概要プロテアーゼは、ペプチド結合の加水分解を触媒する酵素の総称であり、微生物、動物および植物に広く分布している。ペプチド生産において幅広く利用されている代表的な産業用酵素である。医療器具の二次感染予防の観点から、感染性タンパク質汚れのプロテアーゼによる分解は、代替の難しい技術となっている。産業用酵素としての実用面で一番重用視されるのは、酵素の安定性および利用条件下での活性の高さである。物理的・化学的に高い熱安定性が要求される場合が多く、それゆえ、産業用プロテアーゼには耐熱性プロテアーゼが広く使用されている。protease)が知られている。なかでも米国Genencore社が発売しているPrionzymeは、実用化されているプロテアーゼ中、最も高い安定性を示す酵素として、CJD(クロイツフェルトヤコブ病)等のプリオン病の原因物質である異常型プリオンの感染予防を目的とした器具洗浄用途に用いられている。その至適作用条件は40~60°C、pH8~10とされており、より高温で利用できるプロテアーゼの実用化が望まれている。そのため、高温かつ高アルカリ条件下で利用可能な新規プロテアーゼを見出すために、多数の試みがなされている。KOD1株由来のサチライシンファミリーに属するプロテアーゼ(以下「Tk-subtilisin」という)を見出し、Tk-subtilisinがpH9.5、温度80°C~100°Cで最も高い活性を示すこと、公知のプロテアーゼのなかで最も高い熱安定性を有することを報告している(非特許文献1および2参照)。KOD1株由来の耐熱性プロテアーゼが開示され、この耐熱性プロテアーゼは、至適温度が80°C付近にあり、耐熱性は、120分間インキュベートした後も70°Cで約75%、80°Cで約50%の残存活性が認められ、耐アルカリ性は、120分間インキュベートした後もpH11で90%以上、pH11.5で約85%の残存活性が認められたことが記載されている。本発明は、新規なプロテアーゼおよびその利用に関するものであり、詳細には、高温かつ高アルカリ条件下で高い活性を有する新規なプロテアーゼおよびそのプロ体、それらをコードするポリヌクレオチド、並びに、これらの利用に関するものである。以下の(a)または(c)に記載のアミノ酸配列からなるプロテアーゼ。アゾカゼインを基質としてpH7で20分間反応させたときの至適温度が100°C以上である請求項1に記載のプロテアーゼ。Tris-HCl(pH7)中、100°Cで90分間処理したときに40%以上の残存活性を有する請求項1に記載のプロテアーゼ。Tris-HCl(pH8)中、55°Cで60分間処理したときに80%以上の残存活性を有する請求項1に記載のプロテアーゼ。反応温度80°CでSuc-AAPF-pNAを基質としたときにKm値が0.1~1mMである請求項1に記載のプロテアーゼ。請求項1~5のいずれかに記載のプロテアーゼのプロ体であって、配列番号5に示されるアミノ酸配列からなるプロ体。請求項1~5のいずれかに記載のプロテアーゼをコードするポリヌクレオチド。配列番号2もしくは4に示される塩基配列からなるポリヌクレオチドである請求項7に記載のポリヌクレオチド。請求項6に記載のプロ体をコードするポリヌクレオチド。配列番号6に示される塩基配列からなるポリヌクレオチドである請求項9に記載のポリヌクレオチド。請求項7~10のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。特許・技術に関心のある方は、下記問い合わせ先にご相談下さい。同じキーワードでJ-STORE内を検索することが出来ます。