Bolsa 16/16306-0 - Fungos, Enzimas hidrolíticas - BV FAPESP
Análise funcional e biológica de LPMOs (Lytic Polysaccharide Monooxygenases) e proteínas acessórias (não-CAZymes) frente a degradação de palha de cana-de-açúcar por fungos filamentosos
Processo: 16/16306-0
Vinculado ao auxílio: 12/20549-4 - Secreção de glicoproteínas heterólogas em Aspergillus: efeito do padrão de glicosilação em parâmetros funcionais de glicosil hidrolases, AP.BIOEN.JP
Bolsa(s) vinculada(s): 19/08263-7 - Investigação espectroscópica e estrutural sobre monooxigenases líticas de polissacarídeos fúngicas, BE.EP.PD
Assunto(s): Fungos Enzimas hidrolíticas Proteínas Biomassa lignocelulósica Palhas Cana-de-açúcar Degradação de biomassa
A heterogeneidade e recalcitrância da parede celular vegetal faz com que sua degradação completa e eficiente seja ainda um desafio a ser superado na viabilização econômica do etanol de segunda geração. O desenvolvimento de novos e aprimorados coquetéis enzimáticos requer maior conhecimento sobre as proteínas atuantes a fim de que sejam otimizados para a degradação específica de determinado tipo de biomassa. Um dos mais recentes e importantes avanços, foi o reconhecimento das monooxigenases líticas de polissacarídeos (LPMOs), as quais utilizam-se da oxidação química para perturbar a rede cristalina de polissacarídeos, melhorando notavelmente a degradação pelas enzimas hidrolíticas clássicas. Essas enzimas correspondem, assim, a uma grande promessa para melhoria nos processos de hidrólise de biomassa vegetal. As LPMOs atualmente fazem parte da classe AA (Auxiliary Activity) no banco de dados CAZy (Carbohydrate-Active Enzymes), enquanto um outro grupo de proteínas não-CAZymes também têm demonstrado levar à alteração na estrutura de polímeros, sendo chamadas de proteínas acessórias ou indutoras da amorfogênese. O objetivo desse projeto é analisar o secretoma dos fungos Aspergillus nidulans, Laetiporus sulphureus, Pycnoporus coccineus e Trametes versicolor cultivados em substratos puros e resíduos da produção de cana-de-açúcar (palha e bagaço), com foco tanto nas LPMOs quanto nas proteínas acessórias, as quais possam apresentar importante função na degradação da biomassa. Posteriormente, algumas proteínas-alvo serão clonadas e expressas em Aspergillus nidulans e então purificadas, caracterizadas e avaliadas na hidrólise de palha de cana-de-açúcar. Além disso, a implicação biológica destas proteínas será avaliada através da deleção em A. nidulans, sendo os mutantes avaliados quanto ao crescimento. Os dados gerados neste projeto permitirão melhor entendimento tanto da função fisiológica dessas proteínas quanto da sua atuação no processo de degradação da biomassa lignocelulósica. (AU)