b'\n_START_ARTICLE_\nTinci\xc3\xb3n diferencial\n_START_SECTION_\nTinci\xc3\xb3n de Gram\n_START_PARAGRAPH_\nEn 1884 Christian Gram, bacteri\xc3\xb3logo dan\xc3\xa9s, desarrollo una t\xc3\xa9cnica de tinci\xc3\xb3n, la cual se le atribuye a su apellido, esta t\xc3\xa9cnica permiti\xc3\xb3 separar a la bacterias en dos grandes grupos las gram positivas y las gram negativas, dependiendo si retienen el colorante en su pared o no, despu\xc3\xa9s del proceso de decoloraci\xc3\xb3n.\xe2\x80\x8b_NEWLINE_La tinci\xc3\xb3n Gram est\xc3\xa1 basada en la diferenciaci\xc3\xb3n de la composici\xc3\xb3n qu\xc3\xadmica de la pared celular bacteriana; para lo que se emplea 4 compuestos: cristal violeta, mordiente-lugol, decolorante alcohol-cetona y colorante de contraste safranina.\xe2\x80\x8b_NEWLINE_Esto divide a las bacterias en Gram positivas que se ti\xc3\xb1en de violeta pues tienen una gruesa capa de peptidoglicano o mure\xc3\xadna y Gram negativas que tienen una capa m\xc3\xa1s fina por lo que no mantienen el colorante primario (cristal violeta). _NEWLINE_Los pasos a seguir para la tinci\xc3\xb3n de las bacterias es hacer el frote, la fijaci\xc3\xb3n y la aplicaci\xc3\xb3n de las soluciones colorantes. La amplia gama de colorantes que se pueden utilizar, ha obligado a separarlos en tres grupos generales, los de trifenilmetano, los de oxacina y los de tiacina. Esta clasificaci\xc3\xb3n es buena para la distinci\xc3\xb3n de las familias de colorantes, pero en general se utiliza la clasificaci\xc3\xb3n de acuerdo a su car\xc3\xa1cter \xc3\xa1cido \xe2\x80\x93 base, es decir, \xc3\xa1cidos, bases o neutros, debido a que de esto depende mucho su comportamiento._NEWLINE_La coloraci\xc3\xb3n se da de acuerdo con a la acci\xc3\xb3n de los iones complejos del colorante y los sitios activos de la superficie o del interior de la c\xc3\xa9lula._NEWLINE_Entre los diversos tipos de coloraci\xc3\xb3n de bacterias, est\xc3\xa1n la coloraci\xc3\xb3n simple, diferencial y la tinci\xc3\xb3n negativa.\xe2\x80\x8b\n_START_SECTION_\nPreparaci\xc3\xb3n de un frotis para la tinci\xc3\xb3n\n_START_PARAGRAPH_\nEn un portaobjetos de vidrio que debe estar completamente limpio y seco, si el material es l\xc3\xadquido se coloca una gota o si es un material diferente como el sarro dental se hace rodar el hisopo con el que se tom\xc3\xb3 la muestra. Puede usarse una aguja est\xc3\xa9ril para colocar una peque\xc3\xb1a cantidad de un cultivo bacteriano en la superficie del portaobjetos. Este material es suspendido en una gota de agua o soluci\xc3\xb3n salina previamente colocada sobre el portaobjetos. El material se frota directamente sobre el portaobjetos, donde puede visualizarse con facilidad, el material colocado debe de fijarse, es el proceso donde se conversan y se fijan las estructuras internas y externas de las c\xc3\xa9lulas, para la tinci\xc3\xb3n Gram se realizar\xc3\xa1 una fijaci\xc3\xb3n f\xc3\xadsica, es decir, de calor con un mechero a una temperatura resistente al tacto de nuestra mano\xe2\x80\x8b\n_START_SECTION_\nUtilidad de cada colorante en la Tinci\xc3\xb3n Gram\xe2\x80\x8b\n_START_PARAGRAPH_\nCristal de Violeta: Es el colorante catat\xc3\xb3nico que penetra en todas las c\xc3\xa9lulas bacterianas tanto Gram positivas como Gram negativas, a trav\xc3\xa9s de la pared bacteriana._NEWLINE_Lugol: Es un compuesto formado por Yodo en equilibrio con Yoduro de Potasio y Siulterio, los cuales est\xc3\xa1n presentes para solubilizar el Yodo, esto hace que el cristal de violeta se fije con mayor intensidad. El Yodo entra en las c\xc3\xa9lulas y forma un complejo insoluble en soluci\xc3\xb3n acuosa con el cristal de violeta._NEWLINE_Mezcla de alcohol: Sirve para realizar la decoloraci\xc3\xb3n ya que en la misma el complejo Yodo/cristal de violeta es soluble; las bacterias Gram positivos no se decoloran sino las bacterias Gram negativos._NEWLINE_Safranina: Se utiliza para hacer una tinci\xc3\xb3n de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. Al t\xc3\xa9rmino del protocolo las bacterias Gram positivas se ver\xc3\xa1n azul-violeta y las bacterias Gram negativas rojas o rosas.