Phorate and dietholate act as safeners for rice against clomazone at high doses
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-83582010000400024
Phorate e dietholate protegem o arroz da fitotoxicidade do clomazone em doses elevadas
Sanchotene, D.MI; Kruse, N.DII; Avila, L.AIII; Machado, S.L.OIV; Nicolodi, G.AV; Dornelles, S.H.BVI
IDoutorando do Programa de Pós-Graduação em Agronomia, Universidade Federal de Santa Maria - UFSM, <dmartisan@mail.ufsm.br>
IIProfessor Adjunto, Dep.de Defesa Fitossanitária, UFSM
IIIProfessor Adjunto, Dep. de Fitotecnia, Universidade Federal de Pelotas - UFPel
IVProfessor Titular, Dep. de Defesa Fitossanitária, UFSM
VEngª-Agrª., Mestre em Agronomia
VIProfessor Adjunto, Dep. de Biologia, UFSM
Palavras-chave: citocromo P-450, fitotoxicidade, protetores de plantas.
Keywords: cytochrome P-450, phytotoxicity, safener.
Protetores de plantas, ou safeners, são produtos químicos usados com a finalidade de promover a seletividade de herbicidas, por meio da proteção da cultura à fitotoxicidade do herbicida, sem reduzir a eficiência no controle das plantas daninhas. Apesar de os efeitos de alguns protetores encontrados no mercado de agroquímicos já terem sido comprovados, os mecanismos fisiológicos e bioquímicos exatos envolvidos na seletividade ainda não estão totalmente esclarecidos (Ezra et al., 1983).
Está registrado para a cultura do arroz irrigado o protetor dietholate, que permite ao arroz tolerar doses de clomazone acima da recomendação técnica para a cultura não tratada. O uso do dietholate no tratamento de sementes confere às plantas delas oriundas tolerância a maiores doses de clomazone (Karam et al., 2003). Estudos na cultura do algodão mostram que diversos inseticidas do grupo químico dos organofosforados, como malation, phorate, zineb, entre outros, são capazes de inibir a enzima citocromo P-450 nas plantas tratadas, tornando-as mais tolerantes a doses de clomazone (Ferhatoglu et al., 2005). A enzima citocromo P-450 mono-oxigenase nas plantas possui a função de detoxificação de certos compostos. Essa enzima é também a responsável pela oxidação das moléculas do clomazone, tornando-as mais tóxicas às plantas que possuem maior capacidade de oxidação (Yun et al., 2005).
Buscando ampliar as evidências de que a ação protetora do dietholate consiste de fato na inibiçao da enzima citocromo P-450 monooxigenase, assumiu-se que outros compostos presumidamente inibidores dessa enzima também poderiam aumentar a seletividade do clomazone ao arroz. Em vista do exposto, foi desenvolvido um experimento com o objetivo de verificar se o phorate tem atividade protetora do arroz irrigado a doses elevadas de clomazone.
O experimento foi conduzido em casa de vegetação da Universidade Federal de Santa Maria, durante o ano de 2008. O delineamento experimental foi de blocos ao acaso em esquema fatorial 3 x 8, com quatro repetições, sendo os tratamentos do fator A representados pelo tratamento de sementes, em três níveis: semeadura de sementes sem tratamento, sementes tratadas com dietholate e tratamento com phorate. O fator B constou da aplicação de doses crescentes de clomazone (0, 156, 312, 625, 1.250, 2.500, 5.000 e 10.000 g i.a. ha-1). O cultivar de arroz utilizado foi o IRGA 417.
O experimento foi conduzido em vasos de polietileno de 1,4 L de capacidade, revestidos internamente com plásticos e preenchidos com 1.200 gramas de solo, o qual foi classificado como Planossolo Hidromórfico Eutrófico arênico, pertencente à unidade de mapeamento Vacacaí, com as seguintes características: pH água(1:1) = 4,7; P = 6,0 mg dm-3; K = 112 mg dm-3; argila = 16%; MO = 1,6%; Ca = 2,2 cmolc dm-3; Mg = 2,0 cmolc dm-3; Al =1,7 cmolc dm-3; e índice SMP: 6,6. Após o preenchimento dos vasos, mediu-se a umidade gravimétrica, a fim de determinar a massa de solo seco adicionada nos vasos.
A quantidade de água necessária para cada unidade experimental foi determinada por meio da metodologia de coluna úmida (Forsythe, 1975). Esse manejo foi realizado a cada dois dias, através da medição da massa de cada vaso e adicionando-se água até atingir a massa total. Antes da semeadura, as sementes foram tratadas com dietholate (0,0-diethyl 0-phenyl phosphorothioate) na dose de 1.000 g de produto comercial por 100 kg de semente, ou com o inseticida phorate, pertencente ao grupo químico dos organofosforados, na dose de 2 g de ingrediente ativo do organofosforado phorate para 10 g de semente do cultivar IRGA 417 (20 kg 100 kg-1 semente).
