Bolsa 11/23377-7 - Fisiologia, Fármacos neuroprotetores - BV FAPESP
Processo: 11/23377-7
Bolsa(s) vinculada(s): 14/11405-4 - Sobrevivência e plasticidade de motoneurônios alfa/gama após esmagamento do nervo isquiático em ratos neonatos, BE.EP.DD
Assunto(s): Fisiologia Fármacos neuroprotetores Fibrina Leucócitos mononucleares Células da medula óssea Venenos de origem animal Serpentes Nervo isquiático Axotomia Modelos animais
A realização de reparos eficientes em lesões do sistema nervoso é um desafio antigo para a Medicina. A utilização de modelos experimentais bem estabelecidos permite avaliar o potencial de diferentes tratamentos a fim de prevenir as alterações induzidas. O sistema nervoso de ratos neonatos apresenta maior sensibilidade à lesão, que leva conjuntamente a degeneração de neurônios sensitivos e motores medulares. Neste sentido, a axotomia do nervo periférico destes animais é um modelo consagrado para o estudo de agentes ou técnicas que possam levar a neuroproteção. Após a transecção de um nervo periférico, surge a necessidade de se reaproximar os cotos. Estes podem ser reaproximados por diversas técnicas cirúrgicas. O selante de fibrina derivado da peçonha de serpente (selante do CEVAP) tem sido amplamente utilizado como adesivo e scaffold. Sua aplicação possibilita a associação com Células Tronco Mononucleares de Medula Óssea (CTMMO). Estudos recentes mostraram resultados promissores em relação ao implante dessas células para tratamento de doenças e lesões do SNC, atribuindo-se a melhora funcional à produção de fatores tróficos locais. Portanto, os selantes de fibrina aparecem como uma excelente alternativa, pois além de adesivos ainda promove a estabilização das células tronco no local aplicado. Assim, o objetivo do presente projeto será avaliar o potencial neuroprotetor e regenerativo das Células Tronco Mononucleares de Medula Óssea (CTMMO), após neurorrafia com selante de fibrina sobre neurônios motores medulares e sensitivos de ratos neonatos submetidos à axotomia do nervo isquiático. Os animais serão divididos em quatro grupos experimentais: Grupo I (n=30): será realizada a axotomia do nervo isquiático sem tratamento; Grupo II (n=30): axotomia do nervo isquiático, seguida de neurorrafia término terminal com selante de fibrina; Grupo III (n=30): axotomia do nervo isquiático e tratamento com CTMMO; Grupo IV (n=30): axotomia do nervo isquiático, seguida de tratamento com CTMMO e neurorrafia término terminal com selante de fibrina. Serão utilizadas as técnicas de citometria de fluxo para caracterização das CTMMO; microscopia eletrônica de transmissão para análise da plasticidade sináptica; imunoistoquímica para verificação da gliose reativa e determinação da produção local de fatores tróficos in vivo pelas CTMMO. A microscopia de luz será empregada para investigar a sobrevivência neuronal; testes motores serão realizados para o cálculo do índice funcional do nervo isquiático, além de testes sensitivos para avaliar a melhora funcional nociceptiva. Por fim, espera-se que o selante de fibrina atue na neurorrafia preservando as células tronco e permitindo sua ação neuroprotetora na regeneração neuronal. (AU)
BISCOLA, Natália Perussi. Efeitos neuroprotetor e regenerativo do selante de fibrina derivado da peçonha de serpente combinado com células tronco mononucleares após reparo do nervo isquiático de ratos neonatos. 2016. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Medicina..