https://doi.org/10.1590/S0100-29452006000300028
Avaliação de diferentes tipos de atmosferas modificadas na vida útil de carambolas minimamente processadas1
Leandro Camargo NevesI; Marcos André de Souza PrillII; Vanuza Xavier da SilvaIII; Ronaldo Moreno BenedetteIII; Rogério Lopes VieitesIV
IUFRR - Prof. Depto. de Fitotecnia - Centro de Ciências Agrárias, km 12 BR 174 s/nº, CEP 69301-970 - Boa Vista - RR. rapelbtu@hotmail.com
IIUFRR - Pós-Graduando em Ciência e Tecnologia de Alimentos - Centro de Ciências Agrárias, km 12 BR 174 s/nº, CEP 69301-970 - Boa Vista - RR. marcosprill@bol.com.br
IIIUFRR - Graduando em Agronomia - Centro de Ciências Agrárias, km 12 BR 174 s/nº, CEP 69301-970 - Boa Vista - RR. rmbenedette@hotmail.com
IVUNESP/FCA - Prof. Depto. de Gestão e Tecnologia Agroindustrial. C.P. 237, CEP 18603-970, Botucatu - SP. vieites@fca.unesp.br
Palavras-chave: Averrhoa carambola, qualidade, conservação, embalagens plásticas
Index-Terms: Averrhoa carambola, quality, shelf-life, plastic packages.
O processamento mínimo de frutos e hortaliças tem como objetivo fornecer produtos com características semelhantes às de produtos frescos, sem comprometimento das qualidades nutricionais e com vida útil suficiente para sua distribuição, comercialização e consumo (Pereira et al., 2003). Outra vantagem desse tipo de produto é a drástica redução dos desperdícios, através do eficaz aproveitamento da matéria-prima (Junqueira e Luengo, 2000).
Apesar de sua praticidade e conveniência, o processamento mínimo pode proporcionar aos vegetais comportamento similar ao de tecidos submetidos a algum tipo de ferimento e/ou condições de estresse (Hong & Kim, 2001), conduzindo a alterações bioquímicas e fisiológicas indesejáveis. A perda da integridade celular na superfície cortada dos frutos e hortaliças destrói a compartimentalização entre enzimas e substratos, levando ao escurecimento e à formação de metabólitos secundários indesejáveis. Com o aumento da respiração e da produção de etileno, podem ocorrer a aceleração da senescência e também a formação de sabores e odores desagradáveis. Outra limitação é resultante do exsudato da superfície cortada, que se torna um meio favorável ao crescimento de fungos e bactérias (Ahvenainen, 1996).
O desenvolvimento e a aceleração desses eventos metabólicos e microbiológicos estão relacionados às operações de descascamento e/ou seccionamento (Ahvenainen, 1996). Sendo assim, existe a necessidade de utilização de uma combinação de processos, como é o caso da desinfecção com soluções de hipoclorito de sódio ou sódio ativo (Pereira et al., 2003; Arruda et al., 2003), o uso de soluções de CaCl2 (Antoniolli et al., 2001), bem como a utilização de atmosferas modificadas (AM), através do uso de filmes plásticos (Pereira et al., 2003; Arruda et al., 2003), de modo a assegurar a qualidade e aumentar a vida de prateleira desses produtos.
Neste sentido, aproveitando-se ainda da inserção facilitada para produtos tropicais nos grandes mercados internacionais, como é o caso da carambola (Donadio, 2001), o presente trabalho tem por objetivo avaliar a influência da modificação atmosférica na vida útil de carambolas cv. Golden Star, minimamente processadas.
Os frutos foram colhidos em propriedade agrícola situada na zona rural do município de Boa Vista-RR, localizada na Latitude 2º 50' 06" N e Longitude 60º 40' 28" W, no estádio de fisiologicamente maturos, apresentando coloração verde-amarelada (70 e 30%, respectivamente), sólidos solúveis (SS) médios de 6,8 ºBrix, acidez titulável (AT) em média de 13,9 Cmol.L-1 e massa média de 185 g.
