Polyamines contents in some foods from Brazilian population basic diet
http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782006000400039
Giuseppina Pace Pereira LimaI, 1; Suraya Abdallah da RochaI; Massanori TakakiII; Paulo Roberto Rodrigues RamosIII
IDepartamento de Química e Bioquímica, Instituto de Biociências (IB), Universidade Estadual Paulista (UNESP), CP 510, 18618-000, Botucatu, SP, Brasil. E-mail: gpplima@ibb.unesp.br
IIDepartamento de Botânica, UNESP, CP 199, 13506-900, Rio Claro, SP, Brasil. E-mail: massa@rc.unesp.br
IIIDepartamento de Física e Biofísica, IB, UNESP, CP 510, 18618-000, Botucatu, SP, Brasil. E-mail: pramos@ibb.unesp.br
Palavras-chave: putrescina, espermidina, espermina, vegetais, ovos.
The level of polyamines changes as well as the daily necessity since they are directly related to the cell growth. In the present work we analyzed the levels of putrescine, spermidine and spermine in several foods from vegetables and eggs. The cooking did not affect the level of polyamines in rice and bean, but in potato there were differences and frying process increased the level of putrescine. Lettuce, orange, banana and tomato presented significant levels of putrescine while onion, garlic, egg, rice and bean presented specially spermidine and spermine. Those results can help for elaboration of dietary guidelines according to the level of polyamines of those foods and their daily necessity.
Key words: putrescine, spermidine, spermine, vegetables, eggs.
Poliaminas tais como putrescina, espermidina e espermina estão presentes em todos os organismos e são relacionadas com a proliferação e com a diferenciação celular (PEGG & McCANN, 1982). Putrescina, por exemplo, embora não exerça efeito tóxico direto, pode potencializar o efeito tóxico da tiramina e da histamina, aminas biogênicas encontradas em alguns alimentos fermentados, como conseqüência da atividade microbiana (MORET et al., 2005) por competir por enzimas detoxificantes, tal como a diaminaoxidase (DAO) do trato gastrintestinal (HALÁSZ et al., 1994) e agir como precursores de nitrosaminas - compostos carcinogênicos (OLIVEIRA et al., 1995). Alguns autores relatam que a privação de poliaminas em dietas alimentares pode ser benéfica para reduzir crescimento de tumores (SARHAN et al., 1989; LÖSER et al., 1999).
Diversos trabalhos têm mostrado a importância das poliaminas em dietas (BARDÓCZ, 1995; ELIASSEN et al., 2002; KALAC & KRAUSOVÁ, 2005). Em células saudáveis, os níveis de poliaminas são controlados por enzimas biossintéticas e catabólicas. A necessidade de poliaminas é dependente do estado fisiológico do indivíduo. As poliaminas são essenciais para jovens em crescimento e desenvolvimento (BARDÓCZ, 1995), estando envolvidas na regulação e no estímulo da síntese de DNA, RNA e proteína. Podem interagir com componentes da membrana, modulando suas funções, podendo também estimular a diferenciação celular (PEGG & McCANN, 1982; TABOR & TABOR, 1984).
Frutos e sucos têm sido descritos como ricos em putrescina, enquanto outros vegetais apresentam altos teores de espermidina (KALAC et al., 2005; MORET et al., 2005). O cozimento parece não alterar o conteúdo de poliaminas (ELIASSEN et al., 2002).
Há grandes diferenças quanto aos teores de poliaminas, principalmente putrescina, esperimidina e espermina, tanto em produtos animais como em vegetais. Em vegetais, o teor de poliaminas depende do estado nutricional da planta, da época de colheita, das condições de cultivo, do modo de cultivo (orgânico e convencional) e do armazenamento (BOUCHEREAU et al., 1999). Assim, esses vegetais, quando ingeridos pelo homem, fonecerão quantidades diferentes de poliaminas na dieta.
Os alimentos contêm uma certa quantidade de poliaminas que são ingeridas diariamente pela dieta. Porém, não há trabalhos que relatem a quantidade diária necessária para pessoas saudáveis, pois isso depende do estado fisiológico de cada indivíduo (BARDÓCZ, 1995; BARDÓCZ et al., 1995). Assim, devido à grande importância e à necessidade do conhecimento dos níveis de poliaminas em alimentos, o objetivo deste trabalho foi analisar o teor de putrescina, espermidina e espermina presentes em alguns alimentos da dieta básica de brasileiros e verificar a influência do cozimento sobre esses teores.
