lずつ容量可変式マイクロピペットを用いて分注する。2列の穴に移し、そのままマイクロピペットでチップ内に液を数回出し入れして混和する(泡立てないように注意!)。3列の穴に移し、同じように混和・希釈する。1行目第11列まで段階希釈を続ける。IgGの2倍希釈系列が出来ることになる。最後の第12列目には第11列からの液は入れず、希釈液のみにしておく。IgMの2倍希釈系列を作製する。これらをコントロール抗体とする。lを2回)ずつ容量可変式マイクロピペットを用いて分注する。2列の穴に移し、そのままマイクロピペットでチップ内に液を数回出し入れして混和する。3列の穴に移し、同じように混和・希釈する。5列まで段階希釈を続ける。3行目は未知検体の10倍希釈系列が出来ることになる。lずつをとって分注する。この際に最も希釈倍数の高い(濃度の低い)液(すなわち第12列目)から分注していくとチップを最後まで換えずにすむ。lずつをとって分注する。lをとって分注する(同一検体について2穴の測定を行うことになる)。1時間反応させる(実習室にある37°C孵卵器に入れる)。ペーパータオルを敷いた流しの中にプレートからコントロール抗体液と未知検体液を一気に振り捨て、直ちにプレート全体を洗浄バッファーが入った容器に入れて各穴に洗浄バッファーを満たす。これを一気に振り捨て、再び洗浄バッファーを満たす操作(洗浄)を4回繰り返す。最後にプレート全体を各穴を下向きにしてキムワイプにたたきつけるようにして洗浄液を充分に除く。37°Cで1時間反応させる(実習室にある37°C孵卵器に入れる)。lの過酸化水素水をマイクロピペットで加える。lずつプレートに分注する(第1行目から順番に分注していく)。9)の場合と同様に第1行目から順番に分注していく。することにより全ての穴の反応時間を同じにできる)。IgMの検出、定量用である。IgMの濃度を知ることができる。2穴の吸光度の平均値と希釈倍率との関係を示す標準曲線を平均希釈倍数を横軸、吸光度を縦軸にとって描け。IgMの濃度を決定せよ。テュートリアルのページに戻る免疫学教室ホームページに戻る。