ケミステーション(PC用ソフトウェア)である。OD-RH(内径0.46cm、長さ15cm)である。堀場製作所製F-23型ガラス電極式水素イオン濃度指示計を使用して行った。AB-2200を使用して測定した。スペクトル装置AB-1850を使用して測定した。測定したスペクトルは全て検出器の特性を補正したスペクトルである。超純水は、MILLIPORE製Milli-RX12αから採水したものを使用した。pyralis由来)は、Sigma社製またはPromega社製の組換え型を使用した。ATP-Mgは、Sigma社製のものを使用した。リン酸水素二カリウム・水和物(特級)とリン酸二水素カリウム・水和物(特級)を超純水に溶かし、pHを調節して用いた。高速液体クロマトグラフィー用溶媒を使用した。もの(特級)を使用した。基質を電子天秤で秤量し希釈した。6.0)を、化学発光測定の場合はt-ブタノールを使用した。pH8.0)で希釈し小分けにした。これをストック溶液とし、必要量をその都度希釈して用いた。ストック溶液は-80°Cの冷凍庫に保存した。ATP-Mgを超純水で希釈した。40μl)を混合して発光スペクトル測定を行った。酵素溶液の濃度は、17μMのものを使用した。ホタルルシフェリン(1)は、1.7μM、フェノール型ルシフェリンは、170μMの酵素をそれぞれ使用した。発光スペクトル測定の露光時間は、60秒とした。ホタルルシフェリンは、5秒で行った。上記手順を使用して、図1に示した化合物の発光波長を測定した。図1に示した化合物は、それぞれの化合物の下に記載された発光波長を有していた。図1のルシフェリン類似体の構造とその発光波長から、ルシフェリン類似体の構造において、二重結合を1つ伸長するごとに発光波長が長波長側に約100nmシフトすることが分かった。ベンゼン環に変換することにより、発光波長が長波長側に約20~30nmシフトすることが分かった。ルシフェリン類似体の構造において、ジアルキルアミノ基を水酸基に変化させることにより、発光波長が短波長側に約20~30nmシフトすることが分かった。これにより、実用的な発光波長を変更するための指標を確立することができた。この指標に基づいてルシフェリン誘導体を設計することにより、所望の発光波長を有する化合物を製造することができる。図2に示した発光波長のシフト法則に基づいて、図1に示したルシフェリン類似体のように、可視領域の全体にわたる発光波長を有する化合物群を製造することができる。