KELATLAMA AJANLARI
EDTA (etilendiamin–tetra- asetik asit), beyaz renkli suda %20 oranında çözülen kristal bir kelatlama ajanıdır. Bir dekalsifikasyon sıvısı olarak, kalsiyum iyonları ile çözünebilir non–iyonize bileşikler oluşturmak üzere birleşir. Demir tortuları ve diğer metaller de EDTA ile uzaklaştırılabilir. Çözelti nötral pH’da etkili olduğundan boyama genellikle mükemmeldir. Herhangibir dekalsifiye ajanından daha iyi sonuçlar vermektedir. Doku, EDTA ile dekalsifikasyondan sonra sertleşmez aksine kemik daha kolaylıkla kesilebilir. EDTA, diş dokuları, reaktif kemik ve kalsifiye dokular için başarı ile kullanılabilir. Kullanılan EDTA’nın dokudan 150 hacim daha fazla olması gereklidir. Rutinde aşağıda formülü verilen çözelti uygundur ve dekalsifikasyon sırasında her 5-7 günde bir yenilenmelidir. Daha zayıf bir çözelti ise daha sık değiştirilmelidir.
Nötral ETDA Dekalsifikasyon Çözeltisi
ETDA (di-sodyum tuzu) ............................250 gr
Distile su ..............................................1750 cc
Çözeltinin pH’sı yaklaşık 26 gr sodyum hidroksit eklenerek 7’ye ayarlanır. Dekalsifikasyon, örneğin yapısına bağlı olarak 4-40 günlük zaman alır. Uzun süre EDTA' ya maruz bırakma dokuların boyanmasına za¬rar verir. Test için X-ray önerilir. Frozen kesitler hariç kesitler direkt olarak % 70' lik alkole aktarılırlar. Frozen tekniğinde ise kesitler mikrotom bıçağının haraplanmaması için suyla yıkanmalıdır, Dekalsifikasyon süresi ikincil olarak düşünüldüğünde, dokunun ko¬runma kalitesi ve boyamaya bakıldığında EDTA' nın günümüzde mevcut olan en iyi dekalsifikasyon ajanı olduğuna dair hiçbir şüphe yoktur.