Assuntos: BIOLOGIA MOLECULAR; ESTRESSE OXIDATIVO; REGULAÇÃO BACTERIANA DA EXPRESSÃO GÊNICA; BACTÉRIAS GRAM-NEGATIVAS
Resumo: Caulobacter crescentus está entre as bactérias cujos genomas codificam um grande número de fatores sigma ECF, os quais estão envolvidos na regulação transcricional de conjuntos limitados de genes em resposta a uma variedade de estímulos ambientais. No presente trabalho, dois fatores sigma ECF de C. crescentus,´SIGMA POT.R` e ´SIGMA POT.T`, foram caracterizados funcionalmente. Os dados mostraram que´SIGMA POT. R` e ´SIGMA POT. T`, são mantidos em níveis reduzidos de expressão sob condições fisiológicas de crescimento da bactéria, devido à ação das proteínas ChrR e CC3476, respectivamente. Contudo, durante a exposição de C. crescentus ao cádmio, hidroperóxido orgânico, oxigênio singlete ou à radiação UVA, a expressão de ´SIGMA POT.R` e induzida de maneira dependente do próprio fator sigma. Análises de transcriptoma mostraram que SIGMA POT.R` regula a expressão de genes envolvidos na proteção celular contra danos oxidativos. Central para essa resposta transcricional mediada por SIGMA POT.R` é a inativação de ChrR, sendo os resíduos C186 e C188 desta proteína necessários para a percepção de cádmio, mas não de hidroperóxido orgânico ou oxigênio singlete. Em adição, os dados mostraram que SIGMA POT.R` e dois outros genes dependentes de SIGMA POT.R` (cfaS e CC2258) são essenciais para a sobrevivência de C. crescentus quando os danos oxidativos são gerados nas células por longos períodos. Similarmente, a expressão de ´SIGMA POT. T` aumenta em nível transcricional nestabactéria sob condições de hiperosmolaridade induzidas por NaCL ou sacarose. Além de se auto-regular positivamente. ´SIGMA POT. T` controla a expressão de´SIGMA POT. U` e´SIGMA POT. E`, constituindo uma cascata de expressão de fatores sigma ECF em C. crescentus. ´SIGMA POT. T`, mas não ´SIGMA POT. U` e ´SIGMA POT. G`, desempenha um papel essencial na sobrevivência dessa bactéria durante a exposição ao NaCL e sacarose. Adicionalmente, a ) ausência de ´SIGMA POT. T` resulta numa sensibilidade aumentada dessa bactéria ao ´H IND.2´`O IND.2´, apesar de não ser observada indução da expressão dos genes sigT, sigU e sigE durante essa condição de estresse. Diante do exposto, o presente trabalho contribui para a compreensão de dois mecanismos de adaptação dabacéria C. crescentus aos estresses oxidativo ou osmótico