MULTIPLICAÇÃO DE ABACAXIZEIROS ORNAMENTAIS EM DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE BAP E PERÍODOS DE AVALIAÇÃO DO DESENVOLVIMENTO IN VITRO - PDF
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Cecília Cabral Quintão
1 Original Article 188 MULTIPLICAÇÃO DE ABACAXIZEIROS ORNAMENTAIS EM DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE BAP E PERÍODOS DE AVALIAÇÃO DO DESENVOLVIMENTO IN VITRO MULTIPLICATION OF ORNAMENTAL PINEAPPLE IN DIFFERENT CONCENTRATIONS OF BAP AND PERIODS EVALUATION OF DEVELOPMENT IN VITRO Kamila Antunes ALVES 1 ; Luciana Nogueira LONDE 2 ; Emanuelle Ferreira MELO 3 ; Gabriel Belfort RODRIGUES 3 1. Engenheira Agrônoma, Universidade Estadual de Montes Claros UNIMONTES, Bico da Pedra, Janaúba, MG, Brasil; 2. D.Sc. Genética, Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais, Nova Porteirinha, MG, Brasil. 3. Pós- Doutorando(a), Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais, Nova Porteirinha, MG, Brasil; RESUMO: O mercado mundial de flores tem apresentando grande destaque econômico nos últimos anos. Apesar do estabelecimento das técnicas de micropropagação, melhorias no protocolo ainda são necessárias. Neste sentido, objetivou-se com o presente trabalho avaliar a multiplicação in vitro das espécies de abacaxi ornamental Ananas comosus var. bracteatus e A. comosus var. erectifolius em diferentes períodos de avaliação e concentrações de BAP. Foram utilizados como explantes gemas axilares de abacaxizeiro ornamental. Utilizou-se delineamento experimental inteiramente casualizado, composto de 16 tratamentos com 5 repetições e fatorial 2x4x2, sendo um explante por tubo de ensaio. Para o número de folhas produzidas, a variedade erectifolius foi mais eficiente que a bracteatus; na avaliação realizada aos 60 dias, o número de folhas foi 2 vezes superior aos 30 dias na concentração de 1 mg.l -1 de BAP. A variedade erectifolius apresentou folhas mais compridas na concentração de 1 mg.l -1 de BAP. O comprimento das folhas diminuiu com o aumento da concentração de BAP. O número de raízes produzidas não foi influenciado pela variedade, nem pelo período de avaliação. A variedade erectifolius apresentou maior comprimento de raiz principal que a bracteatus na ausência de BAP aos 60 dias. A concentração de 3 mg.l -1 de BAP foi mais eficiente na formação de brotos. A variedade bracteatus aos 60 dias apresentou a maior formação de brotos em abacaxizeiro ornamental. PALAVRAS-CHAVE: Citocinina. Ananas sp. Cultivo in vitro. Plantas ornamentais INTRODUÇÃO O mercado mundial de flores é um segmento que vem apresentando grande importância econômica nos últimos anos. As flores tropicais destacam-se no processo de comercialização, apresentando algumas vantagens em relação às flores de regiões temperadas, incluindo aspecto exótico, forte impacto visual, beleza, alta durabilidade pós-colheita, aceitação no mercado externo, menor custo de aquisição e maior adequação para uso em decoração de grandes espaços (LOGES et al., 2005). Considerando-se o ponto de vista econômico, o cultivo de plantas ornamentais pode apresentar alta rentabilidade por área cultivada, atingindo valores de cerca de 3 a 5 vezes superiores aos obtidos com a fruticultura e chegando, até 10 vezes superior, o lucro obtido com a produção de grãos (RIBEIRO, 2001). Diante do crescente interesse por novas espécies ornamentais, surge como alternativa o uso de fruteiras ornamentais e, nesse contexto, o abacaxizeiro ornamental pode proporcionar plantas de efeito paisagístico para compor jardins e parques, bem como podem ser comercializados em vaso ou como flores, folhagens e minifrutos de corte (SOUZA et al., 2004). Os abacaxis ornamentais, nativos da flora brasileira, vêm sendo bastante utilizados, não somente no Brasil, mas também na Europa e nos Estados Unidos da América (CARVALHO et al., 2009). Entretanto, essa comercialização está relacionada com apenas duas cultivares, o A. comosus var. erectifolius e A. comosus var. bracteatus (SOUZA et al., 2007). O Ananas comosus var. erectifolius, até pouco tempo conhecido como Ananas lucidus, é a variedade de abacaxizeiro mais conhecida e explorada como planta ornamental no Brasil (BOMFIM, 2006). Essa espécie no Brasil é conhecida por nomes populares como curagua, curauá, etc. Devido às suas características tropicais, como coloração intensa e morfologia peculiar despertam interesse de compradores em diversos países. Atualmente, o Brasil é o único país que possui plantios comerciais de A. comosus var. erectifolius (BORGES et al., 2003). Received: 17/09/12 Accepted: 05/02/14
2 189 A espécie A. comosus var. bracteatus é conhecida como ananás-de-cerca, ananas bravo, abacaxi-vermelho, etc. Esta espécie é muito cultivada como cerca-viva ou para produção de sucos e possui grande potencial ornamental para os floricultores do mundo inteiro (GIACOMELLI; PY, 1981). Grande parte da área plantada com abacaxizeiro ornamental tem sido estabelecida via mudas, tipo filhotes, oriundas de plantios comerciais (com a desvantagem de possibilitar a disseminação de doenças e pragas) ou de matrizeiros formados por mudas micropropagadas (com maior qualidade fitossanitária) (CORREIA, 2007). A expansão do cultivo do abacaxizeiro ornamental aumenta a demanda por material sadio e vigoroso para o plantio (BORGES et al., 2003). Nesse contexto, a produção de plantas ornamentais a partir da utilização de técnicas de cultura de tecidos pode ser uma alternativa viável na obtenção de grande número de plantas com qualidade genética e fitossanitária em curto espaço de tempo, suprindo assim a necessidade de aquisição de mudas com qualidade comprovada (PASQUAL et al., 2008). Apesar do estabelecimento das técnicas de micropropagação do abacaxizeiro ornamental, melhorias no protocolo desta espécie ainda são necessárias, sobretudo no que se refere à utilização de diferentes variedades, concentrações de reguladores de crescimento utilizadas e períodos de subcultivos. Sendo assim, objetivou-se com o presente trabalho avaliar a multiplicação in vitro das espécies de abacaxizeiro ornamental Ananas comosus var. bracteatus e A. comosus var. erectifolius, em diferentes concentrações de BAP e em diferentes períodos de avaliação do desenvolvimento das plantas, buscando um melhor protocolo de crescimento in vitro MATERIAL E MÉTODOS Os experimentos foram realizados no Laboratório de Biotecnologia Vegetal da Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais (EPAMIG), Unidade Regional Norte de Minas, em Nova Porteirinha, MG. Foram utilizados como explantes, gemas axilares das espécies de abacaxizeiro ornamental A. comosus var. bracteatus e A. comosus var. erectifolius. As gemas foram retiradas de mudas tipo rebentão, provenientes de plantas sadias localizadas na área experimental da EPAMIG, cujo as características edafoclimáticas eram ideias para o crescimento dessa espécie. Para a retirada dos explantes foram selecionadas plantas sadias e vigorosas. As mudas selecionadas incialmente, passaram por primeira redução de tamanho, cortando-se as folhas. Uma vez reduzidas, foi retirado solo aderido e outras sujidades com água corrente, e em seguida procedeu-se a retirada das folhas, a fim de expor as gemas que foram excisadas. Estas foram submetidas ao processo de desinfestação em câmera de fluxo laminar, sendo imersas em álcool 70% por cinco minutos e, em seguida, em solução de hipoclorito de sódio 1%, acrescido três gotas de Tween 20, durante 20 minutos. Após este período realizaram-se três lavagens com água destilada autoclavada. A partir dessa etapa, iniciou-se a redução das gemas retirando o excesso de tecido. Nessa primeira etapa de estabelecimento