b'\n_START_ARTICLE_\nHigh-temperature liquid chromatography\n_START_PARAGRAPH_\nLa high-temperature liquid chromatography (in italiano "cromatografia liquida ad alta temperatura"), abbreviata in HTLC, \xc3\xa8 una variante della cromatografia liquida che sfrutta l\'utilizzo di alte temperature per la separazione degli analiti._NEWLINE_L\'utilizzo di alte temperature \xc3\xa8 noto diminuire la ritenzione e quindi i tempi di analisi, dando cos\xc3\xac la possibilit\xc3\xa0 di migliorare la risoluzione. Inoltre d\xc3\xa0 la possibilit\xc3\xa0 di effettuare dei gradienti di temperatura invece di gradienti di eluenti. Infine, abbassa la viscosit\xc3\xa0 della fase mobile: in questo modo anche l\'acqua acquisisce delle propriet\xc3\xa0 simili a quelle di un solvente organico, rendendo possibile il suo utilizzo per una cromatografia a fase inversa; questo \xc3\xa8 particolarmente vantaggioso per questioni di semplicit\xc3\xa0, costi, rifiuti non tossici e possibilit\xc3\xa0 di accoppiamento con tecniche per le quali l\'uso di un solvente organico \xc3\xa8 mal sopportato (ad esempio le tecniche basate sul plasma accoppiato induttivamente) o proprio proibito (come la spettrometria di massa isotopica).\n_START_SECTION_\nCaratteristiche\n_START_PARAGRAPH_\nLe condizioni strumentali e operative, dal settaggio della temperatura alla scelta della fase stazionaria, sono un parametro particolarmente critico per ottenere buoni risultati.\n_START_SECTION_\nTemperatura\n_START_PARAGRAPH_\nBench\xc3\xa9 alcuni autori considerassero la temperatura ambiente la soglia per parlare di "alta temperatura", oggi tale soglia minima \xc3\xa8 convenzionalmente fissata a una temperatura vicina al punto di ebollizione dell\'eluente, ovvero la temperatura a cui \xc3\xa8 necessario applicare un accorgimento tecnico (ad esempio un regolatore di contropressione) per evitare che l\'eluente passi alla fase vapore. Tale valore \xc3\xa8 fissato intorno ai 60 \xc2\xb0C, poich\xc3\xa9 i solventi comunemente usati nella cromatografia in fase inversa (metanolo, THF) hanno punti di ebollizione vicino a quel valore._NEWLINE_Il valore massimo di temperatura, invece, \xc3\xa8 quello a cui l\'eluente cambia le sue propriet\xc3\xa0 diventando un fluido supercritico. Tale valore \xc3\xa8 fissato a 374 \xc2\xb0C, temperatura critica pi\xc3\xb9 alta osservata (quella dell\'acqua)._NEWLINE_Nonostante l\'ampio range di temperatura utilizzabile, comunque, la temperatura di lavoro in HTLC \xc3\xa8 normalmente intorno ai 200 \xc2\xb0C, per due motivi: sia perch\xc3\xa9 i sistemi di riscaldamento convenzionali non sono in grado di raggiungere temperature maggiori (anche se sono noti lavori in cui si arrivava a temperature di 370 \xc2\xb0C), sia perch\xc3\xa9 in queste condizioni \xc3\xa8 possibile usare le colonne senza ottenere degradazione della fase stazionaria per lungo tempo.\n_START_SECTION_\nStrumentazione\n_START_PARAGRAPH_\nLe condizioni strumentali e operative, dal settaggio della temperatura alla scelta della fase stazionaria, sono l\'aspetto pi\xc3\xb9 critico della tecnica._NEWLINE_Innanzitutto il sistema di riscaldamento dev\'essere sufficientemente veloce e preciso per ottenere risultati accurati e riproducibili. Inoltre, \xc3\xa8 opportuno posizionare un coil di pre-riscaldamento prima della colonna, altrimenti si generano dei gradienti di temperatura dell\'eluente che entra nella colonna, con conseguente allargamento (o addirittura appiattimento) dei picchi. Infine, \xc3\xa8 spesso necessario far passare il capillare dopo l\'uscita dalla colonna in un bagno raffreddato, in maniera tale che la temperatura dell\'eluente sia controllata; questo \xc3\xa8 importante per detector sensibili alle variazioni di temperatura dell\'eluente, come quelli a indice di rifrazione, fluorescenza o UV, meno per altri dove l\'eluente viene trasformato in vapore prima di essere analizzato, come la spettrometria di massa o l\'ELSD._NEWLINE_Per evitare che l\'eluente liquido subisca una transizione alla fase vapore a causa della temperatura superiore al suo punto di ebollizione, \xc3\xa8 necessario applicare un regolatore di contropressione oppure un capillare di restrizione; questo non \xc3\xa8 necessario quando viene usata acqua con temperature di poco superiori ai 100 \xc2\xb0C, dato che la sua pressione di vapore non cambia di molto in quel range._NEWLINE_Per quanto riguarda la fase stazionaria, \xc3\xa8 necessario utilizzare dei materiali che resistano alle alte temperature senza degradarsi in tempi brevi. Per questo sono molto usate le fasi a base di ossidi metallici (es. ossido di zirconio o di biossido di titanio), di polimeri puri (es. polistirene-divinilbenzene) o di grafite, le quali riescono ad arrivare a 200 \xc2\xb0C. Le normali fasi stazionarie a base di silice, invece, non sono stabili oltre i 100 \xc2\xb0C, bench\xc3\xa9 le loro prestazioni siano migliorate con l\'utilizzo di nuove tecnologie ibride (come la stabilizzazione con ponti di etilene).\n_START_SECTION_\nAnaliti\n_START_PARAGRAPH_\nPoich\xc3\xa9 ad alte temperature gli analiti potrebbero degradarsi, durante l\'ottimizzazione del metodo \xc3\xa8 bene verificare la loro stabilit\xc3\xa0, tenendo conto che essa dipende dalla colonna utilizzata.'