ReP USP - Detalhe do registro: Localização subcelular e padrão de expressão temporal e tecidual de novas proteínas de Drosophila melanogaster conservadas evolutivamente: dATX2 e dA2bp1/Fox1
Localização subcelular e padrão de expressão temporal e tecidual de novas proteínas de Drosophila melanogaster conservadas evolutivamente: dATX2 e dA2bp1/Fox1 (2008)
Poleto, Deise Cristina
Paçó-Larson, Maria Luisa (Orientador)
USP affiliated author: POLETO, DEISE CRISTINA - FMRP
Sigla do Departamento: RBP
Subjects: DROSOPHILA; BIOLOGIA MOLECULAR; BIOLOGIA CELULAR
Abstract: dATX2 é membro da família da ataxina-2 (A TX2), proteína cuja mutação é associada com a ataxia espinocerebelar do tipo 2 e uma forma hereditária dominante de Parkinsonismo. dA2bp1/Fox1 é parte de uma nova família de proteínas ligantes de RNA, inicialmente identificada em mamíferos por interagir com a ataxina 2 e que recentemente tem sido associada com autismo. As funções de ambas as famílias de proteínas são ainda desconhecidas, embora estudos de diferentes membros indiquem que estejam envolvidas com regulação pós-transcricional. Estudos bioquímicos sugerem que, semelhante à sua ortóloga em humanos, a dATX2 tem papel direto na regulação da tradução. Por outro lado, informações sobre a A2bp1/Fox1 de Drosophila, cujo gene é anotado como CG32062, inexistem na literatura. Neste trabalho, através do uso de anticorpos policlonais produzidos contra fragmentos dos polipeptídios deduzidos de cDNAs demonstramos a existência de duas isoformas de ataxina-2 expressas diferencialmente. A isoforma menor (dATX2- PC) corresponde à isoforma maior (dATX2-PB) truncada em 61 aminoácidos no amino-terminal. dATX2-PC é expressa de modo regulado no desenvolvimento. dATX2-PB é detectada somente em extratos de tecidos dissecados (ovário, corpo gorduroso, discos imaginais, cérebro, carcaça e glândula salivar), sendo mais abundante em discos imaginais, cérebro e ovário. dA2bpl/Fox-1 também expressa diferentes isoformas proteicas na faixa de 84-88 kDa. Dentre os tecidos analisados, a isofomamaior se mostrou mais abundante no cérebro, pouco abundante em corpo gorduroso e indetectável em carcaça, enquanto a isoforma de menor peso molecular é mais abundante em carcaça. Experimentos de imuno-localização em células S2R+ mostraram que ambas as isoformas de dATX2 são detectadas predominantemente no citoplasma. Em condições fisiológicas de crescimento, a isoforma B apresenta-se concentrada em poucos focos arredondados de cerca de 0,5 'mü'm de ) diâmetro numa percentagem pequena de células, enquanto a isoforma C parece se acumular em focos perinucleares pontuados ou alongados na maioria das células analisadas. A localização de dATX2-PB em focos citoplasmáticos , aumenta significativamente em células submetidas a choque térmico, sugerindo que essa isoforma migre para corpos de estresse podendo participar da inibição da síntese proteica em resposta ao estresse. dA2bpl/Fox-1 também é de localização citoplasmática, mas diferentemente da dATX2 se localiza em inúmeros focos arredondados de cerca de 2-3 'mü'm de diâmetro em todas as células, num padrão semelhante ao descrito para proteínas localizadas em partículas citoplasmáticas de ribonucleoproteínas. A inibição da síntese proteica por cicloheximida, mas não por puromicina, interfere com o padrão de distribuição em foco da dA2bpl/Fox-1 indicando que essa proteína se localize em P-bodies, complexos de mRNP envolvidos na degradação e/ou estocagem de mRNAs. Embora dATX2 não tenha sido detectada noimunoprecipitado de dA2bp1/Fox1, sugerindo que elas não interajam fisicamente, no conjunto os resultados obtidos indicam que membros dessas duas famílias de proteínas participem de processos de controle da tradução em Drosophila melanogaster
Data da defesa: 07.05.2008
POLETO, Deise Cristina; PAÇÓ-LARSON, Maria Luisa. Localização subcelular e padrão de expressão temporal e tecidual de novas proteínas de Drosophila melanogaster conservadas evolutivamente: dATX2 e dA2bp1/Fox1. 2008.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2008.
Poleto, D. C., & Paçó-Larson, M. L. (2008). Localização subcelular e padrão de expressão temporal e tecidual de novas proteínas de Drosophila melanogaster conservadas evolutivamente: dATX2 e dA2bp1/Fox1. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
Poleto DC, Paçó-Larson ML. Localização subcelular e padrão de expressão temporal e tecidual de novas proteínas de Drosophila melanogaster conservadas evolutivamente: dATX2 e dA2bp1/Fox1. 2008 ;