A study of French centenarians: are ACE and APOE associated with longevity? Hélène Blanch*, Ludovic Cabanne, Mourad Sahbatou, Gilles Thomas Fondation Jean-Dausset-CEPH, 27, rue Juliette-Dodu, 75010 Paris, France Received 8 August 2000; accepted 9 October 2000 Fondation Jean-Dausset-CEPH, 27, rue Juliette-Dodu, 75010 Paris, France Communicated by Jean Rosa Abstract Association study is the method of choice to identify genes involved in complex processes that result from the interaction of environmental and genetic factors. However, because of biases that increase the risk of false positive reports, preliminary positive conclusions have to be reproduced on other populations to be validated as firm conclusions. In 1994, certain alleles of two genes, APOE (Apolipoprotein E) and ACE (angiotensin converting enzyme), were reported to be more frequent in French centenarians, suggesting an association with such a complex polyfactorial process as longevity. Enlargement of the French centenarian cohort allows a new assessment of this hypothesis on 563 centenarians. In contrast to APOE, the ACE association was not confirmed. Retrospective analysis of the initial study revealed discrepancies that may in part explain this observation. Risk of reporting false positive associations is discussed and recommendations to set up a rigorous experimental design are proposed. 2001 Académie des sciences/éditions scientifiques et médicales Elsevier SAS Résumé Les gènes APOE et ACE sont-ils associés à la longévité : étude de centenaires français. La recherche d'une association génétique est la seule méthode actuellement envisageable pour identifier des polymorphismes impliqués dans des processus complexes tels que la longévité. Néanmoins, du fait du risque de biais conduisant à des résultats faussement positifs, toute étude d'association doit être confirmée sur une seconde population. En 1994, deux gènes, APOE (apolipoprotéine E) et ACE (angiotensin converting enzyme), ont été associés à la longévité dans une population de centenaires français. L'élargissement de la cohorte initiale a permis une nouvelle évaluation indépendante en prenant les précautions méthodologiques requises par ce type d'étude. Tandis que l'association entre APOE et longévité a été confirmée, aucune différence statistiquement significative n'a été observée pour ACE. L'analyse rétrospective de l'étude initiale a révélé des problèmes méthodologiques ayant pu conduire à un résultat faussement positif. Des recommandations sont proposées pour permettre une conception rigoureuse de ce type d'étude. 2001 Académie des ACE / APOE / longévité / étude d'association 129 comparée des témoins hommes, sans appariement régional entre les deux populations. L'élargissement de la collecte des centenaires français et un suivi de la qualité des données génotypiques générées ont permis de tester ces conclusions sur une nouvelle population. Ainsi cinq cent soixante centenaires ont été appariés de manière rigoureuse sur le sexe et l'origine géographique avec cinq cent soixante individus plus jeunes de 50 ans en moyenne. La longévité humaine résulte d'un processus complexe dans lequel interagissent des facteurs environnementaux et génétiques. Ce trait phénotypique est caractérisé par une héritabilité faible et l'interaction probable de multiples gènes. Actuellement, seules les études d'association comparant les répartitions des fréquences alléliques et génotypiques de polymorphismes candidats entre deux populations de cas et de contrôles permettent d'aborder ce problème. Ces études doivent être conçues de manière à éviter des sources d'erreurs, telles que la stratification des populations testées, qui peuvent conduire à des résultats faussement positifs. Chaque résultat positif doit être confirmé dans une seconde étude indépendante pour être validé. L'étude d'une population de centenaires français, publiée en 1994, avait montré une association entre les gènes ACE (angiotensin converting enzyme) et APOE (apolipoprotéine E) et la longévFrance. In the present study, centenarians and controls were paired based on sex and geographic origin to improve the likelihood that both members of the pair originated from the same population. Additionally, whenever possible, the regional place of birth of the centenarian was matched with that of both parents of the control individual to account for any regional genetic differences. 

Second, DNA available from the initial cohort was genotyped again to ensure the quality of the original genotypic data. Inconsistencies were identified and rechecked to confirm the accuracy of the results.

The results of this study showed a significant difference in allelic and genotypic frequencies between centenarians and controls for the APOE polymorphism, with the E4E4 genotype being under-represented in centenarians compared to controls. The E3E4 genotype was also less frequent in centenarians compared to controls. These observations suggest that the E4E4 and E3E4 genotypes are associated with decreased longevity in both males and females. 

In contrast, no significant difference was observed between centenarians and controls for the ACE I/D polymorphism.