各グループに以下の実験器具と試薬が配布されている。所を右手の親指と人差し指でしっかりとつまんで持ち上げる。尾を持って持ち上げている限り、マウスは暴れたり噛みついたりする心配は全くない。マウスを尾でしっかり持ったまま、ケージの蓋にそっと下ろして行くと、指がケージの網目に届いた途端にマウスが前に進もうとするため、尾が引っ張られた状態になる。ここで右手で尾を後ろに引っ張り続けた状態でマウスの背後から左手を近づけ、親指の付け根が背中に着くようにして、首のすぐ後ろを親指の腹と人差し指で、また背中の皮膚を拇指球と残りの3本の指でしっかりとつまんで固定する。噛みつかれることを恐れておずおずと手を近づけると却って危ない。マウスは恐怖心を抱いたヒトの気配に敏感なので、振り返って噛みついてくる。親指の付け根の膨らみ(拇指球)全体をマウスの背中にそっと押しつけるようにして、自信を持って愛情を加えるように背中から首にかけての皮膚全体をつまむと、マウスは安心して持ち上げられ、鳴き声も出さない。首だけ持とうとしてはいけない。ケージの蓋の上でマウスの首をしっかりと蓋に押さえつけるように固定したまま、右手で持った尾を素早く斜め上に向かって引っ張り上げ、一度強く引いて頸椎を脱臼させ、延髄切断によって安楽死させる。頸椎が脱臼した時手応えを感じ、マウスは一瞬にして絶命する筈である。手間取っているとマウスに苦しい思いをさせ、安楽死にならない。マウスをしっかりと保定して安心させ、恐怖を感じる隙を全く与えずに一撃必殺で延髄を切断しなければいけない。以上のマウス保持と頸椎脱臼による安楽死にどうしても自信の持てないグループに対しては、申し出によってエーテル麻酔による安楽死を行わせる。マウスを(コルク製)固定台に載せ、四肢をピンでしっかりと固定する。腹部中央の皮膚をピンセット(大)で持ち上げ、大きいハサミで横方向に小さい切れ込みを入れる。切開部上下の皮膚を両手でつまみ、それぞれ頭側・尾側の方向に強く引っ張り大きく展開する。この時、皮下組織と腹膜の間が綺麗に剥がれて腹膜が完全に露出するが、腹膜そのものは全く傷ついていない筈である。次に露出した腹膜の中央部を小さいピンセットでつまみ上げ、小さいハサミで横方向に切れ込みを入れる。腹膜中を走行している大きな血管を切断しないように注意しながら、中央部から左右に大きく切開する。腹腔内臓器をピンセットで左方向(マウスの体の右側)にどけると、左季肋部に暗赤色で細長い脾臓が見える。脾臓は肝臓(腹側にあり大きな三葉に分かれている)より背側下方で、胃の裏側に接するようにあり、薄い腹膜で膵臓(白色)に繋がっている。これをピンセット(小)を用いて丁寧に周辺臓器より離して持ち上げ、ハサミ(小)で血管を含む腹膜と膵臓を切断し、脾臓のみを摘出する。脾臓が取り出せたかどうか、教官に確認して貰うこと。入れたものを用意してあるので、摘出した脾臓を乾かさないよう、ただちにその中に浸す。プラスチック注射器を2本用意し、針カバーを利用して2本とも中程で針を直角に折り曲げおく。小さい切れ込みを入れる。右手に持った注射器の針の湾曲部を用いて、切れ込み部の近くから脾臓の内容物を丁寧に少しずつしごき出す。完全に内容物が除去されると、透明の被膜だけが残る。ある程度まで脾臓内容物をしごき出したら、同様にして反対側にも切れ込みを入れ、被膜だけになるまで同じように脾臓内容物をしごき出す。完全に内容物のなくなった脾臓被膜はシャーレから取り出して捨てる。ゴム球(小)付きの駒込ピッペットを用い、絶対に泡立てないように注意しながら、脾細胞浮遊液に大きな固まりがなくなるまでゆっくりとピペッティング(吸い込んだり吐き出したり)を繰り返す(結合組織があるためいくらかの粗大な固まりは残る)。入れるな!)、シャーレに脾細胞が残らないよう駒込ピペットで丁寧に洗い流し、全量を駒込ピペットで吸い取って再びナイロンメッシュを通しながら遠心チューブに移す。10分間遠心して細胞を遠心管の底に集め(「ペレットにする」と言う)、上清を流しのアスピレータで吸引して除去する。駒込ピペットで軽くピペッティングしてペレットをほぐし、細胞を完全に浮遊させて、室温で5分間(正確に!)反応させる。10分間遠心、上清を吸引除去する。溶血が完全に起こり、ペレットがごく淡い褐色を帯びた白色になっていることを確認する(それまでは赤褐色だった!)。浮遊させ、再度メッシュを通して別の遠心管(2本目)に移す。