ReP USP - Detalhe do registro: Adsorção ótima de bicamada fosfolipídica sobre sílica e reconstituição do reconhecimento receptor-ligante
Adsorção ótima de bicamada fosfolipídica sobre sílica e reconstituição do reconhecimento receptor-ligante (2006)
Autor USP: MOURA, SÉRGIO DE PAULA - IQ
Subjects: LIPOSSOMOS; FOSFOLIPÍDEOS; ADSORÇÃO; RECEPTORES CELULARES
Abstract: Este projeto teve como objetivo geral continuar a avaliar a adequação de anfifilicos que se agregam em solução aquosa formando bicamadas, para recobrir superficies de sílica. Em paralelo, foi objetivada a reconstituição do reconhecimento receptor-ligante, tendo como modelo o monosialogangliosídio GMI e a enterotoxina do vibrião da cólera. Os resultados obtidos poderão se mostrar de grande valor em aplicações práticas que envolvem a construção de sistemas de detecção e quantificação de substâncias ou moléculas específicas. A adsorção e estabilidade de bicamadas contendo fosfatidilcolina (PC) ou misturas de brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB) e dipalmitoilfosfatidilcolna (DPPC) sobre a superficie de nanopartículas de sílica foi estudada através de isotermas de adsorção por dosagem do fosfato inorgânico, análises de sedimentação por imagens fotográficas e medidas dos diâmetros médios (D 'IND.z') e potenciais-zeta ('dzeta') de partículas por espectroscopia de correlação de fótons. Foram avaliadas as afinidades entre as bicamadas e a superficie das nanopartículas e a estabilidade do sistema em função da força iônica, do pH e da concentração adicionada de lipídio. A afinidade das bicamadas pela superficie da sílica apresentou uma correlação com as forças de van der Waals e as pontes de hidrogênio que se formam entre os grupos químicos do anfifilico e aqueles de superficie da sílica. A formação de uma única bicamada lipídica de PC sobre a sílica foidetectada, o que levou à estabilidade coloidal do sistema particulado. As bicamadas mistas de DPPC/DODAB por sua vez apresentaram uma afinidade decrescente pela sílica com a elevação da porcentagem de DODAB na bicamada. Os dados de isoterma e de 'dzeta' das partículas sugerem uma ) separação fisica entre o DPPC e o DODAB. O conjunto otimizado partícula de sílica/bicamada de PC (partícula biomimética) foi assim utilizado para promover a incorporação do GM 1 micelar nas bicamadas, medida por tluorescência com a utilização da sonda GMl pireno, seguida do reconhecimento e ligação da toxina da cólera (CT) ao complexo formado. A transferência do GMl das micelas para as partículas se mostrou dependente da disponibilidade de bicamadas adsorvidas nestas e da ausência de bicamadas não-adsorvidas, livres em dispersão. Para avaliar a ligação da toxina da cólera às partículas biomiméticas foram calculadas isotermas de adsorção a partir da dosagem de proteína não ligada que resta no sobrenadante. A ligação específica da CT na presença de bicamadas de PC e GM 1 foi de 67 'POR CENTO' em massa do total da proteína adicionada, revelando uma ligação positiva entre receptor e ligante. A estequiometria revela que a proporção molar PC: GMI: CT é de 300: 5: 1 respectivamente. A proporção de 1 CT: 5 GMl está de acordo com a literatura onde experimentos de difração de raios-X mostram a estrutura tridimensional do pentâmero CTB 'IND.5' ligado a cinco unidades de pentasacarídeo do GMl
MOURA, Sérgio de Paula; CARMONA-RIBEIRO, Ana Maria. Adsorção ótima de bicamada fosfolipídica sobre sílica e reconstituição do reconhecimento receptor-ligante. 2006.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2006. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-29112006-194153/ >.
Moura, S. de P., & Carmona-Ribeiro, A. M. (2006). Adsorção ótima de bicamada fosfolipídica sobre sílica e reconstituição do reconhecimento receptor-ligante. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-29112006-194153/
Moura S de P, Carmona-Ribeiro AM. Adsorção ótima de bicamada fosfolipídica sobre sílica e reconstituição do reconhecimento receptor-ligante [Internet]. 2006 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-29112006-194153/