(CFP、YFP)間のFRETを利用して、リン酸化を蛍光波長の変化としてとらえるプローブ作製を試みた。CFP-SH2(Grb2/Ash)-YFP、YFP-SH2(Grb2/Ash)-CFP、YFP-SH2(PLCγ1)-CFP発現プラスミドを作製した。これら融合タンパク質を評価するため、EGF受容体やPDGF受容体βの配列中のSH2ドメインによって認識されるチロシン残基を中心とした20残基のペプチド、およびそのチロシンリン酸化ペプチドを化学合成した。大腸菌に発現させて得た各YFP-SH2-CFPを合成ペプチドとインキュベートし、チロシンリン酸化の有無による蛍光変化を測定したところ、YFP-SH2(PLCγ1)-CFPで変化がみられた。一つの試みとして、チロシンリン酸化の基質となる配列(EGF受容体、PDGF受容体等)のN末端、C末端にCFP、YFPを持つ融合タンパク質発現プラスミドを作製した。発現させたこれら融合タンパク質を細胞(HeLa、RBL-2H3等)溶解液、ATP、EGF(PDGF)とともにインキュベートしてチロシンリン酸化反応にともなう蛍光変化を測定したところ、CFP-(PDGF受容体のチロシンリン酸化部位±10残基)-YFPにおいて、ATP濃度依存的な蛍光変化(527nm/475nmの減少)が観察された。以上の作製した各種プラスミドを各種細胞に導入し融合タンパク質を発現させ、画像取得しているが、細胞内ではリン酸化刺激に伴う蛍光変化の検出には成功していない。