgeflecht  ( 4.4 ) bedeckt und in den Trichter einer Saugflasche  ( 4.3 ) gelegt wurde , abgesaugt . Das Filtrat wird aufgefangen und nochmals über denselben Filter filtriert . Das letzte Filtrat wird verworfen .  5 . Ausführung  3 g der Probe werden auf 1 mg genau eingewogen und mit 2 g behandelten Asbests ( 3.2 ) in ein Becherglas ( 4.1 ) gebracht . 200 ml Schwefelsäure ( 3.1 ) und einige Tropfen Antischaummittel ( 3.3 ) werden hinzugegeben . Es wird schnell zum Sieden erhitzt und genau 30 Min . gekocht . Um das Volumen konstant zu halten , wird das Becherglas mit einem Kühlsystem bedeckt , z.B . mit einem 500-ml-Rundkolben , durch den Kühlwasser geleitet wird . Das Kochen wird unterbrochen , indem etwa 50 ml kaltes Wasser hinzugefügt werden , und es wird sogleich unter Anwendung von Vakuum durch ein Asbestfilter filtriert , welches vorher wie unter 4.8 beschrieben vorbereitet wird .  Der Rückstand wird fünfmal mit je etwa 100 ml heissem Wasser gewaschen , so daß das Endvolumen des Filtrats ca . 800 ml beträgt . Anschließend wird der Rückstand quantitativ in das Becherglas ( 4.1 ) zurückgegeben , in das vorher eine Porzellanplatte  ( 4.2 ) zur Vermeidung eines Siedeverzugs gelegt wurde . 200 ml Kaliumhydroxidlösung ( 3.4 ) werden hinzugefügt , es wird schnell zum Sieden erhitzt und genau 30 Min . gekocht . Nach dem sofortigen Zusatz von etwa 50 ml kaltem Wasser wird unter Anwendung von Vakuum durch einen neuen Asbestfilter filtriert , welcher vorher wie unter 4.8 beschrieben vorbereitet wurde . Der Rückstand wird mit heissem Wasser bis zur neutralen Reaktion der letzten Waschfluessigkeit  ( Prüfung mit Lackmuspapier ) und danach dreimal mit Aceton ( 3.6 ) gewaschen ( zusammen etwa 100 ml Aceton ) .  Der Rückstand wird quantitativ in eine Veraschungsschale  ( 4.5 ) übergeführt - wenn erforderlich - , aufgelockert und im Trockenschrank bei 130 * C bis zur Gewichtskonstanz getrocknet und nach dem Abkühlen im Exsikkator schnell gewogen . Die Schale mit Inhalt wird nunmehr in dem Muffelofen ( 4.6 ) bei 900 * C 30 Min . geglüht . Nach dem Abkühlen im Exsikkator wird schnell gewogen .  Ein Blindversuch wird nach demselben Verfahren in Abwesenheit der Analysenprobe mit behandeltem Asbest  ( 3.2 ) durchgeführt . Der Gewichtsverlust nach dem Glühen von 6 g Asbest darf nicht mehr als 10 mg betragen .  6 . Berechnung der Ergebnisse  Der Gehalt an Rohfaser in Hundertteilen der Probe wird mit Hilfe folgender Formel berechnet :   ( a - b ) * 100/3  wobei  a = Glühverlust beim Hauptversuch ,  b = Glühverlust beim Blindversuch .  Wiederholbarkeit  Der Unterschied zwischen 2 Parallelbestimmungen darf bei ein und derselben Probe bei Gehalten von weniger als 10 v.H . Rohfaser 0,3 absolut und bei Gehalten von 10 v.H . Rohfaser und mehr 3 v.H . relativ nicht überschreiten .  7 . Bemerkungen  7.1 . Futtermittel , die mehr als 10 v.H . Fett enthalten , werden vor der Analyse mit Diäthyläther entfettet . Hierzu wird die Probe ( 3 g auf 1 mg genau eingewogen ) auf einen wie unter 4.8 beschriebenen Asbestfilter gebracht und dreimal mit je ca . 50 ml Diäthyläther  ( 3.7 ) überschichtet . Der Diäthyläther wird unter Anwendung von Vakuum jedesmal vorsichtig abgesaugt . Die entfettete Probe und der Asbest werden dann quantitativ in ein Becherglas ( 4.1 ) gebracht , und die Analyse wird nach 5 fortgesetzt .  7.2 . Futtermittel , die nicht direkt extrahierbare Fette enthalten , müssen wie unter 7.1 beschrieben entfettet und zusätzlich nach dem Auswaschen des Rückstands der Säurehydrolyse einer erneuten Entfettung unterworfen werden . Dazu wird der Rückstand der Säurehydrolyse dreimal mit Aceton ( 3.6 ) ( zusammen 100 ml ) und anschließend dreimal mit je 50 ml Diäthyläther ( 3.7 ) gewaschen . Danach wird der Rückstand quantitativ in ein Becherglas ( 4.1 ) übergeführt und die Analyse wie unter 5 2 . Absatz fortgeführt ( Behandlung mit Kaliumhydroxidlösung ) .  7.3 . Bei Futtermitteln mit einem hohen Gehalt an Calcium ( über 2 v.H . Ca ) wird die Einwaage ( 3 g auf 1 mg genau abgewogen ) 5 Min . lang mit 100 ml kalter 0,5 N Salzsäure ( 3,5 ) in einem Becherglas ( 4.1 ) vorbehandelt . Es wird sofort filtriert und mit kaltem Wasser ausgewaschen . Dabei dienen die für die Schwefelsäurekochung vorgesehenen 2,0 g Asbest als Filtrierhilfsmittel . Falls Schwierigkeiten bei der Filtration auftreten , wird die Salzsäureaufschwemmung mit Aceton verdünnt . Dann wird weiter wie bei 5 verfahren .  ANLAGE II  1 . BESTIMMUNG VON RETINOL ( VITAMIN A )  1 . Zweck und Anwendungsbereich  Die Methode erlaubt die Bestimmung von Rentinol  ( Vitamin A ) in Futtermitteln , Konzentraten und Vormischungen . Die untere Grenze der Bestimmbarkeit beträgt 10 000 IE/kg für stark pigmentierte Futtermittel und 4 000 IE/kg für alle anderen Produkte ( 1 ) . Je nach dem zu erwartenden Gehalt an Retinol sind die Erzeugnisse in zwei Gruppen zu unterteilen :  Gruppe A : Gehalte von weniger als 200 000 IE/kg ,  Gruppe B : Gehalte von 200 000 IE/kg und mehr .  2 . Prinzip  Die Probe wird in Gegenwart eines Antioxidans oder unter Stickstoff-Atmosphäre mit einer Kaliumhydroxidlösung unter Zusatz von Äthanol heiß hydrolysiert . Die Mischung wird mit 1,2-Dichloräthan extrahiert , der Extrakt wird zur Trockne eingedampft und mit Petroläther aufgenommen . Die Lösung wird über eine Aluminiumoxid-Säule chromatographiert ( bei Erzeugnissen der Gruppe B wird nur in bestimmten Fällen chromatographiert ) . Die Bestimmung von Retinol erfolgt bei Erzeugnissen der Gruppe A durch photometrische Auswertung bei 610 nm nach Entwicklung eines Farbkomplexes gemäß der Carr-Price-Reaktion , bei Erzeugnissen der Gruppe B durch UV-spektrophotometrische Auswertung bei 325 nm .  3 . Reagenzien  a ) zur Analyse von Erzeugnissen der Gruppe A und B  3.1 . Äthanol , 96 v.H . ( V/V )  3.2 . Natriumascorbatlösung 10 v.H . ( G/V ) p.a . oder  3.3 . Stickstoff , gereinigt  3.4 . Kaliumhydroxidlösung 50 v.H . ( G/V ) p.a .  3.5 . 1 N Kaliumhydroxidlösung  3.6 . 0,5 N Kaliumhydroxidlösung  3.7 . 1,2-Dichloräthan p.a .  3.8 . Petroläther , reinst , Siedeintervall 30 - 50 * C . Wenn erforderlich , wie folgt reinigen : 1 000 ml Petroläther werden mit 20-ml-Portionen konzentrierter Schwefelsäure so lange geschüttelt , bis letztere farblos bleibt . Dann wird die Säure entfernt und der Petroläther einmal mit 500 ml Wasser , zweimal mit 250 ml einer 10 v.H . Natriumhydroxidlösung und dreimal mit je 500 ml Wasser nacheinander gewaschen . Man trennt von der wäßrigen Schicht ab , trocknet während ca . 1 Std . über Aktivkohle und wasserfreiem Natriumsulfat , filtriert und destilliert .  3.9 . Aluminiumoxid zur Chromatographie , standardisiert nach Brockmann . Es wird 8 Std . lang bei 750 * C erhitzt , im Exsikkator abgekühlt und in braunen Schliffflaschen aufbewahrt . Vor der weiteren Verwendung zur Chromatographie wird wie folgt angefeuchtet : 10 g Aluminiumoxid und 0,7 ml Wasser werden in eine braune Flasche gegeben , die Flasche wird hermetisch geschlossen , 5 Min . lang im siedenden Wasserbad kräftig geschüttelt und abkühlen gelassen . Die Aktivität des vorbereiteten Aluminiumoxids wird durch Analyse einer bekannten Menge ( 500 IE ) Retinol nach 5.3 und 5.4 überprüft .  