Bolsa 15/25067-6 - Cultura de células, Biologia celular - BV FAPESP
Mathew B. Grisham | Louisiana State University - Estados Unidos
Mecanismos envolvidos no dano renal causada pela peconha de bothrops alternatus (u...
Mecanismos envolvidos no dano renal causado pela peçonha de Bothrops alternatus (U...
Avaliação do efeito dos inibidores da óxido nítrico sintase sobre a metilação do DNA e sobre a atividade e expressão das enzimas DNA metiltransferase em cultura de células de cérebro de rato
Processo: 15/25067-6
Supervisor no Exterior: Eero Castren
Vinculado à bolsa: 15/06271-1 - Avaliação do efeito dos inibidores da óxido nítrico sintase sobre a metilação do DNA e sobre a atividade e expressão das enzimas DNA metiltransferases no cérebro de ratos submetidos ao estresse, BP.DR
Assunto(s): Cultura de células Biologia celular
A maioria dos episódios de depressão maior (DM) é precedida de eventos estressores. O estresse promove aumento na liberação de glutamato, síntese e liberação de óxido nítrico (NO), bem como alterações epigenéticas induzidas pelo aumento da metilação do DNA em regiões promotoras de genes envolvidos na fisiopatologia da DM. Já foi demonstrado que o estresse oxidativo e o NO podem modular a metilação do DNA e que inibidores da NOS induz um aumento na expressão do BDNF e na sinalização do receptor TrkB no hipocampo de ratos. Estes resultados sugerem uma relação entre NO, plasticidade neuronial e modulação epigenética. Assim, mais estudos são necessários para melhor compreender estes mecanismos intracelulares. Porém, não há relatos na literatura sobre o envolvimento do NO na modulação da metilação de DNA em cultura de células neuroniais estimuladas com corticosterona. Portanto, o objetivo deste trabalho é testar a hipótese de que o aumento da síntese de NO em células neuroniais tratadas com corticosterona, modularia a atividade e/ou a expressão das enzimas DNMTs (DNA metiltransferases) e, consequentemente, a metilação do DNA em regiões promotoras de genes relacionados com a resposta comportamental ao estresse e com a neurobiologia da depressão. Para isso, culturas de célula neuroniais serão desafiadas com corticosterona e tratadas com inibidores das enzimas nNOS (7-NI) ou iNOS. Serão avaliados os níveis de NO e a viabilidade celular frente aos tratamentos farmacológicos, assim como o papel do NO e dos inibidores da NOS sobre a metilação dos genes BDNF e TrkB, e a expressão destas proteínas, e também atividade e expressão de DNMTs, em cultura de células. Os resultados do presente trabalho poderão contribuir para o avanço acerca dos mecanismos intracelulares envolvidos na neurobiologia da DM, possibilitando a identificação de novos alvos biológicos de interesse terapêutico no tratamento da DM.