Bolsa 14/15357-4 - Metilação de DNA, Perfilação da expressão gênica - BV FAPESP
Processo: 14/15357-4
Assunto(s): Metilação de DNA Perfilação da expressão gênica Pró-opiomelanocortina Ratos Wistar Dieta Ácido fólico
Atualmente a obesidade é um grave problema de saúde pública mundial, tem origem multifatorial envolvendo tanto fatores ambientais quanto genéticos. Existem alguns genes que estão envolvidos com a obesidade, como por exemplo, o gene da Pró-Opiomelanocortina (POMC). O objetivo do presente projeto de pesquisa é investigar os padrões de expressão e metilação do gene POMC na prole de ratas submetidas às dietas deficiente e suplementada com ácido fólico. Os animais utilizados serão ratos Wistar. Para o acasalamento serão formados 4 casais/grupo de tratamento (o grupo controle, o grupo deficiente em ácido fólico e o grupo suplementado com ácido fólico). Serão coletadas amostras do núcleo arqueado do hipotálamo, a partir das quais serão extraídos DNA, RNA e proteínas utilizando kits comerciais seguindo o protocolo do fabricante. Com o DNA será realizada a análise do padrão de metilação. O RNAm será utilizado para a análise diferencial da expressão gênica, por PCR em tempo real, pelo sistema TaqMan® (Life TechnologiesÔ). O estudo de proteômica envolverá eletroforese 2-DE e os resultados serão confirmados por Western blotting. Espera-se que com os resultados deste estudo possam fornecer uma melhor compreensão dos mecanismos moleculares relacionados à reprogramação epigenética fetal do gene envolvido com a obesidade e a importância do fornecimento adequado de ácido fólico durante o período de desenvolvimento embrionário/fetal. (AU)
PAULA, Bruna Morais Faleiros de. Padrões de metilação e expressão do gene Pomc na prole de ratas submetidas às dietas deficiente e suplementada com ácido fólico. 2016. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto Ribeirão Preto.