das gemas, o meio de cultura utilizado foi o MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962), suplementado com 0,2 mg.l -1 de BAP (6-benzilaminopurina) e 0,01 mg.l -1 de ANA (ácido naftaleno acético), 3% de sacarose, 7,0 g.l -1 de ágar e ph 5,7 ± 1, previamente autoclavados por 20 minutos a 105 C. Estabeleceuse em câmera de fluxo laminar, uma gema por tubo de ensaio x 0,90 x 150 mm sem orla com 10 ml de meio de cultura. O material foi acondicionado em sala de crescimento, com condições controladas de temperatura (25 C ± 2), luminosidade (22 µ Em -²s-¹) e fotoperíodo de 16 horas de luz. Após o período de 60 dias, os explantes foram transferidos para um novo meio de cultura MS, com a mesma suplementação do usado no estabelecimento das gemas, a fim de possibilitar um maior desenvolvimento das plantas. Após 60 dias iniciou-se a etapa de micropropagação, onde as plantas foram repicadas e então, estabelecidas em frascos de 320 ml com altura de 12,5 cm, diâmetro interno da boca de 5 cm e espessura de 3 mm contendo 30 ml de meio de cultura MS sob os diferentes tratamentos. Os tratamentos foram constituídos de duas variedades de abacaxizeiroornamental (A. comosus var. bracteatus e A. comosus var. erectifolius), quatro concentrações de BAP (0; 1,0; 2,0; 3,0 mg. L -1 ) e dois períodos de avaliação do desenvolvimento (30 e 60 dias). O material foi acondicionado em sala de crescimento, com temperatura de 25 C ± 2, luminosidade de 22 µ Em -²s-¹ e fotoperíodo 16 horas de luz. Avaliaram-se o número médio de folhas, comprimento em centímetro da maior folha, número médio de raízes, comprimento em centímetro da raiz principal e número de brotações. Utilizou-se delineamento experimental inteiramente casualizado, composto de 16
3 190 tratamentos com 5 repetições e fatorial 2x4x2 (variedades x BAP x período de desenvolvimento in vitro). As análises estatísticas foram realizadas utilizando-se o programa SISVAR (FERREIRA, 2007). Os dados foram submetidos à análise de variância e os modelos de regressão ajustados e testados a 5% de significância. RESULTADOS E DISCUSSÃO Na Tabela 1 verifica-se o resumo da análise de variância para os fatores avaliados. Para o número de folhas produzidas, tanto as diferentes variedades, como as concentrações de BAP e os períodos de avaliação diferiram-se estatisticamente (P<0,05). A variedade erectifolius apresentou número médio de folhas superior à bracteatus (13,89 e 10,33, respectivamente). Em relação ao período de avaliação, aos 60 dias foi observado um maior número de folhas produzidas (16,58), um número relevante, se tratando de abacaxi ornamental in vitro, se comparado aos 30 dias (7,64). Por meio da análise de regressão para as diferentes concentrações de BAP, foi observado o efeito quadrático significativo (Figura 1). A utilização de 1 mg.l -1 de BAP, que correspondeu a 14,82 folhas, promoveu a formação de um maior número de folhas. Tabela 1. Resumo da análise de variância para as características número de folhas (NF), comprimento da maior folha (CMF), número de raízes (NR), comprimento da raiz principal (CRP) e número de brotações (NB). Nova Porteirinha, Fontes de GL Quadrados Médios Variação NF CMF NR CRP NB Variedades (V) ,75 * 766,69 * 0,15 n.s. 4,17 n.s. 705,08 * BAP (B) 3 493,58 * 158,28 * 254,84 * 235,52 * 343,21 * Avaliação (A) ,25 * 455,25 * 14,88 n.s. 42,59 * 2015,03 * V x B 3 233,10 n.s. 151,05 * 8,32 n.s. 16,24 * 86,64 * V x A 1 23,65 n.s. 35,86 n.s. 7,50 n.s. 15,87 n.s. 790,65 * B x A 3 283,27 n.s. 73,74 * 13,56 n.s. 37,13 * 200,39 * V x B x A 3 29,54 n.s. 43,47 n.s. 5,87 n.s. 10,77 n.s. 69,98 * Erro ,75 17,96 5,32 7,26 24,45 Total 319 Média geral 12,11 5,85 1,03 0,98 3,53 CV (%) 85,72 72,39 224,28 275,47 139,90 n.s. F não significativo a 5% de probabilidade; * F significativo a 5% de probabilidade; GL = graus de