Twilight Sparkle: Es una poni unicornio (un unicornio terrestre en las temporadas 1,2 y 3) dotada de una magia poderosa y que representa el Elemento de la Magia. Es la Principal central de la serie. Es la hija menor de Night Light y Twilight Velvet, hermana menor de Shining Armor, cuñada de Cadance y tía de Flurry Heart. Antes del primer episodio, realizaba sus estudios en una amplia biblioteca (que también era su casa) en Canterlot como alumna de la princesa Celestia, de tal modo que huía de situaciones que la obligaran a socializar con otros ponis. Sin embargo, tras ser enviada a Ponyville, descubre la alegría de la amistad. Twilight establece una estrecha amistad con las otras cinco ponis. Su mascota es un búho llamado Owlowiscious que lo ayuda en algunas de sus funciones cuando Spike está dormido. A partir del último episodio de la tercera temporada, Cura Mágica y Misteriosa, Twilight se transforma en una alicornio (un unicornio pegaso) y se convierte en princesa, y más tarde es la princesa de la amistad. Su Cutiie Mark es una estrella rosa con brillos blancos y representa el amancer y la magia de la amistad.