ملف   تصغير يسار محاور عصبية في عقدة عصبية لفأر مرئية بواسطة التألق المناعي الكيمياء النسيجية المناعية هي تقنية مخبرية لتحديد مكان البروتينات عن طريق تصوير انتقائي لمولدات الضد في خلايا قطعة نسيج حيوي باستغلال مبدأ ارتباط الأجسام المضادة بمولدات الضد كلمة المناعية في اسم هذه التقنية تشير إلى الأجسام المضادة والكلمة نسيجية إشارة إلى النسيج الحيوي وذلك لتمييزها عن تقنية ألبرت كوونز هو أول من صاغ هذه الطريقة وقام باستخدامها سنة يستخدم التلوين بالكيمياء النسيجية المناعية بشكل واسع في تشخيص الخلايا غير الطبيعية كتلك الموجودة في الأورام السرطانية بعض الواسمات الجزيئية المحد هي ميزات لبعض الأحداث الخلوية الخاصة كتكاثر أو موت الخلية تسخدم الكيمياء النسيجية المناعية كذلك بشكل واسع في البحوث الأساسية لفهم توز ومكان الواسمات الحيوية والتعبير المتغاير للبروتينات في أجزاء مختلفة من النسيج الحيوي يمكن تصوير تآثر جسم مضاد مولد الضد بطرق عديدة في الحالة الأكثر شيوعا يتم إرفاق الجسم المضاد بإنزيم مثل البيروكسيداز والذي يمكنه تحفيز تفاعل منتج للألوان في طريقة أخرى يتم إرفاق الجسم المضاد بجسم مفلور مثل الفلوريسئين أو الرودامين طالع تألق مناعي تحضير العينة تحضير العينة بالطريقة المناسبة ضروري للحفاظ على مورفولوجيا الخلية وبنية الأنسجة واستضداد الحواتم المستهدفة لذا يجب جمع الأنسجة وتثبيتها وتقطيعها على نحو ملائم ستخدم غالب محلول بارافورمالدهيد لتثبيت الأنسجة ويمكن استخدام طرق أخرى تحضير المقاطع النسيجية بعد تحضير الأنسجة يمكن تقطيعها أو استخدامها بالكامل تبع للغرض من التجربة والنسيج المدروس قبل التقطيع يمكن أن تغمر العينة النسيجية في وسط معين مثل شمع البارافين أو الأوساط المبر دة يمكن الحصول على المقاطع النسيجية باستخدام مجموعة متنوعة من الأدوات الأكثر استخدام بينها المشراح وناظم البرد والمشراح ذو النصل المهتز تقسم العينات عادة في هيئة مقاطع تتراوح سماكتها بين ميكرومتر توضع المقاطع بعد ذلك على شرائح وتجفف باستخدام غسولات كحولية ذات تراكيز متزايدة على سبيل المثال وت مسح باستخدام مادة منظفة مثل الزيلين ثم صور تحت المجهر اعتماد على طريقة تثبيت الأنسجة وحفظها ربما تحتاج العينة إلى خطوات إضافية لتصبح الحواتم متاحة للارتباط بالأجسام المضادة بما في ذلك نزع البارافين واسترداد المستضد بالنسبة للأنسجة المثبتة بالفورامالين والمغمورة في وسط البارافين غالب ما يكون استرداد المستضد أمر ضروري ويتضمن معالجة مسبقة للمقاطع النسيجية بالحرارة أو البروتياز تؤثر هذه الخطوات في تلون الأنسجة أو عدم تلونها الحد من التلون المناعي غير النوعي تبع لنوع الأنسجة وطريقة الكشف عن المستضد ربما يلزم حصر أو إخماد البيوتين الداخلي أو الإنزيمات الداخلية على التتالي قبل التلوين باستخدام الجسم المضاد على الرغم من أن الأجسام المضادة ظهر رغابة تفضيلية نحو الحواتم النوعية يمكن أن ترتبط جزئي أو بشكل ضعيف بالمواقع الموجودة على بروتينات غير نوعية تسمى أيض المواقع التفاعلية التي تشبه مواقع الربط المعروفة على المستضد المستهدف يسبب التلوين غير النوعي اصطباغ خلفية المحضر النسيجي بصورة كبيرة ما يعيق الكشف عن المستضد المستهدف للحد من تلون الخلفية في الكيمياء النسيجية المناعية والكيمياء الخلوية المناعية وطرق التلوين المناعي الأخرى حتضن العينات بعد إضافة مادة واقية تحصر المواقع التفاعلية التي يمكن أن ترتبط بها الأجسام المضادة الأولية والثانوية تشمل الواقيات الشائعة المصل الطبيعي والحليب الجاف خالي الدسم وألبومين المصل البقري والجيلاتين تتوفر الواقيات التجارية ذات التراكيب المسجلة تجاري وتكون أكثر كفاءة تتضمن طرق التخلص من تلون الخلفية تخفيف الأجسام المضادة الأولية أو الثانوية وتغيير وقت أو درجة حرارة الاحتضان واستخدام نظام كشف مختلف أو جسم مضاد أولي مختلف يجب أن ستخدم أنسجة معروفة التعبير عن المستضد لتكون عنصر تحكم إيجابي وأنسجة معروفة بعدم التعبير عن المستضد لتكون ضوابط سلبية ويجب اختبار النسيج المدروس بنفس الطريقة دون إضافة الجسم المضاد الأولي والأفضل امتصاص الجسم المضاد الأولي وذلك في سياق مراقبة الجودة وسم العينة أنواع الأجسام المضادة يمكن أن تكون الأجسام المضادة المستخدمة للكشف النوعي متعددة النسيلة أو وحيدة النسيلة تصنع الأجسام المضادة متعددة النسيلة عبر حقن الحيوانات بالبروتين المدروس أو جزء ببتيدي وبعد تحفيز الاستجابة المناعية الثانوية عزل الأجسام المضادة من المصل الكامل لذا فإن الأجسام المضادة متعددة النسيلة هي مزيج غير متجانس من الأجسام المضادة قادرة على التعرف على حواتم متعددة تصنع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من خلال حقن الحيوان ثم أخذ عينة محددة من الأنسجة المناعية وعزل الخلية الأم واستخدام الخط الخالد الناتج لتشكيل الأجسام المضادة ينتج عن ذلك أجسام مضادة نوعية لحاتمة واحدة في استراتيجيات الكشف الكيميائي النسيجي المناعي تصنف الأجسام المضادة في فئتين كواشف أولية وكواشف ثانوية وج الأجسام المضادة الأولية ضد المستضد المدروس وعادة ما تكون غير مقترنة غير موسومة ثم توجه الأجسام المضادة الثانوية ضد الغلوبولين المناعي للأجسام المضادة الأولية عادة ما يكون الجسم المضاد الثانوي مقترن بجزيء رابط كالبيوتين الذي يربط بعد ذلك جزيئات مراس لة أو يرتبط الجسم المضاد الثانوي بجزيء مراس مباشرة مراجع تصنيف كيمياء نسيجية مناعية تصنيف تقنيات مخبرية تصنيف تلوين تصنيف طرق البروتين تصنيف علم الأمراض تصنيف علم الأمراض التشريحي تصنيف علم الأنسجة تصنيف فحوصات مناعية