Outro ponto a ser considerado é a osmolaridade, pois a ação negativa das soluções hipertônicas sobre a progressão dos espermatozoides pode chegar a paralisá-los (Mies Filho, 1982). Porém, a lactose, presente no DII, atua extracelularmente mantendo a pressão osmótica durante a estocagem do sêmen (Salamon e Maxwell, 2000), e considera-se que as fórmulas comerciais apresentam valor próximo dos 300 miliosmóis, pressão equivalente à do sêmen (Hafez, 1995). Neste estudo, não se realizou essa mensuração e, portanto, não foi possível esclarecer se este foi um fator determinante.
Os valores referentes à característica do vigor nos cinco tratamentos estudados (Tab. 2), com o transcorrer do tempo, diminuíram progressivamente nos tratamentos DI, DIII e DIV, tornando-se mais evidentes ao final das 48h (P<0,05). As amostras dos tratamentos DII e DV foram as que mantiveram o vigor ao longo do tempo, com valores aceitáveis e acima dos demais tratamentos (P<0,05).