ENSAIOS IMUNOLÓGICOS NAS ENFERMIDADES VIRAIS ANTICORPOS MONOCLONAIS GENÉTICA MOLECULAR CITOMETRIA DE FLUXO - PDF
Download "ENSAIOS IMUNOLÓGICOS NAS ENFERMIDADES VIRAIS ANTICORPOS MONOCLONAIS GENÉTICA MOLECULAR CITOMETRIA DE FLUXO"
Heitor Dias Carvalho
1 ENSAIOS IMUNOLÓGICOS NAS ENFERMIDADES VIRAIS I - INTRODUÇÃO *NOVAS TECNOLOGIAS ANTICORPOS MONOCLONAIS GENÉTICA MOLECULAR CITOMETRIA DE FLUXO
2 *DECISÃO DIAGNÓSTICA CONFIRMAÇÃO TRATAMENTO MONITORAMENTO PREVENÇÃO DE DOENÇAS *DESAFIO INFLUÊNCIA DE DIVERSOS FATORES INTERFERÊNCIA LIMITAÇÕES
3 *QUALIDADE DO LAUDO FASE PRÉ-ANALÍTICA FASE ANALÍTICA FASE PÓS-ANALÍTICA *FASE PRÉ-ANALÍTICA SOLICITAÇÃO DO EXAME PELO MÉDICO INFORMAÇÕES CLÍNICAS, SUSPEITA DIAGNÓSTICA PREPARO DO PACIENTE: JEJUM, SORO
4 *FASE ANALÍTICA: EXECUÇÃO DO EXAME, METODOLOGIAS AGLUTINAÇÃO HEMAGLUTINAÇÃO IMUNOFLOURESCÊNCIA QUIMIOLUMINESCÊNCIA IMUNOFLUORIMETRIA IMUNO ENZIMA ENSAIO (ELISA) *FASE PÓS-ANALÍTICA: RESULTADOS FALSO-POSITIVO FALSO-NEGATIVO
5 *INFECÇÃO ANTÍGENO SISTEMA IMUNE ANTICORPOS CURA FATORES GENÉTICOS E IMUNOLÓGICOS INERENTES AO INDIVÍDUO: CRONICIDADE OU MORTE *CLASSE DO ANTICORPO ANTICORPOS IGM FASE AGUDA DA DOENÇA ANTICORPOS IGG DOENÇA ATUAL, PREGRESSA OU IMUNIDADE
6 II DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
7 *MONONUCLEOSE COMENTÁRIO Mononucleose infecciosa aguda: Herpes vírus Epstein-Barr infecta células epiteliais e linfócitos. Os pacientes apresentam anticorpos que reagem com hemácias de carneiro ou de cavalo, chamados de anticorpos heterófilos, da classe IGM, e não específicos, que aparecem no soro dos pacientes entre a 2ª e 3ª semana da doença.
8 *DIAGNÓSTICO E INTERPRETAÇÃO MONOTESTE: reação de hemaglutinação em lâmina com hemácias de cavalo formolizadas Reação de Hoff e Bauer. É um teste extremamente sensível. Reação de Paul-Bunnell-Davidsohn: pesquisase a presença de anticorpos heterófilos contra hemácias de carneiro, títulos superiores a 1/56 sugere positividade para mononucleose infecciosa. Anticorpos específicos para EBV: IGG E IGM.
9 *DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL PATOLOGIAS QUE CURSAM COM SÍNDROMES MONONUCLEOSES like : Citomegalovirose, toxoplasmose, hepatites virais agudas, colagenoses, síndrome de soroconversão do HIV, entre outras.
10 *RUBÉOLA COMENTÁRIO Doença viral benigna, caracterizada por febrícula, sintomas respiratórios de vias aéreas superiores, exantema máculo-papular típico e linfodenopatia sub-occipital.
11 *DIAGNÓSTICO RUBÉOLA ANTICORPOS IGM *SINONÍMIA Rubéola IGM, Pesquisa de IGM para Rubéola, Sorologia IGM para Rubéola. *INTERPRETAÇÃO A presença de anticorpos específicos da classe IGM pode indicar uma infecção aguda. Os níveis de anticorpos IGM são detectáveis a partir da 1ª ou 2ª semana do início das manifestações clínicas. Importante para o diagnóstico diferencial da infecção em recém-nascidos, pois não atravessa a placenta.