O trabalho foi conduzido no Centro de Ciências Agrárias (CCA), da Universidade Federal de Roraima (UFRR). Após a colheita, os frutos foram levados em veículo aberto até o Laboratório de Fitotecnia (15 ± 2º C e 75 ± 3 % de U.R.), dentro de contentores de 20 kg, sendo então selecionados pela ausência de danos e/ou podridões e higienizados em solução de hipoclorito de sódio (NaOCl) a 100 mg.L-1, por 10 minutos. Realizado o enxágüe e a secagem em bandejas perfuradas expostas ao ar atmosférico, os frutos foram resfriados em B.O.D. por 10 h a 15 ± 0,5 °C, visando à desaceleração metabólica. Para a constituição dos tratamentos, os frutos foram seccionados transversalmente, na forma de estrela, em pedaços de 2,5 ± 0,5 cm, por 7 ± 1,5 cm de área, sendo então novamente higienizados em solução de NaOCl a 10 mg.L-1, por 3 minutos. Após o processamento, os pedaços foram acondicionados em bandejas rígidas de poliestireno, com capacidade para 250 g, as quais foram revestidas com sacolas plásticas de 0,2 x 0,25 m dos seguintes materiais: T1: filme plástico perfurado de polietileno de baixa densidade (PEBD), de 0,006 mm (TPO2 = 18.083 cm3.m-2.dia-1, a 25 °C e 1 atm; TPCO2 = 75.552 cm3.m-2.dia-1, a 25 °C e 1 atm; área de permeação = 790 cm2); T2: filme plástico poliolefínico com antiembassamento da Dupont® (AGF), de 0,015 mm (TPO2 = 11.850, TPCO2 = 43.212, área de permeação = 700 cm2); T3: filme plástico polioefínico da Dupont® (HF), de 0,015 mm (TPO2 = 10.116, TPCO2 = 38.633, área de permeação = 780 cm2) ; T4: filme plástico de PEBD, de 0,060 mm (TPO2 = 3.565, TPCO2 = 13.888, área de permeabilidade = 920 cm2); T5: filme plástico de PEBD, de 0,080 mm (TPO2 = 2.302, TPCO2 = 8.756, área de permeabilidade = 990 cm2); T6: filme plástico de polipropileno (PP), de 0,022 mm (TPO2 = 4.842, TPCO2 = 9.105, área de permeabilidade = 810 cm2), e T7: bandeja rígida de polietileno tereftalato (PET), com capacidade para 500 mL, com tampa do mesmo material (TPO2 = 12.892 e área de permeação = 370 cm2). A seguir, as bandejas foram acondicionadas em câmara frigorífica a 12 ± 0,5 °C e 95 ± 3 % de U.R, por 18 dias e, durante esse período, foram analisados nos tempos 1; 2; 3; 5; 7; 9; 12; 15 e 18 dias de armazenamento refrigerado (AR) quanto aos teores de sólidos solúveis (SS), determinados através da leitura refratométrica direta, com o refratômetro tipo Abbe, marca ATAGO N1, resultados expressos em ºBrix; acidez titulável (AT), determinada através de titulometria de neutralização (NaOH a 0,01n), com ponto de viragem no pH 8,2 e resultados expressos em Cmol.L-1; pH, determinado através de potenciometria em amostra triturada e homogeneizada; ocorrência de desordens fisiológicas nos frutos seccionados, avaliada através da porcentagem média desses danos em cada embalagem (20 repetições de cada tratamento), utilizando-se de um índice de aceitabilidade máximo de não mais do que 25 % dos frutos de cada embalagem apresentando pigmentação não-característica; teor de ácido ascórbico (mg por 100 g de polpa), determinado segundo método de Carvalho et al. (1990), que se baseia na redução do indicador 2,6 – diclorobenzenoindolfenol (DCFI) pelo ácido ascórbico; desenvolvimento de fungos, leveduras, coliformes totais/fecais, Salmonella e bactérias lácticas, segundo metodologia proposta por Vanderzante & Splittstoesser (1992), obedecendo à Resolução RCD n° 12, de 2 de janeiro de 2001, da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Também avaliou-se a composição gasosa presente no espaço livre das embalagens, utilizando cromatógrafo gasoso marca Varian, modelo 3300, sendo os resultados expressos em porcentagem. Quantificou-se, ainda, a taxa de permeabilidade dos materiais de embalagem, através do método de aumento da concentração, segundo protocolo citado por Arruda et al. (2003) e descrito por Oliveira et al. (1996), sendo os resultados expressos em cm3.m2.dia-1.
