باسم الله الرحمن الرحيم اليوم شاء الله رب العالمين
راح ناخد مع بعض كيف أنا بدي أعرف نسبة Hemoglobin F
Hemoglobin F quantitation اللي هو الـFetal
Hemoglobin طبعا إحنا عارفين إن Hemoglobin F is the
main oxygen transport protein in the fetus during
the last seven months of development in the uterus
يعني هو الناقل الأهم للأكسوجين خلال الحياة
الجنينيةوبيستمر مع المولود تقريبا 6 شهور طبعا ال
baby عشان فعلا يصير completely زي ال adult بياخد
من 6 شهور إلى سنتين لغاية ما يصير ال hemoglobin
عنده زي ال adult fetal
hemoglobin بيختلف عن ال adult hemoglobin في قدرته
على أنه يرتبط بالأكسوجين ب high affinity وهذه طبعا
بتعطي ميزة ومواقمة لحياة الجنين في الرحمالأن
الجنين بحتاج كمية كبيرة من الأكسوجين يعني هو أحوج
من الأكسوجين للأم لأن الأم عندها رئتين و بتقدر
تاخد أكسوجين من الهواء الجوي لكن الطفل بحاجة أنه
ياخد كمية كبيرة من الأكسوجين فبالتالي ال baby
هيكون عنده Hemoglobin F عشان يقدر يزود جسم الطفل
خلال مرحلة النمو بالأكسوجين الكافي لنموه لنضجهفيتا
الـ hemoglobin differs from the adult hemoglobin
in that it is able to bind oxygen with a greater
affinity than the adult form giving the developing
fetus better access to oxygen from the mother's
bloodstream طبعا هذا بسمح لإنه ياخد كل الأكسجين
اللي بدهيا من الأم ال transfer of oxygen is from
the mother less tightly bound to the baby more
tightly bound فبالتالي بيصير ال transfer للأكسجين
من اللي عند الأم إلى الطفل ليش؟ لأن الأم الـ
Oxygen الـ Hemoglobin عندها أقل ارتباط بالأكسوجين
أو أقل affinity للأكسوجين إلى الطفل اللي عنده high
affinity للأكسوجين طبعا Hemoglobin F بتكون من two
Alpha و two Gamma chainsHemoglobin F لا يتحول
هو الـ Hemoglobin F إلى A بعدما الطفل يكبر، لأ هو
فعلياً تصنيع بتحول من تصنيع Hemoglobin F إلى تصنيع
Hemoglobin A Hemoglobin F and Hemoglobin A are
completely different Hemoglobins يعني التانيين
مختلفين تماما وكل واحد بتصنع بطريقة مختلفةFetal
Hemoglobin is alkaline resistant hemoglobin إيش
يعني alkaline resistant؟ يعني لو أضفنا عليه مادة
قلوية ما بيخرب، ما بيتلف، ما بيصيرله denaturation
هي هذه الخاصية اللي إحنا راح نستخدمها في تحديد
كمية Hemoglobin F Newborn babies with sickle cell
disease make Hemoglobin F and Hemoglobin S عادة ال
babyاللي بيبقى عنده Sickle Cell Disease ممكن يصنع
اتنين Hemoglobin F وبعد هيك بيبدأ يصنع Hemoglobin
Fوزي ما قلنا إذا كنتوا فاكرين إنه Hemoglobin F
بأثر بقلل من تأثير ال cycling على الخلايا عشان هيك
الأطفال اللي عندهم Sickle Cell Disease وعندهم نسبة
من Hemoglobin F يعني بيكون تأثير ال Sickle Cell
عليهم أقل واستخدامنا هذه الخاصية عند ال Adult إنه
نرجع تصنيع Hemoglobin F بنسبة معينة عشان نقلل من
