PBS5mLを通じてカラムを洗浄後、10mM水酸化ナトリウムPBS溶液5mLを通じ、流出液を1mLずつ集めた(NaOH-1.2.3.4.5とした)。【0237】(6-3・タンパク質の同定)上記(6-2)のアフィニティクロマトグラフィにより、集めた画分は紫外分光計を用いて波長280nmでの吸光度を測定し、吸収が認められた画分を、以下のようにSDS-PAGEにかけた。【0238】初めに以下の溶液を調製した。)を用いてろ過してから用いた。)*)クマジーブリリアントブルー染色液(ナカライテスク製ラピッドステインCBBキット使用)集めた画分1mLを凍結乾燥してから、イオン交換水100μLを加え再度溶解させた。この溶液20μLとサンプル調整用バッファー10μLを混合し、95°Cで10分加熱してサンプル溶液を調整した。12.5%含有))をセットし、各レーンに、マーカー色素溶液を1μLと、変性させたサンプル溶液を10μLずつのせ20mAの一定電流で泳動させた。range(ナカライテスク製)を同時に泳動した。振盪後ゲルをイオン交換水で洗浄し、さらに60°Cのイオン交換水に浸し脱色させた。脱色したゲルは乾燥させて保存した。AE-6000)を用いてSDS-PAGEを行い、クマジーブリリアントブルーによって染色した。この結果が図8である。A,PSA,BSAの3つバンドが見られ、これらが溶出されていることがわかる。Aのバンドだけが現れている。Aのバンドが見られた。これらの結果から、次の2つのことが分かった。(1)BSA,PSAはカラムを素通りした。Aの一部も溶出されていて、Mix-2にも3つのタンパク質すべてが見られる。Aは、担体上の4-Malと結合して保持され、溶離剤によってカラムから溶出する。Aだけを選択的に分離することができた。【0241】【発明の効果】本発明のリンカー化合物は、以上のように、4単位以上の糖分子を導入可能な部位として、4つの芳香族アミノ基を有している。糖分子と特異的に相互作用するタンパク質の検出や分離を行う際に用いられるタンパク質分析用の支持体に結合可能な部位として、ビオチン部位又はイミノビオチン部位を有している。【0242】それゆえ、上記リンカー化合物を用いることによって、上記支持体に4単位以上の糖分子を再現性よく2次元的に配列させることができるという効果を奏する。上記リンカー化合物は、タンパク質との非特異的な相互作用の影響をほぼ無視することができるので、糖分子とタンパク質との相互作用を観測する際に、糖分子の生物活性を再現性よく評価することが可能になる。【0243】また、本発明のリガンドは、上記リンカー化合物に糖分子を導入してなるものである。【0244】それゆえ、上記リガンドを、例えば、タンパク質分析用の支持体表面に導入することにより、2次元的に複数の糖分子を再現性よく集合化させて配列させることができるので、糖分子の生物活性を再現性よく評価することが可能になるという効果を奏する。【0245】従って、上記リンカー化合物又はリガンドを用いることにより、糖分子と特異的に相互作用するタンパク質の検出や分離を行うためのSPRやアフィニティクロマトグラフィ、遺伝子工学でのバイオプローブ等にて、タンパク質分析用の支持体に糖分子の導入を好適に行うことができるという効果を奏する。【図面の簡単な説明】【図1】(a)~(d)は、本発明におけるリガンドを導入するために、アビジンを固定した表面プラズモン共鳴(SPR)のセンサチップを作成する工程を示す斜視図である。【図2】(a)は本発明にかかるリガンド導入チップであり、(b)は同図(a)のリガンド導入チップとタンパク質との相互作用を表す斜視図である。【図3】本発明のリガンドのSPR測定に用いた「2-チャンネル解析法」の模式図である。【図4】本発明のリガンド担持体を得る工程におけるSPR測定の結果を表すグラフである。【図5】本発明のリガンド(Mal-Bio)と比較例のリガンド(Ace-Ma1)と相互作用を表すSPR測定の結果を表すグラフである。【図6】本発発明のリガンド5.3-Malおよび8-GlcとコンカナバリンAとの相互作用を表すSPR測定の結果を表すグラフである。【図7】(a)~(c)は、本発明におけるリガンド担持体を有するアフィニティカラムを作成する工程を示す図である。【図8】アフィニティクロマトグラフィの手順を表す図である。【図9】4-Malとタンパク質との結合についてのSDS-PAGEの結果を表す図である。