12 *RUBÉOLA ANTICORPOS IGG *SINONÍMIA Pesquisa de IGG para Rubéola, Sorologia IGG para Rubéola. *INTERPRETAÇÃO Exame útil na avaliação pré-natal. Indica imunidade adquirida natural ou artificialmente. Os anticorpos surgem após os da classe IGM ou 2 semanas após imunização. Detectáveis por toda a vida, mais nem sempre traduzem uma proteção duradoura, principalmente em mulheres com imunidade adquirida por vacinação. Há indícios de que a doença natural confere maior imunidade.
13 *CITOMEGALOVÍRUS *COMENTÁRIO O CMV pertence a família Herpesviridae. A infecção pode permanecer latente por toda a vida ou ter um ou mais episódios de reativação. É endêmico em todo mundo. A infecção pelo CMV pode ser adquirida por via transplacentária, amamentação, transfusão sanguínea, sexual, entre outras. A maioria das infecções evolui de forma assintomática. Quando sintomáticas, as manifestações clínicas são amplas de acordo com a idade e o estado imunológico do paciente. A infecção pelo CMV apresenta quadro semelhante à Mononucleose.
14 *DIAGNÓSTICO CITOMEGALOVÍRUS ANTICORPOS IGM *SINONÍMIA CMV IGM, Pesquisa de Anticorpos IGM para citomegalovírus, Sorologia IGM para CMV *INTERPRETAÇÂO A presença positiva de IGM relaciona-se, dependendo da história clínica do paciente, a infecção primária aguda, reativação ou reinfecção. A infecção primária da mãe durante a gravidez é muito mais danosa ao feto do que a reativação durante este período.
15 *CITOMEGALOVÍRUS ANTICORPOS IGG *SINONÍMIA CMV IGG, Pesquisa de anticorpos IGG para Citomegalovírus, Sorologia IGG para CMV *INTERPRETAÇÃO Os anticorpos da classe IGG aparecem uma semana após os da classe IGM. Devido a alta incidência de CMV - IGG positiva na população de 30 anos (30 a 90%), um único resultado não tem valor clínico.
16 *HEPATITES AGENTES ETIOLÓGICOS: VÍRUS: A, B, C, D, E MARCADORES SOROLÓGICOS: DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL IDENTIFICAÇÃO DO VÍRUS DISTINÇÃO DA FASE EVOLUTIVA GRAU DE INFECTIVIDADE DO VÍRUS PROGNÓSTICO DA DOENÇA
17 *HEPATITE A COMENTÁRIO E INTERPRETAÇÃO É uma doença aguda, de curso clínico benigno, altamente contagiosa. Cerca de 50% dos casos apresentam-se de forma subclínica (hepatite aníctérica), sendo mais freqüente em crianças.
18 *DIAGNÓSTICO IGM ANTI-VÍRUS DA HEPATITE A *SINONÍMIA: ANTI-VHA IGM, HAV IGM, IGM PARA HEPATITE A *INTERPRETAÇÃO Os anticorpos IGM anti vírus da hepatite A são encontrados na fase inicial da infecção indicando doença aguda. O anticorpo da classe IGM está presente uma semana antes do início do quadro clínico e permanece positivo por cerca de 3 meses.
19 *ANTI-VÍRUS DA HEPATITE A *SINONÍMIA: ANTI-VHA IGG, HAV-IGG, IGG PARA HEPATITE A *INTERPRETAÇÃO O teste em geral se torna positivo uma semana após o início da doença e permanece positivo para o resto da vida. A maior parte da população adulta em nosso meio (mais de 90%) apresenta positividade para anti-vha IGG por infecção pregressa ou vacinação.
20 *HEPATITE B COMENTÁRIOS VÍRUS DE DNA PERÍODO DE INCUBAÇÃO: 1 a 6 MESES SINTOMATOLOGIA ADULTOS: AGUDA MAIORIA FULMINANTE 0.5 a 1% CRÔNICA 2 a 10% CRIANÇAS: 10% AGUDA 30 a 90% SUBCLÍNICA OU CRÔNICA.