أعراض Sickle Cell Anemia أمتى بزيد Hemoglobin F في
حالاتبسموها Hereditary Resistance of Hemoglobin F
إيش يعني؟ يعني هذا الشخص بيظل طول حياته يصنع
Hemoglobin F ماعندهش ثلاثيميا مثلا، ماعندهش .. لأ
هو .. هو مابيصيرش Complete Switch On لتصنيع
Hemoglobin A فبيظل عنده Hemoglobin F تصنيعه On
الجين بتاعه Hemoglobin F On طول الحياة وبيظل يصنع
كمية من Hemoglobin F هذا بلاقي عنده نسبة من
Hemoglobin F ممكن توصل لـ 40%ممكن يزيد في حالات
الـ Sickle Cell Anemia لأن الـ Sickle Cell فيها
خلل في الـ Beta-Chain Hemoglobin F مافيش في الـ
Beta-Chain فممكن نلاقي ارتفاع في حالات الـ
Acquired Plastic Anemia في حالات الـ Megaloplastic
Anemia ممكن يرتفع في حالات البروكزيما النكتوريا
الـ Hemoglobin Urea أو ما يسمى بالـ PNH الـ
Principle إيش فكرة الفحث فكرة الفحث كتير بسيطة
بتعتمد على توي قاعد حكيناها إنه Hemoglobin F مقاوم
للـAlkaline Denaturation فأنا إيش بروح بعمل؟ بضيف
مادة Alkaline على الـHemolysate اللي بحضره بعد ما
بضيف مادة Alkaline هيصير Denaturation أو ترسيب لكل
أنواع الـHemoglobin ما عدا Hemoglobin F تمام؟ الآن
عند مرحلة معينة بوقف عملية الـDenaturationيعني
بوقف مفعول الـ Sodium Hydroxide اللي أنا أضافته
وببدأ أعمل filtration ال filter paper عادية عملية
ال filtration هذههينحجز من خلالها كل أنواع الـ
Hemoglobin اللي صار لها denaturation ما عدا
Hemoglobin F لأنه ما صارله denaturation هينزل
وأجمعه في الـ YouTube وأقرأ Spectrophotometry
خلّيني أشوف الـ Test استعمل الـ Characteristic of
Hemoglobin F to resist denaturation in an alkaline
solution يعني هو بيقاوم الـ denaturation لو أنا
حطيته في alkaline solutionA red blood cell
hemolysate is prepared to lyse a red cell and free
hemoglobin أول خطوة بحضر الـ hemolysate The
hemolysate is added to cyanomethemoglobin reagent
اللي هو هذا نفسه يا بنات اللي أنا استخدمته لفحص
الهمoglobin اللي هو الـ Drupkin reagent إذا كنتوا
فاكرين لما قرأنا الهمoglobin لما قرأتوا
الهمoglobin في المقدمة استخدمنا cyanomethemoglobin
reagent أو بيسمينا Drupkin reagentطبعا إذا بحضر
الهيمولايزات في سيانو مت هيموجلوبين reagent بعد
هيك إيش بضيف؟ بضيف حاجة alkaline عشان تعمل
denaturation للهيموجلوبين الحاجة ال alkaline ها دي
ال sodium hydroxide طبعا بضيف ال sodium hydroxide
لوقت محدد exactly two minutes بس two minutes خلال
ال two minutes بضمن أن أنواع الهيموجلوبين صار لها
denaturation مع ده hemoglobin F لكن لو طولتفي
اختمال إنه برضه Hemoglobin F يصير له Denaturation
تمام؟ خلال هذا الوقت Normal Hemoglobin is
destroyed but the fetal Hemoglobin remains intact
يعني أنواع الـ Hemoglobin التانية هيصير له
Denaturation Hemoglobin F هيظله ايه كويس مش هيخرب
فلقيت بعد دقيقتين أنا بدي أوقف التفاعل لأنني خايفة
