ReP USP - Detalhe do registro: Proteína flagelar FliD (CAP) de Escherichia coli enteropatogênica atípica no processo de adesão a enterócitos
Proteína flagelar FliD (CAP) de Escherichia coli enteropatogênica atípica no processo de adesão a enterócitos (2011)
Sampaio, Suely C. F - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Sinigaglia-Coimbra, Rita - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Freymüller, Edna - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Abstract: Escherichia coli enteropatogênica atípica (aEPEC) coloniza o trato digestório causando diarreia em humanos. A colonização é processo multifatorial, que pode envolver várias estruturas de superfície bacteriana, entre as quais o flagelo. Além da motilidade, o flagelo tem sido reportado como uma estrutura necessária para adesão, invasão e indução da resposta inflamatória em vários patógenos. Recentemente, evidenciamos uma interação preferencial entre a extremidade distal do flagelo de aEPEC 1711-4 (sorotipo O51:H40) e a extremidade das microvilosidades de enterócitos. Os fatores envolvidos nessa interação ainda não estão estabelecidos. Aventamos a possibilidade de FliD (CAP), proteína essencial na montagem do flagelo e que se posiciona na sua extremidade distal, ter papel de adesina na interação bactéria-célula. O objetivo deste estudo foi investigar o papel de FliD na interação da aEPEC 1711-4 com enterócitos humanos in vitro. A construção de mutantes deficientes em fliD ou fliC (que codifica a flagelina, subunidade da estrutura do flagelo) foi baseada na técnica da recombinação homóloga da região de interesse com uma sequência do gene de resistência a zeocina, com auxílio do plasmídio pKOBEG. Para avaliação qualitativa da associação bacteriana, utilizamos células intestinais Caco-2 cultivadas por 10 dias. Após este período, os tapetes celulares foram inoculados com ≅ 10E7 UFC/ml e incubados por 3 h a 37ºC, em 5% de CO2. Para avaliação quantitativa, 3 h após a infecção, um conjunto de tapetes celulares foi tratado com gentamicina e outro não. Após lise e semeadura, os números de UFC foram determinados. Por microscopia óptica e microscopia eletrônica de transmissão, foi observada uma diminuição significativa da adesão em Caco-2 quando mutantes isogênicos deficientes em fliD ou fliC foram testadosEm experimentos quantitativos, após 3 h de infecção, esses mutantes apresentaram capacidades de aderir e invadir células Caco-2 diminuídas em aproximadamente 40 e 96 vezes, respectivamente. Os resultados obtidos evidenciam que FliD participa no processo de adesão eficiente da amostra aEPEC 1711-4 a enterócitos in vitro
SAMPAIO, Suely C. F; SINIGAGLIA-COIMBRA, Rita; FREYMÜLLER, Edna; SAMPAIO, Jorge Luiz Mello; GOMES, Tânia Aparecida Tardelli. Proteína flagelar FliD (CAP) de Escherichia coli enteropatogênica atípica no processo de adesão a enterócitos. Anais.. São Paulo: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM), 2011.
Sampaio, S. C. F., Sinigaglia-Coimbra, R., Freymüller, E., Sampaio, J. L. M., & Gomes, T. A. T. (2011). Proteína flagelar FliD (CAP) de Escherichia coli enteropatogênica atípica no processo de adesão a enterócitos. In Resumos. São Paulo: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM).
Sampaio SCF, Sinigaglia-Coimbra R, Freymüller E, Sampaio JLM, Gomes TAT. Proteína flagelar FliD (CAP) de Escherichia coli enteropatogênica atípica no processo de adesão a enterócitos. Resumos. 2011 ;