Patrícia França, Mayara Magri e Jackson Antunes foram os primeiros atores confirmados na trama em junho de 2004. Originalmente Cleo foi a primeira convidada para interpretar Isaura, porém a atriz recusou, alegando que não estava pronta para o papel central de uma trama, fato este que levou-a a recusar a protagonista de Cabocla, na Rede Globo, na mesma época. Mel Lisboa chegou a ser cogitada, porém a direção não chegou a um consenso sobre sua escalação parte da equipe era contra por achá-la inexperiente e seu nome foi desistido. Bianca Rinaldi, que vinha de duas protagonistas bem sucedidas no SBT, foi convidada por Herval Rossano, sendo anunciada como Isaura. A atriz abriu mão de um papel na novela América, o qual seria para um papel pequeno. Bianca recebeu críticas negativas ao ser anunciada por ser loira de olhos azuis, além de ter a pele bronzeada, diferente da descrição do livro que citava Isaura como “tão branca quanto a Lua”, sendo que a atriz teve que passar por um processo de caracterização, que incluía pintar os cabelos de preto, usar lentes de contato e evitar o contato com o sol meses antes. Lavínia Vlasak foi convidada para interpretar a antagonista Branca, porém recusou pela trama ser gravada em São Paulo, o que lhe faria ter que mudar-se durante meses a atriz aceitaria o convite um ano depois para Prova de Amor, quando a teledramaturgia da Record TV migrou para o Rio de Janeiro. Após o bom desempenho em Malhação, Henri Castelli foi convidado para interpretar o protagonista Álvaro, porém o ator acabou tendo seu contrato renovado com a Rede Globo e sendo escalado para o antagonista de Como uma Onda. Theo Becker foi escolhido para o papel após realizar testes com outros cinco atores, incluindo Miguel Thiré e Caio Junqueira que também foi incluído na trama como Geraldo, melhor amigo do protagonista. Rubens de Falco foi convidado para interpretar Comendador Almeida exatamente por já ter feito parte da primeira versão da telenovela, no qual interpretou Leôncio. Leopoldo Pacheco foi convidado pessoalmente por Herval Rossano por seu destaque no teatro. Isaura (Bianca Rinaldi) Os caminhos e desafios da jovem e bela Isaura para conquistar a liberdade vão comover os brasileiros e contribuir com os resultados de sua campanha. Miguel (Jackson Antunes) O público vai acompanhar com muita emoção, os desafios do corajoso feitor para livrar a filha das maldades de Leôncio e conseguir a tão sonhada alforria. Juliana (Valquíria Ribeiro) Após viver um romance proibido com Miguel, a escrava da Fazenda Engenho do Sol morre após o parto mas deixa uma lição de amor que vai inspirar a família brasileira. Comendador Almeida (Rubens de Falco)