إن Hemoglobin F يصير له Denaturation فإيش بعمل؟
بضيف مادة المادة هذه اللي هي الـ Ammonium Sulphate
هذه الـ Ammonium Sulfate بتعمل شغل تاني بتعمل stop
لل-denaturation process إذا كانت بتتفاعل مع ما
تبقى من الـ Sodium Hydroxide يعني خلاص، بتعادل الـ
Sodium Hydroxide المتبقى عساس أنه مايشتغلش كمان
الشغل التاني، الـ Hemoglobin اللي صار له
denaturation بتعمله precipitation يعني بترسبه،
بتعمله على شكل particles كثيرة عساس أنه بعد هيك
أعمله filtration وأفصلهبعد هيك الـ solution is
filtered سيانوميت هيمoglobin solution measured
spectrophotometrically to determine the percent of
hemoglobin F كيف يعني؟ بعمل filtration في تيوب
عادية باخده تيوب هادي و بقرأها على 540 نانومتر نفس
الطول الموج اللي كنت أقرأ عليه الهيمoglobin هيك
أنا بكون قرأت مين؟ بكون قرأت ال absorbance
لهيمoglobin F أكيد بالزمن أعمل الـ total عشان
أقارنهم ببعض زي ما عملنا في hemoglobin A2
هذه الخطوات بالتفصيل ان شاء الله لما نرجع نحكيها
لأنها كلها كميات يعني لا يمكن تبقى محافظينها
الخطوات أول إشي تحضير الـ Hemolysate الخطوة
التانية تجميع Hemoglobin F الخطوة التالتة أني أحضر
الـ Total Hemoglobin أحضرت الـ Total Hemoglobin
فبقرأ Hemoglobin F و Total Hemoglobin
Spectrophotometry بيصير عندي قراءة تانيةبحسب نسبة
Hemoglobin F هي عبارة عن الـ Absorbance لـ
Hemoglobin F على الـ Absorbance للـ Total
Hemoglobin طبعاً في عشرة في المقام في 100% أو إني
بدرب في عشرة مباشرة يعني اللي هي 100 على 10 هتكون
العشرة هذه يا بنات إيش أنا بحطها؟ لأنه في عندى
فترة تخفيف يعني أنا عشان أقارن الـ Hemoglobin F
Absorbance بالـ Total Hemoglobin لازم أبقى شغلكم
بنفس التخفيفاتفي عندي فرق في التخفيف عشر أضعاف
وبضرب فيه في المقام عشان المقارنة بتاعتي صحيحة
وسليمة، كويس؟ فممكن أقول هو عبارة عن الـ
Absorbance لأفعل Absorbance للـ Total في عشرة،
فهيك بكون خالصة الـ Normal Range من Zero إلى Six
Months هيوصل لغاية 75% يعني طبعا بعد ست شهور الـ
Adult هيكون أقل من 2% حتى في الـ Adult غالبا أقل
من 1% كمان
طيب هنا بعض النقاط اللي بدنا نناقشها هنا بقولك
الأطفال اللي عندهم sickle cell disease هتلاقي
عندهم مشاكل
هتبدأ تظهر لما يقل تصنيع Hemoglobin F وهذا الكلام
احنا قلناه ان هو Hemoglobin F وجوده بقلل ال
sickling فبالتالي لما يسير switch off لتصنيع
Hemoglobin F هتلاقي المشاكل بلش هتزيد عندهم in
adultFeta-Hemoglobin production can be reactivated
pharmacologically العلاج اللي حكينا عنه إنه نشط
Feta-Hemoglobin عن طريق علاج سمنها Hydroxyurea
وطبعا هذا علاج جيد بيقلل من أعراض Sickle Cell
Disease Hydroxyurea one of the new drugs used to
treat Sickle Cell Disease in adult work by turning
Hemoglobin F back on يعني برجع يصنع Hemoglobin
بيخلّي Hemoglobin F يرجع يتصنععافية هيك خلصنا
طريقة hemoglobin F