liberdade; CV = coeficiente de variação. Figura 1. Número médio de folhas de duas variedades de abacaxizeiro ornamental micropropagado em meio de cultivo MS, adicionado de concentrações de BAP. Nova Porteirinha, O número de folhas produzidas no cultivo in vitro é uma característica importante, pois, mudas com maior número de folhas tem maior índice de pegamento no campo, uma vez que estas são as estruturas responsáveis pela captação de energia solar e produção de matéria orgânica através da fotossíntese (MOREIRA et al., 2006). Oliveira et al. (2007) estudando a multiplicação do abacaxi
4 191 ornamental Ananas lucidus Miller em função das concentrações de 0, 1, 2, 3 e 4 mg.l -1 de BAP, não observaram diferenças significativas no número de folhas produzidas por plântula nas diferentes concentrações testadas. Para o comprimento da maior folha apenas as interações entre variedades e BAP (V x B) e entre BAP e períodos de avaliação (B x A) foram significativas. Procedendo-se o desdobramento da interação V x B (Tabela 2), ao se avaliar as variedades em cada concentração de BAP, observou-se que a variedade erectifolius foi superior a bracteatus e que as concentrações de 0 e 1 mg.l -1 foram mais eficientes na formação de folhas mais compridas. Tabela 2. Comprimento médio (cm) da maior folha de abacaxizeiros ornamentais através da análise do desdobramento de variedades, em função das concentrações de BAP. Nova Porteirinha, Variedades de Concentrações de BAP (mg.l -1 ) abacaxizeiro bracteatus 5,48 b 3,34 b 4,71 a 3,70 a erectifolius 8,99 a 10,16 a 5,87 a 4,59 a As médias seguidas de mesma letra na coluna não diferem entre si pelo teste F a 5% de probabilidade. Para o desdobramento de BAP em função das variedades (B x V) foi realizada a análise de regressão (Figura 2A), sendo que, somente a variedade erectifolius mostrou significância, apresentando resposta linear significativa, no qual o comprimento da maior folha foi inversamente proporcional ao aumento da concentração de BAP. Avaliando-se a interação B x A, ao se estudar o fator BAP em função dos diferentes períodos de avaliação, apenas a avaliação aos 60 dias apresentou significância. Por meio da análise de regressão, para esta situação, foi observado um efeito linear significativo (Figura 2B). A ausência do BAP no meio de cultura possibilitou a formação de folhas maiores nas plântulas de abacaxi in vitro. Figura 2. Comprimento da maior folha de abacaxizeiro ornamental em diferentes concentrações de BAP. A Abacaxizeiro ornamental cultivar erectifolius. B - Abacaxizeiro ornamental em diferentes concentrações de BAP aos 60 dias de avaliação de desenvolvimento in vitro. Nova Porteirinha, Embora não tenham sido encontradas informações para a cultura do abacaxizeiro ornamental, alguns trabalhos foram realizados com a cultura do abacaxi, relacionando a altura das plântulas com a qualidade das mudas formadas. Moreira (2001), trabalhando com abacaxizeiro cv. Pérola observou resultados semelhantes ao do presente trabalho, sendo que o meio MS na ausência de regulador de crescimento mostrou-se mais eficiente para se obter melhor desenvolvimento das plantas. Santos et al. (2005) observaram que o melhor tratamento para multiplicação in vitro do abacaxizeiro ornamental, bem como para o desenvolvimento das plantas (comprimento da parte aérea) foi o constituído pelo meio MS suplementado com 2 mg. L -1 de BAP seguido das concentrações 1,0 e 0,5 mg L -1. Moore et al. (1992), por sua vez, verificaram que plantas maiores que 3,0 cm podem atingir índice de sobrevivência próximo de 100%. No estudo do período de avaliação em função das diferentes concentrações de BAP, apenas as concentrações 0 e 1 mg.l -1 diferiram-se estatisticamente. A ausência de BAP aos 60 dias de avaliação possibilitou o maior comprimento das folhas de abacaxizeiro (Tabela 3).