3.10 . Aluminiumoxid basisch , Aktivität I  3.11 . Diäthyläther , reinst . Zur Entfernung von Peroxiden und Wasserspuren auf einer basischen Aluminiumoxid-Säule ( 3.10 ) gereinigt ( 25 g Aluminiumoxid für etwa 250 ml Diäthyläther )  3.12 . Petroläthermischungen ( 3.8 ) mit 4 , 8 , 12 , 16 und 20 v.H . ( V/V )-Diäthyläther ( 3.11 )  3.13 . Natriumsulfidlösung , aus Natriumsulfid p.a . , 0,5 Mol in 70 v.H . ( V/V ) Glycerin  b ) nur zur Analyse von Erzeugnissen der Gruppe A  3.14 . Benzol p.a . , kristallisierbar  3.15 . Chloroform p.a . Zur Entfernung von Äthanol , Phosgen und Wasserspuren wird auf einer basischen Aluminiumoxid-Säule ( 3.10 ) gereinigt ( 50 g Aluminiumoxid für etwa 200 ml Chloroform ; es empfiehlt sich , die ersten 50 ml des Eluats nochmals über dieselbe Säule zu reinigen )  3.16 . Carr-Price-Reagenz : ca . 25 g Antimontrichlorid p.a . ( im Exsikkatot aufbewahrt ) werden mit 100 ml Chloroform ( 3.15 ) bis zur Sättigung der Lösung geschüttelt . Ein kleiner Bodensatz von Antimontrichlorid-Kristallen stört nicht . 2 ml Essigsäureanhydrid p.a . werden hinzugegeben und das Reagenz in brauner Schliffstopfenflasche im Eisschrank aufbewahrt . Es ist mehrere Wochen haltbar .  3.17 . Retinol-Standard , spektrophotometrisch geprüft  c ) nur zur Analyse von Erzeugnissen der Gruppe B  3.18 . Isopropanol , zur Chromatographie .  4 . Geräte  4.1 . Wasserbad  4.2 . Vakuum-Rotations-Verdampfer mit Rundkolben von verschiedenem Inhalt  4.3 . Chromatographieröhre aus Glas ( Länge : 300 mm , innerer Durchmesser : ca . 13 mm )  4.4 . Spektralphotometer mit Kuevetten von 10 mm Schichtdicke ( aus Quarz für die Messung im UV-Bereich )  4.5 . UV-Lampe , 365 mm .  5 . Ausführung  NB . : Alle Arbeiten werden bei gedämpftem Tageslicht , gegebenenfalls unter Verwendung von braunen Glasgefässen , durchgeführt .  5.1 . Einwaage  Je nach dem vermuteten Gehalt an Retinol wird eine Menge der fein zerkleinerten Probe wie folgt eingewogen : bei Konzentraten ( Gehalte über 20 000 IE/g ) : 0,1 bis 1,0 g ; bei Vormischungen ( Gehalte zwischen 400 und 20 000 IE/g ) : 3,0 bis 5,0 g ;  bei Mineralmischungen : 10 bis 20 g ;  bei Erzeugnissen der Gruppe A : 30 g .  Die Einwaage wird sofort in einen 500-ml-Rundschliffkolben umgefuellt .  5.2 . Hydrolyse und Extraktion ( 2 )  40 ml Äthanol ( 3.1 ) , 2 ml Natriumascorbatlösung  ( 3.2 ) ( 3 ) , 10 ml Kaliumhydroxidlösung ( 3.4 ) und 2 ml Natriumsulfidlösung ( 3.13 ) werden nacheinander der eingewogenen Probe zugegeben .  Die Mischung wird bei 70 - 80 * C 30 Min . lang am Rückflußkühler erhitzt und anschließend unter fließendem Wasser abgekühlt . Darauf werden 50 ml Äthanol ( 3.1 ) und exakt mit einer Pipette 100 ml 1,2-Dichloräthan  ( 3.7 ) zugegeben . Die Mischung wird kräftig durchgeschüttelt und die überstehende Flüssigkeit in einen Scheidetrichter dekantiert . Man gibt 150 ml Kaliumhydroxidlösung ( 3.5 ) zu , schüttelt während 10 Sek . und wartet die Schichtentrennung ab . Die Dichloräthanphase ( Unterschicht ) wird in einen Scheidetrichter abgelassen , man gibt 40 ml Kaliumhydroxidlösung ( 3.6 ) zu , schüttelt während 10 Sek . und wartet die Schichtentrennung ab . Die Dichloräthanphase wird in einen Scheidetrichter abgelassen und dann 6 - bis 8mal mit 40-ml-Portionen Wasser bis zur Alkalifreiheit ( Phenolphthaleinprobe ) gewaschen . Die Dichloräthanphase wird aufgefangen und die Wasserspuren werden mit Filterpapierschnitzeln entfernt .  Ein aliquoter Teil der Dichloräthanlösung wird bei 40 * C Wassertemperatur im Vakuum zur Trockne eingeengt und der Rückstand schnell in 5 ml Petroläther  ( 3.8 ) aufgenommen .  Bei Erzeugnissen der Gruppe A wird , wie unter 5.3.1 angegeben , chromatographiert .  Bei Erzeugnissen der Gruppe B wird die Lösung in einen 50-ml-Meßkolben gegeben , mit Petroläther  ( 3.8 ) zur Marke aufgefuellt und gemischt . Dann wird die Extinktion wie unter 5.4.2 angegeben gemessen .  5.3 . Chromatographie  5.3.1 . Erzeugnisse der Gruppe A  Ein Chromatographierohr ( 4.3 ) wird bis zu einer Höhe von 200 mm mit Aluminiumoxid ( 3.9 ) , welches mit Petroläther ( 3.8 ) befeuchtet wurde , gefuellt . Die unter 5.2 erhaltene Lösung wird auf die Säule gegeben , dann werden sofort 20 ml Petroläther ( 3.8 ) hinzugefügt . Anschließend wird das Chromatogramm nacheinander mit je 10-ml-Portionen der Petroläthermischungen mit 4 , 8 , 12 , 16 und 20 v.H . Diäthyläther ( 3.12 ) , unter schwachem Vakuum oder auch Überdruck eluiert . Die Tropfgeschwindigkeit wird auf 2 bis 3 Tropfen/Sek . einreguliert .  Die Carotin-Fraktion wird im Durchlaufchromatogramm zuerst erhalten ( 4 ) . Die Retinol-Fraktion steigt im allgemeinen mit der 20 v.H . Diäthyläther-Petroläthermischung  ( 3.12 ) ab . Die Elution wird im UV-Licht  ( kurzes Beleuchten mit einer Hg-Lampe ) kontrolliert . Der fluoreszierende Retinol-Horizont trennt sich dabei deutlich von den nachfolgenden gelb gefärbten Xanthophyllbändern . Die Retinol-Fraktion des Eluats wird in einer Vorlage aufgefangen .  5.3.2 . Erzeugnisse der Gruppe B  Die Chromatographie muß nur durchgeführt werden , wenn die Messungen der unter 5.4.2 erwähnten Extinktion nicht nach 5.4.2 vorschriftsmässig sind .  Wenn die Chromatographie erforderlich ist , wird ein aliquoter Teil der unter 5.2 erhaltenen Petrolätherlösung , der etwa 500 IE Retinol enthält , auf die Chromatographiesäule gegeben . Die Chromatographie wird wie unter 5.3.1 beschrieben fortgeführt .  5.4 . Messung der Extinktion  5.4.1 . Erzeugnisse der Gruppe A  Das unter 5.3.1 erhaltene Retinol-Eluat wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und in 2 ml Benzol ( 3.14 ) aufgenommen . 0,3 ml davon werden mit 3 ml Carr-Price-Reagenz ( 3.16 ) versetzt . Es entwickelt sich eine blaue Färbung , deren Extinktion im Spektralphotometer bei 610 nm , genau 30 Sek . nach Reaktionsbeginn , gemessen wird . Die Berechnung des Vitamin-A-Gehalts erfolgt über eine Eichkurve , die mit Benzollösungen von Retinol-Standard in steigenden Konzentrationen unter Zugabe von Carr-Price-Reagenz  ( 2 bis 16 ) IE Retinol-Standard ( 3.17 ) pro 0,3 ml Benzol ( 3.14 ) + 3 ml Carr-Price-Reagenz ( 3.16 ) aufgestellt wird . Die Eichkurve ist mit dem Standard und dem frisch bereiteten Carr-Price-Reagenz regelmässig und in kurzen Zeitabständen zu überprüfen .  5.4.2 . Erzeugnisse der Gruppe B  Ein aliquoter Teil der unter 5.2 erhaltenen Petrolätherlösung , der etwa 200 IE Retinol enthält , wird im Vakuum zur Trockne eingeengt und in 25 ml Isopropanol ( 3.18 ) aufgenommen . Die Extinktion wird im Spektralphotometer bei 325 , 310 und 334 nm gemessen . Das Absorptionsmaximum liegt bei 325 nm . Der Retinol-Gehalt der Lösung berechnet sich aus :  E325 * 18,30 = IE Retinol/ml  Das Verhältnis der Extinktionen  E310 : E325 und E334 : E325  muß jedoch den Wert 6 : 7 = 0,857 erreichen .  Weicht eines dieser Verhältnisse stärker ab  ( < 0,830 oder > 0,880 ) , muß der Messung der Extinktionen eine Chromatographie nach dem Verfahren 5.3.2 vorausgehen .  Zeigt die nach der Chromatographie vorgenommene Messung der Extinktionen an , daß die obengenannten Verhältnisse immer noch vom Wert 0,857 stärker abweichen ( < 0,830 oder > 0,880 ) , dann ist die Bestimmung nach dem für die Erzeugnisse der Gruppe A vorgeschriebenen Verfahren durchzuführen .  6 . Berechnung der Ergebnisse  Der Gehalt an Retinol der Probe wird unter Berücksichtigung des Gewichts der Einwaage und der Verdünnungsverhältnisse im Analysengang berechnet . Die Ergebnisse werden in IE Retinol pro kg ausgedrückt .  