Berdasarkan rumus Federer, dengan menggunakan 4 kelompok penelitian, sampel penelitian yang dibutuhkan adalah >= 6 sampel per kelompok, dengan tambahan 2 sampel atas saran Komite Etik Kedokteran Hewan, sehingga total sebanyak 32 sampel penelitian diperoleh dengan 8 sampel per kelompok (Gambar 1).