O delineamento experimental empregado foi o inteiramente casualizado, seguindo um esquema fatorial 7x9 (7 embalagens e 9 tempos de AR), com 20 repetições para análise de desordens fisiológicas (contendo uma amostra por repetição) e 5 repetições para as demais análises (contendo 3 amostras – embalagens, por repetição). Os dados foram submetidos à análise de variância e à comparação de médias, pelo teste de Tukey (pd"0,05).
Composição Gasosa das Embalagens – Com relação à composição gasosa do espaço livre das embalagens, puderam-se detectar 4 comportamentos distintos (Figura 1). Primeiramente, observou-se, nas embalagens onde as concentrações gasosas permaneceram constantes e equilibradas com o ar atmosférico, que praticamente não houve relação entre o avanço do amadurecimento dos pedaços de carambola e as embalagens plásticas (Figura 1a). Nas embalagens de PEBD de 0,006 mm perfuradas, AGF e HF de 0,015 mm, não foram detectadas modificações expressivas na concentração de O2 no interior das embalagens, quando comparada com a concentração de O2 do meio externo. Esses tratamentos apresentaram concentrações estáveis e constantes, variando entre 21,87 ± 1% no primeiro dia de análise e 21,71 ± 1% no último dia de AR. Quanto à concentração de CO2 nessas embalagens, pôde-se detectar o mesmo comportamento. No primeiro dia de avaliação, constataram-se variações entre 0,92 ± 0,04%, ligeiro acréscimo aos 12 dias de AR, atingindo valores entre 0,95 ± 0,06%, o que seguramente não se pode relacionar a nenhum pico climatérico de respiração, pois, caracteristicamente, carambolas não apresentam comportamento de frutos climatéricos (Neves et al., 2004). Aos 18 dias de AR, detectaram-se concentrações de CO2 variando entre 0,88 ± 0,07%, o que confirma o diagnóstico de uma seqüência de dados relativamente linear e sem modificações expressivas. Da mesma forma, as taxas de permeabilidade desses filmes foram relativamente altas, superior a 10.000 cm³.m2.dia-1 para O2 e superior a 38.000 cm³.m2.dia-1 para CO2, explicando, assim, a baixa eficiência na modificação da atmosfera gasosa dessas embalagens.
Um segundo tipo de comportamento refere-se às embalagens plásticas, onde, mesmo havendo modificações na composição gasosa do interior das embalagens, não se conseguiu atingir as concentrações sugeridas por Cantwell (1992), ou seja, de 2 a 8% de O2 e de 5 a 15% de CO2, para que, segundo o mesmo, ocorresse a melhor conservação de frutos minimamente processados (Figura 1b). Nas embalagens plásticas de PP, de 0,022 mm, observou-se suave decréscimo na concentração de O2 ao longo do período experimental. Assim, no primeiro dia de avaliação, observaram-se valores médios de 20,62 %, chegando ao final dos 18 dias de AR com valores médios de 17,10 %. Essas concentrações são consideradas como insuficientes para a manutenção da qualidade sensorial de produtos minimamente processados. Os níveis de CO2 detectados nesse tratamento alcançaram concentrações médias de 2,34 % no início do experimento e 3,96 % aos 18 dias de AR. Semelhantemente, essas condições também podem ser prescritas como insuficientes para o controle dos eventos que estimulam o avanço do amadurecimento (Brackmann et al., 2003; Lana & Finger, 2000; Cantwell, 1992), bem como qualquer menção de controle microbiológico dos frutos, dada a reconhecida ação fúngica promovida pela elevação dos níveis de CO2 (Donazollo et al., 2003). Sendo assim, é possível relacionar a baixa eficiência do controle atmosférico interno nas embalagens, observada nos filmes de PEBD de 0,006 mm perfurados, AGF e HF de 0,015 mm, e PP de 0,022 mm, com os elevados índices de contaminação microbiológica detectados nesses tratamentos (Tabelas 2 e 3).
