BDPI USP - Detalhe do registro: Padrão de Inativação do Cromossomo X e Expressão de MicroRNAS X-Específicos na pré-Eclâmpsia
Padrão de Inativação do Cromossomo X e Expressão de MicroRNAS X-Específicos na pré-Eclâmpsia (2010)
USP affiliated authors: OLIVEIRA, ADRIANE ARAUJO DE - FMRP
Subjects: PRÉ-ECLÂMPSIA; EXPRESSÃO GÊNICA; GENÉTICA
Keywords: ensaio de HUMARA; Expressão Gênica Diferencial; gene XIST; Inativação do cromossomo X; MicroRNAs; Pré-eclâmpsia; Chromosome X Inactivation; Differential Gene Expression; HUMARA assay; Preeclampsia; XIST
Abstract: As síndromes hipertensivas gestacionais estão entre as maiores causas de morte materna e fetal. Entre elas destaca-se a pré-eclâmpsia (PE), que caracteriza-se pelo aumento da pressão arterial e proteinúria, a partir da 20ª semana de gestação. Embora sua etiologia seja ainda discutida, o papel dos fatores genéticos é amplamente aceito. Alterações do padrão da inativação do cromossomo X, processo epigenético encontrado em mamíferos com placenta, têm sido encontradas em algumas doenças que ocorrem exclusivamente em mulheres. O XIST é um gene chave nesse processo. Por outro lado, muitos microRNAs (pequenos RNAs não codificantes) são expressos abundantemente na placenta humana e alguns estão mapeados no cromossomo X. O objetivo do presente trabalho foi a verificação do padrão de inativação do cromossomo X e da expressão dos genes XIST e dos microRNAs X-específicos miR-221, miR-222 e miR-223 em mulheres com PE. O ensaio de HUMARA (receptor de andrógeno humano) utilizando PCR convencional e digestão com a enzima sensível à metilação Hpall foi analisado de forma qualitativa (visualização em gel de poliacrilamida) e semi-quantitativa (sequenciamento), sendo realizado a partir de sangue periférico (todas as amostras) e de tecido placentário [apenas das placentas de fetos femininos (17 amostras)]. Para o estudo do padrão de expressão foi obtido cDNA por transcrição reversa, a partir de RNA total extraído do tecido placentário (30 amostras). A análise foi realizada por meio de PCR em tempo real. Foram utilizados os testes de Qui-quadrado e de t-Student, além do modelo linear generalizado para a análise estatística. Não houve diferença estatisticamente significativa para o parâmetro de inativação do cromossomo X entre os grupos controle e de PE, independente do tipo de tecido estudado (sangue ou placenta) quando foram aplicados os ensaios de HUMARA qualitativoe semi-quantitativo. Para o gene XIST e o microRNA miR-221 não foi evidenciada diferença estatisticamente significativa entre os grupos controle e de PE. O microRNA miR- 223 não apresentou transcritos detectáveis em nenhum dos grupos de estudo. Para o microRNA miR-222, houve diferença estatisticamente significativa, sendo que no grupo de PE a expressão foi mais elevada. Não foi encontrada associação entre o padrão de inativação do cromossomo X e a expressão do gene XIST e dos microRNAs estudados. Embora a inativação preferencial do cromossomo X tenha sido encontrada nos dois grupos, padrões de inativação preferencial extrema foram verificados em um número maior de casos com PE. Os resultados mostram que o miR-222 apresenta potencial para ser utilizado como marcador molecular da PE, sugerindo também que exista uma diminuição na expressão de seus genes-alvo que devem ser estudados como candidatos na patogênese da doença
FMRP 11200038240 Frasson, Danúbia
OLIVEIRA, Adriane Araújo de; RAMOS, Ester Silveira. Padrão de Inativação do Cromossomo X e Expressão de MicroRNAS X-Específicos na pré-Eclâmpsia. 2010.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-19042013-161635/ >.
Oliveira, A. A. de, & Ramos, E. S. (2010). Padrão de Inativação do Cromossomo X e Expressão de MicroRNAS X-Específicos na pré-Eclâmpsia. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-19042013-161635/
Oliveira AA de, Ramos ES. Padrão de Inativação do Cromossomo X e Expressão de MicroRNAS X-Específicos na pré-Eclâmpsia [Internet]. 2010 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-19042013-161635/