ReP USP - Detalhe do registro: Contribuição da sinalização dependente de beta-arrestinas, via receptor de angiotensina II do tipo 1, na hipertrofia cardiomiocítica induzida por T3
Autor USP: LINO, CAROLINE ANTUNES - ICB
Subjects: HORMÔNIOS TIREOIDIANOS; SISTEMA RENINA-ANGIOTENSINA; SISTEMA CARDIOVASCULAR; FIBRAS MUSCULARES; IMUNOFLUORESCÊNCIA; ENDOCITOSE
Keywords: Angiotensin II Type 1 Receptor; Beta-arrestinas; Beta-arrestins; Cardiac hypertrophy; GPCR; GPCR; Hipertrofia Cardíaca; Hormônios Tireoidianos; Internalização de Receptores; Receptor de Angiotensina II do tipo I; Receptor Internalization; Thyroid Hormones
Abstract: Níveis elevados de hormônios tireoidianos (HTs) são comumente associados à ativação do sistema renina angiotensina local e ao desenvolvimento da hipertrofia cardíaca. O envolvimento do receptor de angiotensina II tipo 1 (AT1R) nos efeitos hipertróficos dos HTs fora descrito previamente. No entanto, os mecanismos subjacentes a essa interação ainda são desconhecidos. O AT1R pertence à família dos receptores acoplados à proteína G e, portanto, promove a transdução de sinal por mecanismos dependentes e independentes de proteína G. Recentemente, a sinalização dependente de beta-arrestinas (independente de proteína G) tem sido descrita por contribuir com a resposta hipertrófica em diferentes modelos experimentais. Assim, no presente estudo investigou-se o envolvimento da sinalização dependente de beta-arrestinas nos efeitos hipertróficos dos HTs, mediados pelo AT1R, bem como a participação de ERK1/2 nesse processo. Culturas primárias de cardiomiócitos foram estimuladas com T3 (triiodotironina; 15nM) para indução da hipertrofia. O tratamento dos cardiomiócitos com T3 por tempos rápidos (5-30 min) resultou na ativação transiente de ERK1/2, a qual foi parcialmente atenuada quando da administração de Losartan (1μM), antagonista do AT1R. A contribuição de ERK1/2 na hipertrofia dos cardiomiócitos foi verificada através do uso de PD98059 (20μM), inibidor de MEK1/2, o qual preveniu a transcrição de marcadores hipertróficos. Ensaios de imunoprecipitação revelaram oaumento da interação entre AT1R e beta-arrestina 2 sob estímulo do T3, sugerindo o recrutamento de beta-arrestina 2 e, possível, internalização do AT1R. Através de ensaios de imunofluorescência e fracionamento subcelular, foi demonstrado que o T3 estimula a translocação do AT1R, amentando sua expressão no núcleo dos cardiomiócitos. Além disso, tanto a ativação de ERK1/2 quanto a hipertrofia cardiomiocítica mostraram-se sensíveis à inibição da endocitose, a qual foi avaliada através de Concanavalina A (0,5μg/ml). Ensaios de silenciamento gênico por RNA de interferência foram eficientes em demonstrar o envolvimento de beta-arrestina 2 na ativação de ERK1/2 e na hipertrofia cardiomiocítica induzida por T3. Desta forma, os resultados evidenciam o envolvimento da sinalização dependente de beta-arrestina 2 na ativação de ERK1/2, através do AT1R, a qual contribui com a hipertrofia cardiomiocítica promovida pelo T3
Renin-angiotensin system overactivation in perivascular adipose tissue contributes to vascular dysfunction in heart failure