泳動終了後、ゲルを取り出し、PVDF膜を用いて30分間転写を行った。NaN3)に浸し振盪機を用いて室温で60分間振盪し、ブロッキングを行った。Signaling製))を入れ、室温で1時間振盪しながら反応させた。LAS4000)(富士フィルム製)にセットし、検出をした。イメージアナライザーで得られた結果を図5及び図6に示す。72時間作用させた場合にプロカスパーゼ14の発現が確認された。SPG、Cerを作用させた場合においてもプロカスパーゼ14の発現が確認された。μMでは、PHSの優れたプロカスパーゼ14発現効果が認められた。以下のRT-PCR法により、スフィンゴイド類によるカスパーゼ14のmRNAの発現性を調べた。時間インキュベートした。【実施例2】【0031】(ii)RNAの抽出下記手順で、RNAを抽出した。(Invitrogen製)を加え、均一に懸濁させた。mLのクロロホルムを加え、20秒間、ボルテックスミキサーで攪拌した。2~3分放置し、12000×g、4°Cで10分間遠心した。4)上層を400μLマイクロピペットで新たなエッペンドルフチューブに移し、Trizolを500μL加えて、均一に懸濁させた。mLのクロロホルムを加えて20秒間、ボルテックスミキサーで攪拌した。2~3分放置し、12000×g、4°Cで10分間遠心した。7)上層の400μLを、マイクロピペットで採取して新たなエッペンドルフチューブに移し、500μLの2-プロパノールを加えてボルテックスミキサーで攪拌した後5分間静置した。8)12000×g、4°Cで10分間遠心し、上清を捨てた。mLの70%エタノールを加えて12000×g、4°Cで10分間遠心した。10)上清を捨て、20μLのmilliQ水を加えてよく均一に懸濁させた。【実施例2】【0032】(iii)RT-PCR法下記手順で、RT-PCRを行った。Ver.3.0のプロトコルに従った。dT-アダプタープライマー(0.5μL)]を調製した。2)PCRチューブに、上記(ii)で得られたRNA試料を1μLずつと、逆転写反応液を9μLずつ入れた。分→99°C、5分→5°C、5分でインキュベーションした。1.0μL)を調製し、各PCRチューブに加えた。5’-CTGCTTCACCACCTTCTTGA-3’4)10秒間フラッシュした。チューブをサーマルサイクラーにセットし、94°C、30秒→60°C、30秒→72°C、2分を30サイクル行った。6)5%アガロースゲルでアガロースゲル電気泳動を行い、バンドを確認した。図7から分かるように、各スフィンゴイドの濃度に拠らずGAPDHのmRNAが一定レベルで発現しているのに対し、カスパーゼ14のmRNAは、スフィンゴイドの濃度が高い程、高い発現レベルを示した。ここから、スフィンゴイドによって、カスパーゼ14の発現が促進されることが確認された。Cerを含む皮膚外用剤を調製した。Cerが、50μMの濃度になるように、マカデミアナッツ油に溶解した。含まれる保湿用軟膏を調製した。被験者5人に、該軟膏の適量を、毎日一回、右手に塗布し、左手には何も塗布せずに、30日後に両手を比べて評価してもらったところ、5人のうち4人が、右手の皮膚が左手の皮膚に比べて、みずみずしさの点で改善されたと評価した。【産業上の利用可能性】【0035】本発明のカスパーゼ14合成促進剤は、カスパーゼ14の発現の促進を利用する用途に有用であり、なかでも保湿用の皮膚外用剤に有用である。