21 HBsAg DNA HBeAg HBcAg
22 PERFIS SOROLÓGICOS TÍPICOS EVOLUÇÃO BENÍGNA HBsAg (HBV, ANTÍGENO AUSTRÁLIA, ANTÍGENO AU, ANTÍGENO DE SUPERFÍCIE DO VÍRUS DA HEPATITE B): torna-se positivo dias após exposição ao vírus (antes da elevação das transaminases) e é detectável por cerca de 4 meses. ANTI-HBc IGM (HBc IGM, ANTICORPO IGM ANTICORE DO VÍRUS DA HEPATITE B): 1º anticorpo detectável e permanece por cerca de 4 meses.
23 ANTI-HBc IGG (ANTI-HBc TOTAL, ANTICORPOS IGG ANTI-CORE DO VÍRUS DA HEPATITE B): surgem logo após e tendem a permanecer por toda vida do indivíduo. Pode ser o único marcador de infecção positiva no período que decorre entre a negativação do HBsAg e a positivação do anti-hbs ( Janela imunológica ).
24 HBeAg (AgHBe, ANTÍGENO e DA HEPATITE B): torna-se positivo logo após o HBsAg, seguido da sintomatologia. É um marcador de replicação viral. Com a evolução da infecção, os níveis do HBeAg começam a declinar com o surgimento de anticorpos antihbe, indicadores de um bom prognóstico. ANTI-HBs (ANTI-HBV, ANTI-AU ANTICORPO ANTI-ANTÍGENO DE SUPERFÍCIE DO VÍRUS DA HEPATITE B): surge entre 2 a 6 semanas após o desaparecimento do HBsAg e permanece positivo para o resto da vida, conferindo imunidade à doença. O exame é útil no acompanhamento dos indivíduos imunizados contra o HBV.
25 *EVOLUÇÃO CRÔNICA HBsAg: permanece detectável por anos, e os indivíduos são classificados como portadores, que podem ou não terem doença hepática. HBeAg: estando presente indica replicação viral e infectividade. NOTA: Os níveis de HBeAg e de HBsAg só irão decair em caso de resolução da infecção após tratamento antiviral e o aparecimento dos anticorpos anti-hbe. Entretanto, pode ocorrer a resolução da infecção crônica e o não surgimento dos anticorpos anti-hbs.
26 *PERFIS SOROLÓGICOS ATÍPICOS HBsAg INDETECTÁVEL mutante a : substituição no aa 145 do antígeno de superfície do HBV; baixa replicação do vírus selvagem: epas de HBV com mutações na região omotora do antígeno de superfície do BV e no gene da polimerase; equilíbrio do vírus com o sistema imune: dificulta a persistência de marcadores orológicos a níveis detectáveis.
27 PRESENÇA ÚNICA DO POSITIVO ANTI-HBc IGG períodos de janela imunológica; casos de infecção resolvidas há décadas e os níveis de anti-hbs já diminuíram significativamente; geralmente são indivíduos assintomáticos, têm níveis normais de transaminases e bom prognóstico; mutantes a (10 a 40%)
28 MUTAÇÕES NA REGIÃO DO CORE E DO PRÉ- CORE QUE CODIFICAM O ANTÍGENO HBe (HBeAg ): podem ser encontrados tanto em pacientes crônicos sintomáticos como em assintomáticos. Nestes casos, testes de DNA ou biópsia são recomendados para confirmar o diagnóstico.
29 * DNA DO VÍRUS DA HEPATITE B *SINONÍMIA PCR para Hepatite B, HBV DNA, PCR para VHB, Carga Viral para Hepatite B *MÉTODO Reação em cadeia de polimerase (PCR)
30 *COMENTÁRIO E INTERPRETAÇÃO A presença de DNA do VHB é o indicador mais sensível de replicação viral na circulação. A carga viral do VHB auxilia na: indicação da terapêutica antiviral ou imunomoduladora; monitoração da progressão da doença e resposta terapêutica; determinação da infecciosidade (por exemplo: transmissão materno-fetal) avaliar a presença de replicação viral casos de perfis sorológicos atípicos
31 *HEPATITE C *COMENTÁRIO E INTERPRETAÇÃO A infecção causada por um flavírus (RNA), é prevalente em indivíduos transplantados, transfundidos, usuários de drogas e pacientes dialisados. Com um período de incubação de 6 a 8 semanas, 70 a 80% dos casos evoluem de forma assintomática, anictérica e para cronicidade.
