Auxílio à pesquisa 09/07225-2 - Cirurgia pediátrica, Hepatopatias - BV FAPESP
Modelo experimental de obstrução biliar extra-hepática em ratos jovens: estudo histológico e modulação farmacológica com prednisolona e pentoxifilina
Processo: 09/07225-2
Assunto(s): Cirurgia pediátrica Hepatopatias Colestase Atresia biliar Prednisona Pentoxifilina Imuno-histoquímica
Diversas doenças crônicas do fígado resultam em desenvolvimento de fibrose do parênquima, condição que pode culminar em perda de função do órgão e hipertensão portal grave com indicação de transplante. Os mecanismos fisiopatológicos envolvidos nesse processo não estão completamente esclarecidos. Nas últimas décadas, alguns estudos têm buscado demonstrar a possibilidade de modulação farmacológica da fibrogênese hepática. Particularmente com relação às obstruções biliares, tem-se sugerido que a administração de corticosteróides pode promover melhora no prognóstico tardio das crianças portadoras de atresia das vias biliares submetidas à portoenterostomia (cirurgia de Kasai). Nenhum trabalho experimental foi realizado com o objetivo de verificar essa hipótese e os modelos descritos para estudo de outras drogas com potencial antifibrogênico, como a pentoxifilina, não incluíram animais jovens. A proposta deste projeto consiste em realizar um estudo experimental para análise histológica / imuno-histoquímica dos mecanismos envolvidos no estabelecimento da fibrose e da proliferação ductular secundárias à obstrução biliar em animais em crescimento e análise da influência da administração de corticosteróide e pentoxifilina sobre a evolução desses processos. Serão operados 100 ratos Wistar na época do desmame (21º ou 22º dias de vida), submetidos a laparotomia com ligadura do ducto biliar comum (LDBC) ou cirurgia simulada (CS). Os animais serão divididos em 5 grupos, conforme o procedimento cirúrgico e a medicação administrada: 1. LDBC + água destilada; 2. CS + água destilada; 3. LDBC + pentoxifilina (PTX); 4. LDBC + prednisolona (PRED); 5. LDBC + pentoxifilina + prednisolona (PTX+PRED). Cada grupo será dividido em 2 subgrupos conforme a duração do experimento (15 ou 30 dias). Ao final do período, os animais serão pesados e submetidos à retirada de um fragmento de fígado, coletado para análise histológica (através das colorações de hematoxilina-eosina e picrossírius) e de imunofluorescência / imunohistoquímica (através da marcação com anticorpos monoclonais anti-colágeno III, anti-TGFbeta, anti-VEGF e anti-citoqueratina 7. As lâminas serão submetidas à avaliação quantitativa das áreas marcadas, por meio de morfometria digital e os dados obtidos serão submetidos à análise estatística para determinar diferenças entre os grupos. (AU)
ANDRADE, WAGNER DE CASTRO; FERRAZ DA SILVA, LUIZ FERNANDO; DE MENDONCA COELHO, MARIA CECILIA; AOUN TANNURI, ANA CRISTINA; FERREIRA ALVES, VENANCIO AVANCINI; TANNURI, UENIS. Effects of the administration of pentoxifylline and prednisolone on the evolution of portal fibrogenesis secondary to biliary obstruction in growing animals: immunohistochemical analysis of the expression of TGF-BETA; and VEGF. Clinics, v. 67, n. 12, p. 1455-1461, 2012. Citações Web of Science: 3.
SANTOS, M. M.; TANNURI, U.; TANNURI, A. C. A.; COELHO, M. C. M. Description of a New Model of Intestinal Denervation and In Situ Ischemia-Reperfusion Injury Using the Cecal Artery for Perfusion. Transplantation Proceedings, v. 41, n. 9, p. 3617-3621, NOV 2009. Citações Web of Science: 1.