My Little Pony: La magia de la amistad: se lleva a cabo en la tierra de Equestria, poblada por variedades de ponis (incluyendo variantes de pegasos, unicornios y también alicornios que son pegasos y unicornios.) junto con otras numerosas criaturas mitológicas. El personaje principal es Twilight Sparkle, una poni unicornio enviada por su mentora la Princesa Celestia, regente de Equestria, a la pacífica ciudad de Ponyville para estudiar la magia de la amistad. En los primeros episodios de la serie, Twilight deja en segundo plano esa tarea, ya que está más preocupada sobre la aparición de Nightmare Moon, una leyenda poni. Cuando Nightmare Moon aparece, jurando la noche eterna y provocando que Celestia desaparezca, Twilight se pone en marcha con otras 5 ponis: Applejack, Fluttershy, Pinkie Pie, Rainbow Dash, y Rarity para conseguir los Elementos de la Armonía y así derrotar a Nightmare Moon. Antes de que Twilight hiciera reaccionar a los elementos de la armonía, Nightmare Moon aparece y las ataca. En un momento de inspiración, Twilight se da cuenta de que cada una de sus nuevas amigas representa a cada uno de los Elementos de la Armonía, y que ella misma es el elemento final, la magia. El poder mágico de la amistad de las ponis, hace que Nightmare Moon se convierta en la arrepentida Princesa Luna. Celestia reaparece, se reencuentra con su hermana, la Princesa Luna, y permite que Twilight permanezca en Ponyville para seguir estudiando la magia de la amistad.