Tahap sintesis cDNA dilakukan dengan komposisi pereaksi terdiri atas 3 μL RNA total, 10 mM primer d(T) 1 μL, 10 mM dNTP 0.5 μL, dan 1.5 μL air bebas nuklease, dicampur hingga homogen, kemudian dipanaskan pada suhu 65 °C selama 5 menit, dan langsung didinginkan di dalam es.