Ovos de galinha, arroz agulhinha tipo longo (Oryza sativa L.), feijão carioca (Phaseolus vulgaris L.), alface lisa (Lactuca sativa L.), laranja pêra (Citrus sinensis L.), batata inglesa (Solanum tuberosum L.), tomate (Licopersicum esculentum Mill.), banana nanica (Musa sp sub-grupo Cavendish), cebola (Allium cepa L.), alho (Allium sativum L.) e azeite extra virgem comercial foram adquiridos de supermercados e quitandas, em Botucatu, SP, durante a primeira quinzena de abril de 2005.
Os ovos foram separados em clara e gema, cozidos ou não em água. O mesmo procedimento para o cozimento foi realizado para arroz, feijão e batata, sendo que estas foram ainda fritas em óleo de soja comum. Para o cozimento, o tempo variou para cada alimento testado (simulando o cozimento para ingestão). O número de amostras variou de acordo com cada alimento, tendo sido utilizadas cinco amostras para ovos, alface, laranja, batata, arroz, feijão, alho e oito para tomate. Cada amostra foi analisada em triplicata.
Todos os vegetais foram lavados com água corrente, sabão neutro e escova macia para a retirada de possíveis interferentes. O suco de laranja, as folhas de alface e os grãos foram utilizados inteiros. Os demais foram descascados.
Ensaio para poliaminas livres
Amostras de cada alimento foram analisadas de acordo com o método proposto por FLORES & GALSTON (1982) e por LIMA et al. (1999), com modificações, como se segue. Material fresco, em duplicata e (10g), foi homogeneizado por um minuto, em ácido perclórico gelado 5% (v/v), usando homogeneizador de alimentos. Para amostras líquidas, foi utilizado suco puro em ácido perclórico (1:1) v/v. Após centrifugação em 10.000rpm por 20 minutos, a 4°C, ao sobrenadante (200mL) foram adicionados 400mL de cloreto de dansila e 200mL de carbonato de sódio saturado. Após uma hora a 60°C, 100mL de prolina foram adicionados e a mistura foi mantida por 30 minutos no escuro, à temperatura ambiente. Foram usados 500mL para extrair as poliaminas dansiladas e alíquotas de 20mL foram aplicadas em placas de cromatografia de camada delgada (placas de vidro recobertas por sílica Gel 60G – Merck, 20 x 20cm) e submetidas à separação em cubas contendo clorofórmio:trietilamina (10:1). Padrões de putrescina, espermidina e espermina foram submetidos ao mesmo processo. Todo o procedimento foi acompanhado com luz UV (254nm). As poliaminas foram quantificadas, por comparação com os padrões também aplicados nas placas, por espectroscopia de emissão de fluorescência (excitação em 350nm e medida de emissão em 495nm), no Video Documentation System, utilizando o programa Software Image Master, versão 2.0, da Amersham Pharmacia Biotech 1995, 1996. Os teores de poliaminas livres foram expressos em mg g-1 de matéria fresca.
Diferenças entre médias dos teores das aminas foram analisadas pelo teste-t (P<0,05), através do programa Origin 6.0 Copyrightã1991-1999, Microcal Software Inc..
Os resultados das análises de poliaminas nos alimentos são apresentados na tabela 1. Os teores de poliaminas encontrados em azeite extra-virgem foram em nível de traço.
Os maiores teores de poliaminas foram encontrados na batata, no tomate e na banana. O cozimento dos ovos, do arroz ou do feijão não alterou significativamente o teor das poliaminas presentes (espermidina e espermina). Resultados diferentes foram obtidos quando se analisou a batata. A batata crua apresentou baixos teores das três poliaminas, sendo que esses valores foram incrementados quando a análise foi realizada em batatas fritas em óleo de soja.
Em relação ao ovo, a clara mostra teores maiores de espermidina quando cozida. Resultados inversos são observados quando se compara gema crua e cozida. Putrescina foi detectada apenas em níveis de traços nesse alimento.
Das três poliaminas analisadas, putrescina foi mais abundante em alface, laranja, tomate e banana, enquanto que espermina foi predominante em cebola, alho, ovo (clara e gema), arroz cru e feijão (independente do cozimento).
