Bolsa 04/02226-7 - Fatores de transcrição - BV FAPESP
Modulação do Transporte em Túbulos Renais por Angiotensina II.
Modulacao transcricional de nhe3 nas acidoses metabolicas e respiratorias.
Processo: 04/02226-7
Beneficiário: Pedro Henrique Imenez Silva
As questões que pretendemos abordar durante o desenvolvimento do projeto proposto se referem ao estudo dos mecanismos de regulação transcricional do gene NHE3, com o objetivo de identificar os elementos da região promotora-reguladora do gene (elementos cis) que são importantes para modulação da transcrição gênica por estímulos acidóticos, seja na acidose respiratória (acidificação pela adição CO2-10%) seja na acidose metabólica (acidificação do meio por adição de HCI, ajustando o pH em 6,9), e os mecanismos pelos quais esses elementos são utilizados para ativação da transcrição do gene. Uma vez identificados os elementos cis, trataremos de identificar os fatores de transcrição (elementos trans) importantes na atividade funcional da região promotora/regulatória do gene NHE3, em células de túbulos proximais, e a relação entre a ativação desses fatores e as vias sinalizadoras envolvendo AMPc/PKA, Ca2+/PKC e tirosina kinases. Nesses estudos, analisaremos a atividade do promotor-NHE3 com a utilização do gene repórter luciferase. Os elementos específicos no D NA e os fatores de transcrição que interagem com os mesmos serão identificados com a utilização das técnicas de "footprinting" e "gel shift", respectivamente. (AU)