5 192 Tabela 3. Comprimento médio (cm) da maior folha de abacaxizeiros ornamentais através da análise do desdobramento do período de avaliação em função das concentrações de BAP. Nova Porteirinha, Avaliação (dias) Concentração de BAP (mg.l -1 ) ,87 b* 5,16 b 4,71 a 3,89 a 60 9,59 a 8,33 a 5,86 a 4,40 a * Médias seguidas de mesma letra na coluna não diferem entre si pelo teste F, a 5% de probabilidade. Avaliando-se o número de raízes formadas (Figura 3), apenas as diferentes concentrações de BAP apresentam diferenças estatísticas entre si e a análise de regressão apresentou efeito quadrático significativo. A ausência de BAP no meio de cultura possibilitou a maior formação de raízes, em média 3,56 raízes por planta. Figura 3. Número de raízes formadas em abacaxizeiro ornamental em diferentes concentrações de BAP. Nova Porteirinha, Corroborando com estes resultados, Macedo et al. (2003), estudando a micropropagação do abacaxizeiro, confirmaram a inibição da formação de raízes nos explantes cultivados em meio de cultura na presença de BAP. Do mesmo modo, Araújo et al. (2008) trabalhando com a variedade Smooth Cayenne, constatou que os tratamentos que não utilizaram BAP no meio de cultivo estimularam o enraizamento e um maior crescimento dos explantes. Para o abacaxi ornamental Ananas comosus var. ananassoides, um maior número de raízes foi obtido em interação da ausência de BAP e acréscimo de 0,25 mg L -1 de ANA (DIAS et al., 2011). Ao avaliar-se o comprimento da raiz principal, foram observadas as interações significativas entre variedades e BAP (V x B) e entre BAP e períodos de avaliação (B x A). Procedendo-se o desdobramento da interação V x B, ao se estudar as variedades em função dos níveis de BAP, apenas na ausência de BAP foram encontradas diferenças significativas (Tabela 4). O maior comprimento da raiz principal foi encontrado na variedade erectifolius na ausência de BAP (4,32 cm). Tabela 4. Comprimento médio (cm) da raiz principal de abacaxizeiros ornamentais através da análise do desdobramento de variedades em função das concentrações de BAP. Nova Porteirinha, Variedades Concentração de BAP (mg.l -1 ) bracteatus 2,59 b 0,19 a 0,49 a 0,00 a erectifolius 4,32 a 0,05 a 0,00 a 0,00 a As médias seguidas de mesma letra na coluna não diferem entre si pelo teste F a 5% de probabilidade. Analisando o desdobramento de BAP em função das variedades, a análise de regressão das diferentes concentrações de BAP apresentou efeito quadrático significativo para as duas variedades avaliadas. Na ausência de BAP no meio de cultura foram encontrados os maiores comprimentos de raiz principal (Figura 4A). No estudo das concentrações de BAP em função das diferentes épocas de avaliação, pela análise de regressão foram observados efeitos
6 193 quadráticos significativos para os dois períodos avaliados (Figura 4B). Nas avaliações realizadas aos 60 dias foi observado um maior comprimento da raiz principal. Nos dois períodos avaliados a ausência de BAP possibilitou o maior crescimento da raiz. Figura 4. Comprimento da raiz principal nas diferentes concentrações de BAP. A - Comprimento da raiz principal em função de duas variedades de abacaxi ornamental. B - Comprimento da raiz principal em função das avaliações aos 30 e 60 dias. Nova Porteirinha, Na observação das raízes notou-se certo crescimento negativo, efeito causado pelo fenômeno de fototropismo positivo, possível de ocorrência em cultivos in vitro. Analisando-se o desdobramento dos períodos de avaliação em função das concentrações de BAP foram observadas diferenças significativas apenas na ausência de BAP (Tabela 5). Na avaliação aos 60 dias foi encontrado o maior comprimento da raiz principal (4,74 cm), aos 30 dias o comprimento médio foi de apenas 2,17 cm. Tabela 5. Comprimento médio (cm) da raiz principal de abacaxizeiros ornamentais através da análise do desdobramento do período de avaliação em função das diferentes concentrações de BAP. Nova Porteirinha, Avaliação (dias) Concentração de BAP (mg.l -1 ) ,17 b 0,21 a 0,07 a 0,00 a 60 4,74 a 0,03 a 0,42 a 0,00 a As médias seguidas de