Foram observados, também, tratamentos que apresentaram diminuição da concentração de O2 e manutenção de níveis satisfatórios de CO2 tardiamente, ou seja, somente após o terço final do período experimental (Figura 1c). Esse fato, por sua vez, não contribuiu para o controle efetivo do desenvolvimento de contaminantes microbiológicos. Foi o caso dos pedaços de carambolas acondicionados nos filmes de PEBD de 0,060 e 0,080 mm, onde, inicialmente, os níveis de O2 estavam entre 21,52 ± 0,27% e reduziram para concentrações entre 7,33 ± 0,38% aos 12 dias de AR, chegando ao final do experimento com concentrações entre 6,35 ± 0,18%. Da mesma forma, para os níveis de CO2, onde somente aos 12 dias de AR foram constatadas concentrações médias superiores a 8,0 %, consideradas por Brackmann et al. (2003) como suficientes para um controle da velocidade metabólica e do desenvolvimento de microrganismos. Este fato comprova os resultados obtidos nesse experimento, em que os pedaços de carambola embalados nos filmes de PEBD de 0,060 e 0,080 mm se de se apresentaram ao final do período experimental com algum comprometimento microbiológico (Tabelas 3 e 4). Vale ainda ressaltar que os filmes de PEBD de 0,060 e 0,080 mm apresentaram baixa permeabilidade gasosa quando comparados aos tratamentos submetidos aos filmes plásticos de PEBD de 0,006 mm, AGF e HF de 0,015 mm. Baseado nisso, dever-se-ia esperar maior modificação da atmosfera gasosa no interior das embalagens, influenciando desta forma nos resultados e, conseqüentemente, melhorando a manutenção da qualidade final, o que não foi observado. Provavelmente, a atividade metabólica da carambola minimamente processada exija barreiras mais eficientes quanto à diminuição das trocas gasosas com o meio exterior.
De acordo com a Figura 1d, podemos destacar o tratamento utilizando embalagens PET como aquele que, logo nos primeiros dias de AR, alcançou o efetivo estabelecimento da concentração atmosférica adequada segundo Cantwell (1992). Como conseqüência disso, a velocidade dos processos que desencadeiam a senescência foi reduzida, proporcionando, assim, a extensão do período de vida útil do produto. Neste sentido, as embalagens PET apresentavam, já no quinto dia de AR, concentrações médias de O2 de 6,98 %, estabilizando em valores médios de 5,21 ± 0,19% até o final do experimento. Constatou-se, então, a partir desses resultados, excelente controle no suprimento de O2 disponível no interior das embalagens PET, sem, contudo, incitar um comportamento de anaerobiose nos frutos. Os níveis de CO2, também aos cinco dias de AR, já se apresentavam com valores médios de 7,81 % e estabilizaram, na média, com 10,02 % dos 15 aos 18 dias de AR. Esses resultados refletiram diretamente na manutenção dos atributos qualitativos. Nesse sentido, os frutos acondicionados nas embalagens PET, não apresentavam sintomas de podridão e/ou contaminação microbiológica sem escurecimento dos pedaços de carambola. Por outro lado, esse tratamento apresentou maiores níveis de vitamina C, proporcionando,assim, maior potencial comercial.
Contagem Microbiológica – Em todas as amostras analisadas, os níveis de Salmonella e de coliformes totais/fecais encontravam-se dentro dos padrões microbiológicos estabelecidos pela ANVISA (2001). Resultados semelhantes foram descritos por Pereira et al. (2003), trabalhando com goiabas var. Paloma e Bonnas et al. (2003), trabalhando com abacaxis cv. Smooth Cayenne, onde a sanificação com o NaOCl e a modificação atmosférica contribuíram para o eficiente controle de tais contaminantes patogênicos. Baseado nos resultados acima descritos, acredita-se que as condições higiênico-sanitárias impostas durante a execução do trabalho eram satisfatórias.
Entretanto, observou-se que o tratamento com o hipoclorito de sódio, a exemplo do que ocorreu com o experimento de Bonnas et al. (2003), não foi eficiente para o controle de fungos, leveduras (Tabela 2) e bactérias lácticas em alguns dos tratamentos testados (Tabela 3). No entanto, os frutos acondicionados nas embalagens PET, dada a estabilização da atmosfera gasosa no interior das embalagens em níveis médios aproximados de 7 % de O2 e 8 % de CO2 já nos primeiros dias de AR, não apresentaram indícios desses tipos de contaminantes ao longo do experimento (Tabelas 2 e 3). A inibição do crescimento de fungos e leveduras promovidas pela atmosfera modificada também foi verificada por Mohd-Som et al. (1994) (citado por Pereira et al., 2003) em brócolis minimamente processados, mostrando que elevados níveis de CO2 e baixos níveis de O2 apresentam efeitos benéficos na inibição desses microrganismos. Pereira et al. (2003) somente relatam o efeito positivo no controle de fungos, leveduras e bactérias lácticas à associação entre a embalagem PET e a desidratação osmótica das goiabas minimamente processadas, descartando, por sua vez, a eficácia do uso da atmosfera modificada em frutos in natura. Ao contrário do observado neste trabalho, cujas carambolas minimamente processadas, sem nenhum tratamento complementar e acondicionadas em embalagens PET, não apresentaram quaisquer índices representativos de contaminação microbiológica.
