Diferentes espaçamentos de plantio e níveis de adubação sobre a atividade da redutase do nitrato em folhas do híbrido de mamoeiro UENF/CALIMAN-01
Diferentes espaçamentos de plantio e níveis de adubação sobre a atividade da redutase do nitrato em folhas do híbrido de mamoeiro UENF/CALIMAN-011
Different planting spacings and fertilization levels on the activity of nitrate reductase in leaves of papaya hybrid UENF/CALIMAN-01
Renata Venturim FontesI; Alexandre Pio VianaII; Messias Gonzaga PereiraII; Jurandi Gonçalves de OliveiraII; Diolina Moura SilvaIII; Sabrina Garcia BroettoIV; Mariela Mattos da SilvaV
IBolsista de Pós-doutoramento/CAPES, DSc. em Produção Vegetal, PPGBV/UFES. Vitória-ES. rvfontes@yahoo.com.br
IIProf. Associado, Lab. de Melhoramento Genético Vegetal - CCTA/LMGV/UENF. pirapora@uenf.br; messias@uenf.br; jugo@uenf.br
IIIProf. Associado, DSc. em Fisiologia Vegetal, PPGBV/UFES. biovegetal@terra.com.br
IVDoutoranda no Departamento de Alimentos e Nutrição Experimental/USP. sabroetto@yahoo.com.br
VDoutoranda em Fisiologia Vegetal/UFV. marielamtts@yahoo.com.br
Termos para indexação: mamão, espaçamento, adubação, redutase do nitrato.
Index terms: papaya, spacing, fertilizer, reductase of the nitrate.
O nitrogênio é o segundo nutriente mais exigido pelo mamoeiro, fomentando o seu crescimento vegetativo. A exigência do mamoeiro em relação a este nutriente é crescente e constante em todo o ciclo, sendo muito importante seu suprimento nos seis primeiros meses de vida da planta. Neste período, uma faixa de 23% do total de nitrogênio absorvido é exportada para as flores e frutos (LYRA, 2007). Dada a sua importância e a alta mobilidade no solo, o nitrogênio tem sido intensamente estudado, no sentido de maximizar a eficiência do seu uso. Para tanto, tem-se procurado diminuir as perdas do nitrogênio no solo, bem como melhorar a absorção e a metabolização do nitrogênio no interior da planta (BREDEMEIER; MUNDSTOCK, 2000).
O nitrato é a principal forma de nitrogênio disponível para as plantas após a calagem e adubações em plantios comerciais. Para que esse íon seja incorporado a compostos orgânicos no sistema radicular e na parte aérea, deve ser reduzido a amônio (NH4+) (ANDRADE NETTO, 2005; FONTES et al., 2008). Após a absorção do nitrato pelas raízes, inicia-se o processo de assimilação do nitrogênio. Segundo Ferreira et al. (2002), este processo é vital, pois controla o crescimento e o desenvolvimento das plantas, e tem efeitos marcantes sobre a fitomassa e a produtividade final das culturas. A taxa e a quantidade de nitrogênio assimilado pelas plantas durante o seu ciclo dependem da atividade das enzimas envolvidas no ciclo do nitrogênio e da disponibilidade de energia necessária para os processos de assimilação (BREDEMEIER; MUNDSTOCK, 2000).
O primeiro passo do processo de assimilação do nitrogênio é realizado pela redutase do nitrato (RN), enzima que catalisa a transformação do nitrato (NO3-) em nitrito (NO2-) no citossol. A RN é considerada a enzima-chave no processo de absorção do nitrogênio, pois catalisa o primeiro passo na via de redução do nitrato (FONTES et al., 2008). O nitrito formado pela ação catalisadora da RN é posteriormente transformado em amônio (NH4+) pela ação da redutase do nitrito. O amônio produzido é então incorporado em ácidos orgânicos, dando origem aos aminoácidos, a partir de reações subsequentes catalisadas pelas enzimas glutamina sintetase (GS) e glutamato sintase (GOGAT) (DONATO et al., 2004). A GS catalisa a conversão do aminoácido glutamato (Glu) para a amida glutamina (Gln) enquanto a GOGAT catalisa a transferência redutiva do N-amídico da GLN para o 2-oxoglutarato, para formar dois Glu (ANDRADE NETTO, 2005).
