Laislamientu yel diagnósticu confirmatorio y pal so intentu cultívense fluyíos y órganos nos medios especiales pa leptospira (Fletcher, EMJH) Los medios semaos son llevaos a estufa de 29°C y reparaos baxu microscopia de campu escuro. El diagnósticu molecular ye útil pa detectar leptospiras, sobremanera en materiales contaminaos o de mal aislamientu, o cuando les leptospiras nun tán vidables. La PCR (polimerasa chain reaction) identifica lADN de manera específica con elevada sensibilidá y en curtiu periodu a cualquier material clínico. La PCR tien como ventayes la confirmación rápida del diagnósticu na fase inicial de la enfermedá y la detección del ADN del microorganismu, nun dependiendo de la viabilidá del axente.