Já nos frutos embalados nos filmes de PEBD de 0,060 e 0,080 mm, a presença de fungos e leveduras (Tabela 2) não foi expressiva, variando de 1,21 x 10-3 UFC.g-1 no primeiro dia a 2,82 x 10-2 UFC.g-1 ao final dos 18 dias de AR. Nesses tratamentos, a partir do 12º dia de AR, quando as concentrações de CO2 estabilizaram em níveis mais elevados, a contagem de bactérias estava aproximadamente em 5,4 x 104 UFC.g-1 (Tabela 4), proporcionando a manifestação de aromas e sabores desagradáveis (dados não publicados). Estes sintomas podem representar, segundo Neves et al. (2004), o efeito direto da fermentação do produto, supostamente devido às condições da atmosfera gasosa no interior das embalagens a partir do 12º dia de AR. O comportamento acima citado, possivelmente, seja devido ao controle tardio da estabilização dos níveis de CO2 e O2 no interior dessas embalagens, tendo então potencializado, a partir do 12 ° dia de AR, condições favoráveis ao crescimento das bactérias lácticas. Nos tratamentos acondicionados em filmes de PEBD de 0,006 mm perfurados e AGF e HF de 0,015 mm e PP de 0,022 mm, observou-se que, a partir do 5 ° dia de AR, a contagem de fungos e leveduras variava entre 3,77 x 102 UFC.g-1 e 1,24 x 103 UFC.g-1, ao passo que, aos 15 dias de AR, a contagem havia subido para valores entre 2,15 x 104 UFC.g-1 e 5,29 x 105 UFC.g-1 (Tabela 2). Da mesma maneira, na contagem de bactérias lácticas, desde o terceiro dia de AR, os números estavam entre 7,26 x 101 e 4,51 x 104 UFC.g-1 (Tabela 3).
Características físico-químicas – As embalagens testadas interagiram diferentemente na manutenção dos atributos qualitativos das carambolas minimamente processadas (Tabela 1). Nesse sentido, observa-se que somente nas análises de SS e AT é que os tratamentos não apresentaram diferença significativa entre si. Desta forma, mesmo não apresentando padrão climatérico (Neves et al., 2004), os pedaços de carambolas cv. Golden Star apresentaram pequeno e gradativo aumento nos teores de SS, não apresentando, entretanto, alterações significativas em função dos tratamentos testados. O pequeno e não-significativo incremento detectado nos teores de SS, provavelmente, deve-se tão somente à desidratação parcial desses pedaços de carambola durante o período de AR, concentrando, portanto, o conteúdo celular. Lamikanra et al. (2000) também não observaram mudanças significativas nos teores de SS em melões cv. Cantaloupe minimamente processados mantidos a 4°C por 14 dias.
Quanto aos níveis de AT, constataram-se decréscimos progressivos e acentuados, porém não-significativos, a exemplo da análise de SS, entre os tratamentos testados. A AT que se apresentava com níveis médios de 13,9 Cmol.L-1 no momento da colheita, alcançou níveis médios de 9,6 Cmol.-1 aos 9 dias de AR, chegando ao final do experimento com níveis médios de 6,8 Cmol.L-1. Esse comportamento indica que não houve influência significativa da AM, através dos diferentes tipos de embalagens testadas, no metabolismo de transformação dos ácidos orgânicos durante o AR. Yamashita et al. (2001), trabalhando com mangas cv. Tommy Atkins, não observaram influência da AM na manutenção dos níveis de AT dos frutos armazenados in natura. No entanto, Bonnas et al. (2003) verificaram em abacaxis minimamente processados, acondicionados em embalagens de PVC e PP (sem detalhamento), a diminuição na velocidade das perdas de AT, refletindo, por sua vez, na melhor qualidade ao final do período de armazenamento. Deste modo, pode-se condicionar o efeito da AM em relação à AT, ao tipo de embalagem, taxa de permeabilidade, grau de processamento dos frutos e às características individuais de cada espécie.
