Pompalar – Biyokimya ve Moleküler Biyolojide Laboratuvar Teknikleri – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
İyi bir hazırlayıcı ayırmanın pratik geliştirilmesinde, iyi araştırılmış bir analitik ayırma ile başlamak iyi bir fikirdir. Hazırlayıcı bir kolona transfer daha sonra, çözücü kuvvetinin 10’a kadar kapasite faktörlerine (k ‘) izin verecek şekilde azaltılmasını içeren ve böylece kolon boyunca çözünen maddenin konsantrasyonları azalacağından numune yüklemesini iyileştiren gerçekleşebilir.
Bu aynı zamanda çözünürlüğü artırma etkisine de sahiptir. Gradyan elüsyonunun eklenmesi, yüksek kapasite faktörlerine sahip bileşenlerin kurtarılmasını kolaylaştıracaktır. İyi çözümlenmiş piklere sahip ayırmalar için çok daha büyük numuneler uygulanabildiğinden, çözücü sisteminin modifikasyonu yoluyla seçicilikteki (a) iyileştirmelerin daha fazla araştırılması değerli olabilir.
Daha sonra, üretim oranını maksimize etmek için numune yükleme ve mobil faz hızı arasında bir uzlaşma bulunabilir. Numune yüklemesinin iki şekilde artırılabileceği unutulmamalıdır: (a) konsantrasyonu artırarak ve (b) hacmi artırarak; ikincisi tercih edilebilir olarak kabul edilir.
Üretim hızı daha sonra yalnızca kolon boyutlarının artırılmasıyla daha da artırılabilir. Bu amaçla daha geniş kolonlar tavsiye edilir ve üretim oranı kesit alanı ile doğru orantılıdır. Üretim oranını optimize etmek, sistemi sadece zaman açısından değil, aynı zamanda solvent tüketimi ve eluentteki numunenin konsantrasyonu açısından da optimize eder.
Hazırlayıcı sıvı kromatografisinin faydalı bir incelemesi literatürde bulunabilir.
Laboratuvar Isıtıcı
Laboratuvar Vakum Pompası
Laboratuvarda kullanılan Isıtıcılar
Tıbbi laboratuvar malzemeleri
Laboratuvar Cihazları
Vakum Kompresörü
Laboratuvar Malzemeleri online
Laboratuvar soğutucu
Enstrümantasyon
HPLC ile ilgilenen araştırmacıların sayısındaki hızlı artışa, HPLC ekipmanı üreticilerinin sayısında da benzer bir artış eşlik etmiştir. Sonuç olarak, HPLC alanında yeni olanlar genellikle ekipmanda bulunan bilgiler karşısında şaşkına dönerler.
Bu bölüm, (a) yatırımlarından belki de en iyi şekilde yararlanamayan kullanıcıların sistemlerini iyileştirmelerini ve (6) HPLC ekipmanına yatırım yapmayı düşünenler için bir rehberdir.
Önemli bir husus maliyettir. Şematik olarak gösterilen basit izokratik sistem f6.000 – 10.000 € civarında mal olabilirken, tam entegre bir mikroişlemci kontrollü gradyan sistemi için maliyet S35, OOO’ya kadar herhangi bir şey olabilir.
Açıkçası bu, özellikle hibe destekli araştırma grupları için önemli bir yatırımdır ve ilk ekipman seçiminin doğru olması önemlidir. Örneğin, daha sonra diğer bileşenlerin eklenebileceği bir sistem seçmek akıllıca olabilir (modüler tasarım).
Bu bölüm boyunca, çeşitli üreticilerin ekipmanlarından bahsedilmiştir. Bu, yazarların aşina olduğu konuları yansıtır ve belirli bir öneri olarak düşünülmemelidir.
Sistem Tasarımı
Akış diyagramı, basınç monitörü haricinde düşük basınçlı sıvı kromatografik sistemleri kullanan herkese aşina olacaktır; ancak, her kullanıcının kendine özgü gereksinimleri olacaktır.
Örneğin, üzerinde çok sayıda görevin gerçekleştirilebileceği (böylece ekipmanı çeşitli sulu ve susuz çözücülere maruz bırakan) genel bir çok amaçlı araç olarak bir makine isteyen bir kullanıcı, muhtemelen aynı derecede sofisti gerektirmeyecektir. Bu özel bir alet gerektiren biri olarak katyon, örn. kalite kontrol amaçlıdır.