Wiederholbarkeit  Der Unterschied zwischen zwei Parallelbestimmungen darf bei ein und derselben Probe   - bei Gehalten von weniger als 75 000 IE/kg 20 v.H . relativ ,   - bei Gehalten von 75 000 bis 150 000 IE/kg 15 000 IE absolut ,   - bei Gehalten von 150 000 bis 250 000 IE/kg 10 v.H . relativ ,   - bei Gehalten von 250 000 bis 500 000 IE/kg 25 000 IE absolut ,   - bei Gehalten von mehr als 500 000 IE/kg 5 v.H . relativ  nicht überschreiten .  2 . BESTIMMUNG VON THIAMIN ( ANEURIN , VITAMIN B1 )  1 . Zweck und Anwendungsbereich  Die Methode erlaubt die Bestimmung von Thiamin  ( Aneurin , Vitamin B1 ) in Futtermitteln , Konzentraten und Vormischungen . Die untere Grenze der Bestimmbarkeit beträgt 5 mg/kg .  2 . Prinzip  Die Probe wird mit verdünnter Schwefelsäure heiß behandelt und enzymatisch hydrolysiert . Die Lösung wird alkalisch oxydiert , und das erhaltene Thiochrom wird mit Isobutanol extrahiert und fluorinetrisch bestimmt .  3 . Reagenzien  3.1 . Thiamin-Standardlösung 100 mg/ml : 112,3 mg reinstes , im Vakuum bis zur Gewichtskonstanz getrocknetes Thiaminhydrochlorid werden in 1 000 ml 0,2 N Schwefelsäure  ( 3.2 ) gelöst . Kühl und dunkel aufbewahrt hält sich diese Lösung einen Monat .  3.2 . 0,2 N Schwefelsäure  3.3 . Natriumdisulfit , rein ( Na2S2O5 )  3.4 . Kaliumhexacyanoferrat(III)-Lösung 20 v.H .  ( G/V ) p.a .  3.5 . Kaliumhydroxidlösung 25 v.H . ( G/V ) p.a .  3.6 . Oxidationsmischung : 2 ml Kaliumhexacyanoferrat(III)-Lösung ( 3.4 ) werden mit 18 ml Kaliumhydroxidlösung ( 3.5 ) gemischt . Diese Mischung hält sich höchstens 4 Std .  3.7 . Isobutanol p.a .  3.8 . 2,5 N Natriumacetatlösung p.a .  3.9 . Multienzympräparat aus Protease , Phosphatase und Amylase ( z.B . " Clarase " )  3.10 . Äthanol 96 v.H . ( V/V ) .  4 . Geräte  4.1 . Wasserbad  4.2 . Zentrifuge ( 3 500 U/Min . ) , dazu eingeschliffene Gläser mit Schliffstopfen , 30 bis 50 ml Inhalt  4.3 . Fluorimeter .  5 . Ausführung  5.1 . Enzymatische Hydrolyse  In zwei 250-ml-Meßkolben A und B werden gleiche Mengen der fein zerkleinerten Probe , die etwa 100 mg Thiamin enthalten , gegeben und 125 ml Schwefelsäure ( 3.2 ) hinzugefügt . In den Kolben A wird ausserdem 1,0 ml der Standardlösung ( 3.1 ) pipettiert  ( interner Standard ) .  Die Kolben werden kräftig geschüttelt , 15 Min . lang in einem siedenden Wasserbad unter gelegentlichem Schürteln erwärmt und auf etwa 45 * C abgekühlt . Dann werden jedem Kolben 20 ml Natriumacetatlösung ( 3.8 ) und 0,5 g Multienzympräparat ( 3.9 ) zugesetzt , und es wird 20 Min . lang bei Raumtemperatur stehen gelassen . Man fügt 20 ml Natriumacetatlösung ( 3.8 ) zu , fuellt mit Wasser zur Marke auf und filtriert . Die Filtrate A und B werden aufgefangen , nachdem die ersten 15 ml verworfen wurden . Dann werden die folgenden Lösungen vorbereitet :  5.1.1 . Blindprobenlösung T  5 ml des Filtrats A und ca . 10 mg Natriumdisulfit  ( 3.3 ) werden in ein Zentrifugenglas ( 4.2 ) gegeben . Das Glas wird 15 Min . lang in ein siedendes Wasserbad gestellt und anschließend auf Raumtemperatur abgekühlt .  5.1.2 . Lösungen A ( interner Standard ) und B ( Probe )  Es werden 5 ml des Filtrats A in ein Zentrifugenglas  ( 4.2 ) und 5 ml des Filtrats B in ein anderes Zentrifugenglas ( 4.2 ) gegeben .  5.2 . Oxydation  Den Lösungen T , A und B werden 5 ml Oxydationsmischung  ( 3.6 ) und - eine Minute danach - 10 ml Isobutanol  ( 3.7 ) zugesetzt . Die Gläser werden verschlossen , 5 Sek . kräftig geschüttelt und nach etwa einer Minute zur Schichtentrennung zentrifugiert . Jedem Zentrifugenglas werden 5 ml der oben schwimmenden Isobutanol-Phase entnommen und in einen 25-ml-Meßkolben pipettiert . Die Kolben werden mit Äthanol ( 3.10 ) zur Marke aufgefuellt und es wird gemischt ( Extrakte T , A und B ) .  5.3 . Messung der Fluoreszenzintensität  Die fluorimetrischen Messungen sind bei der Wellenlänge vorzunehmen , bei der das Gerat für die Thiochromfluoreszenz den grössten Ausschlag zeigt . Die Anregung erfolgt bei 365 nm .  Die Fluoreszenzintensität der Extrakte A und B wird gemessen , indem der Nullwert des Fluorimeters auf die Fluoreszenzintensität des Extrakts T eingestellt wird .  6 . Berechnung der Ergebnisse  Der Gehalt an Thiamin in mg/kg der Probe wird nach folgender Formel berechnet :  d * b /( a - b ) c  Es bedeuten :  a = Fluoreszenzintensität des Extrakts A  ( interner Standard ) ,  b = Fluoreszenzintensität des Extrakts B  ( Probe ) ,  c = Gewicht der Analysenprobe in g ,  d = bei der Analysenprobe zugesetzte Thiaminmenge in mg ( interner Standard ) .  Wiederholbarkeit  Der Unterschied zwischen zwei Parallelbestimmungen darf bei ein und derselben Probe   - bei Gehalten von weniger als 500 ppm Thiamin 10 v.H . relativ und - bei Gehalten von 500 ppm Thiamin und mehr 5 v.H . relativ  nicht überschreiten .  3 . BESTIMMUNG VON ASCORBINSÄURE UND DEHYDROASCORBINSÄURE  ( VITAMIN C )  1 . Zweck und Anwendungsbereich  Die Methode erlaubt die Bestimmung der Summe von Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure ( Vitamin C ) in Futtermitteln , Konzentraten und Vormischungen . Die untere Grenze der Bestimmbarkeit beträgt 5 mg/kg . Je nach dem zu erwartenden Gehalt an Vitamin C sind die Erzeugnisse in zwei Gruppen zu unterteilen :  Gruppe A : Gehalte von weniger als 10 g/kg  Gruppe B : Gehalte von 10 g/kg und mehr .  2 . Prinzip  Die Probe wird in verdünnter Metaphosphorsäure suspendiert und mit Chloroform extrahiert . Die wäßrige Phase wird zur Umwandlung der Ascorbinsäure in Dehydroascorbinsäure mit einer 2,6-Dichlorphenolindophenollösung behandelt und danach mit einer 2,4-Dinitrophenylhydrazinlösung versetzt . Das entstehende Hydrazon wird mit einem Gemisch von Äthylacetat , Eisessig und Aceton extrahiert und der Extrakt über eine Kieselgelsäule chromatographiert . Das Eluat wird zur Trockne verdampft und der Rückstand mit verdünnter Schwefelsäure aufgenommen . Die Extinktion dieser Lösung wird bei 509 nm photometrisch bestimmt .  Bei Erzeugnissen der Gruppe A wird das aus der Chromatographiesäule gewonnene Eluat ausserdem zur Abtrennung des Hydrazons der Dünnschichtchromatographie unterworfen .  3 . Reagenzien  3.1 . L-Ascorbinsäure-Standardlösung 0,05 v.H . : 50 mg L-Ascorbinsäure p.a . werden in ca . 20 ml Metaphosphorsäurelösung ( 3.2 ) gelöst und mit Wasser auf 100 ml aufgefuellt . Die Lösung ist kurz vor Gebrauch herzustellen .  3.2 . Metaphosphorsäurelösung 10 v.H . ( G/V ) : 200 g Metaphosphorsäure p.a . , im Mörser zerkleinert , werden in Wasser gelöst und auf 2 000 ml mit Wasser aufgefuellt . Diese Lösung ist bei 4 * C aufzubewahren . Sie ist eine Woche lang haltbar .  3.3 . Chloroform p.a .  3.4 . 2,6-Dichlorphenolindophenollösung 0,5 v.H .  ( G/V ) aus 2,6-Dichlorphenolindophenol p.a . Kurz vor Gebrauch herzustellen .  3.5 . Filterflockenmasse ( S . und S . Nr . 121 oder gleichwertiges Material )  3.6 . 2,4-Dinitrophenylhydrazinlösung 2 v.H . ( G/V ) : 2 g 2,4-Dinitrophenylhydrazin p.a . werden in 100 ml verdünnter Schwefelsäure ( 25 ml Schwefelsäure p.a . , D : 1,84 , auf 100 ml mit Wasser aufgefuellt ) gelöst . Im Kühlschrank ist diese Lösung eine Woche lang haltbar .  3.7 . Stickstoff oder  3.8 . Kohlendioxid  3.9 . Gemisch von Äthylacetat p.a./Eisessig p.a./Aceton p.a . : 96/2/2 in Vol .  3.10 . Gemisch von Dichlormethan p.a./Eisessig p.a . : 97/3 in Vol .  