mesma letra na coluna não diferem entre si pelo teste F a 5% de probabilidade. Como observado para a variável número de raízes, a presença de BAP no meio de cultura também inibiu o crescimento das raízes de abacaxizeiro ornamental. Segundo Pasqual et al. (2008), o comprimento médio do sistema radicular do abacaxizeiro Ananas comosus var. erectifolius mostrou-se superior na ausência de reguladores de crescimento e de agente solidificante. Na cultivar de abacaxizeiro Emepa 1, o regulador de crescimento ANA no meio de cultivo provocou o aumento no número e, consequentemente, a diminuição do tamanho das raízes. Na ausência total de reguladores de crescimento foi observado um número médio de 7 raízes com comprimento médio de 2,3 cm em mudas micropropagadas de abacaxizeiro (MORAES et al., 2010). No presente trabalho esses valores foram de 3,56 raízes com comprimento médio de 4,32 cm. Ao se avaliar o número de brotos formados, a análise de variância revelou efeito significativo da interação tripla entre os fatores variedades (V), concentrações de BAP (B) e períodos de avaliação (A). Procedendo-se a decomposição da interação tripla, ao se estudar o desdobramento das variedades em função dos níveis de BAP e períodos de avaliação, o número de brotos formados apresentou diferenças significativas apenas nos tratamentos com presença de BAP aos 60 dias de avaliação. A variedade Bracteatus apresentou um número médio de brotos superior a Erectifolius aos 60 dias (Tabela 6).
7 194 Tabela 6. Número médio de brotos de abacaxizeiros ornamentais através da análise do desdobramento de variedades em função de BAP e períodos de avaliação de desenvolvimento in vitro. Nova Porteirinha, Variedades de abacaxizeiro BAP (mg.l -1 ) Avaliação (dias) bracteatus 0,20a 1,05a 0,90a 10,25a 1,25a 12,80a 1,40a 12,30a erectifolius 0,30a 0,20a 2,25a 4,30b 1,00a 2,85b 0,90a 4,60b As médias seguidas de mesma letra na coluna não diferem entre si pelo teste F a 5% de probabilidade. Para o desdobramento das concentrações de BAP em função das variedades e períodos de avaliação foi realizada análise de regressão, encontrando-se efeito linear significativo apenas aos 60 dias de avaliação, para as duas variedades estudadas. O maior número médio de brotos formados foi encontrado na variedade Bracteatus em maiores concentrações de BAP (Figura 5). Figura 5. Número médio de brotos de abacaxizeiro em diferentes concentrações de BAP aos 60 dias de avaliação, em função de variedade e períodos de avaliação de desenvolvimento in vitro. Nova Porteirinha, O desdobramento de períodos de avaliação em função de variedades e BAP demonstrou que na avaliação realizada aos 60 dias foi observada uma maior formação de brotos. A variedade bracteatus produziu maior número médio de brotos que a variedade erectifolius. Foram encontradas diferenças significativas para os diferentes períodos avaliados apenas no meio de cultura com a presença do BAP (Tabela 7). Tabela 7. Número médio de brotos de abacaxizeiros ornamentais através da análise do desdobramento de períodos de avaliação em função de variedades e BAP. Nova Porteirinha, Avaliação bracteatus erectifolius (dias) BAP (mg.l -1 ) ,20a 0,90b 1,25b 1,40b 0,30a 2,25a 1,00a 0,90b 60 1,05a 10,25a 12,80a 12,30a 0,20a 4,30a 2,85a 4,60a As médias seguidas de mesma letra na coluna não diferem entre si pelo teste F a 5% de probabilidade. Estudos sobre micropropagação de espécies do gênero Ananas têm usado a citocinina BAP, nas suas diferentes concentrações, na indução de brotações por apresentar resultados mais eficientes. Santos (2008) analisando diferentes concentrações de reguladores de crescimento na propagação do abacaxizeiro ornamental inferiu que o meio nutritivo sem BAP foi considerado ineficiente para propagação em larga escala, pela formação de baixo número de brotações por explante. Estudando-se a cultivar de abacaxi EMEPA 1, Moraes et al. (2010) verificaram que as maiores taxas de multiplicação dos brotos foram obtidas em meio de cultivo MS suplementado com 2,0 mg.l -1 de BAP + 0,5 mg.l -1 de ANA, com média de 10,4 brotos por explantes.