Detaylandırılan bileşenlerin her biri. bir sistemin nasıl tasarlanacağına dair bir anlayış oluşturmaya çalışmak için düşünülecektir. HPLC ekipmanının geliştirilmesinin ayrıntılı bir açıklaması McNair’de bulunabilir.
Rezervuar
Tüm borular ve bağlantı parçaları kimyasal olarak korozyona karşı inert olmalıdır ve bu nedenle çoğu ya 316 kalite paslanmaz çelikten ya da bir tür PTFE borudan yapılmıştır.
Mikro delikli boru kullanılırken ne çözücüde ne de numune içinde partikülat materyalin bulunmaması büyük önem taşımaktadır; Her ikisinin de 0.45 pm filtreden (örneğin, Millipore) filtrelenmesi rutin bir uygulama olmalıdır ve 5-50 p1 kadar düşük numune hacimlerini işleyebilen filtreler mevcuttur.
Ayrıca ek bir önlem olarak rezervuara bir tür sıralı filtre yerleştirmek de yaygın bir uygulamadır. Solvent filtrasyonu ve gazdan arındırmanın diğer ayrıntıları ilerleyen bölümlerde tartışılmaktadır.
Pompalar
Sıvı bir kromatografik sistemin (kolon dışında) en kritik özelliği pompadır. Solventi uzun ve kısa dönemler boyunca sabit ve hassas bir akış hızında teslim etme yeteneği, son on yıldır üreticilerin hedefi olmuştur. Birden fazla yaklaşım benimsenmiştir.
İlk tasarımlardan biri, sabit basınçlı şırınga pompası olarak bilinen gaz basıncı ile çalışan şırınga tipi çözücü dağıtım sistemiydi. Bu tasarımın ana dezavantajı, dağıtımın sıcaklık dalgalanmaları veya çözücü viskozite değişikliklerinden kaynaklanan basınç değişikliklerine duyarlı olmasıydı.
Şırınga pompasının başka bir versiyonu, basınç değişikliğine duyarlı olmayan mekanik olarak çalıştırılan bir piston içeriyordu. Şırınga tip pompalarının ikinci dezavantajı, şırınga bölmesi içinde çözücü değişimi sırasında kolayca değiştirilemeyen büyük hacimde çözücünün bulunması gerekliliğiydi; dahası, dalma piston bir sonraki dağıtım vuruşunu başlatmak için bölmenin uzunluğunu süpürmek zorunda kaldı; bu ciddi temel sorunlara neden olabilir. (180 ° faz dışı çalışan ikiz başlı şırınga pompalarının kullanımı, bu ikinci sorunun üstesinden gelmek için Pharmacia tarafından sunulan FPLC (hızlı protein sıvı kromatografisisistemine dahil edilmiştir.)
Bununla birlikte, genel olarak, şırınga pompaları ve gaz deplasman pompaları, büyük ölçüde pistonlu pompaların yerini almıştır. Her bir pompa tipinin özellikleri başka bir yerde tartışılmıştır.
En yaygın pistonlu pompa türleri, yönü çek valfler tarafından kontrol edilen bir sıvı hacmini değiştirmek için bir kam aracılığıyla bir cam piston çalıştırır. Tasarımın basitliği ve performansın güvenilirliği, diğer tasarımlar pahasına bu tip pompanın performansındaki iyileştirmelere önemli ölçüde çaba harcanmasına yol açmıştır.
Bu özel tasarımdaki en büyük hata, piston pompa odasını tararken, eşit olmayan çözücü akışına neden olabilecek bir çözücü darbesinin iletilmesi ve bir tür nemlendirme de gerekmesidir.
Sadece bir uzunlukta yassılaştırılmış borudan oluşan hidro-pnömatik sönümleyicilerin dahil edilmesi, pompa ile kolon arasında istenmeyen bir ekstra ölü hacim oluşturur; ancak yine de bazı pompa tasarımlarına da dahil edilmektedirler.
Pistona hızlı bir yeniden doldurma döngüsünün eklenmesi titreşimi önemli ölçüde azaltır ve bir sönümleme cihazı ile birlikte nispeten düzgün çözücü dağıtımı da sağlar.
Laboratuvar Cihazları Laboratuvar Isıtıcı Laboratuvar Malzemeleri online Laboratuvar soğutucu Laboratuvar Vakum Pompası Laboratuvarda kullanılan Isıtıcılar Tıbbi laboratuvar malzemeleri Vakum Kompresörü