3.11 . Kieselgel , granuliert , Teilchengrösse : 0,05 bis 0,2 mm  3.12 . Kieselgel H , nach Stahl , für Dünnschichtchromatographie  3.13 . Verdünnte Schwefelsäure : 105 ml Wasser werden in einem Meßkolben mit Schwefelsäure p.a . , D : 1,84 , auf 200 ml aufgefuellt  3.14 . Laufmittel für Dünnschichtchromatographie : 75 ml Diäthyläther p.a . werden mit 25 ml Äthylacetat p.a . und 4,0 ml Eisessig 96 v.H . ( G/V ) p.a . gemischt . Nach 2 - bis 3maligem Gebrauch frisch zubereiten .  4 . Geräte  4.1 . Ultrathermostat auf 20 * C eingestellt  4.2 . Zentrifuge ( 3 500 U/Min . ) , dazu Gläser mit eingeschliffenem Stopfen , 40 bis 50 ml Inhalt  4.3 . Vakuum-Rotationsverdampfer , mit 250-ml-Rundkolben  4.4 . Chromatographieröhre , aus Glas ( Länge : 100 mm , innerer Durchmesser : 20 mm ) , mit Fritte  ( z.B . Allihn'sches Rohr )  4.5 . Spektralphotometer oder Filterphotometer mit 10 mm Kuevetten  4.6 . Apparatur zur Dünnschichtchromatographie , mit Kieselgel(3.12)-Platten , Schichtdicke : 0,5 bis 0,6 mm . ( Fertigplatten können verwendet werden ) . Die Platten werden während 2 1/2 bis 3 Std . im Trockenschrank bei 120 - 130 * C getrocknet und nach dem Abkühlen mindestens 24 Std . vor dem Gebrauch im Exsikkator aufbewahrt .  4.7 . Trockenschrank , auf 120 - 130 * C geregelt .  5 . Ausführung  5.1 . Extraktion  Zwei 250-ml-Meßkolben mit Schliff , A und B , werden mit gleichen Mengen der fein zerkleinerten Probe , die etwa 200 mg Vitamin C enthalten , beschickt . In den Kolben A werden ausserdem 0,4 ml der Standardlösung ( 3.1 ) pipettiert , und es wird durch leichtes Schütteln gemischt ( interner Standard ) . Dann werden bei 4 * C in jeden Kolben 30 ml Chloroform ( 3.3 ) und 25 ml Metaphosphorsäurelösung ( 3.2 ) zugegeben , kurz umgeschüttelt und 10 bis 15 Min . lang stehen gelassen . Nach Zusatz von 25 ml Wasser werden die Kolben verschlossen , 10 Sek . kräftig durchgeschüttelt und 10 bis 15 Min . lang im Ultrathermostat ( 4.1 ) belassen . Anschließend wird zentrifugiert , um die wäßrige Phase von der Chloroform-Phase zu trennen . Die wäßrigen Extrakte A  ( interner Standard ) und B werden wie folgt weiterverarbeitet .  5.2 . Oxydation  40 ml der nach 5.1 erhaltenen etwas trüben überstehenden Lösung werden abpipettiert , in ein Reagenzglas mit Schliffstopfen , das 0,5 bis 1 ml 2,6-Dichlorphenolindophenollösung ( 3.4 ) enthält , übergeführt und gemischt . Die entstehende rote Färbung muß mindestens 15 Min . lang bestehen bleiben . Dann werden ca . 300 mg Filterflockenmasse ( 3.5 ) hinzugefügt , es wird geschüttelt und durch ein trockenes Faltenfilter filtriert . Das Filtrat braucht nicht klar zu sein .  5.3 . Reaktion mit 2,4-Dinitrophenylhydrazin und Extraktion des Hydrazons  10 ml des nach 5.2 erhaltenen Filtrats werden abpipettiert , in ein Zentrifugenglas ( 4.2 ) mit 2 ml 2,4-Dinitrophenylhydrazinlösung ( 3.6 ) gegeben und gemischt . Das Glas wird kurz mit Stickstoff  ( 3.7 ) oder Kohlendioxid ( 3.8 ) gespült , verschlossen und 15 Std . ( über Nacht ) im Ultrathermostaten ( 4.1 ) belassen . Dann werden 3 ml Wasser , 20 ml des Äthylacetat/Eisessig/Aceton-Gemischs ( 3.9 ) und ca . 800 mg Filterflockenmasse ( 3.5 ) zugegeben . Das Glas wird verschlossen , während 30 Sek . kräftig durchgeschüttelt und zentrifugiert . Von der klaren oberen Phase werden 15 ml in einen Kolben pipettiert und am Rotationsverdampfer ( 4.3 ) unter Vakuum eingedampft , bis ein öliger Rückstand verbleibt . Der Rückstand wird mit 2 ml des Äthylacetat/Eissesig/Aceton-Gemischs  ( 3.9 ) aufgenommen und bei 50 * C vollständig aufgelöst . Nach dem Abkühlen werden 10 ml des Dichlormethan/Eisessig-Gemischs ( 3.10 ) zugesetzt und es wird gemischt .  5.4 . Säulenchromatographie  Ein Chromatographierohr ( 4.4 ) wird 30 mm hoch mit dem Dichlormethan/Eisessig-Gemisch ( 3.10 ) gefuellt . 5 g Kieselgel ( 3.11 ) werden durch kräftiges Schütteln in 30 ml des Dichlormethan/Eisessig-Gemischs ( 3.10 ) suspendiert und in das Rohr eingegossen . Man lässt absetzen und packt anschließend mit leichtem Stickstoff(3.7)-Druck dichter .  Man gibt die nach 5.3 erhaltene Lösung auf die Säule , spült mit etwas Dichlormethan/Eisessig-Gemisch ( 3.10 ) in die Säule hinein , fuellt das Rohr mit demselben Gemisch ( 3.10 ) auf und wäscht so lange aus ( 3 bis 4 Füllungen von ca . 5 ml ) , bis das Eluat farblos abläuft . Die gelbgefärbte Fraktion des Eluats wird verworfen .  Nun wird der rötliche Säulenkopf mit dem Äthylacetat/Eisessig/Aceton-Gemisch ( 3.9 ) eluiert und das erhaltene Eluat zur Trockne eingedampft .  5.4.1 . Bei Erzeugnissen der Gruppe A ( Gehalte an Vitamin C weniger als 10 g/kg ) wird der Rückstand mit 2,0 ml des Äthylacetat/Eisessig/Aceton-Gemischs ( 3.9 ) aufgenommen und unmittelbar wie unter 5,5 angegeben auf einer Dünnschichtplatte chromatographiert .  5.4.2 . Bei Erzeugnissen der Gruppe B ( Geholte an Vitamin C von 10 g/kg und mehr ) wird der Rückstand mit 4,0 ml verdünnter Schwefelsäure ( 3.13 ) aufgenommen und bis zur vollständigen Lösung kräftig geschüttelt . Die Extinktion dieser Lösung wird wie unter 5.6 angegeben gemessen .  5.5 . Dünnschichtchromatographie  Das nachfolgende Verfahren wird doppelt ausgeführt . Man trägt 0,5 ml der nach 5.4.1 erhaltenen Lösung auf die Platte ( 4.6 ) auf . Man chromatographiert bei Kammersättigung mit dem Laufminel ( 3.14 ) während mindestens 20 Min . , bis zur guten Abtrennung der rosa gefärbten Zone des Hydrazons , und lässt an der Luft trocknen . Die rosa Zone wird abgegrenzt , mittels eines Spatels abgekratzt und quantitativ in ein Chromatographierohr  ( 4.4 ) gebracht .  Man eluiert nacheinander einmal mit 2 ml und dann zweimal mit 1,5 ml des Äthylacetat/Eisessig/Aceton-Gemischs  ( 3.9 ) und presst in einen kleinen Rundkolben ab  ( das letzte Eluat soll farblos sein ) . Man dampft bis zur Trockne , nimmt den öligen Rückstand in 4,0 ml verdünnte Schwefelsäure ( 3.13 ) auf , schüttelt kräftig durch , um den Rückstand vollständig aufzulösen , und misst wie folgt die Extinktion .  5.6 . Messung der Extinktion  Die Extinktion wird 20 bis 30 Min . nach Zugabe der Schwefelsäure bei 509 nm photometrisch bestimmt . Die Messungen werden im Vergleich mit verdünnter Schwefelsäure  ( 3.13 ) ausgeführt .  5.7 . Blindversuch  Ein Blindversuch wird unter den gleichen Bedingungen ohne Probe durchgeführt .  6 . Berechnung der Ergebnisse  Der Gehalt an Vitamin C der Probe in g/kg wird nach folgender Formel berechnet :   ( c - a ) * 2   ( b - c ) * 10d  wobei :  a = Extinktion des Blindwerts ,  b = Extinktion der internen Standardlösung ,  c = Extinktion der Probelösung ,  d = Gewicht der Analysenprobe ing .  Wiederholbarkeit  Der Unterschied zwischen zwei Parallelbestimmungen darf bei ein und derselben Probe   - bei Gehalten von weniger als 10 g Vitamin C pro kg 10 v.H . relativ und   - bei Gehalten von 10 g Vitamin C pro kg und mehr 5 v.H . relativ  nicht überschreiten .  ( 1 ) 1 IE = 0,3 mg Retinol .  ( 2 ) Bei Milchaustauschfutter oder bei anderen zur Klumpenbildung oder Quellung neigenden Erzeugnissen sind die unter 5.2 erster und zweiter Absatz aufgeführten Reagenzienmengen zu verdoppeln .  ( 3 ) Der Zusatz von Natriumascorbat kann unterbleiben , wenn die Hydrolyse unter Stichstoff-Atmosphare erfolgt .  ( 4 ) Der Carotingehalt kann durch Extinktionsermittlung bei 450 nm bestimmt werden E 1 % /1 cm = 2 600 .


