ObjectiveA higher trans-epidermal water loss (TEWL) occurs in rough skin, in elder skin and also in atopic dermatitis. An impaired skin barrier function is considered to be caused by an incomplete construction of the intercellular lamellar structure due to the quantitative reduction of ceramides. Since these symptoms coexist with oxidative stress, we hypothesized that impairment of the skin barrier function is accelerated by oxidative stress. Thus, the purpose of this study was to clarify the effect of oxidative stress on ceramide synthesis and to characterize whether antioxidants can improve skin barrier function. 3-O-Laurylglyceryl ascorbate (VC-3LG), which is a newly amphipathic derivative of ascorbic acid, was evaluated as a candidate antioxidant. MethodsWe characterized the mRNA expression levels of serine palmitoyltransferase (SPT) in normal human epidermal keratinocytes (NHEKs) treated with H2O2 using real-time PCR analysis. In order to evaluate the effect of VC-3LG on skin barrier function, we used several assays with reconstructed human epidermis equivalents (RHEEs). ResultsCeramide synthesis was down-regulated in NHEKs by oxidative stress. Treatment with VC-3LG abrogated the down-regulation of SPT mRNA in NHEKs caused by oxidative stress, and stimulated SPT mRNA expression levels. In experiments characterizing the antioxidative properties of VC-3LG, VC-3LG reduced oxidative stress in NHEKs by up-regulating catalase mRNA expression. In addition, VC-3LG stimulated the skin barrier function in RHEEs, which had lower TEWL values compared with untreated RHEEs. Furthermore, VC-3LG increased the quantity of ceramide in RHEEs. ConclusionTaken together, we conclude that VC-3LG reinforces the skin barrier function due to its reduction of oxidative stress and its promotion of ceramide synthesis. Resume ObjectifUne plus haute perte d'eau de trans-epidermal (TEWL) se produit dans la peau rugueuse, dans la peau ainee et aussi dans la dermatite atopic. On considere qu'une fonction de barriere de peau diminuee est provoquee par une construction incomplete de la structure lamellar intercellulaire en raison de la reduction quantitative de ceramides. Comme ces symptomes coexistent avec la tension d'oxidative, nous etions hypothetiques que l'affaiblissement de la fonction de barriere de peau est accelere par la tension d'oxidative. Ainsi, le but de cette etude etait de clarifier l'effet de tension d'oxidative sur la synthese ceramide et caracteriser si les antioxydants peuvent ameliorer la fonction de barriere de peau. 3-O-Laurylglyceryl ascorbate (VC-3LG), qui est nouvellement amphipathic le derive d'acide ascorbique, a ete evalue comme un antioxydant de candidat. MethodesNous avons caracterise les niveaux d'expression mRNA de serine palmitoyltransferase (SPT) dans epidermal humain normal ker-atinocytes (NHEKs) a traite avec H2O2 en utilisant PCR en temps reel analy-sis. Pour evaluer l'effet de VC-3LG sur la fonction de barriere de peau, nous avons utilise plusieurs essais avec epider-humain reconstruit mis les equivalents (RHEEs). ResultatsLa synthese de Ceramide a ete en bas regulee dans NHEKs par la tension d'oxidative. Traitement avec VC-3LG abroge en-bas-egu-lation de SPT mRNA dans NHEKs provoque par la tension d'oxidative et SPT stimule mRNA niveaux d'expression. Dans le caractere d'experiences - izing les proprietes antioxidative de VC-3LG, VC-3LG a reduit la tension d'oxidative dans NHEKs par catalase regulant en haut mRNA expres-sion. En plus, VC-3LG a stimule la fonction de barriere de peau dans RHEEs, qui avait plus bas des valeurs de TEWL comparees avec RHEEs non soigne. En outre, VC-3LG a augmente la quantite de ceramide dans RHEEs. ConclusionPris ensemble, nous concluons que VC-3LG contiennent - force la fonction de barriere de peau en raison de sa reduction d'oxidative 4 tension et sa promotion de synthese ceramide.