RI UFLA: Transformação de Stenocarpella maydis com os genes marcadores GFP e DsRed e patogenicidade dos transformados em sementes de milho
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Título: Transformação de Stenocarpella maydis com os genes marcadores GFP e DsRed e patogenicidade dos transformados em sementes de milho
Título(s) alternativo(s): Transformation of Stenocarpella maydis with genes markers GFP and DsRed and pathogenicity of transformed into maize seeds
Autor : Siqueira, Carolina da Silva
Referência: SIQUEIRA, Carolina da Silva. Transformação de Stenocarpella maydis com os genes marcadores GFP e DsRed e patogenicidade dos transformados em sementes de milho. 2009. 53 p. Dissertação (Mestrado em Fitopatologia) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2009.
Resumo: Entre os principais fungos que se associam às sementes de milho encontra-se Stenocarpella maydis, agente causal de podridões do colmo e de espiga que acarreta perdas consideráveis em regiões produtoras desta cultura no Brasil. Na literatura, poucas são as informações sobre os mecanismos de infecção e da dinâmica de transmissibilidade deste fungo via sementes deste hospedeiro. Para estes tipos de estudos, uma ferramenta importante tem sido o uso de microrganismos transformados por meio de marcadores moleculares, como GFP e DsRed. Dessa forma, com a realização deste trabalho, os objetivos foram transformar o referido fungo e avaliar o seu comportamento em associação com sementes de milho. Para a transformação do fungo, o protocolo utilizado permitiu obter protoplastos íntegros e em concentração necessária. O plasmídeo utilizado foi multiplicado satisfatoriamente e a concentração do antibiótico utilizado foi aferida. O protocolo de transformação foi adaptado em alguns aspectos, revelando ser eficaz, com base em observações da fluorescência em microscópio de epifluorescência. O fungo manteve suas características morfológicas, quando comparado aos isolados originais, sem transformação, e sua infectividade em sementes de milho também não foi alterada. Pela técnica de PCR foi confirmada a presença dos genes nos isolados transformados. A inoculação de sementes com os transformantes não só confirmou a patogenicidade destes, como possibilitou a observação da colonização nas sementes.
URI: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/1886
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