32 *DIAGNÓSTICO ANTI VÍRUS PARA HEPATITE C *SINONÍMIA Anti HCV, sorologia para Hepatite C, Anticorpo Anti-Hepatite C, VHC *COMENTÁRIO E INTERPRETAÇÃO Os anticorpos contra o HCV não são neutralizantes e não conferem imunidade. Teste de triagem para detectar infecção pregressa ou atual, não diferencia entre Hepatite C aguda ou crônica. Cerca de 10% dos pacientes infectados jamais se tornam anti HCV positivos. A detecção do RNA é o único marcador direto da infecção pelo HCV.
33 RNA DO VÍRUS DA HEPATITE C *SINONÍMIA PCR para Hepatite C, HCV-RNA, PCR para Vírus da Hepatite C. *COMENTÁRIO E INTERPRETAÇÃO A detecção tanto qualitativa como quantitativa do RNA viral pela técnica do PCR é possível 2 semanas após a infecção pelo HCV. Este teste é utilizado para: detectar flutuações da viremia; monitorar a resposta terapêutica antiviral; determinar a infecciosidade.
34 GENOTIPAGEM DO VÍRUS DA HEPATITE C *METODOLOGIA:RT PCR e sequenciamento nucleotídico. *COMENTÁRIO E INTERPRETAÇÃO Tipos do HCV isolados no Brasil: 1a (42%), 1b (34%), 2a (2%), 2b (1%) e 3a (19%). O Genótipo do HCV e suas concentrações pré-tratamento são importantes em predizer os resultados da terapia: genótipos 2a, 2b e 3a têm maior resposta ao tratamento do que aqueles do Genótipo 1b. Genótipo e a carga viral são fatores independentes na previsão da resposta à terapia pelo interferon.
Diagnóstico Imunológico das Hepatites Virais
Diagnóstico Imunológico das Hepatites Virais O Fígado Limpa o sangue Regula os hormônios Ajuda na coagulação sanguínea Produz bile Produz proteínas importantes Mantém o nível de açúcar sanguíneo Etc O
1º e 4ºcapa.pdf 7/10/2008 16:06:56 CMY
1º e 4ºcapa.pdf 7/10/2008 16:06:56 C M Y CM MY CY CMY K Sumário 05 - Apresentação 07 - Introdução 14 - Transmissão Vírus da Hepatite B (VHB) 16 - Diagnóstico Vírus da Hepatite C (VHC) Diagnóstico laboratorial
INSTITUO SUPERIOR DE EDUCAÇÃO DEPARTAMENTO DE GEOCIÊNCIAS CENTRO DE BIOLOGIA
INSTITUO SUPERIOR DE EDUCAÇÃO DEPARTAMENTO DE GEOCIÊNCIAS CENTRO DE BIOLOGIA Eloisa Maria Silva Coutinho Hepatites Virais Frequência do antígeno de superfície da hepatite viral tipo B nos portadores do
MINISTÉRIO DA SAÚDE. José Serra. Ministro de Estado da Saúde. João Yunes. Secretário de Políticas de Saúde. Pedro Chequer
MINISTÉRIO DA SAÚDE José Serra Ministro de Estado da Saúde João Yunes Secretário de Políticas de Saúde Pedro Chequer Coordenador Nacional de DST e Aids Hélio Moraes de Souza Coordenador Nacional de Sangue
Fundação Oswaldo Cruz Concurso Público 2010 Tecnologista em Saúde Pública Prova Objetiva Código da prova C3138 Diagnóstico em Virologia Instruções: Você deverá receber do fiscal: a) um caderno com o enunciado
HEPATITE B Texto extraído da homepage do CDC no site: http://www.cdc/gov/travel/yellowbk00.pdf atualizado em 06.04.2000
HEPATITE B Texto extraído da homepage do CDC no site: http://www.cdc/gov/travel/yellowbk00.pdf atualizado em 06.04.2000 CONTEÚDO Hepatite Viral... 3 Vírus da hepatite B... 3 Características clínicas...