A partir da análise do pH, pôde-se estabelecer um paralelo comparativo entre os resultados microbiológicos, anteriormente discutidos (Tabelas 2 e 3), com as variações de pH (Tabela l). Nos tratamentos acondicionados em filmes de PEBD de 0,006 mm perfurados e AGF e HF de 0,015 mm, nos quais foram observados os maiores índices de contaminações microbiológicas, o pH apresentou-se relativamente elevado. Nesses tratamentos, o pH variou em média de 3,51 na colheita, para 4,98 aos 5 dias de AR, chegando a 7,21 aos 18 dias de AR. Partindo-se então do pressuposto de que a manutenção do pH, em níveis mais baixos, consista em um importante fator de restrição ao crescimento de microrganismos nos alimentos (Antoniolli et al., 2001), o elevado pH observado nesses tratamentos, pode ter influência direta nos elevados índices de contaminação microbiológica desses frutos, ou, até mesmo, ser um reflexo da intensa atividade microbiana. Nos tratamentos acondicionados em embalagens de PEBD de 0,060 e 0,080 mm, o comportamento do pH apresentou dois padrões distintos. Da colheita até os 12 dias de AR, o pH sofreu gradativo aumento, não apresentando, no entanto, sinais de contaminação microbiológica expressiva. Porém, após o 12° dia de AR, quando a composição gasosa teria se estabelecido em um patamar favorável (Figura 1), o pH alcançou níveis médios de 5,50 aos 15 dias de AR, chegando ao final do experimento com níveis não inferiores a 6,91. Esse comportamento pode então comprovar que a estabilização tardia da atmosfera gasosa nessas embalagens não proporcionou benefícios qualitativos. Neste caso, o aumento de pH, associado à baixa permeabilidade gasosa, pode ter desencadeado o desenvolvimento de bactérias lácticas, o que, por suas vez, contribuiu diretamente para a perda de qualidade do produto final.
Já nos frutos acondicionados em embalagens PET, o pH apresentou as menores variações dentre os tratamentos testados, ou seja, variou em média de 3,51 no momento da colheita, para 4,26 aos 18 dias de AR. Nesse sentido, é possível validar a afirmação de Antoniolli et al. (2001), em que a manutenção do pH, em níveis mais baixos, pode consistir em uma ferramenta eficiente para o controle microbiano.
Quanto ao teor de ácido ascórbico nas carambolas minimamente processadas, os maiores valores foram detectados nas carambolas acondicionadas nas embalagens PET (Tabela 1). Esses pedaços continham, em média, no momento da colheita, 19,02 mg de ácido ascórbico.100g-1 de polpa, chegando, ao final de 18 dias de AR, com valores médios de 2,95 mg de ácido ascórbico.100g-1 de polpa. O mesmo foi relatado por Antoniolli et al. (2001) observando reduções nos teores de ácido ascórbico em abacaxis minimamente processados. Em relação aos demais tipos de embalagens testadas, onde o controle da atmosfera gasosa foi totalmente ineficiente ou tardia, não foram observadas diferenças significativas entre si, apresentando perdas variando entre 98 a 100 % frente ao conteúdo inicial. Assim, verificaram-se valores entre 0,37 mg de ácido ascórbico.100g-1 de polpa à ausência absoluta de ácido ascórbico nos pedaços de carambola. Esses resultados podem ser considerados como pertinentes, principalmente partindo-se do propósito de que esse tipo de substância apresenta grande sensibilidade ao O2.
Com base nos resultados obtidos neste experimento, recomenda-se o uso de bandejas rígidas de polietileno tereftalato (PET), com capacidade para 500 mL, com tampa do mesmo material, para a concepção da atmosfera modificada passiva, em carambolas minimamente processadas. Deste modo, estima-se uma vida útil desse produto de até 18 dias em atmosfera refrigerada, com boa manutenção dos atributos físico-químicos e microbiológicos.
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