Auxílio à pesquisa 12/21238-2 - Sistema musculoesquelético, Regeneração muscular - BV FAPESP
Processo: 12/21238-2
Assunto(s): Sistema musculoesquelético Regeneração muscular Plasticidade muscular Receptores adrenérgicos beta 2 Fibras musculares esqueléticas Expressão de proteínas Células satélites de músculo esquelético
A regeneração do músculo esquelético é essencial para a integridade muscular, no entanto os mecanismos intracelulares envolvidos nesse processo ainda não estão totalmente esclarecidos. Um possível regulador do processo regenerativo muscular seria o receptor ²2-adrenérgico, pois têm sido descrito que agonistas ²2-adrenérgicos sintéticos são capazes de maximizar a recuperação do tamanho das fibras musculares em regeneração, acarretando na melhora da estrutura e consequente função de músculos de animais jovens. Além disso, estudos têm mostrado que o agonista ²2-adrenérgico clembuterol é capaz de antecipar a proliferação de células satélites em músculos jovens transplantados. Nosso grupo também demonstrou recentemente que o agonista ²2-adrenérgico formoterol melhora a regeneração estrutural e funcional de músculos esqueléticos de ratos idosos (Conte, T. C. et al., 2012). Portanto, o receptor ²2-adrenérgico possivelmente deve exercer um papel importante no processo regenerativo muscular. Dessa forma, nós decidimos estudar o papel do receptor ²2-adrenérgico na regeneração muscular utilizando-se camundongos knockout para este receptor. Para tanto, serão analisados aspectos macroscópicos (peso corporal e muscular), histológicos (coloração de azul de toluidina), imunohistoquímicos (detecção de macrófagos, células satélites ativadas/em proliferação e de células musculares em diferenciação no tecido muscular dos camundongos knockout), celulares (utilizando-se cultura de células satélites isoladas de músculos por meio do fluorescence activated cell sorter - FACS, para análise da proliferação e da diferenciação celular in vitro), moleculares (mensuração do conteúdo de AMPc tecidual, detecção da expressão de proteínas relevantes para o processo regenerativo muscular como miostatina, akirina-1 e de proteínas da via PI3K/ AKT/mTOR) e funcionais (análise da contração muscular) em diferentes fases da regeneração (1, 3, 10 e 21 dias após lesão) dos músculos soleus. O papel do receptor ²2-adrenérgico nos processos de proliferação das células satélites e subsequente diferenciação in vitro, também será abordado por meio do silenciamento pós-transcricional do gene do receptor ²2-adrenérgico através da transfecção de células satélites (isoladas dos membros posteriores de camundongos selvagens) com RNA de interferência. (AU)
SILVA, M. T.; WENSING, L. A.; BRUM, P. C.; CAMARA, N. O.; MIYABARA, E. H. Impaired structural and functional regeneration of skeletal muscles from beta 2-adrenoceptor knockout mice. ACTA PHYSIOLOGICA, v. 211, n. 4, p. 617-633, AUG 2014. Citações Web of Science: 10.