\n_START_SECTION_\nRecomendaciones para tinci\xc3\xb3n Gram\xe2\x80\x8b\n_START_PARAGRAPH_\nPara obtener una buena l\xc3\xa1mina es necesario tomar en cuenta algunas precauciones tanto para la preparaci\xc3\xb3n del frotis como en la observaci\xc3\xb3n del microscopio. _NEWLINE_1.- Extendido.- se debe de tomar en cuenta que el extendido en la l\xc3\xa1mina con el cultivo bacteriano (muestra) debe ser fina, caso contrario no ser\xc3\xa1 visible en el lente del microscopio, es decir, que las estructuras no se podr\xc3\xa1n evidenciar._NEWLINE_2.- Fijaci\xc3\xb3n.- si no hay una correcta fijaci\xc3\xb3n del cultivo (muestro), es probable que las c\xc3\xa9lulas bacterianas se pierda durante el proceso de fijaci\xc3\xb3n._NEWLINE_3.- No perder de vista el lugar donde est\xc3\xa1 la muestra, colocar de manera correcta el portaobjetos, y de la misma forma una vez que la lamina est\xc3\xa1 en la platina del microscopio._NEWLINE_5.- se debe observar en los diferente lentos objetivos, de manera que se pueden focalizar y diferenciar las estructuras\n_START_SECTION_\nTinci\xc3\xb3n de Ziehl-Neelsen\xe2\x80\x8b\n_START_PARAGRAPH_\nEs una t\xc3\xa9cnica de tinci\xc3\xb3n diferencial r\xc3\xa1pida y econ\xc3\xb3mica, se identifican microorganismos pat\xc3\xb3genos; fue descrita por primera vez por los m\xc3\xa9dicos alemanes, el bacteri\xc3\xb3logo Franz Ziehl y el pat\xc3\xb3logo Friedrich Neelsen.\n_START_SECTION_\nFundamento\xe2\x80\x8b\n_START_PARAGRAPH_\nLas paredes celulares de ciertos par\xc3\xa1sitos y bacterias contienen \xc3\xa1cidos grasos de cadena larga que les confieren la propiedad de resistir la decoloraci\xc3\xb3n \xc3\xa1cido-alcohol, despu\xc3\xa9s de la tinci\xc3\xb3n con colorantes b\xc3\xa1sicos; por esto se los denomina \xc3\xa1cido-alcohol resistentes como por ejemplo las micro-bacterias y los par\xc3\xa1sitos cocc\xc3\xaddeos. La coloraci\xc3\xb3n cl\xc3\xa1sica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras; al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificaci\xc3\xb3n de los \xc3\xa1cidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias.\n_START_SECTION_\nTinci\xc3\xb3n de \xc3\xa1cido alcohol resistencia\xe2\x80\x8b\n_START_PARAGRAPH_\nMycobacterium no se unen f\xc3\xa1cilmente a colorantes simples y hay que te\xc3\xb1irlas con un tratamiento m\xc3\xa1s fuerte, este tratamiento se trata de calentar una mezcla de fucsina b\xc3\xa1sica y fenol. Una vez que la fucsina ha penetrado con la ayuda del calor y el fenol, las c\xc3\xa9lulas \xc3\xa1cido alcohol resistentes no se decoloran con una soluci\xc3\xb3n \xc3\xa1cido-alcoh\xc3\xb3lica, permaneciendo de color rojo. Mientras que las bacterias no \xc3\xa1cido alcohol resistentes se decoloran con la soluci\xc3\xb3n y se ti\xc3\xb1en de azul de metileno (tinci\xc3\xb3n de contraste).\n_START_SECTION_\nTinci\xc3\xb3n de endosporas\n_START_PARAGRAPH_\nLa morfolog\xc3\xada y localizaci\xc3\xb3n var\xc3\xadan con la especie, pueden ser esf\xc3\xa9ricas a el\xc3\xadpticas, con un di\xc3\xa1metro menor o superior al de la bacteria madre, con el m\xc3\xa9todo de Fulton, las endosporas se ti\xc3\xb1en primero calentando las bacterias con verde de malaquita y se contra-ti\xc3\xb1e con safranina. En resultados se podr\xc3\xa1 ver las endosporas te\xc3\xb1idas de color verde en c\xc3\xa9lulas de color rosa o rojo.\n_START_SECTION_\nTinci\xc3\xb3n de estructuras espec\xc3\xadficas\n_START_PARAGRAPH_\nLa tinci\xc3\xb3n negativa revela la presencia de c\xc3\xa1psulas alrededor de la bacteria, para realizar esta tinci\xc3\xb3n se mezcla las bacterias con tinta china o nigrosina y se extiende en una capa fina sobre un portaobjeto, en el microscopio se podr\xc3\xa1 observas que aparecen cuerpos m\xc3\xa1s claros debido a que la tinta no penetra ni la c\xc3\xa9lula ni la c\xc3\xa1psula\n_START_SECTION_\nTinci\xc3\xb3n de flagelos\n_START_PARAGRAPH_\nLos flagelos para que sean visibles en un microscopio es necesario aumentar su grosor con mordientes tales como: \xc3\xa1cido t\xc3\xa1nico, alumbre de potasio, pararosanilina o fucsian..'