Em 1945, após a morte de sua mãe, ele termina a escola primária e resolve inscrever-se na Escola de Belas-Artes de Mendoza. A década de 1960 foi decisiva para a sua carreira: em 1962, fez sua primeira exposição em uma livraria de Buenos Aires; no ano seguinte é publicado seu primeiro álbum de humor, Mundo Quino, uma compilação dos desenhos de humor gráfico sem texto, com prólogo de Miguel Brascó.
É também nesta década que surge Mafalda, que foi publicada em diversos jornais: Primera Plana, El Mundo e Siete Dias. Neste período, foram publicados ainda cinco volumes dos livros de Mafalda. Em 1977, a pedido da ONU, Quino volta a ilustrar Mafalda e os personagens de suas tiras para a edição internacional da Campanha Mundial da Declaração do Direitos da Criança. No ano seguinte, recebe o Troféu Palma de Ouro pelo Salão Internacional do Humorismo de Bridigher.