Neste trabalho, os alimentos analisados foram adquiridos em supermercados e fazem parte da dieta normal de muitas pessoas. Além disso, os valores encontrados podem diferir da literatura devido à forma e condução da cultura, ao clima, à estação do ano, à nutrição, etc (BOUCHEREAU et al., 1999), assim como devido aos métodos de extração (BOUCHEREAU et al., 2000; KALAC et al., 2005).
De acordo com alguns autores, os teores de putrescina e espermidina são maiores em frutos, enquanto que, em cereais, há predominância de espermidina e espermina (BARDÓCZ, 1995; BARDÓCZ et al., 1995). Esses resultados são confirmados neste trabalho, pois, ao se analisar arroz, não se observou alto nível de putrescina. Em feijões (cru e cozido), ocorreu predominância de espermidina e espermina. Resultados semelhantes foram descritos por MORET et al. (2005) ao analisarem poliaminas em diversos alimentos. A análise de batatas, tanto cozida como frita, mostrou predominância de putrescina, como também relatado por BARDÓCZ (1995), ELIASSEN et al. (2002) e MORET et al. (2005).
Em laranja, a poliamina que aparece em maior quantidade é a putrescina. De acordo com KALAC & KRAUSOVÁ (2005), o nível de putrescina em frutos cítricos atinge uma média de 40mg g-1, teores muito maiores do encontrado neste trabalho, o que pode ser devido à época de colheita, ao cultivo, ao armazenamento ou ainda, a diferentes tipos de estresse durante o transporte e manuseio do produto (KONDO et al., 2003).
Em alface, também foi observado maior teor de putrescina, seguido de espermidina e espermina, sendo que os valores encontrados para a putrescina e espermina são semelhantes aos descritos por BARDÓCZ et al. (1993) e ELIASSEN et al. (2002). Assim como nos demais alimentos, o armazenamento pode afetar qualitativa e quantitativamente os níveis das poliaminas, principalmente em folhosas (SIMON-SARKADI et al., 1994; KALAC & KRAUSOVÁ, 2005). Em cebola e alho, não foi observado teores significativos de putrescina, porém há predominância de espermina, seguida de espermidina. Baixa concentração de putrescina e predominância de espermidina foram descritas por BARDÓCZ et al. (1993) em cebola.
Bananas, dependendo do estádio de amadurecimento, podem apresentar alterações nos teores de putrescina, principalmente nos estádios avançados. Neste trabalho, nota-se que a concentração de putrescina foi maior em relação às demais poliaminas analisadas. Em bananas "prata", ADÃO & GLÓRIA (2005) não observaram alterações nos teores desta diamina durante os primeiros 21 dias de armazenamento a 16°C, porém, após este período, durante 14 dias, notaram diminuição da concentração de putrescina. Resultados diferentes foram encontrados por LIMA (1994), o qual observou predominância de putrescina em bananas "nanica". As condições de armazenamento (umidade, temperatura, tratamentos com reguladores vegetais), a cultivar e o tempo de armazenamento pós-colheita têm sido descritos como alguns dos principais fatores que afetam a qualidade e/ou a quantidade das poliaminas nesta fruta (LIMA, 1994; ADÃO & GLÓRIA, 2005). Estes fatores podem ter afetado enzimas de síntese ou de degradação, alterando os teores destas substâncias na fruta analisada, assim como nos demais vegetais analisados.
Em ovos, os resultados da gema e da clara separadamente evidenciam que espermidina e espermina aparecem em quantidades semelhantes, sendo que os níveis encontrados foram baixos frente aos demais alimentos analisados. KALAC & KRAUSOVÁ (2005) relatam que ovos inteiros cozidos apresentaram baixos teores das três poliaminas analisadas, sendo permitido em dietas de pacientes com câncer de próstata (CIPOLLA et al., 1993).
As maiores fontes de putrescina dentre os alimentos analisados foram alface, laranja, tomate, banana, batata frita ou cozida. Todos os alimentos analisados contribuem com espermidina e espermina para a dieta, embora os valores possam variar de acordo com a origem e com as formas de armazenamento ou produção.
Os autores agradecem ao suporte financeiro da Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP), do Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e da Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP).
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