Avis juridique important

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31982L0891

Sechste Richtlinie 82/891/EWG des Rates vom 17. Dezember 1982 gemäß Artikel 54 Absatz 3 Buchstabe g) des Vertrages betreffend die Spaltung von Aktiengesellschaften

Amtsblatt Nr. L 378 vom 31/12/1982 S. 0047 - 0054 Finnische Sonderausgabe: Kapitel 17 Band 1 S. 0041  Spanische Sonderausgabe: Kapitel 17 Band 1 S. 0111  Schwedische Sonderausgabe: Kapitel 17 Band 1 S. 0041  Portugiesische Sonderausgabe: Kapitel 17 Band 1 S. 0111

SECHSTE RICHTLINIE DES RATES vom 17. Dezember 1982 gemäß Artikel 54 Absatz 3 Buchstabe g) des Vertrages betreffend die Spaltung von Aktiengesellschaften (82/891/EWG)  DER RAT DER EUROPÄISCHEN GEMEINSCHAFTEN -  gestützt auf den Vertrag zur Gründung der Europäischen Wirtschaftsgemeinschaft, insbesondere auf Artikel 54 Absatz 3 Buchstabe g),  auf Vorschlag der Kommission (1),  nach Stellungnahme des Europäischen Parlaments (2),  nach Stellungnahme des Wirtschafts- und Sozialausschusses (3),  in Erwägung nachstehender Gründe:  Die Koordinierung, die Artikel 54 Absatz 3 Buchstabe g) und das Allgemeine Programm zur Aufhebung der Beschränkungen der Niederlassungsfreiheit (4) vorsehen, wurde mit der Richtlinie 68/151/EWG (5) begonnen.  Diese Koordinierung wurde für die Gründung der Aktiengesellschaft sowie die Erhaltung und Änderung ihres Kapitals durch die Richtlinie 77/91/EWG (6), für die Jahresabschlüsse von Gesellschaften bestimmter Rechtsformen durch die Richtlinie 78/660/EWG (7) und für die Verschmelzung von Aktiengesellschaften durch die Richtlinie 78/855/EWG (8) fortgesetzt.  Die Richtlinie 78/855/EWG hat nur die Verschmelzung von Aktiengesellschaften und einige gleichgestellte Vorgänge geregelt. Der Vorschlag der Kommission zielte aber auch auf die Spaltung ab. Das Europäische Parlament und der Wirtschafts- und Sozialausschuß befürworten auch eine Regelung dieses Vorgangs.  Angesichts der Verwandschaft zwischen Verschmelzung und Spaltung kann eine etwaige Umgehung der durch die Richtlinie 78/855/EWG bezueglich der Verschmelzung eingeräumten Garantien nur dadurch verhindert werden, daß für den Fall der Spaltung ein gleichwertiger Schutz vorgesehen wird.  Der Schutz der Interessen von Gesellschaftern und Dritten erfordert es, die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten über die Spaltung von Aktiengesellschaften zu koordinieren, sofern die Mitgliedstaaten die Spaltung zulassen.  Im Rahmen der Koordinierung ist es besonders wichtig, die Aktionäre der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften angemessen und so objektiv wie möglich zu unterrichten und ihre Rechte in geeigneter Weise zu schützen.  Die Wahrung von Ansprüchen der Arbeitnehmer beim Übergang von Unternehmen, Betrieben oder Betriebsteilen ist zur Zeit durch die Richtlinie 77/187/EWG (9) geregelt.  Die Gläubiger einschließlich der Inhaber von Schuldverschreibungen sowie die Inhaber anderer Rechte der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften müssen dagegen geschützt werden, daß sie durch die Spaltung Schaden erleiden.  Die Offenlegung, wie sie die Richtlinie 68/151/EWG vorsieht, muß auf die Maßnahmen zur Durchführung der Spaltung ausgedehnt werden, damit hierüber auch Dritte ausreichend unterrichtet werden.  Ferner ist es notwendig, daß die Garantien, die Gesellschaftern und Dritten bei der Durchführung der Spaltung gewährt werden, auch für bestimmte andere rechtliche Vorgänge gelten, die in wesentlichen Punkten ähnliche Merkmale wie die Spaltung aufweisen, um Umgehungen des Schutzes zu vermeiden.  Schließlich müssen, um die Rechtssicherheit in den Beziehungen zwischen den an der Spaltung beteiligten Gesellschaften, zwischen diesen und Dritten sowie unter den Aktionären zu gewährleisten, die Fälle der Nichtigkeit der Spaltung beschränkt werden ; ausserdem müssen der Grundsatz, daß (1) ABl. Nr. C 89 vom 14.7.1970, S. 20. (2) ABl. Nr. C 129 vom 11.12.1972, S. 50, und ABl. Nr. C 95 vom 28.4.1975, S. 12. (3) ABl. Nr. C 88 vom 6.9.1971, S. 18. (4) ABl. Nr. 2 vom 15.1.1962, S. 36/62. (5) ABl. Nr. L 65 vom 14.3.1968, S. 8. (6) ABl. Nr. L 26 vom 31.1.1977, S. 1. (7) ABl. Nr. L 222 vom 14.8.1978, S. 11. (8) ABl. Nr. L 295 vom 20.10.1978, S. 36. (9) ABl. Nr. L 61 vom 5.3.1977, S. 26.   Mängeln der Spaltung soweit wie möglich abgeholfen werden soll, und eine kurze Frist zur Geltendmachung der Nichtigkeit festgelegt werden -  HAT FOLGENDE RICHTLINIE ERLASSEN:    Artikel 1 (1) Gestatten die Mitgliedstaaten für die in Artikel 1 Absatz 1 der Richtlinie 78/855/EWG genannten, ihrem Recht unterliegenden Gesellschaften die in Artikel 2 der vorliegenden Richtlinie beschriebene Spaltung durch Übernahme, so unterwerfen sie diesen Vorgang den Vorschriften des Kapitels I der vorliegenden Richtlinie.  (2) Gestatten die Mitgliedstaaten für die in Absatz 1 bezeichneten Gesellschaften die in Artikel 21 definierte Spaltung durch Gründung neuer Gesellschaften, so unterwerfen sie diesen Vorgang den Vorschriften des Kapitels II.  (3) Gestatten die Mitgliedstaaten für die in Absatz 1 bezeichneten Gesellschaften den Vorgang, durch den eine Spaltung durch Übernahme im Sinne von Artikel 2 Absatz 1 mit einer Spaltung durch Gründung einer oder mehrerer neuer Gesellschaften im Sinne von Artikel 21 Absatz 1 verbunden wird, so unterwerfen sie diesen Vorgang den Vorschriften des Kapitels I und des Artikels 22.  (4) Artikel 1 Absätze 2 und 3 der Richtlinie 78/855/EWG ist anzuwenden.   KAPITEL I Spaltung durch Übernahme  Artikel 2 (1) Im Sinne dieser Richtlinie ist die Spaltung durch Übernahme der Vorgang, durch den eine Gesellschaft ihr gesamtes Aktiv- und Passivvermögen im Wege der Auflösung ohne Abwicklung auf mehrere Gesellschaften überträgt, und zwar gegen Gewährung von Aktien der Gesellschaften, denen die sich aus der Spaltung ergebenden Einlagen zugute kommen, - im folgenden "begünstigte Gesellschaften" genannt - an die Aktionäre der gespaltenen Gesellschaft und gegebenenfalls Gewährung einer baren Zuzahlung, die den zehnten Teil des Nennbetrags oder, wenn ein Nennbetrag nicht vorhanden ist, des rechnerischen Wertes der gewährten Aktien nicht übersteigt.  (2) Artikel 3 Absatz 2 der Richtlinie 78/855/EWG ist anzuwenden.  (3) Soweit in dieser Richtlinie auf die Richtlinie 78/855/EWG verwiesen wird, bezeichnen der Ausdruck "sich verschmelzende Gesellschaften" die an der Spaltung beteiligten Gesellschaften, der Ausdruck "übertragende Gesellschaft" die gespaltene Gesellschaft, der Ausdruck "übernehmende Gesellschaft" jede begünstigte Gesellschaft und der Ausdruck "Verschmelzungsplan" den Spaltungsplan.   Artikel 3 (1) Die Verwaltungs- oder Leistungsorgane der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften erstellen einen schriftlichen Spaltungsplan.  (2) Der Spaltungsplan muß mindestens folgende Angaben enthalten:    a) die Rechtsform, die Firma und den Sitz der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften,       b) das Umtauschverhältnis der Aktien und gegebenenfalls die Höhe der baren Zuzahlung,       c) die Einzelheiten hinsichtlich der Übertragung der Aktien der begünstigten Gesellschaften,       d) den Zeitpunkt, von dem an diese Aktien das Recht auf Teilnahme am Gewinn gewähren, sowie alle Besonderheiten in bezug auf dieses Recht,       e) den Zeitpunkt, von dem an die Handlungen der gespaltenen Gesellschaft unter dem Gesichtspunkt der Rechnungslegung als für Rechnung der einen oder anderen begünstigten Gesellschaft vorgenommen gelten,       f) die Rechte, welche die begünstigten Gesellschaften den Aktionären mit Sonderrechten und den Inhabern anderer Wertpapiere als Aktien gewähren, oder die für diese Personen vorgeschlagenen Maßnahmen,       g) jeden besonderen Vorteil, der den Sachverständigen im Sinne des Artikels 8 Absatz 1 sowie den Mitgliedern der Verwaltungs-, Leistungs-, Aufsichts- oder Kontrollorgane der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften gewährt wird,       h) die genaue Beschreibung und Aufteilung der Gegenstände des Aktiv- und Passivvermögens, das an jede der begünstigten Gesellschaften zu übertragen ist,       i) die Aufteilung der begünstigten Gesellschaften auf die Aktionäre der gespaltenen Gesellschaft sowie den Aufteilungsmaßstab.         (3)  a) Wird ein Gegenstand des Aktivvermögens im Spaltungsplan nicht zugeteilt und lässt auch dessen Auslegung eine Entscheidung über die Zuteilung nicht zu, so wird der  Gegenstand oder sein Gegenwert auf alle begünstigten Gesellschaften anteilig im Verhältnis zu dem nach dem Spaltungsplan auf sie entfallenden Nettoaktivvermögen übertragen.   