b"\n_START_ARTICLE_\nTaqMan\n_START_PARAGRAPH_\nLas sondas TaqMan son sondas de hidr\xc3\xb3lisis dise\xc3\xb1adas para incrementar la especificidad de la PCR cuantitativa. El m\xc3\xa9todo fue descrito por primera vez en 1991 por investigadores de Cetus Corporation,\xe2\x80\x8b y la tecnolog\xc3\xada fue desarrollada posteriormente por Roche Molecular Diagnostics para pruebas diagn\xc3\xb3sticas y por Applied Biosystems para aplicaciones en el \xc3\xa1mbito de la investigaci\xc3\xb3n._NEWLINE_La sonda TaqMan se basa en la actividad exonucleasa 5'-3 'de la Taq polimerasa para escindir una sonda marcada ya hibridada a la secuencia diana. Esta escisi\xc3\xb3n de la sonda permite la emisi\xc3\xb3n de fluorescencia,\xe2\x80\x8b que, al igual que en otros m\xc3\xa9todos de PCR cuantitativa, permite obtener una medida cuantitativa de la acumulaci\xc3\xb3n del producto durante los ciclos de Reacci\xc3\xb3n en cadena de la polimerasa (PCR). La gran ventaja de la sonda TaqMan es que aumenta significativamente la especificidad de la detecci\xc3\xb3n._NEWLINE_Por lo tanto, la fluorescencia detectada en el termociclador de la PCR cuantitativa es directamente proporcional a la del fluor\xc3\xb3foro liberado y la cantidad de ADN molde presente en la PCR. Se trata de un m\xc3\xa9todo espec\xc3\xadfico cuyo objetivo es la cuantificaci\xc3\xb3n de la expresi\xc3\xb3n de genes.\n_START_SECTION_\nPrincipios\n_START_PARAGRAPH_\nLa sonda TaqMan est\xc3\xa1 formada por un fluor\xc3\xb3foro unido covalentemente al extremo 5 'de un oligonucle\xc3\xb3tido, y un desactivador de fluorescencia (quencher) en el extremo 3' \xe2\x80\x8b (Figura 1)._NEWLINE_Para este m\xc3\xa9todo se pueden utilizar distintos fluor\xc3\xb3foros (ej: 6-carboxifluoresce\xc3\xadna, tetraclorofluoresce\xc3\xadna) y quenchers (ej: tetrametilrodamina).\xe2\x80\x8b El quencher inhibe la fluorescencia del fluor\xc3\xb3foro cuando es excitado por la fuente de luz del termociclador.\xe2\x80\x8b De esta forma, mientras que el fluor\xc3\xb3foro y el quencher est\xc3\xa9n pr\xc3\xb3ximos el uno al otro, no habr\xc3\xa1 se\xc3\xb1al fluorescente, puesto que el quencher est\xc3\xa1 ejerciendo su actividad inhibidora (Figura 1)._NEWLINE_Cada sonda TaqMan est\xc3\xa1 dise\xc3\xb1ada de manera que hibride con una regi\xc3\xb3n espec\xc3\xadfica de ADN que va a ser amplificada por un par de oligonucle\xc3\xb3tidos espec\xc3\xadficos. A medida que la Taq polimerasa sintetiza la cadena en sentido 3'-5', la actividad exonucleasa 5'-3' de esta misma enzima degrada la sonda TaqMan ya hibridada al ADN. La degradaci\xc3\xb3n de la sonda separa el fluor\xc3\xb3foro, rompiendo as\xc3\xad la proximidad entre \xc3\xa9ste y el quencher, permitiendo as\xc3\xad la emisi\xc3\xb3n de fluorescencia. La fluorescencia detectada es directamente proporcional a la cantidad de fluor\xc3\xb3foro liberado y, por lo tanto, a la cantidad de ADN de inter\xc3\xa9s presente en el producto de PCR."