BDPI USP - Detalhe do registro: Analise em grande escala de proteínas exportadas no estagio eritrocítico da malária revela potenciais candidatos vacinais
Rodriguez-Málaga, Sergio
Manque, Patrico
Silva, Borges da
Carlton, Jame
USP affiliated authors: DAFFRE, SIRLEI - ICB ; LIMA, MARIA REGINA D'IMPERIO - ICB
Abstract: Introdução: Recentemente foi proposto que aproximadamente 400 proteínas diferentes podem ser exportadas durante a fase eritrocítica da infecção malárica e é sabido que em alguns casos, estes antígenos são expostos diretamente ao sistema imune nos sucessivos ciclos de invasão. Uma estratégia lógica para tentar controlar este parasita intracelular poderia ser baseada na geração de uma resposta efetiva contra estes antígenos exportados. Objetivos: Para este projeto propomos dois objetivos principais: i) utilização de antígenos já caracterizados como antígenos expostos na membrana do eritrócito infectado para ensaios de imunização e ii) caracterização de novos antígenos presentes na membrana dos eritrócitos infectados utilizando uma abordagem proteômica. Métodos e Resultados: Para nosso primeiro objetivo utilizamos genes de dois antígenos previamente descritos como proteínas exportadas em P. falciparum. Foram definidas as regiões hidrofílicas de cada uma das proteínas e os fragmentos de DNA correspondentes foram clonados no vetor pIgSP para imunizações de animais C57BL/6. Conseguimos demonstrar que a sobrevida dos animais imunizados com os antígenos foi aumentada para 60% (PC000040.04.0) e 20% (PC000742.04.0) quando desafiados com uma cepa letal de P. chabaudi.) Finalmente, amostras de membrana de eritrócitos infectados com P. chabaudi foram analisadas por MudPIT, com o qual conseguimos identificar 18 proteínas que teoricamente podem ser exportadas peloparasita para a membrana da célula hospedeira. Estas proteínas contem uma série de motivos conservados entre os quais se destacam possíveis motivos PEXEL de P. chabaudi. Atualmente estamos tentando caracterizar a localização de cada uma das proteínas e sua potencial utilização como antígeno vacinal. Conclusão: Conseguimos demonstrar que antígenos expressos na membrana dos eritrócitos infectados podem ser utilizados como vacinas frente à infecção pelo plasmódio e que a utilização de técnicas de pós-genômica de alto rendimento podem identificar novos antígenos vacinais não descritos até agora.