b) Wird ein Gegenstand des Passivvermögens im Spaltungsplan nicht zugeteilt und lässt auch dessen Auslegung eine Entscheidung über die Zuteilung nicht zu, so haftet jede der begünstigten Gesellschaften als Gesamtschuldner. Die Mitgliedstaaten können vorsehen, daß die gesamtschuldnerische Haftung auf das Nettoaktivvermögen beschränkt wird, das jeder begünstigten Gesellschaft zugeteilt wird.   Artikel 4 Der Spaltungsplan ist mindestens einen Monat vor dem Tag der Hauptversammlung, die über den Spaltungsplan zu beschließen hat, für jede der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften nach den in den Rechtsvorschriften der einzelnen Mitgliedstaaten gemäß Artikel 3 der Richtlinie 68/151/EWG (1) vorgesehenen Verfahren offenzulegen.   Artikel 5 (1) Die Spaltung bedarf zumindest der Zustimmung der Hauptversammlung jeder an der Spaltung beteiligten Gesellschaften. Artikel 7 der Richtlinie 78/855/EWG ist bezueglich der für diesen Beschluß erforderlichen Mehrheit, dessen Tragweite sowie des Erfordernisses einer gesonderten Abstimmung anzuwenden.  (2) Werden die Aktien der begünstigten Gesellschaften den Aktionären der gespaltenen Gesellschaft nicht im Verhältnis zu ihren Rechten an deren Kapital gewährt, so können die Mitgliedstaaten vorsehen, daß die Minderheitsaktionäre der gespaltenen Gesellschaft ihre Aktien aufkaufen lassen können. In diesem Fall haben sie Anspruch auf ein dem Wert ihrer Aktien entsprechendes Entgelt. Sofern hierüber keine Einigung erzielt wird, muß das Entgelt durch ein Gericht festgesetzt werden können.   Artikel 6 Die Rechtsvorschriften eines Mitgliedstaats brauchen die Zustimmung der Hauptversammlung einer begünstigten Gesellschaft nicht vorzuschreiben, wenn folgende Bedingungen erfuellt sind:    a) Die in Artikel 4 vorgeschriebene Offenlegung ist für die begünstigte Gesellschaft mindestens einen Monat vor dem Tag derjenigen Hauptversammlung der gespaltenen Gesellschaft, die über den Spaltungsplan zu beschließen hat, zu bewirken;       b) jeder Aktionär der begünstigten Gesellschaft hat mindestens einen Monat vor dem unter Buchstabe a) genannten Zeitpunkt das Recht, am Sitz dieser Gesellschaft von den in Artikel 9 Absatz 1 genannten Unterlagen Kenntnis zu nehmen;       c) ein oder mehrere Aktionäre der begünstigten Gesellschaft, die über Aktien in einem Mindestprozentsatz des gezeichneten Kapitals verfügen, müssen das Recht haben, die Einberufung einer Hauptversammlung der begünstigten Gesellschaft, in der über die Zustimmung zu der Spaltung beschlossen wird, zu verlangen. Dieser Mindesprozentsatz darf nicht auf mehr als 5 % festgesetzt werden. Die Mitgliedstaaten können jedoch vorsehen, daß die Aktien ohne Stimmrecht von der Berechnung dieses Prozentsatzes ausgenommen sind.          Artikel 7 (1) Die Verwaltungs- oder Leistungsorgane jeder der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften erstellen einen ausführlichen schriftlichen Bericht, in dem der Spaltungsplan, insbesondere das Umtauschverhältnis der Aktien und der Maßstab für ihre Aufteilung, rechtlich und wirtschaftlich erläutert und begründet wird.  (2) In dem Bericht ist ausserdem auf besondere Schwierigkeiten bei der Bewertung, soweit solche aufgetreten sind, hinzuweisen.  Zu erwähnen sind darin ferner die Erstellung des Berichtes über die Prüfung der Einlagen, die nicht Bareinlagen sind, nach Artikel 27 Absatz 2 der Richtlinie 77/91/EWG (2) für die begünstigten Gesellschaften sowie das Register, bei dem dieser Bericht zu hinterlegen ist.  (3) Die Verwaltungs- oder Leitungsorgane der gespaltenen Gesellschaft sind verpflichtet, über jede zwischen der Aufstellung des Spaltungsplans und dem Tag der Hauptversammlung der gespaltenen Gesellschaft, die über den Spaltungsplan zu beschließen hat, eingetretene wesentliche Veränderung des Aktiv- oder Passivvermögens die Hauptversammlung der gespaltenen Gesellschaft sowie die Verwaltungs- oder Leitungsorgane der begünstigten Gesellschaften zu unterrichten, damit diese die Hauptversammlung ihrer Gesellschaft unterrichten.  (1) ABl. Nr. L 65 vom 14.3.1968, S. 9. (2) ABl. Nr. L 26 vom 31.1.1977, S. 1.    Artikel 8 (1) Für jede der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften prüfen ein oder mehrere von diesen unabhängige Sachverständige, welche durch ein Gericht oder eine Verwaltungsbehörde bestellt oder zugelassen sind, den Spaltungsplan und erstellen einen schriftlichen Bericht für die Aktionäre. Die Rechtsvorschriften eines Mitgliedstaats können jedoch die Bestellung eines oder mehrerer unabhängiger Sachverständiger für alle an der Spaltung beteiligten Gesellschaften vorsehen, wenn die Bestellung auf gemeinsamen Antrag dieser Gesellschaften durch ein Gericht oder eine Verwaltungsbehörde erfolgt. Diese Sachverständigen können entsprechend den Rechtsvorschriften jedes Mitgliedstaats sowohl natürliche oder juristische Personen als auch Gesellschaften sein.  (2) Artikel 10 Absätze 2 und 3 der Richtlinie 78/855/EWG ist anzuwenden.  (3) Die Mitgliedstaaten können vorsehen, daß der Bericht über die Prüfung von Einlagen, die nicht Bareinlagen sind, nach Artikel 27 Absatz 2 der Richtlinie 77/91/EWG sowie der Bericht über den Spaltungsplan nach Absatz 1 des vorliegenden Artikels von demselben bzw. denselben Sachverständigen erstellt werden.   Artikel 9 (1) Mindestens einen Monat vor dem Tag der Hauptversammlung, die über den Spaltungsplan zu beschließen hat, hat jeder Aktionär das Recht, am Sitz der Gesellschaft zumindest von folgenden Unterlagen Kenntnis zu nehmen:    a) dem Spaltungsplan,       b) den Jahresabschlüssen und den Geschäftsberichten der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften für die letzten drei Geschäftsjahre,       c) einer Zwischenbilanz, die für einen Zeitpunkt erstellt ist, der nicht vor dem ersten Tag des dritten der Aufstellung des Spaltungsplans vorausgehenden Monats liegen darf, sofern der letzte Jahresabschluß sich auf ein mehr als sechs Monate vor der Aufstellung des Spaltungsplans abgelaufenes Geschäftsjahr bezieht,       d) den in Artikel 7 Absatz 1 genannten Berichten der Verwaltungs- oder Leitungsorgane der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften,       e) den in Artikel 8 genannten Berichten.         (2) Die Zwischenbilanz nach Absatz 1 Buchstabe c) ist nach denselben Methoden und in derselben Gliederung zu erstellen wie die letzte Jahresbilanz.  Die Rechtsvorschriften eines Mitgliedstaats können jedoch vorsehen, daß    a) es nicht erforderlich ist, eine neue körperliche Bestandsaufnahme durchzuführen,       b) die Bewertungen der letzten Bilanz nur nach Maßgabe der Bewegungen in den Büchern verändert zu werden brauchen, wobei jedoch zu berücksichtigen sind:      - Abschreibungen, Wertberichtigungen und Rückstellungen für die Zwischenzeit,           - wesentliche, aus den Büchern nicht ersichtliche Veränderungen der wirklichen Werte.                    (3) Vollständige oder, falls gewünscht, auszugsweise Abschriften der in Absatz 1 genannten Unterlagen sind jedem Aktionär auf formlosen Antrag kostenlos zu erteilen.   Artikel 10 Die Mitgliedstaaten können gestatten, daß Artikel 7, Artikel 8 Absätze 1 und 2 sowie Artikel 9 Absatz 1 Buchstaben c), d) und e) keine Anwendung finden, wenn alle Aktionäre und Inhaber anderer mit einem Stimmrecht verbundener Wertpapiere der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften darauf verzichtet haben.   Artikel 11 Die Wahrung von Ansprüchen der Arbeitnehmer der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften wird gemäß der Richtlinie 77/187/EWG (1) geregelt.   Artikel 12 (1) Die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten müssen ein angemessenes Schutzsystem für die Interessen der Gläubiger der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften vorsehen, deren Forderungen vor der Bekanntmachung des Spaltungsplans entstanden und zum Zeitpunkt dieser Bekanntmachung noch nicht fällig sind.  (2) Zu diesem Zweck sehen die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten zumindest vor, daß diese Gläubiger Anspruch auf angemessene Garantien haben, wenn die finanzielle Lage der gespaltenen Gesellschaft sowie der Gesellschaft, auf die die Verpflichtung nach dem Spaltungsplan übertragen wird, einen solchen Schutz erforderlich machen und die Gläubiger nicht schon derartige Garantien haben.  (1) ABl. Nr. L 61 vom 5.3.1977, S. 26.   (3) Soweit ein Gläubiger von der Gesellschaft, auf welche die Verpflichtung nach dem Spaltungsplan übertragen wurde, keine Befriedigung erlangt hat, haften die begünstigten Gesellschaften für diese Verpflichtung als Gesamtschuldner. Die Mitgliedstaaten können diese Haftung auf das jeder dieser Gesellschaften mit Ausnahme der Gesellschaft, auf die die Verpflichtung übertragen wurde, zugeteilte Nettoaktivvermögen beschränken. Sie brauchen diesen Absatz nicht anzuwenden, wenn der Vorgang der Spaltung der Aufsicht eines Gerichtes nach Artikel 23 unterliegt und in einer Versammlung nach Artikel 23 Absatz 1 Buchstabe c) die Mehrzahl der Gläubiger, auf die Dreiviertel des Betrages der Forderungen entfallen, oder die Mehrzahl einer Kategorie von Gläubigern der gespaltenen Gesellschaft, auf die Dreiviertel des Betrages der Forderungen dieser Kategorie entfallen, darauf verzichtet haben, die gesamtschuldnerische Haftung geltend zu machen.  (4) Artikel 13 Absatz 3 der Richtlinie 78/855/EWG ist anzuwenden.  (5) Unbeschadet der Vorschriften über die gemeinsame Ausübung der Rechte der Anleihegläubiger der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften sind die Absätze 1 bis 4 auf diese Gläubiger anzuwenden, es sei denn, eine Versammlung der Anleihegläubiger - sofern die einzelstaatlichen Rechtsvorschriften eine solche Versammlung vorsehen - oder jeder einzelne Anleihegläubiger hat der Spaltung zugestimmt.  (6) Die Mitgliedstaaten können vorsehen, daß die begünstigten Gesellschaften für die Verpflichtungen der gespaltenen Gesellschaft als Gesamtschuldner haften. In diesem Fall brauchen sie die vorstehenden Absätze nicht anzuwenden.  (7) Verbindet ein Mitgliedstaat das System des Gläubigerschutzes nach den Absätzen 1 bis 5 mit der gesamtschuldnerischen Haftung der begünstigten Gesellschaften nach Absatz 6, so kann er diese Haftung auf das jeder dieser Gesellschaften zugeteilte Nettoaktivvermögen beschränken.   Artikel 13 Die Inhaber anderer Wertpapiere, die mit Sonderrechten verbunden, jedoch keine Aktien sind, müssen in den begünstigten Gesellschaften, denen gegenüber ihre Rechte nach dem Spaltungsplan geltend gemacht werden können, Rechte erhalten, die mindestens denen gleichwertig sind, die sie in der gespaltenen Gesellschaft hatten, es sei denn, daß eine Versammlung der Inhaber - sofern die einzelstaatlichen Rechtsvorschriften eine solche Versammlung vorsehen - der Änderung dieser Rechte oder daß jeder einzelne Inhaber der Änderung seines Rechts zugestimmt hat oder daß diese Inhaber einen Anspruch auf Rückkauf ihrer Wertpapiere haben.   Artikel 14 Falls die Rechtsvorschriften eines Mitgliedstaats für Spaltungen eine vorbeugende gerichtliche oder verwaltungsmässige Kontrolle der Rechtmässigkeit nicht vorsehen oder sich diese Kontrolle nicht auf alle für die Spaltung erforderlichen Rechtshandlungen erstreckt, ist Artikel 16 der Richtlinie 78/855/EWG anzuwenden.   Artikel 15 Die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten bestimmen den Zeitpunkt, zu dem die Spaltung wirksam wird.   Artikel 16 (1) Für jede der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften muß die Spaltung nach den in den Rechtsvorschriften eines jeden Mitgliedstaates in Übereinstimmung mit Artikel 3 der Richtlinie 68/151/EWG vorgesehenen Verfahren offengelegt werden.  (2) Jede begünstigte Gesellschaft kann die für die gespaltene Gesellschaft vorzunehmenden Förmlichkeiten der Offenlegung selbst veranlassen.   Artikel 17 (1) Die Spaltung bewirkt ipso jure gleichzeitig folgendes:    a) Sowohl zwischen der gespaltenen Gesellschaft und den begünstigten Gesellschaften als auch gegenüber Dritten geht das gesamte Aktiv- und Passivvermögen der gespaltenen Gesellschaft auf die begünstigten Gesellschaften über, und zwar entsprechend der im Spaltungsplan oder in Artikel 3 Absatz 3 vorgesehenen Aufteilung;       b) Die Aktionäre der gespaltenen Gesellschaft werden entsprechend der im Spaltungsplan vorgesehenen Aufteilung Aktionäre einer oder mehrerer begünstigter Gesellschaften;       c) die gespaltene Gesellschaft erlischt.         (2) Es werden keine Aktien einer begünstigten Gesellschaft im Austausch für Aktien der gespaltenen Gesellschaft gegeben, die sich    a) im Besitz dieser begünstigten Gesellschaft selbst oder einer Person befinden, die im eigenen Namen, aber für Rechnung der Gesellschaft handelt;        b) im Besitz der gespaltenen Gesellschaft selbst oder einer Person befinden, die im eigenen Namen, aber für Rechnung der Gesellschaft handelt.         (3) Unberührt bleiben die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten, die für die Wirksamkeit der Übertragung bestimmter, von der gespaltenen Gesellschaft eingebrachter Vermögensgegenstände, Rechte und Pflichten gegenüber Dritten besondere Förmlichkeiten erfordern. Die begünstigte(n) Gesellschaft(en), der (denen) diese Vermögensgegenstände, Rechte und Pflichten nach dem Spaltungsplan oder nach Artikel 3 Absatz 3 übertragen werden, kann (können) diese Förmlichkeiten selbst veranlassen ; die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten können jedoch der gespaltenen Gesellschaft gestatten, während eines begrenzten Zeitraums diese Förmlichkeiten weiter zu vollziehen ; dieser Zeitraum kann nur in Ausnahmefällen auf mehr als sechs Monate nach dem Zeitpunkt, in dem die Spaltung wirksam wird, festgesetzt werden.   Artikel 18 Die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten regeln zumindest die zivilrechtliche Haftung der Mitglieder des Verwaltungs- oder Leitungsorgans der gespaltenen Gesellschaft gegenüber den Aktionären dieser Gesellschaft für schuldhaftes Verhalten von Mitgliedern dieses Organs bei der Vorbereitung und dem Vollzug der Spaltung sowie die zivilrechtliche Haftung der Sachverständigen, die beauftragt sind, für diese Gesellschaft den in Artikel 8 vorgesehenen Bericht zu erstellen, für schuldhaftes Verhalten bei der Erfuellung ihrer Aufgaben.   Artikel 19 (1) Die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten können die Nichtigkeit der Spaltung von Gesellschaften nur nach Maßgabe folgender Bestimmungen regeln:    a) Die Nichtigkeit muß durch gerichtliche Entscheidung ausgesprochen werden;       b) für nichtig erklärt werden kann eine im Sinne von Artikel 15 wirksam gewordene Spaltung nur wegen Fehlens einer vorbeugenden gerichtlichen oder verwaltungsmässigen Kontrolle der Rechtmässigkeit oder einer öffentlichen Beurkundung oder wenn festgestellt wird, daß der Beschluß der Hauptversammlung nach innerstaatlichem Recht nichtig oder anfechtbar ist;       c) die Nichtigkeitsklage kann nicht mehr erhoben werden, wenn eine Frist von sechs Monaten verstrichen ist, nachdem die Spaltung demjenigen gegenüber wirksam geworden ist, der sich auf die Nichtigkeit beruft, oder wenn der Mangel behoben worden ist;       d) kann der Mangel, dessentwegen die Spaltung für nichtig erklärt werden kann, behoben werden, so räumt das zuständige Gericht den beteiligten Gesellschaften dazu eine Frist ein;       e) die gerichtliche Entscheidung, durch welche die Nichtigkeit der Spaltung ausgesprochen wird, wird in Übereinstimmung mit Artikel 3 der Richtlinie 68/151/EWG nach den in den Rechtsvorschriften jedes Mitgliedstaats vorgesehenen Verfahren offengelegt;       f) falls die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten gegen die gerichtliche Entscheidung einen Einspruch Dritter vorsehen, so kann dieser nach Ablauf einer Frist von sechs Monaten seit Offenlegung der gerichtlichen Entscheidung gemäß der Richtlinie 68/151/EWG nicht mehr erhoben werden;       g) die gerichtliche Entscheidung, durch welche die Nichtigkeit der Spaltung ausgesprochen wird, berührt für sich allein nicht die Wirksamkeit der Verpflichtungen, die vor der Offenlegung der gerichtlichen Entscheidung, jedoch nach dem in Artikel 15 bezeichneten Zeitpunkt, zu Lasten oder zugunsten der begünstigten Gesellschaften entstanden sind;       h) jede begünstigte Gesellschaft haftet für die Verpflichtungen zu ihren Lasten, die nach dem Zeitpunkt des Wirksamwerdens der Spaltung und vor dem Zeitpunkt, zu dem der Beschluß über die Nichtigkeit der Spaltung offengelegt worden ist, entstanden sind. Die gespaltene Gesellschaft haftet ebenfalls für diese Verpflichtungen ; die Mitgliedstaaten können vorsehen, daß diese Haftung auf den Teil des Nettoaktivvermögens beschränkt ist, welcher auf die begünstigte Gesellschaft entfällt, zu deren Lasten diese Verpflichtungen entstanden sind.         (2) Abweichend von Absatz 1 Buchstabe a) können die Rechtsvorschriften eines Mitgliedstaats auch gestatten, daß die Nichtigkeit der Spaltung durch eine Verwaltungsbehörde ausgesprochen wird, wenn gegen eine solche Entscheidung ein Rechtsbehelf bei einem Gericht eingelegt werden kann. Die Buchstaben b), d), e), f), g) und h) gelten entsprechend für die Verwaltungsbehörde. Dieses Nichtigkeitsverfahren kann nach Ablauf einer Frist von 6 Monaten nach dem in Artikel 15 genannten Zeitpunkt nicht mehr eingeleitet werden.  (3) Unberührt bleiben die Rechtsvorschriften der Mitgliedstaaten über die Nichtigkeit einer Spaltung, die im Wege einer anderen Kontrolle der Spaltung als der vorbeugenden gerichtlichen oder verwaltungsmässigen Kontrolle der Rechtmässigkeit ausgesprochen wird.   Artikel 20 Gehören den begünstigten Gesellschaften insgesamt alle Aktien sowie sonstigen Anteile der gespaltenen Gesellschaft, die in der Hauptversammlung ein  Stimmrecht gewähren, so brauchen die Mitgliedstaaten unbeschadet des Artikels 6 die Zustimmung der Hauptversammlung der gespaltenen Gesellschaft zur Spaltung nicht vorzuschreiben, wenn mindestens folgende Bedingungen erfuellt sind:    a) Die in Artikel 4 vorgeschriebene Offenlegung ist für die an dem Vorgang beteiligten Gesellschaften mindestens einen Monat vor dem Zeitpunkt, zu dem der Vorgang wirksam wird, zu bewirken;       b) alle Aktionäre der an dem Vorgang beteiligten Gesellschaften haben das Recht, mindestens einen Monat vor dem Zeitpunkt, zu dem der Vorgang wirksam wird, am Sitz ihrer Gesellschaft von den in Artikel 9 Absatz 1 bezeichneten Unterlagen Kenntnis zu nehmen. Artikel 9 Absätze 2 und 3 ist anzuwenden;       c) ein oder mehrere Aktionäre der gespaltenen Gesellschaft, die über Aktien in einem Mindestprozentsatz des gezeichneten Kapitals verfügen, müssen das Recht haben, die Einberufung einer Hauptversammlung der gespaltenen Gesellschaft, in der über die Zustimmung zu der Spaltung beschlossen wird, zu verlangen. Dieser Mindestprozentsatz darf nicht auf mehr als 5 % festgesetzt werden. Die Mitgliedstaaten können jedoch vorsehen, daß die Aktien ohne Stimmrecht von der Berechnung dieses Prozentsatzes ausgenommen sind;       d) wird eine Hauptversammlung der gespaltenen Gesellschaft, in der über die Zustimmung zur Spaltung beschlossen wird, nicht einberufen, so erstreckt sich die in Artikel 7 Absatz 3 vorgesehene Unterrichtung auf jede nach der Aufstellung des Spaltungsplans eingetretene wesentliche Veränderung des Aktiv- und Passivvermögens.          KAPITEL II Spaltung durch Gründung neuer Gesellschaften  Artikel 21 (1) Im Sinne dieser Richtlinie ist die Spaltung durch Gründung neuer Gesellschaften der Vorgang, durch den eine Gesellschaft ihr gesamtes Aktiv- und Passivvermögen im Wege der Auflösung ohne Abwicklung auf mehrere neugegründete Gesellschaften überträgt, und zwar gegen Gewährung von Aktien der begünstigten Gesellschaften an die Aktionäre der gespaltenen Gesellschaft und gegebenenfalls Gewährung einer baren Zuzahlung, die den zehnten Teil des Nennbetrags oder, wenn ein Nennbetrag nicht vorhanden ist, des rechnerischen Wertes der gewährten Aktien nicht übersteigt.  (2) Artikel 4 Absatz 2 der Richtlinie 78/855/EWG ist anzuwenden.   Artikel 22 (1) Die Artikel 3, 4, 5 und 7, Artikel 8 Absätze 1 und 2 und die Artikel 9 bis 19 sind unbeschadet der Artikel 11 und 12 der Richtlinie 68/151/EWG auf die Spaltung durch Gründung neuer Gesellschaften anzuwenden. Für diese Anwendung bedeuten der Ausdruck "an der Spaltung beteiligte Gesellschaften" die gespaltene Gesellschaft, der Ausdruck "begünstigte Gesellschaft" jede der neuen Gesellschaften.  (2) Der Spaltungsplan erwähnt ausser den Angaben nach Artikel 3 Absatz 2 die Rechtsform, die Firma und den Sitz jeder der neuen Gesellschaften.  (3) Der Spaltungsplan und, falls sie Gegenstand eines getrennten Aktes sind, der Errichtungsakt oder der Entwurf des Errichtungsaktes und die Satzung oder der Entwurf der Satzung jeder der neuen Gesellschaften bedürfen der Zustimmung der Hauptversammlung der gespaltenen Gesellschaft.  (4) Die Mitgliedstaaten können vorsehen, daß der Bericht über die Prüfung von Einlagen, die nicht Bareinlagen sind, nach Artikel 10 der Richtlinie 77/91/EWG sowie der Bericht über den Spaltungsplan nach Artikel 8 Absatz 1 der vorliegenden Richtlinie von demselben bzw. denselben Sachverständigen erstellt werden.  (5) Die Mitgliedstaaten können vorsehen, daß Artikel 8 und - in bezug auf den Sachverständigenbericht - Artikel 9 keine Anwendung finden, wenn die Aktien jeder der neuen Gesellschaften den Aktionären der gespaltenen Gesellschaft im Verhältnis zu ihren Rechten am Kapital dieser Gesellschaft gewährt werden.   KAPITEL III Spaltung unter Aufsicht eines Gerichtes  Artikel 23 (1) Die Mitgliedstaaten können Absatz 2 anwenden, wenn die Spaltung unter der Aufsicht eines Gerichtes erfolgt, das befugt ist,    a) die Hauptversammlung der Aktionäre der gespaltenen Gesellschaft einzuberufen, damit sie über die Spaltung beschließt;       b) sich zu vergewissern, daß die Aktionäre jeder der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften zumindest die in Artikel 9 bezeichneten Unterlagen binnen einer Frist erhalten haben oder  sich beschaffen können, die es ihnen ermöglicht, sie rechtzeitig vor dem Tag der Hauptversammlung ihrer Gesellschaft, die über die Spaltung zu beschließen hat, zu prüfen ; macht ein Mitgliedstaat von der in Artikel 6 vorgesehenen Möglichkeit Gebrauch, so muß die Frist ausreichen, um es den Aktionären der begünstigten Gesellschaften zu ermöglichen, die ihnen durch Artikel 6 zuerkannten Rechte auszuüben;       c) eine Versammlung der Gläubiger jeder der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften einzuberufen, damit sie über die Spaltung beschließt;       d) sich zu vergewissern, daß die Gläubiger jeder der an der Spaltung beteiligten Gesellschaften zumindest den Spaltungsplan binnen einer Frist erhalten haben oder sich beschaffen können, die es ihnen ermöglicht, ihn rechtzeitig vor dem unter Buchstabe b) genannten Zeitpunkt zu prüfen;       e) den Spaltungsplan zu genehmigen.         (2) Stellt das Gericht fest, daß die in Absatz 1 Buchstaben b) und d) bezeichneten Bedingungen erfuellt sind und den Aktionären und den Gläubigern kein Schaden entstehen kann, so kann es die an der Spaltung beteiligten Gesellschaften befreien von der Anwendung    a) des Artikels 4 unter der Bedingung, daß das in Artikel 12 Absatz 1 bezeichnete angemessene Schutzsystem für die Interessen der Gläubiger sich auf alle Forderungen erstreckt, unabhängig von dem Zeitpunkt, zu dem sie entstanden sind;       b) der in Artikel 6 Buchstaben a) und b) bezeichneten Bedingungen, wenn ein Mitgliedstaat von der in Artikel 6 vorgesehenen Möglichkeit Gebrauch macht;       c) des Artikels 9 hinsichtlich der Frist und der Einzelheiten, die darin für die Möglichkeit festgelegt sind, daß die Aktionäre von den bezeichneten Unterlagen Kenntnis nehmen.          KAPITEL IV Andere der Spaltung gleichgestellte Vorgänge  Artikel 24 Gestatten die Rechtsvorschriften eines Mitgliedstaats für einen der in Artikel 1 vorgesehenen Vorgänge, daß die bare Zuzahlung den Satz von 10 % übersteigt, so sind die Kapitel I, II und III anzuwenden.   Artikel 25 Gestatten die Rechtsvorschriften eines Mitgliedstaats einen der in Artikel 1 vorgesehenen Vorgänge, ohne daß die gespaltene Gesellschaft aufhört zu bestehen, so sind die Kapitel I, II und III mit Ausnahme des Artikels 17 Absatz 1 Buchstabe c) anzuwenden.   KAPITEL V Schlußbestimmungen  Artikel 26 (1) Die Mitgliedstaaten erlassen vor dem 1. Januar 1986 die erforderlichen Rechts- und Verwaltungsvorschriften, um dieser Richtlinie nachzukommen, soweit sie zu diesem Zeitpunkt Vorgänge, auf die diese Richtlinie anwendbar ist, gestatten. Sie setzen die Kommission unverzueglich davon in Kenntnis.  (2) Gestattet ein Mitgliedstaat nach dem in Absatz 1 vorgesehenen Zeitpunkt die Spaltung, so erlässt er die in Absatz 1 genannten Vorschriften an dem Tag, an dem er diesen Vorgang gestattet. Er setzt die Kommission unverzueglich davon in Kenntnis.  (3) Für die Anwendung der in Absatz 1 genannten Vorschriften auf die "unregistered companies" im Vereinigten Königreich und in Irland kann jedoch eine Frist von fünf Jahren vorgesehen werden, die mit Inkrafttreten dieser Vorschriften beginnt.  (4) Die Mitgliedstaaten brauchen die Artikel 12 und 13 auf Inhaber von Wandelschuldverschreibungen und anderen Wertpapieren, die in Aktien umgewandelt werden können, nicht anzuwenden, wenn bei Inkrafttreten der Vorschriften nach Absatz 1 oder 2 in den Ausgabebedingungen die Stellung dieser Inhaber bei einer Spaltung vorab festgelegt worden ist.  (5) Die Mitgliedstaaten brauchen diese Richtlinie nicht auf Spaltungen oder diesen gleichgestellte Vorgänge anzuwenden, für deren Vorbereitung oder Durchführung eine durch die einzelstaatlichen Rechtsvorschriften vorgesehene Handlung oder Förmlichkeit bereits zum Zeitpunkt des Inkrafttretens der in Absatz 1 oder 2 genannten Vorschriften vorgenommen worden ist.   Artikel 27 Diese Richtlinie ist an die Mitgliedstaaten gerichtet.     Geschehen zu Brüssel am 17. Dezember 1982.  Im Namen des Rates  Der Präsident  H. CHRISTOPHERSEN