8 195 Almeida et al. (2002), com o objetivo de maximizar o número de brotações do abacaxizeiro Pérola, pela manipulação de concentrações de BAP concluiu que a concentração de 1,5 mg.l -1 promoveu a melhor resposta para o número de brotações. Já Dias et al. (2011), concluíram que a adição de 1,0 mg.l -1 de BAP ao meio MS promoveu maior número de brotações em Ananas comosus var. ananassoides. No presente trabalho, as diferentes variedades diferiram-se na capacidade de formação de brotos e os maiores resultados para esta característica foram observados na concentração de 3 mg.l -1 de BAP. Nessas condições, a cultivar bracteatus foi mais eficiente, apresentando uma média de 12,30 brotos, enquanto a erectifolius produziu apenas 4,60 brotos. As mudas de abacaxizeiro ornamental devem passar para a próxima fase do manejo in vitro após 60 dias de cultivo, quando estas apresentam-se bem desenvolvidas e com maior número de brotos (Figura 6). Figura 6. Mudas de abacaxi ornamental micropropagadas in vitro. A - A. comosus var. bracteatus. B - Raízes de bracteatus. C - Brotos de bracteatus. D - A. comosus var. erectifolius. E - Raízes de erectifolius. F - Brotos de erectifolius. Nova Porteirinha, A multiplicação in vitro do abacaxizeiro ornamental é bastante responsivo sob as condições testadas. Trabalhos futuros irão verificar o sucesso da aclimatização dessas mudas sob condições de casa de vegetação, já que o mercado de plantas ornamentais se intensifica, principalmente em si tratando de mudas tropicais. CONCLUSÕES Para o número de folhas, a variedade erectifolius foi mais eficiente; na avaliação aos 60 dias foi encontrado número de folhas 2 vezes superior aos 30 dias e a concentração ótima de BAP foi 1 mg.l -1. A variedade erectifolius apresentou folhas mais compridas na concentração de 1 mg.l -1 de BAP. As avaliações realizadas aos 60 dias, resultados superiores às realizadas aos 30 dias e o comprimento das folhas diminuiu com o aumento da concentração de BAP. Maior número de raízes na ausência de BAP. A variedade erectifolius apresentou maior comprimento de raiz principal que a bracteatus na ausência de BAP. Aos 60 dias o comprimento das raízes foram superiores aos encontrados aos 30 dias. A concentração de 3 mg.l -1 de BAP foi mais eficiente na formação de brotos. A cultivar bracteatus aos 60 dias apresentou a maior formação de brotos em abacaxizeiro ornamental. ABSTRACT: The world market for flowers is showing great economic prominence in recent years. Despite the establishment of micropropagation techniques, improvements are still needed in the protocol. In this sense, the aim of the present study was to evaluate the in vitro multiplication of species of ornamental pineapple Ananas comosus var. bracteatus and A. comosus var. erectifolius at different evaluation periods and concentrations of BAP. Were used as explants axillary buds of ornamental pineapple. We used a completely randomized design, consisting of 16 treatments with 5 replicates and 2x4x2 factorial design, with one explant per tube. For leaf number, variety erectifolius was more efficient than bracteatus; evaluation performed 60 days, the number of leaves was two times higher than at 30 days at the concentration of 1 mg l-1 BAP. The variety erectifolius presented leaves longer in the concentration of 1 mg L-1 BAP. The