A semeadura nos vasos ocorreu em 15 de outubro de 2008, e a aplicação dos tratamentos herbicidas em pré-emergência do arroz, no dia 16 de outubro de 2008. Foram realizadas avaliações visuais de fitotoxicidade, seguindo a escala porcentual, em que 0% representou ausência de dano e 100%, morte das plantas (Frans & Crowley, 1986). Ao final do décimo oitavo dia foram realizadas a contagem do número de plantas por vaso, a coleta das plantas para determinação de sua massa fresca (MF), a medição da estatura de plantas (EST) e, após secagem em estufa a 60 ºC até massa constante, da massa seca (MS) de plantas. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA), para verificação das interações entre os fatores e entre os níveis do fator A. Para as interações significativas, os dados foram ajustados ao modelo de regressão não linear do tipo log-logístico, usando-se o modelo proposto por Seefeldt et al. (1995).
em que D representa o limite superior; C representa o limite inferior; o parâmetro b descreve a inclinação da curva em torno do I50 e os valores de I50 correspondem à dose que causa resposta de 50% da assíntota de máxima da variável resposta.
Analisando os resultados obtidos por meio das curvas apresentadas na Figura 1A e B, verifica-se que as curvas de dose-resposta contendo protetores de sementes dietholate e phorate ficaram acima da curva sem protetor. Os valores estimados de I50 demonstram que, para os dois protetores utilizados (dietholate e phorate), as doses necessárias para causar 50% de redução da variável dependente foram maiores que aquelas do tratamento sem protetor (Tabela 1), independentemente da variável avaliada (fitotoxicidade, massa fresca de plantas, massa seca e estatura de plantas de arroz). Quando comparados os valores de I50 do tratamento com dietholate versus o tratamento com phorate, não é evidenciada diferença significativa entre os tratamentos, pois os intervalos de confiança se sobrepõem.
Os valores do fator de proteção (FP) calculado para cada protetor demonstram quanto se pode aumentar a dose do herbicida para obter o mesmo nível de I50 nas variáveis (FT, EST, MF e MS), em relação às plantas não tratadas. Salienta-se que para a variável estatura de plantas o tratamento com protetor de plantas phorate proporcionou maior proteção às plantas, tolerando até cinco vezes a dose de clomazone (g de i.a. ha-1), quando comparado ao tratamento sem protetor. Apesar de não haver diferença estatística significativa entre os protetores dietholate e phorate, verifica-se que phorate apresentou proteção que possibilitou incrementar quatro vezes a dose do herbicida para um mesmo MF50, enquanto para dietholate a dose foi aproximadamente três vezes maior que aquela que causou 50% de redução na massa fresca.
Os resultados deste experimento corroboram os obtidos por Concenço et al. (2006), que observaram que clomazone em solos com característica semelhante acarretou diminuição significativa na densidade populacional das plantas, aumentando o grau de fitotoxicidade. O efeito protetor do dietholate e do phorate a doses superiores às suportadas pelo arroz irrigado sem tratamento pode ser explicado em função da inibição da produção de metabólitos ativos de clomazone nessas plantas, o que impede a ação fitotóxica desse herbicida (Norman et al., 1990). Nesse sentido, segundo Ferhatoglu et al. (2005), a produção desses metabólitos está diretamente relacionada com as reações de oxidação e redução que ocorrem nas plantas, dependentes da concentração de NADPH nas células (Deng et al., 2002). A oxidação é catalisada pela enzima citocromo P-450 mono-oxigenase, que tem sua atividade inibida pelo dietholate e por alguns inseticidas do grupo químico dos organofosforados, entre eles o phorate. Assim, inibindo a atividade da enzima citocromo P-450, o dietholate e o phorate interferem na catalisação da NADPH e na produção de metabólitos ativos do clomazone, principalmente o 5-OH-clomazone e o 5-ceto clomazone (Ferhatoglu et al., 2005), envolvidos na rota não mevalonato responsável pela síntese dos carotenoides - rota descrita por Dubey et al. (2003). Portanto, com a evidência de que não somente o dietholate, mas também o phorate, outro provável inibidor da enzima citocromo P-450, também confere proteção às plantas tratadas contra a ação do herbicida clomazone, sustenta-se que o mecanismo pelo qual esses compostos exercem essa proteção encontra-se no bloqueio da ativação do herbicida, por meio da sua não oxidação.
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