A metodologia in vivo de análise da RN oferece uma estimativa satisfatória da redução do íon nitrato in situ, possibilitando a quantificação do nitrito produzido por células intactas de pequenos segmentos de tecidos vegetais e tem sido amplamente utilizada como indicadora do metabolismo do nitrogênio nos vegetais, sendo considerada por muitos autores como a mais adequada para a comparação da atividade da redutase do nitrato entre espécies diferentes ou entre tratamentos distintos (NIEVOLA;MERCIER, 2001).
Na literatura, são escassos os trabalhos que relacionam a atividade da redutase do nitrato com o período de avaliação, com o manejo de espaçamento de plantio ou com o manejo de adubação NPK em espécies cultivadas, a exemplo do mamoeiro. Dessa forma, este trabalho teve o objetivo de avaliar o efeito de diferentes espaçamentos de plantio e de níveis de adubação NPK, bem como do período de avaliação, sobre a atividade da redutase do nitrato em folhas do híbrido de mamoeiro UENF/CALIMAN-01, visando a sugerir possível ajuste em seu manejo de adubação nitrogenada, no sentido de maximizar a eficiência do uso do nitrogênio.
O experimento foi conduzido na Fazenda Caliman Agrícola S/A, localizada no município de Linhares, norte do Estado do Espírito Santo, cujas coordenadas geográficas são 19º 10' de latitude sul e 39º 50' de longitude oeste e altitude de 30m (MARINHO, 2007). A precipitação pluviométrica anual é de 1.250 mm, a temperatura média de 23 ºC e a umidade relativa do ar de 83,5% (ROLLIM et al., 1999; SIAG/Incaper, 2006).
A área experimental possui solo com fertilidade natural baixa, entretanto não apresenta restrições para o uso agrícola nem necessidade de práticas especiais de manejo para controle de erosão (GOMES FILHO, 2005).
O sistema de irrigação adotado para o experimento foi o de microaspersão, sendo um mesmo microaspersor utilizado para quatro plantas. Neste sistema, a água é aplicada diretamente sobre a região radicular, com pequena intensidade e alta frequência (turno de rega de 1 a 5 dias), de modo a manter a umidade do solo na zona radicular próxima à capacidade de campo (BERNARDO et al., 1996).
O delineamento experimental adotado foi o de blocos casualizados, em arranjo fatorial, com quinze tratamentos e quatro repetições. Adotou-se o sistema de fileiras duplas com o espaçamento fixo entre fileiras duplas de 3,6 m e de 2,0 m entre as fileiras que compunham a fileira dupla. Entre plantas dentro de fileiras duplas, foram testados três espaçamentos: E1 = 1,8 m entre plantas (30 plantas parcela -1); E2 = 2,25 m entre plantas (24 plantas parcela -1), e E3 = 2,7 m entre plantas (20 plantas parcela-1). O número variável de plantas entre os diferentes espaçamentos foi ajustado para que todas as parcelas tivessem a mesma área útil de plantio. Dentro de cada espaçamento, foram testados cinco níveis de adubação NPK convencional (A1 = 80% do padrão; A2 = 100% do padrão da empresa; A3 = 120% do padrão; A4 = 140% do padrão, e A5 = 160% do padrão). O padrão de adubação NPK da empresa consiste em 350; 105 e 660 Kg ha-1 ano-1 de sulfato de amônio (20% de N), superfosfato simples (18% de P) e cloreto de potássio (60% de K), respectivamente.
A atividade da redutase do nitrato no mamoeiro UENF/CALIMAN-01 foi determinada em folhas jovens completamente expandidas e fisiologicamente maduras, cuja axila continha uma primeira flor aberta. Foi retirada uma amostra por parcela, totalizando 60 amostras por período avaliado (meses de março a julho). As folhas eram retiradas das plantas no campo e transportadas dentro de sacos plásticos pretos colocados em bolsa térmica com gelo e permaneciam nessas condições, por algumas horas, até o momento da chegada ao laboratório. Para a determinação da atividade da RN, utilizou-se o método in vivo descrito por Jaworski (1971) com modificações feitas por Fontes et al. (2008). Este método baseia-se no princípio de que a concentração de nitrito (NO2-) liberada por fragmentos de tecidos foliares em uma solução tampão, na presença de um agente permanente (propanol), do substrato (NO3-) e de um saponificador (triton), reflete a atividade potencial da RN in situ. Esse conjunto é então transferido para um dessecador, onde é mantido sob vácuo por um minuto, sendo essa operação repetida mais duas vezes. Em seguida, o frasco de incubação é levado para banho-maria, com agitação constante a 30ºC, no escuro. Amostras de 0,8 mL do extrato são retiradas do banho-maria após 40 minutos de incubação. Mistura-se a essas amostras 0,3 mL de sulfanilamida a 1% e 0,3 mL de N-(1-napthly)-ethylenediamine dihydrochloride a 0,02%, completando o volume para 5 mL. Após uma hora de reação, a atividade da enzima é estimada pela quantidade de nitrito liberada na solução de incubação, medida em espectrofotômetro a 540 nm, e expressa em nmoles de NO2- h-1 g-1 de matéria fresca.
Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância, com teste F a 5% de probabilidade, no programa SAS. Os graus de liberdade dos fatores em estudo foram desdobrados via teste de comparação de médias, utilizando-se para isto do teste de Tukey, a 5% de significância, no programa GENES (CRUZ, 2006).
A análise de variância (Tabela 1) indicou efeito apenas do espaçamento, período de avaliação e interação entre espaçamento e período de avaliação sobre a atividade da redutase do nitrato (RN). Entretanto, essas diferenças da atividade da RN não se apresentaram diretamente relacionadas aos níveis de adubo nitrogenado aplicado.
A atividade da redutase do nitrato variou entre os períodos de avaliação (Tabela 2), sendo que os maiores valores de atividade dessa enzima foram obtidos nos meses de março, maio e junho, valores superiores aos encontrados, por exemplo, por Fontes et al. (2008), trabalhando com plantas de mamoeiro das cultivares Tainung 01 e Sunrise Solo 72/12. Os menores valores obtidos para a atividade da RN, no presente estudo (abril e julho), estão próximos aos encontrados por Fontes (2003), Fontes (2005) e Fontes et al. (2008), que também trabalharam com mamoeiro, e por Donato et al. (2004), que determinaram a atividade desta enzima em plantas de cana.
A variação da atividade da redutase do nitrato nos diferentes períodos de avaliação, observada neste estudo, pode ser explicada pela influência de fatores variados. O ATP é requerido para a inativação da enzima RN, que ao ser fosforilada perde sua atividade (TAIZ; ZEIGER, 2006). O NADPH é utilizado como aceptor de elétrons e como cofator da reação de oxirredução que é mediada pela RN, que converte o nitrato em nitrito (KAISER; HUBER, 2001). Os carboidratos fornecem energia para as reações endergônicas do processo, como a entrada do nitrato nas células (GALON; SILVA, 2001). Em contrapartida, a capacidade fotossintética das plantas é dependente do suprimento de nitrogênio, pois uma considerável fração desse elemento encontra-se alocada nas folhas em proteínas e em pigmentos envolvidos diretamente no processo fotossintético (CARELLI et al., 1996; DONATO et al., 2004). Por essa razão, a capacidade fotossintética das plantas e o metabolismo do nitrogênio estão diretamente interligados. Esta relação entre a atividade da redutase do nitrato e a fotossíntese em plantas já foi observada por Huber et al. (1992) em espinafre, Fontes (2003) em mamoeiro cv. Sunrise Solo, por Andrade Netto (2005) em cafeeiro arábica e por Fontes (2005) e Fontes et al. (2008) em mamoeiro cv. Tainung 01 e Sunrise Solo 72/12.
Assim, a atividade da redutase do nitrato apresentou os maiores valores nos meses de março, maio e junho, e os menores valores nos meses de abril e julho. Esses resultados poderiam ser explicados quando se verifica o valor de temperatura média, umidade relativa e de pluviosidade obtidos em cada mês (Tabela 3). Essas variáveis estão relacionadas diretamente ao processo fotossintético, como descrito anteriormente. Entretanto, em relação à temperatura média e à umidade relativa, em todos estes cinco meses de avaliação da atividade da RN, não foram obtidos valores inadequados para o cultivo do mamoeiro, de acordo com os valores considerados adequados por Trindade (2000). Nos meses de março, maio e junho, onde a atividade da RN foi maior, os valores de pluviosidade apresentaram-se baixos. E nos meses de abril e julho, onde a atividade dessa enzima apresentou os menores valores, a pluviosidade foi muito alta no mês de abril e, ao contrário, muito baixa no mês de julho (Figura 1). Dessa forma, a quantidade de chuva não deve ter sido um dos fatores determinantes no comportamento da atividade da RN nas plantas de mamoeiro aqui avaliadas, devido, também, a cultura ter sido irrigada periodicamente.