9 196 length of the leaves decreased with increasing concentration of BAP. The number of roots produced was not influenced by the variety, or the evaluation period. The variety erectifolius showed greater root length main bracteatus that in the absence of BAP at 60 days. The concentration of 3 mg L-1 BAP was more effective in the formation of shoots. The variety bracteatus at 60 days showed the highest shoot formation in ornamental pineapple. KEYWORDS: Cytokinin. Ananas SP. In vitro cultivation. Ornamental plants REFERÊNCIAS ALMEIDA, W. A. B.; SANTANA, G. S.; RODRIGUEZ, A. P. M.; COSTA, M. A. P. C. Optimization of a protocol for the micropropagation of pineapple. Revista Brasileira de Fruticultura. Jaboticabal, v. 24, n. 2, p , ago ARAÚJO, R. F.; SIQUEIRA, D. L.; CECON, P. R. Multiplicação in vitro do abacaxizeiro smooth cayenne utilizando benzilaminopurina (BAP) e ácido naftalenoacético (ANA). Revista Ceres, Viçosa, v. 55, n. 5, p , BONFIM, G. V. Efeitos de lâminas e freqüências de irrigação e de tipos e volumes de substrato na aclimatização de mudas micropropagadas de abacaxizeiro ornamental p. Dissertação (Mestrado em Irrigação e Drenagem). Universidade Federal do Ceará, Ceará, BORGES, N. S. S.; CORREIA, D.; ROSSETTI, A. G. Influência do meio bifásico na multiplicação de gemas e no alongamento de brotos in vitro de Ananas lucidus Miller. Revista Brasileira de Horticultura Ornamental, Campinas, v. 9, n. 1, p , CALDAS, L. S.; HARIDASAN, P.; FERREIRA, M. E. Meios nutritivos. In: TORRES, A. C.; CALDAS, L. S.; BUSO, J. A. (Eds). Cultura de tecidos e transformação genética de plantas. Brasília: Embrapa, p CARVALHO, A. C. P. P.; PINHEIRO, M. V. M.; DIAS, G. M. G.; MORAIS, J. P. S. Multiplicação in vitro de abacaxi ornamental por estiolamento e regeneração de brotações. Horticultura Brasileira, Brasília, v. 27, n. 1, p , CORREIA, D. Biotecnologia em bromélias. In: BARROSA, L. M.; SANTOS JUNIOR, A. (Org.). A botânica no Brasil, pesquisa, ensino e políticas públicas ambientais. São Paulo: Sociedade Brasileira de Botânica, p DIAS, M. M.; PASQUAL, M.; ARAÚJO, A. G.; SANTOS, V. A. Reguladores de crescimento na propagação in vitro de abacaxizeiro ornamental. Revista Brasileira de Ciências Agrárias, Recife, v. 6, n. 3, p , FERREIRA, D. F. Sisvar: sistema de análise de variância para dados balanceados, versão 5.1 Build 72. Lavras: DEX/ UFLA, GEORGE, E. F. Plant propagation by tissue culture, part 1 - the technology. ed. Edington: Exegetics Limited, p. GIACOMELLI, E. J.; PY, C. O abacaxi no Brasil. Campinas: Fundação Cargil, p. GRATTAPAGLIA D; MACHADO M. A. Micropropagação. In: TORRES A. C.; CALDAS, L. S.; BUSO, J. A. (Eds). Cultura de tecidos e transformação genética de plantas. Brasília: Embrapa, p
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ISSN 1679-2254 42 Estiolamento In Vitro de Plantas: Alternativa para a Produção de Mudas Micropropagadas de Abacaxizeiro Ornamental Circular Técnica Introdução A busca por novas espécies ornamentais tropicais
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