O efeito do espaçamento de plantio na atividade da RN foi verificado no mês de março. No tratamento com adubação de 100% de NPK, a atividade da enzima foi menor no espaçamento E3 em relação ao valor obtido no espaçamento E1. Na adubação de 120% de NPK, o menor valor obtido para a atividade da enzima foi no espaçamento E2, e o maior valor, no espaçamento E1 (Tabela 2). Nestes dois casos, a atividade da RN foi maior nas plantas cultivadas mais adensadas, ou seja, com menor espaçamento de plantio entre elas. A mesma situação foi verificada no mês de abril (na adubação de 140% NPK), em que a atividade da redutase do nitrato foi maior nas plantas cultivadas no espaçamento E1 e menor naquelas cultivadas no espaçamento E2. Entretanto, na adubação de 160% de NPK, o maior valor para atividade da RN nas plantas do híbrido de mamoeiro UENF/CALIMAN-01 foi observado no maior espaçamento entre plantas testado, espaçamento E3, enquanto o menor valor foi obtido no espaçamento E2. Apenas nesta situação, o comportamento da atividade enzimática da RN poderia ser explicado pelo fato de que a utilização de maior espaçamento de plantio reduziria a competição por luz, nutrientes e água. De acordo com Resende e Costa (2003), a densidade de plantio é um fator a ser levado em consideração, uma vez que as pressões exercidas pela população de plantas afetam de modo marcante seu crescimento e desenvolvimento. Isto porque, quando há um aumento do número de plantas por unidade de área, há também um aumento na competição por fatores essenciais de crescimento, como luz, nutrientes e água (SCARPARE FILHO; KLUGE, 2001).
Em maio e junho, verificou-se efeito do espaçamento entre plantas apenas dentro da adubação de 160% de NPK, em que o maior valor encontrado foi no espaçamento E1, e os menores valores, no espaçamento E2 (Tabela 2).
No mês de julho, apenas dentro da adubação de 140% de NPK, foi observado maior atividade da RN nos espaçamentos E1 e E2 em relação ao espaçamento E2 (Tabela 2).
Observa-se que, para a maioria dos meses avaliados (abril, maio e junho), o efeito do espaçamento na atividade da redutase do nitrato foi observado dentro do maior nível de adubação testado, que foi de 160% de NPK. Como não se observou diferença estatística da atividade da RN nos espaçamentos com menores níveis de adubação (80%, 100% e 120% de NPK) e que os valores de atividade da enzima se encontraram adequados, ou até mesmo superiores aos já obtidos na literatura para cultivares de mamoeiro, resolveu-se optar pela sugestão de utilização do nível de 80% de NPK na adubação, uma vez que a produtividade das plantas não diferiu entre os tratamentos (dados não mostrados). Essa sugestão baseia-se na economia de gastos com adubo nitrogenado, bem como na minimização do impacto ao meio ambiente da utilização de altas doses de adubação contendo nitrogênio. Em relação à indicação do espaçamento mais adequado (E1, E2 ou E3), dentro da adubação de 80% de NPK, observa-se que, em todos eles, não houve diferença significativa na atividade da redutase do nitrato em todos os meses avaliados. Dessa forma, todos os três espaçamentos testados poderiam ser utilizados no manejo de adubação nitrogenada para o híbrido de mamoeiro UENF/CALIMAN-01 quando associados à adubação A1 (80% de NPK).
Dentre os tratamentos testados, o nível A1 (80% do padrão da empresa), independentemente dos espaçamentos, poderia ser indicado no manejo de adubação nitrogenada para o híbrido de mamoeiro UENF/CALIMAN-01, pois em todos eles a atividade da redutase do nitrato em, praticamente, todos os períodos avaliados, apresenta valores adequados, ou até mesmo superiores aos encontrados na literatura em cultivares de mamoeiro. A redução da adubação NPK pode ser justificada, uma vez que não há diferença na produtividade das plantas entre os tratamentos avaliados.
À empresa Caliman Agrícola, à FINEP, ao CNPq e à FAPERJ, pelo apoio logístico e financeiro para a condução das pesquisas.
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